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复合脂肪酸对骡鸭原代肝细胞脂质沉积及AMPK信号通路的影响 被引量：1
1
作者 赵婉芯 陈超 +5 位作者 黄彩云 王梦诗 胡映秀 于暄慈 罗儒唐 李昂 《中国家禽》 北大核心 2025年第5期1-9,共9页
试验旨在探究复合脂肪酸对骡鸭原代肝细胞超微结构、脂质沉积、氧化应激及AMPK信号通路相关基因表达的影响。试验使用不同浓度的复合酸(油酸+棕榈酸)进行处理:500μmol/L+250μmol/L、1000μmol/L+500μmol/L、1500μmol/L+750μmol/L和... 试验旨在探究复合脂肪酸对骡鸭原代肝细胞超微结构、脂质沉积、氧化应激及AMPK信号通路相关基因表达的影响。试验使用不同浓度的复合酸(油酸+棕榈酸)进行处理:500μmol/L+250μmol/L、1000μmol/L+500μmol/L、1500μmol/L+750μmol/L和2000μmol/L+1000μmol/L,并持续处理36 h构建原代骡鸭肝细胞脂质沉积模型。结果显示:(1)分离的骡鸭原代肝细胞有丰富糖原颗粒和脂滴的存在。(2)与对照组相比,油酸+棕榈酸浓度为1500μmol/L+750μmol/L时,培养骡鸭原代肝细胞36 h,细胞活力没有显著差异(P>0.05),脂滴数量显著增加(P<0.05)。(3)透射电镜结果显示,复合脂肪酸处理的骡鸭原代肝细胞和线粒体均出现明显水肿,脂滴出现聚合,并且膜和嵴的结构受损。此外,与对照组相比,肝细胞脂滴含量、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性、丙二醛和活性氧水平显著上升(P<0.05)。(4)与对照组相比,复合脂肪酸处理的骡鸭原代肝细胞中AMP活化蛋白激酶(AMPK)、脂蛋白脂肪酶(LPL)和肉碱棕榈转移酶-1A(CPT-1A)mRNA表达量以及AMPK蛋白表达量显著降低(P<0.05),而白细胞分化抗原36(CD36)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)mRNA及白细胞分化抗原36(CD36)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)蛋白表达量显著提高(P<0.05)。因此,油酸+棕榈酸浓度为1500μmol/L+750μmol/L处理骡鸭原代肝细胞36 h能通过调控AMPK信号通路,有效增加肝细胞脂质沉积,但同时易诱导肝细胞氧化应激。 展开更多
关键词 脂肪肝细胞模型 脂质沉积与氧化应激 AMPK信号通路 骡鸭原代肝细胞
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基于非酒精性脂肪肝体外细胞模型对藏药“松蒂”基原植物中6个多酚类化合物的活性评价 被引量：2
2
作者 阿都莫子力 魏荣锐 +7 位作者 秦伟瀚 冯海青 任刚 朱继孝 万鑫浩 金重先 蒋伟 钟国跃 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2592-2598,共7页
目的研究源自“松蒂”基原植物中6个多酚类化合物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)体外细胞模型各项指标及脂滴形成的影响。方法采用SRB法确定各化合物对LO2细胞存活率的影响。化合物预处理LO2细胞24 h后,加入油酸诱导LO2细胞诱导非酒精性脂肪... 目的研究源自“松蒂”基原植物中6个多酚类化合物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)体外细胞模型各项指标及脂滴形成的影响。方法采用SRB法确定各化合物对LO2细胞存活率的影响。化合物预处理LO2细胞24 h后,加入油酸诱导LO2细胞诱导非酒精性脂肪肝细胞模型,检测各组细胞TG、MDA、SOD水平,并采用油红O染色法观察各组细胞内脂滴的形成。结果油酸(200μmol/L)诱导LO2细胞24 h后,模型组细胞内脂滴形成增多,TG水平增多(P<0.01)。药物干预后,山柰酚(25、50μmol/L)及100μmol/L异槲皮苷、没食子酸、白桦林烯酮、芦丁均能降低细胞内TG水平(P<0.05,P<0.01);50μmol/L山柰酚及100μmol/L没食子酸、金丝桃苷、芦丁、白桦林烯酮能提高SOD水平(P<0.05,P<0.01),异槲皮苷(50、100μmol/L)提高SOD水平(P<0.05);异槲皮苷、金丝桃苷、芦丁在50、100μmol/L下能降低MDA水平(P<0.05,P<0.01),50μmol/L山柰酚及100μmol/L没食子酸、白桦林烯酮降低MDA水平(P<0.01),且细胞内红色脂滴形成情况与TG水平变化趋势基本一致。结论“松蒂”类药材中山柰酚、异槲皮苷、没食子酸、金丝桃苷、芦丁和白桦林烯酮均可不同程度减少细胞内TG水平,抑制细胞内MDA水平同时提高SOD水平,并减少细胞内脂滴的形成。 展开更多
关键词 松蒂 多酚 非酒精性脂肪肝体外细胞模型 TG
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诱导剂作用时间对3T3-L1前脂肪细胞系分化的影响 被引量：6
3
作者 刘新农 刘秀 +4 位作者 李天佳 王占启 倪冷 刘暴 刘昌伟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期271-274,共4页
