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脂质体介导法转染体细胞效率的优化被引量：5: 1; 作者侯颖李文蓉 +1 位作者谭立新牛志刚《黄牛杂志》 2005年第2期18-20,24,共4页; 为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5～13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数... 展开更多; 关键词转染效率血清脂质体介导法流式细胞仪检测 DNA 剂量羊胎山羊体细胞胎儿成纤维细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂质体介导转染法原理及其研究近展被引量：4: 2; 作者周雪雁关伟军 +1 位作者马月辉刘桂林《上海畜牧兽医通讯》 2004年第4期5-6,共2页; 关键词脂质体介导转染法技术原理组成制备转基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

四种启动子调控RFP报告基因在家蚕细胞(Bm-e-HNU5)内的瞬时表达被引量：6: 3; 作者王云叶向群 +2 位作者吴亦亮桂慕燕左正宏《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期167-171,共5页; 以红色荧光蛋白基因(RFP)为报告基因,构建含4种不同启动子的重组表达质粒,用脂质体介导法转染家蚕Bombyxmori细胞(Bm-e-HNU5),观察家蚕细胞质肌动蛋白4基因启动子(A4)、α微管蛋白基因启动子(α-tub)、蚕丝心蛋白重链基因启动子(Fib)和... 展开更多; 关键词家蚕启动子 RFP报告基因瞬时表达活性脂质体介导法; 在线阅读下载PDF 职称材料

人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建被引量：8: 4; 作者安珂田玉科 +2 位作者杨辉高峰王鹏《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期167-170,共4页; 目的构建人前脑啡肽原(hPPE)基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株。方法采用DNA重组技术将质粒pCMVhPPE.SEQ中的人前脑啡肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE... 展开更多; 关键词前脑啡肽原星形胶质基因修饰细胞株永生化大鼠 pcDNA3.1(+) DNA重组技术免疫细胞化学法重组质粒真核表达载体脂质体介导法亮氨酸脑啡肽 RT-PCR L-EK mRNA表达免疫法检测 Neo基因平均光密度培养上清液显著性差异; 在线阅读下载PDF 职称材料

骨形态发生蛋白-7基因转染骨髓基质细胞后的表达被引量：2: 5; 作者段德宇杜靖远 +3 位作者王洪刘勇郭晓东刘维刚《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期684-686,共3页; 为了观察重组人骨形态发生蛋白 - 7(rh BMP- 7)基因转染骨髓基质细胞 (BMSCs)后的表达及表达产物对 BM-SCs增殖的影响 ,用脂质体介导法将 rh BMP- 7基因转染 BMSCs,用逆转录 PCR技术和免疫组化 SABC法分别检测其瞬时表达和稳定表达 ;再... 展开更多; 关键词骨形态发生蛋白-7 骨髓基质细胞基因转染脂质体介导法; 在线阅读下载PDF 职称材料

β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染的人肾癌细胞的生物学特性观察被引量：1: 6; 作者邵晨秦卫军 +5 位作者温伟红张磊王禾秦荣良袁建林邵国兴《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期145-147,共3页; 目的 :建立高表达 β 葡萄糖醛酸苷酶 (以下简称 βG)基因的肾癌细胞模型 ,并观察转染细胞的生物学特性。方法 :构建真核表达载体 pcDNA3.1 βG ,并利用阳离子脂质体介导将其转入人肾癌细胞株GRC 1中。用mRNA打点杂交和Westernblot,鉴... 展开更多; 关键词肾癌 Β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染超微结构生物学特性脂质体介导法; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙型肝炎病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建与表达: 7; 作者谢娜王晓燕张琼《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期353-353,共1页; 为研究乙型肝炎病毒（HBV）启动子（含增强子）调控下的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因在肝癌细胞中的表达。用聚合酶链反应（PCR）技术分别扩增出HBV的4个启动子，载入T载体，测序后插入到含EGFP报告基因的质粒pEGFP-1。构建出HB... 展开更多; 关键词乙型肝炎病毒(HBV) 增强型绿色荧光蛋白真核表达载体启动子肝癌细胞株HEPG2 调控聚合酶链反应(PCR) GFP报告基因基因表达载体脂质体介导法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体介导法转染体细胞效率的优化被引量：5: 1; 作者侯颖李文蓉谭立新牛志刚; 机构新疆畜牧科学院农业部家畜繁育生物技术重点开放实验室; 出处《黄牛杂志》 2005年第2期18-20,24,共4页; 基金新疆高技术研究发展计划项目(编号200311105); 文摘为建立脂质体介导的高效体细胞转染体系,采用脂质体TransfastTM包裹编码增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的pCMV-EGFP质粒,转染5～13代山羊胎儿成纤维细胞,并用流式细胞仪检测不同DNA剂量、细胞汇合度、血清、转染时间及脂质体与DNA比例等参数对转染效率的影响。