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脂肪组织特异性PU.1敲除小鼠的鉴定及其活体脂肪和肌肉含量分析 被引量:1
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作者 庞卫军 卫宁 +3 位作者 王禹 熊燕 童强 杨公社 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期225-232,共8页
本研究运用基因工程和同源重组等技术,产生了脂肪组织特异性PU.1敲除小鼠(aP2-cre-PU.1fl/fl),并用PCR技术进行基因型判定。Western blot结果表明,与PU.1fl/fl小鼠相比,aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠脂肪组织PU.1蛋白表达显著降低,达到敲除水... 本研究运用基因工程和同源重组等技术,产生了脂肪组织特异性PU.1敲除小鼠(aP2-cre-PU.1fl/fl),并用PCR技术进行基因型判定。Western blot结果表明,与PU.1fl/fl小鼠相比,aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠脂肪组织PU.1蛋白表达显著降低,达到敲除水平。在此基础上,对1~6月龄的PU.1fl/fl和aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠体重和活体成分进行了分析。研究发现,aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠在出生后第5和第6月龄体重显著高于PU.1fl/fl小鼠(P【0.05);6月龄时,肌肉量无显著差异,但aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠脂肪量明显高于PU.1fl/fl小鼠(P【0.05)。结果提示,aP2-cre-PU.1fl/fl小鼠脂肪重量的增加是其体重增加的主要原因。脂肪组织特异性PU.1敲除小鼠的生产为深入研究PU.1基因在体调控脂肪生成的功能奠定了基础,也为探索PU.1基因控制家畜体脂沉积提供了理论依据。 展开更多
关键词 PU.1 脂肪组织特异性敲除小鼠 脂肪 肌肉 活体成分分析
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巨噬细胞特异性敲除KLF2基因小鼠模型构建与鉴定
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作者 孟雪 王新洲 +1 位作者 高水波 吴鸿 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期444-450,共7页
目的 建立巨噬细胞特异性敲除Kruppel样因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)基因小鼠模型,探讨KLF2对巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建KLF2~(flox/+)小鼠。通过与Lyz2-Cre~(+/+)小鼠繁育得到目的基因... 目的 建立巨噬细胞特异性敲除Kruppel样因子2(kruppel-like factor 2,KLF2)基因小鼠模型,探讨KLF2对巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建KLF2~(flox/+)小鼠。通过与Lyz2-Cre~(+/+)小鼠繁育得到目的基因型小鼠,通过基因型鉴定、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western Blot从DNA、RNA、蛋白水平验证KLF2敲除效率。分离培养小鼠骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs),检测脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的炎症相关因子mRNA变化。结果 建立了KLF2~(flox/flox)/Lyz2-Cre~+基因型小鼠,即巨噬细胞特异性敲除KLF2基因。小鼠骨髓、BMDMs的KLF2 mRNA及蛋白水平显著低于对照组小鼠,而心脏、肝、肾组织中KLF2 mRNA表达较对照组小鼠无显著变化。两组小鼠的体重、进食、进水、形态无显著性差异。在LPS作用下,缺失KLF2的BMDMs炎症相关基因IL-6 mRNA表达水平较对照组显著下降,而IL-1、iNOS、CD86 mRNA表达水平较对照组显著升高。结论 本研究成功构建了巨噬细胞特异性敲除KLF2小鼠模型,为进一步研究巨噬细胞KLF2对临床炎症相关疾病的调控作用及机制奠定基础。 展开更多
关键词 Kruppel样因子2 异性敲除小 CRE/LOXP系统 巨噬细胞 动脉粥样硬化
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脂肪组织特异性敲除rictor损害胰岛素调节的脂肪细胞和全身糖脂代谢