目的观察不同诱导剂作用时间对3T3-L1前脂肪细胞系分化的影响。方法参照传统鸡尾酒法,分别在作用时间为2 d(A组,传统法),3 d(B组)、4 d(C组,改良法)条件下诱导分化,采用倒置显微镜观察细胞形态,油红O染色及三酰甘油检测脂肪含量,台盼蓝... 目的观察不同诱导剂作用时间对3T3-L1前脂肪细胞系分化的影响。方法参照传统鸡尾酒法,分别在作用时间为2 d(A组,传统法),3 d(B组)、4 d(C组,改良法)条件下诱导分化,采用倒置显微镜观察细胞形态,油红O染色及三酰甘油检测脂肪含量,台盼蓝染色鉴定细胞活力。结果 A组3T3-L1前脂肪细胞转化率在80%以上的样本数(n=12)占该组所有样本数(n=18)的66%,而B、C两组中所有样本(n=18)的3T3-L1前脂肪细胞转化率均在80%以上。油红O染色定量检测结果显示,C组510nm处的OD值为2.59±0.17,明显高于A组的2.12±0.47(F=6.62,P=0.0001)和B组的2.20±0.17(F=5.15,P=0.0001),A、B两组间差异无统计学意义(F=1.14,P=0.74)。C组的三酰甘油含量为(1351.04±119.01)ng/ml,明显高于A组的(1077.88±272.75)ng/ml(F=6.73,P=0.001)和B组的(1089.38±115.39)ng/ml(F=5.78,P=0.001),A、B两组间差异无统计学意义(F=0.27,P=0.64)。台盼蓝染色结果显示,A、B、C 3组细胞的活力分别为(98.3±1.2)%、(98.5±1.8)%、(98.9±2.1)%,3组间差异无统计学意义(F=0.18,P=0.83)。结论改良法3T3-L1前脂肪细胞诱导法能提高脂肪细胞转化率,可作为高效诱导脂肪细胞模型的方法之一。推荐作用时间为3 d的改良法诱导方案。 展开更多
关键词 3T3-L1 前脂肪细胞系 脂肪细胞模型 转化率
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3T3-L1脂肪细胞诱导分化的研究进展 被引量：4
4
作者 刘秀 刘新农 +1 位作者 李天佳 刘暴 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期733-737,共5页
随着脂肪代谢性疾病的增多,有关脂肪细胞的体外研究成为近年来研究热点。3T3-L1前脂肪细胞系是建立成熟脂肪细胞模型最为常用的细胞系之一,但经典的脂肪细胞诱导方案存在转化率低、转化不均匀等问题。近年来,诸多学者通过改变诱导剂作... 随着脂肪代谢性疾病的增多,有关脂肪细胞的体外研究成为近年来研究热点。3T3-L1前脂肪细胞系是建立成熟脂肪细胞模型最为常用的细胞系之一,但经典的脂肪细胞诱导方案存在转化率低、转化不均匀等问题。近年来,诸多学者通过改变诱导剂作用时间、增加新的诱导药物等方法,即改良诱导法,进行脂肪细胞模型的建立。本文主要从传统诱导法和改良诱导法两方面,总结了3T3-L1脂肪细胞诱导分化的研究进展。 展开更多
关键词 3T3-L1前脂肪细胞系 脂肪细胞模型 转化率 传统法 改良法
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动物脂代谢细胞模型研究进展
5
作者 赵海东 邬明丽 +1 位作者 王淑辉 孙秀柱 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第10期8-12,共5页
脂肪细胞模型是脂代谢相关研究的重要媒介,但是现阶段建立的众多脂肪细胞系并不能完全体现出活体水平的物种、组织部位、年龄和性别等差异。因此,加深对原代脂肪细胞模型建立的认识和明确原代脂肪体外脂代谢相关过程对现阶段的脂代谢研... 脂肪细胞模型是脂代谢相关研究的重要媒介,但是现阶段建立的众多脂肪细胞系并不能完全体现出活体水平的物种、组织部位、年龄和性别等差异。因此,加深对原代脂肪细胞模型建立的认识和明确原代脂肪体外脂代谢相关过程对现阶段的脂代谢研究具有重要的参考价值。该文综述了不同脂肪细胞模型建立方法中的优缺点和异同点,并对原代脂肪细胞模型的生物学差异进行探讨,旨在为细胞模型建立提出较为全面的认识并提供相应的理论依据。 展开更多
关键词 脂肪组织 脂肪细胞模型 脂质代谢 生物学差异性
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乙酸钠对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性的影响及机制分析 被引量：2
6
作者 李林 宫彬彬 +2 位作者 王广力 赵梅 张源淑 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4450-4460,共11页
通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24... 通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48)mmol·L^(-1)刺激BRL-3A细胞24 h后,分别检测细胞相对活力、总脂滴面积、三酰甘油(TG)含量、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,建立脂肪变性细胞模型;2)向BRL-3A细胞中添加不同浓度的乙酸钠,通过流式细胞术检测细胞凋亡率;3)用不同浓度的乙酸钠和0.12 mmol·L^(-1)油酸共同孵育BRL-3A细胞,试验分为4组,分别为油酸处理组、2 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组、4 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组和8 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组,分别对细胞脂滴、TG含量、AST、ALT活性、AMPK信号通路蛋白以及脂代谢关键基因进行检测。