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p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达
1
作者
陈昌杰
汪华侨
+1 位作者
徐杰
何蕴韶
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期135-137,F002,共4页
目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC3中表达。方法:运用RTPCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC3细...
目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC3中表达。方法:运用RTPCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC3细胞中,经G418筛选后,用RTPCR、间接免疫荧光化学和细胞免疫组织化学法在转录和翻译两个水平上检测表达产物。结果:酶切和测序证实所获得的重组质粒包含-p75完整基因;在转染pcDNA3.1(+)-p75的PC-3细胞中检测到转录和翻译产物。结论:成功地构建了-p75真核表达质粒并在PC-3细胞中表达,为深入研究p75在前列腺癌中的生物学功能奠定了基础。
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关键词
PC-3细胞
P75
真核表达载体
前列腺癌细胞PC-3
RT-PCR技术
真核表达质粒
人神经生长因子
免疫组织化学
法
低亲和力受体
脂质体介导法
PCDNA3
重组质粒
脑胶质细胞
DNA载体
生物学功能
表达产物
荧光化学
瘤组织
基因
测序
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职称材料
pEgr-ssEndostatin的构建及其在体外的辐射诱导表达
2
作者
李秀娟
李治国
+3 位作者
田梅
杨巍
刘林林
李修义
《辐射研究与辐射工艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期35-38,共4页
为探讨 pEgr-ssEndostatin 重组质粒转染 B16 细胞后接受不同辐射剂量以及接受同一剂量不同时程endostatin 表达的规律。采用 RT-PCR 方法从鼠肝脏中扩增出 Endostatin cDNA,连入信号肽,构建了pEgr?ssEndostatin 重组质粒,用脂质体介导...
为探讨 pEgr-ssEndostatin 重组质粒转染 B16 细胞后接受不同辐射剂量以及接受同一剂量不同时程endostatin 表达的规律。采用 RT-PCR 方法从鼠肝脏中扩增出 Endostatin cDNA,连入信号肽,构建了pEgr?ssEndostatin 重组质粒,用脂质体介导的转染法转染小鼠 B16 细胞,用 ELISA 方法检测 B16 细胞上清中endostatin 的表达水平。结果表明的分泌型 Endostatin 序列与报道完全一致,Egr-1 启动子和 Endostatin cDNA正确插入表达载体 pcDNA3.1;pEfr-ssEndostatin 具有辐射诱导表达特性。提示小鼠 Endostatin 基因成功地被克隆和表达,Egr-1 启动子具有辐射激活和诱导下游基因表达增强的功能。
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关键词
辐射诱导表达
内皮抑素cDNA
Egr-l启动子
pEgr-ssEndostatin重组质粒
照射条件
脂质体
介导
转染
法
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职称材料
题名
p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达
1
作者
陈昌杰
汪华侨
徐杰
何蕴韶
机构
中山大学基础医学院人体解剖学教研室
出处
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期135-137,F002,共4页
文摘
目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC3中表达。方法:运用RTPCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC3细胞中,经G418筛选后,用RTPCR、间接免疫荧光化学和细胞免疫组织化学法在转录和翻译两个水平上检测表达产物。结果:酶切和测序证实所获得的重组质粒包含-p75完整基因;在转染pcDNA3.1(+)-p75的PC-3细胞中检测到转录和翻译产物。结论:成功地构建了-p75真核表达质粒并在PC-3细胞中表达,为深入研究p75在前列腺癌中的生物学功能奠定了基础。
关键词
PC-3细胞
P75
真核表达载体
前列腺癌细胞PC-3
RT-PCR技术
真核表达质粒
人神经生长因子
免疫组织化学
法
低亲和力受体
脂质体介导法
PCDNA3
重组质粒
脑胶质细胞
DNA载体
生物学功能
表达产物
荧光化学
瘤组织
基因
测序
Keywords
p75
eukaryotic expression vector
PC-3 cell
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
R758.63 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
pEgr-ssEndostatin的构建及其在体外的辐射诱导表达
2
作者
李秀娟
李治国
田梅
杨巍
刘林林
李修义
机构
河南大学医学院细胞与分子免疫实验室
吉林大学卫生统计教研室
吉林大学卫生部放射生物学重点实验室
出处
《辐射研究与辐射工艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期35-38,共4页
基金
国家自然科学基金(30170290)资助
文摘
为探讨 pEgr-ssEndostatin 重组质粒转染 B16 细胞后接受不同辐射剂量以及接受同一剂量不同时程endostatin 表达的规律。采用 RT-PCR 方法从鼠肝脏中扩增出 Endostatin cDNA,连入信号肽,构建了pEgr?ssEndostatin 重组质粒,用脂质体介导的转染法转染小鼠 B16 细胞,用 ELISA 方法检测 B16 细胞上清中endostatin 的表达水平。结果表明的分泌型 Endostatin 序列与报道完全一致,Egr-1 启动子和 Endostatin cDNA正确插入表达载体 pcDNA3.1;pEfr-ssEndostatin 具有辐射诱导表达特性。提示小鼠 Endostatin 基因成功地被克隆和表达,Egr-1 启动子具有辐射激活和诱导下游基因表达增强的功能。
关键词
辐射诱导表达
内皮抑素cDNA
Egr-l启动子
pEgr-ssEndostatin重组质粒
照射条件
脂质体
介导
转染
法
Keywords
Mouse endostatin cDNA, Egr-1 promoter, Recombinant plasmid of pEgr-ssEndostatin expression induced by radiation
分类号
R811.5 [医药卫生—放射医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达
陈昌杰
汪华侨
徐杰
何蕴韶
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
在线阅读
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职称材料
2
pEgr-ssEndostatin的构建及其在体外的辐射诱导表达
李秀娟
李治国
田梅
杨巍
刘林林
李修义
《辐射研究与辐射工艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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