3
《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期280-280,共1页
mTOR是一个重要的调节细胞生长与代谢的丝氨酸/苏氨酸激酶,mTOR有包括两个多蛋白复合体:mTORC1和mTORC2。两种复合体都可以通过经典的P13K途径介导胰岛素和生长因子在细胞内内的信号传导。Akt是一个重要的胰岛素调节脂肪组织、骨骼... mTOR是一个重要的调节细胞生长与代谢的丝氨酸/苏氨酸激酶,mTOR有包括两个多蛋白复合体:mTORC1和mTORC2。两种复合体都可以通过经典的P13K途径介导胰岛素和生长因子在细胞内内的信号传导。Akt是一个重要的胰岛素调节脂肪组织、骨骼肌和肝脏的糖脂代谢的信号转导中介,Akt的完全激活有赖于第473位丝氨酸的磷酸化(由mTORC2介导)以及第308位酪氨酸的磷酸化(由PDKl介导)。近年来,脂肪组织越来越受到人们的关注,其不仅仅是作为一个能量储存器官,同时也作为一个重要的内分泌器官,可分泌多种物质,例如瘦素、脂连素和抵抗素等。但是,mTORC2对脂肪组织中糖脂代谢有何作用目前还不清楚。研究者建立了脂肪组织nctor(mTORC2的一个重要组成成分)特异性敲除的小鼠以用于实验,这种小鼠被称为FRic一小鼠。 展开更多
关键词 组织异性 脂代谢 胰岛素 脂肪细胞 丝氨酸/苏氨酸激酶 内分泌器官 蛋白复合体 脂肪组织
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泛素特异性蛋白酶42调节人脂肪干细胞成骨向分化 被引量:1
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作者 潘媛 顾航 +3 位作者 肖涵 赵笠君 汤祎熳 葛雯姝 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期9-16,共8页
目的:探索泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨向分化中的作用。方法:用慢病毒转染hASCs,构建敲低和过表达USP42的稳定转染细胞系,通过碱性磷... 目的:探索泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨向分化中的作用。方法:用慢病毒转染hASCs,构建敲低和过表达USP42的稳定转染细胞系,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性定量、茜素红S矿化结节染色及定量,检测实验组(敲低组和过表达组)及对照组在成骨诱导下hASCs成骨向分化能力的差异,通过定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测实验组及对照组成骨相关基因的表达水平,通过蛋白免疫印迹实验检测实验组及对照组成骨相关蛋白的表达水平,通过裸鼠异位成骨实验评价USP42在hASCs体内成骨向分化中的作用。结果:敲低组USP42的mRNA和蛋白表达显著低于对照组,过表达组显著高于对照组。成骨诱导7 d后,敲低组的ALP活性显著高于对照组,过表达组显著低于对照组;成骨诱导14 d后,敲低组茜素红S染色显著深于对照组,过表达组显著浅于对照组。qRT-PCR结果显示,成骨诱导14 d时,敲低组ALP、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLⅠ)的mRNA表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。蛋白免疫印迹实验结果显示,成骨诱导14 d时敲低组runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、OSX和COLⅠ蛋白表达水平显著高于对照组,过表达组显著低于对照组。裸鼠皮下移植物苏木精-伊红染色结果显示,敲低组类骨组织百分比较对照组显著增高。结论:敲低USP42显著促进hASCs的体内外成骨向分化,过表达USP42显著抑制hASCs的体内成骨向分化,USP42可作为骨组织工程学潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 泛素异性蛋白酶类 脂肪干细胞 细胞分化 骨和骨组织 再生医学
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Subfatin脂肪特异性敲除动物模型的建立及胰岛素敏感性评价 被引量:1
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作者 宋捷 李志勇 缪朝玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期179-179,共1页