实验发现0.75μgDNA按1∶1的脂质体与DNA比例,在无血清条件下转染汇合50%细胞3h,转染效率最高可达40.7%±5%。4h转染时间、细胞汇合80%及转染体系中有血清会降低转染效率。随着DNA剂量的增加,转染效率呈剂量依赖性增高,但山羊成纤维细胞的活细胞数显著下降。实验表明TransfastTM能高效安全地介导外源基因转染山羊成纤维细胞。; 关键词转染效率血清脂质体介导法流式细胞仪检测 DNA 剂量羊胎山羊体细胞胎儿成纤维细胞; Keywords Liposome Transfection efficiency Somatic cells EGFP; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学] R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂质体介导转染法原理及其研究近展被引量：4: 2; 作者周雪雁关伟军马月辉刘桂林; 机构中国农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《上海畜牧兽医通讯》 2004年第4期5-6,共2页; 关键词脂质体介导转染法技术原理组成制备转基因; 分类号 Q819 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四种启动子调控RFP报告基因在家蚕细胞(Bm-e-HNU5)内的瞬时表达被引量：6: 3; 作者王云叶向群吴亦亮桂慕燕左正宏; 机构厦门大学生命科学学院; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期167-171,共5页; 基金国家自然科学基金项目(39870410); 文摘以红色荧光蛋白基因(RFP)为报告基因,构建含4种不同启动子的重组表达质粒,用脂质体介导法转染家蚕Bombyxmori细胞(Bm-e-HNU5),观察家蚕细胞质肌动蛋白4基因启动子(A4)、α微管蛋白基因启动子(α-tub)、蚕丝心蛋白重链基因启动子(Fib)和家蚕核型多角体病毒早期即刻蛋白基因启动子(IE)4种启动子调控RFP报告基因在家蚕细胞内的瞬时表达情况。构建的重组表达质粒pDsRed-α-tub、pDsRed-A4、pDsRed-IE和pDsRed-Fib经双酶切和PCR鉴定正确无误。转染和转录实验结果表明,除了pDsRed-A4外,其他3种重组质粒在Bm-e-HNU5细胞中都得到高转染率,α-tub、IE和Fib可依次增强RFP报告基因在家蚕细胞内的瞬时表达活性。; 关键词家蚕启动子 RFP报告基因瞬时表达活性脂质体介导法; Keywords Bombyx mori cells promoter RFP reporter gene transient expression activity lipoid-mediated method; 分类号 Q966 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建被引量：8: 4; 作者安珂田玉科杨辉高峰王鹏; 机构华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学研究室; 出处《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期167-170,共4页; 基金国家自然科学基金(30170905)资助项目; 文摘目的构建人前脑啡肽原(hPPE)基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株。方法采用DNA重组技术将质粒pCMVhPPE.SEQ中的人前脑啡肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE和空质粒pcDNA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)。经G418(600μg/ml)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养。采用免疫细胞化学法、RTPCR和放射免疫法检测转染细胞亮氨酸脑啡肽(LEK)的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功。结果重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和950bb片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE亚克隆成功。Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染至IAST中,筛选获得IAST/hPPE和IAST/Neo两个细胞株,LEK免疫染色均阳性,但平均光密度结果显示IAST/hPPE的LEK表达明显强于IAST/Neo和IAST(P<0.01)。IAST/hPPE细胞与IAST/Neo和IAST细胞相比,hPPEmRNA表达水平和培养上清液中LEK的分泌量明显增高(P<0.01),而IAST与IAST/Neo细胞相比无显著性差异(P>0.05)。结论成功构建了人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE),为该细胞移植用于镇痛的研究奠定了基础。