结果显示:1)用0.12 mmol·L^(-1)油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞脂肪变性模型。2)不同浓度的乙酸钠对BRL-3A细胞凋亡率没有影响;3)4、8 mmol·L^(-1)乙酸钠处理脂肪变性细胞模型后,与油酸处理组相比,细胞总脂滴面积、每平方毫米脂滴数、TG含量、AST和ALT活性均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降,P-AMPK表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上升;脂合成代谢相关基因ACC、FAS以及SCD-1 mRNA表达水平均有一定程度下降;脂分解代谢相关基因CPT-1、CPT-2以及ACO mRNA表达水平均有一定程度上升。本研究表明,乙酸钠会通过AMPK通路激活脂分解代谢,减轻肝细胞脂质蓄积,并且对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性模型的损伤具有一定缓解作用。 展开更多
关键词 BRL-3A细胞 乙酸钠 脂肪变性细胞模型 脂代谢
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肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝中的作用 被引量：2
7
作者 王换换 刘颖 +3 位作者 李帅 何晟 朱斌 张源淑 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期910-918,共9页
[目的]通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤模型,探讨BRL-3A细胞中RAS的ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang-1-7/Mas这2条通路相互负向调节与NAFLD细胞损伤的关系。[方法]采用不同浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2... [目的]通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤模型,探讨BRL-3A细胞中RAS的ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang-1-7/Mas这2条通路相互负向调节与NAFLD细胞损伤的关系。[方法]采用不同浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2 mmol·L^-1)处理BRL-3A细胞24 h,通过检测细胞活力、细胞内甘油三酯(TG)含量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性以及油红染色确立NAFLD细胞模型条件,然后选取低、中、高3个浓度(0.025、0.1和0.2 mmol·L^-1)油酸作用于细胞24 h,用ELISA法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)水平;Western blot分析细胞内血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平;斯皮尔曼相关分析法分析油酸浓度与细胞内ACE、ACE2表达水平的相关性。[结果]1)用0.1 mmol·L^-1油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞NAFLD模型。2)油酸处理24 h后,BRL-3A细胞出现脂滴沉积,在0.025 mmol·L^-1油酸(低浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平有升高趋势,AngⅡ水平与AT1R表达水平下降,ACE/ACE2值下降;0.1 mmol·L^-1油酸(中浓度)组ACE、AT1R表达水平显著升高,其他RAS成员变化不明显;0.2 mmol·L^-1油酸(高浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平下降,AngⅡ水平和ACE、AT1R表达水平及ACE/ACE2值升高。3)斯皮尔曼相关分析显示,油酸浓度、血液相关生化指标(TG含量、AST和ALT活性)和脂滴数及脂滴面积与ACE2表达水平和Ang1-7水平负相关,而与ACE表达水平和AngⅡ水平正相关。[结论]BRL-3A细胞中的2条轴共同参与了油酸致BRL-3A细胞NAFLD损伤的发生和发展过程。低浓度油酸时,ACE2介导的Ang1-7/MasR通路占优势;高浓度油酸处理细胞损伤加重,ACE介导的AngⅡ/AT1R通路占主导地位。ACE2与油酸致细胞炎性损伤的程度呈显著负相关关系。 展开更多
关键词 血管紧张素系统(RAS) BRL-3A细胞 非酒精性脂肪肝病(NAFLD)细胞模型
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