目的Subfatin(又名Metrnl)是近年来发现的一个新的脂肪因子,能够被机体内多种脂肪组织表达、分泌.它在皮下白色脂肪中高丰度的表达,提示Subfatin可能参与调节白色脂肪的生物学功能和能量代谢.方法通过Cre/LoxP重组酶系统特异性敲除脂... 目的Subfatin(又名Metrnl)是近年来发现的一个新的脂肪因子,能够被机体内多种脂肪组织表达、分泌.它在皮下白色脂肪中高丰度的表达,提示Subfatin可能参与调节白色脂肪的生物学功能和能量代谢.方法通过Cre/LoxP重组酶系统特异性敲除脂肪组织Subfatin的表达,成功构建了Subfatin脂肪特异性敲除小鼠模型(Subfatin^-/-).与对照野生型小鼠(WT)相比,Subfatin^-/-脂肪组织中Subfatin的表达下调了57%.对WT和Subfatin^-/-小鼠给予正常饮食(NCD)和高脂饮食(HFD)喂养,使用葡萄糖耐量实验(GTT)和胰岛素耐量实验(ITT)对小鼠的胰岛素敏感性进行评估.结果正常饮食和高脂饮食喂养的WT和Sub-fatin^-/-小鼠在体重、摄食量以及能量代谢水平上均没有显著性差异.在高脂饮食喂养情况下,Subfatin^-/-小鼠出现的胰岛素抵抗明显地强于WT小鼠,这种差异在正常饮食情况下没有被观察到.结论脂肪组织缺乏Subfatin加剧了高脂饮食诱导的胰岛素抵抗. 展开更多
关键词 Subfatin 白色脂肪 脂肪异性敲除模型 胰岛素敏感性 能量代谢 高脂饮食
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诱导型巨噬细胞特异性敲除GRK2基因小鼠模型的构建及应用 被引量:3
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作者 魏琦 朱学敏 +2 位作者 刘潇一 杨雪枝 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第4期534-540,共7页
目的 建立诱导型巨噬细胞特异性敲除G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)基因(GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+))小鼠模型。方法 基于Cre/LoxP系统构建GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠。通过PCR扩增程序及琼脂糖凝胶电泳鉴定GRK2^(flox/flox)... 目的 建立诱导型巨噬细胞特异性敲除G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)基因(GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+))小鼠模型。方法 基于Cre/LoxP系统构建GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠。通过PCR扩增程序及琼脂糖凝胶电泳鉴定GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠的基因型。二氧化碳法处死小鼠后,Western blot检测骨髓源巨噬细胞(BMDMs)和腹腔巨噬细胞(PMs)中GRK2表达。免疫荧光检测小鼠脑、心脏和脾脏巨噬细胞中GRK2表达。流式细胞术分析前列腺素E2(PGE2)诱导的PMs中M1/M2比例。结果 基因型鉴定结果表明,flox扩增产物长度在355 bp处有一条条带且Cre扩增产物长度在355 bp处有一条条带的小鼠即为GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠。Western blot结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠BMDMs和PMs中GRK2表达降低(P<0.01)。免疫荧光结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠脑、心脏和脾脏中GRK2表达降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与GRK2^(flox/flox)小鼠相比,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠PMs中CD86/CD206比例变化差异无统计学意义。在PGE2(10μmol/L)刺激下,GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠PMs中CD86/CD206比例升高(P<0.01),且GRK2^(flox/flox)小鼠PMs中CD86/CD206比例高于GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠(P<0.01)。结论 该研究成功构建出GRK2^(flox/flox)Lyz2-CreERT^(+)小鼠模型,且该小鼠可促进PGE2诱导的PMs向M2型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体激酶2 CRE/LOXP系统 异性敲除小 巨噬细胞 基因型鉴定