; 关键词前脑啡肽原星形胶质基因修饰细胞株永生化大鼠 pcDNA3.1(+) DNA重组技术免疫细胞化学法重组质粒真核表达载体脂质体介导法亮氨酸脑啡肽 RT-PCR L-EK mRNA表达免疫法检测 Neo基因平均光密度培养上清液显著性差异; Keywords Human preproenkephalin Astrocyte Immortalization Cell strain; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名骨形态发生蛋白-7基因转染骨髓基质细胞后的表达被引量：2: 5; 作者段德宇杜靖远王洪刘勇郭晓东刘维刚; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期684-686,共3页; 文摘为了观察重组人骨形态发生蛋白 - 7(rh BMP- 7)基因转染骨髓基质细胞 (BMSCs)后的表达及表达产物对 BM-SCs增殖的影响 ,用脂质体介导法将 rh BMP- 7基因转染 BMSCs,用逆转录 PCR技术和免疫组化 SABC法分别检测其瞬时表达和稳定表达 ;再用 3H- Td R掺入法检测基因表达产物对正常培养的 BMSCs增殖的影响。结果表明 :转基因细胞能高效表达外源基因 ,且表达时间长达 4周 ;基因表达产物能明显促进 BMSCs的增殖。; 关键词骨形态发生蛋白-7 骨髓基质细胞基因转染脂质体介导法; Keywords bone morphogenetic protein 7 bone marrow stromal cells gene transfection; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染的人肾癌细胞的生物学特性观察被引量：1: 6; 作者邵晨秦卫军温伟红张磊王禾秦荣良袁建林邵国兴; 机构第四军医大学西京医院泌尿外科第四军医大学第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室第四军医大学预防医学系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期145-147,共3页; 文摘目的 :建立高表达 β 葡萄糖醛酸苷酶 (以下简称 βG)基因的肾癌细胞模型 ,并观察转染细胞的生物学特性。方法 :构建真核表达载体 pcDNA3.1 βG ,并利用阳离子脂质体介导将其转入人肾癌细胞株GRC 1中。用mRNA打点杂交和Westernblot,鉴定其转录与表达水平 ,并通过光镜、电镜及细胞增殖周期检测等方法 ,观察转染细胞的生物学特性。结果 :在mRNA与蛋白水平证实 ,转染细胞内有 βG基因的高表达。透射电镜观察 ,转染细胞中的溶酶体、内质网丰富 ,细胞微绒毛及突起增多 ,但转染前后肾癌细胞GRC 1的周期及生长情况无显著性差别。结论 :应用脂质体介导法 ,将βG基因导入人肾癌GRC 1细胞后 ,获得生物学特性稳定 βG基因高表达的肾癌细胞模型。; 关键词肾癌 Β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染超微结构生物学特性脂质体介导法; Keywords glucuronidase renaltumorcell genetransfection ultrastructure; 分类号 R737.11 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙型肝炎病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建与表达: 7; 作者谢娜王晓燕张琼; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期353-353,共1页; 文摘为研究乙型肝炎病毒（HBV）启动子（含增强子）调控下的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因在肝癌细胞中的表达。用聚合酶链反应（PCR）技术分别扩增出HBV的4个启动子，载入T载体，测序后插入到含EGFP报告基因的质粒pEGFP-1。构建出HBV不同启动子调控的EGFP基因表达载体，经酶切、测序鉴定各重组体。采用脂质体介导法将4种构建好的载体转染肝癌细胞株HepG2，用倒置荧光显微镜观察各重组体转染细胞中EGFP的表达。; 关键词乙型肝炎病毒(HBV) 增强型绿色荧光蛋白真核表达载体启动子肝癌细胞株HEPG2 调控聚合酶链反应(PCR) GFP报告基因基因表达载体脂质体介导法; 分类号 R511 [医药卫生—内科学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	脂质体介导法转染体细胞效率的优化	侯颖李文蓉谭立新牛志刚	《黄牛杂志》	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	脂质体介导转染法原理及其研究近展	周雪雁关伟军马月辉刘桂林	《上海畜牧兽医通讯》	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	四种启动子调控RFP报告基因在家蚕细胞(Bm-e-HNU5)内的瞬时表达	王云叶向群吴亦亮桂慕燕左正宏	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建	安珂田玉科杨辉高峰王鹏	《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	8	在线阅读下载PDF 职称材料
5	骨形态发生蛋白-7基因转染骨髓基质细胞后的表达	段德宇杜靖远王洪刘勇郭晓东刘维刚	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	β-葡萄糖醛酸苷酶基因转染的人肾癌细胞的生物学特性观察	邵晨秦卫军温伟红张磊王禾秦荣良袁建林邵国兴	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	乙型肝炎病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建与表达	谢娜王晓燕张琼	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料