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髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建和表型初步分析 被引量:1
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作者 李亚婷 张洁 +3 位作者 尹荣华 杨晓明(指导) 任广明(指导) 葛志强(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期580-585,共6页
目的:构建髓系特异性Abro1(Abraxas brother 1)基因敲除小鼠,并初步分析其对小鼠造血系统及LPS诱导败血症的影响。方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre/LoxP重组系统构建Abro1^(flox/+)小鼠,将Abro1^(flox/+)雌雄小鼠自交,子代得到Ab... 目的:构建髓系特异性Abro1(Abraxas brother 1)基因敲除小鼠,并初步分析其对小鼠造血系统及LPS诱导败血症的影响。方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre/LoxP重组系统构建Abro1^(flox/+)小鼠,将Abro1^(flox/+)雌雄小鼠自交,子代得到Abro1^(flox/flox)基因型小鼠。Abro1^(flox/flox)与Lyz2-Cre^(+)小鼠交配,子代得到Abro1^(flox/+)/Lyz2-Cre^(+)小鼠,再将其与Abro1^(flox/flox)交配,最终得到的Abro1^(flox/flox)/Lyz2-Cre^(+)小鼠为髓系特异性Abro1基因敲除小鼠,即MKO小鼠;Abro1^(flox/flox)/Lyz2-Cre^(−)小鼠作为野生型小鼠,即WT小鼠。提取WT和MKO小鼠尾基因组DNA,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳鉴定其基因型。提取WT和MKO小鼠免疫细胞蛋白,Western blot检测ABRO1蛋白表达。流式细胞术分析小鼠骨髓和外周血免疫细胞组成,检测MKO小鼠对造血系统的影响。LPS处理WT和MKO小鼠3 h,检测血清中相关生化指标变化以及炎症因子分泌情况。结果:PCR和Western blot结果显示髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建成功。流式细胞术结果显示WT和MKO小鼠骨髓和外周血中髓系细胞(CD11b^(+)、CD11b^(+)Ly6G^(+)、CD11b^(+)Ly6C^(+))和淋巴细胞组成(CD3^(+)、B220^(+))无差异。LPS诱导败血症实验中,MKO小鼠相关生化指标和炎症因子水平均低于WT小鼠,表明MKO小鼠可抵抗LPS诱导的败血症。结论:成功构建ABRO1 MKO敲除小鼠,发现MKO小鼠造血系统正常,但可抵抗LPS诱导的败血症,ABRO1 MKO小鼠的建立为揭示ABRO1在免疫细胞亚群中的差异性调控机制提供了良好的动物模型。 展开更多
关键词 ABRO1 CRE/LOXP重组系统 髓系异性基因敲除小 造血分化 败血症
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肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立 被引量:2
8
作者 侯宁 杨冠 +2 位作者 范雄伟 吴秀山 杨晓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-74,共6页
肥大软骨细胞是软骨细胞的终末分化形式,在软骨内成骨过程中发挥十分关键的作用。为了研究肥大软骨细胞在骨骼发育过程中的功能,文章构建了在8.2 kb小鼠X型胶原基因(Coll0a1)启动子控制下表达Cre重组酶的转基因小鼠品系(Coll0a1(8.2)-C... 肥大软骨细胞是软骨细胞的终末分化形式,在软骨内成骨过程中发挥十分关键的作用。为了研究肥大软骨细胞在骨骼发育过程中的功能,文章构建了在8.2 kb小鼠X型胶原基因(Coll0a1)启动子控制下表达Cre重组酶的转基因小鼠品系(Coll0a1(8.2)-Cre)。采用显微注射法将11.5 kb的转基因片段导入小鼠基因组,共注射受精卵328枚,获得子代鼠51只,经PCR基因型鉴定有3只在基因组上整合有Cre重组酶基因。PCR检测发现Coll0a1(8.2)-Cre转基因在含有肥大软骨细胞的组织中表达。为了检测Cre重组酶表达的强度和组织特异性,转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,子代ROSA26;Coll0a1(8.2)-Cre双转基因小鼠LacZ染色检测的结果显示,Cre重组酶在所有的肥大软骨细胞中表达。原位杂交的结果证实Coll0a1(8.2)-Cre转基因表达在肥大区的上端。通过对比发现Coll0a1(8.2)-Cre转基因表达的组织特异性和强度均优于之前我们构建的Coll0a1(1.0)-Cre转基因品系。以上结果表明,建立的肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠品系可以作为一种遗传学工具,介导目的基因在肥大软骨细胞中的敲除。 展开更多
关键词 肥大软骨细胞 CRE重组酶 转基因小鼠 组织异性
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Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用 被引量:3
9
作者 罗海峰 吴志勇 +3 位作者 陈炜 邱江锋 张志奇 孟方斌 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期256-259,共4页
目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。... 目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果pEGFP-Cl-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05)。结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调。 展开更多
关键词 SMAD2 RNA 异性 抗肝纤维化 肝脏组织 转染 EGFP 克隆 质粒
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肝脏特异性可调控丙型肝炎病毒核心蛋白表达的转基因小鼠模型的建立 被引量:1
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作者 杨国柱 傅思莹 +5 位作者 黄冰 单于 肖东 马芸 邓新燕 陈系古 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期373-377,共5页
【目的】制备TRE-HCV-C转基因小鼠,为四环素调控系统的体内研究提供了反应部分的转基因小鼠,以便与本实验室同时建立的调控部分的小鼠共同作用,为进一步建立双转基因小鼠模型奠定基础,更为丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)的发病机制的研究... 【目的】制备TRE-HCV-C转基因小鼠,为四环素调控系统的体内研究提供了反应部分的转基因小鼠,以便与本实验室同时建立的调控部分的小鼠共同作用,为进一步建立双转基因小鼠模型奠定基础,更为丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)的发病机制的研究提供一个实用方便的模型。【方法】重组构建含有目的基因HCV-C、TRE序列和SV40 polyA的转基因载体pTRE-HCV-C,以显微注射的方法将1.153kb的转基因片段注入BALB/C母鼠的受精卵,出生动物及其后代经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性鼠基因组DNA标本行进一步鉴定。用转基因阳性小鼠和整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的另一品系转基因小鼠杂交,得到子代F1小鼠,通过免疫组织化学来初步检测HCV-C在肝脏中特异性的可调控性的表达。【结果】产生了5只整合有TRE-HCV-C基因的首建鼠,以及它的子代也带有此基因。与基因组上整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的转基因小鼠杂交后,得到子代F1小鼠,特定时间与DOX作用后,小鼠肝脏的免疫组织化学结果表明,TRE-HCV-C小鼠为丙型肝炎病毒核心蛋白的发病机制研究提供了一个良好的动物模型工具。【结论】成功制备了HCV-C转基因小鼠,可利用四环素调控系统来研究HCV中的C基因对小鼠的作用,为进一步建立四环素调控系统调控下表达HCV-C基因双转基因小鼠模型奠定基础,也是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具。 展开更多
关键词 HCV-C 丙型肝炎病毒核心蛋白 转基因小鼠模型 四环素调控系统 组织异性表达
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肝特异性单不饱和脂肪酸合成酶抑制剂在丙型肝炎治疗中的作用
11
作者 王乐 周豪 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第10期1954-1954,共1页
【据《Antiviral Res》2016年8月报道】题:肝特异性单不饱和脂肪酸合成酶抑制剂在丙型肝炎治疗中的作用(作者Nio Y等)近年来,直接抗病毒药物已成为治疗HCV感染非常有效的药物。然而,直接抗病毒药物的耐药性是亟待解决的问题。
关键词 单不饱和脂肪 丙型肝炎 合成酶抑制剂 抗病毒药物 宿主因素 异性 脂代谢 糖尿病 Ⅰ期临床试验 膜性
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家猪长链非编码RNA的组织特异性表达及其对肉质的影响
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作者 王浩杰 张珍华 +2 位作者 李琰 张霞 彭锐 《四川动物》 北大核心 2023年第1期1-13,共13页
长链非编码RNA(lncRNA)是一类无法编码蛋白且长度大于200 nt的RNA,lncRNA可参与生物体内多种调控与代谢过程,且在多种生物体内呈现出组织特异性的表达模式。然而,lncRNA在家猪Sus scrofa domestica体内的组织特异性表达模式和功能机制... 长链非编码RNA(lncRNA)是一类无法编码蛋白且长度大于200 nt的RNA,lncRNA可参与生物体内多种调控与代谢过程,且在多种生物体内呈现出组织特异性的表达模式。然而,lncRNA在家猪Sus scrofa domestica体内的组织特异性表达模式和功能机制尚不明确。肌肉内脂肪(IMF)是影响猪肉品质的重要因素之一,IMF的沉积受多种机制的调控,而lncRNA对IMF的影响还有待深入研究。本研究利用GEO数据库中家猪RNA-seq数据,通过生物信息学方法共筛选23678个lncRNA,包括14309个新鉴定的lncRNA,其中1218个被鉴定为组织特异性lncRNA(TS lncRNA)。与mRNA相比,lncRNA具有长度较短、表达量更低和外显子数量更少等特点。通过顺式作用与反式作用分别预测了TS lncRNA的潜在作用位点,并通过GO和KEGG分析进行功能注释,发现TS lncRNA的功能总体上与其所属组织或器官的功能相关。此外,发现了潜在影响家猪IMF含量的lncRNA MSTRG.7256.5,并对其进行了RNA干扰与过表达实验,结果表明MSTRG.7256.5会影响PPARγ、SCD等PPAR通路相关的脂质调控基因的水平,并反向调控家猪的脂肪沉积。本研究为生猪养殖和肉类行业未来的研究提供了线索和参考。 展开更多
关键词 家猪 lncRNA 组织异性 肌肉内脂肪
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β3肾上腺素能受体激动剂诱导小鼠脂肪组织棕色化的时效性 被引量:2
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作者 贾如 黄佳琪 +2 位作者 魏晓静 胡波 罗肖 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1099-1106,共8页
目的:研究β3肾上腺素能受体激动剂CL316,243在体诱导小鼠各部位脂肪组织棕色化的时效性,明确其潜在的分子调控机制。方法:以10周龄C57BL/6J小鼠为研究对象,实验组分别腹腔注射CL316,243(1μg/g)1,3及5 d,对照组注射无菌生理盐水溶剂。... 目的:研究β3肾上腺素能受体激动剂CL316,243在体诱导小鼠各部位脂肪组织棕色化的时效性,明确其潜在的分子调控机制。方法:以10周龄C57BL/6J小鼠为研究对象,实验组分别腹腔注射CL316,243(1μg/g)1,3及5 d,对照组注射无菌生理盐水溶剂。通过免疫组织化学法和基因表达分析等,观察不同作用时间下小鼠各部位脂肪组织的棕色化改变及产热相关基因及蛋白质的表达水平。结果:与对照组相比,在腹腔注射CL316,243第1天时附睾周围白色脂肪组织(epididymal white adipose tissue,eWAT)的重量就明显减轻,并且随着给药时间的延长,腹股沟皮下白色脂肪组织(inguinal subcutaneous white adipose tissue,sWAT)和eWAT中解偶联蛋白UCP-1 mRNA和蛋白质表达升高;而持续注射5 d能显著抑制小鼠的摄食及体重增加,并诱导小鼠肩胛部棕色脂肪(interscapular brown adipose tissue,iBAT)、sWAT及eWAT中细胞直径的缩小及小脂滴的聚集。结论:β3肾上腺素能受体激动剂CL316,243能在体诱导小鼠脂肪组织的棕色化,并且在不同脂肪组织中表现出不同的时效性特点。 展开更多
关键词 脂肪组织棕色化 beige细胞 β3肾上腺素能受体激动剂 部位异性
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人类皮下和网膜脂肪组织中脂联素基因的表达和调控的研究 被引量:12
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作者 李晓南 陈荣华 +2 位作者 潘亚 Tommy Olsson Olle Hernell 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期6-9,共4页
目标:探讨脂联素在人类皮下和网膜脂肪组织中mRNA表达水平,以及糖皮质激素和PPARγ激动剂对脂联素的调控作用。方法:应用real-time摇RT-PCR方法观察了16名成人腹部皮下和网膜脂肪组织中脂联素mRNA表达水平以及与肥胖的关系。通过体外培... 目标:探讨脂联素在人类皮下和网膜脂肪组织中mRNA表达水平,以及糖皮质激素和PPARγ激动剂对脂联素的调控作用。方法:应用real-time摇RT-PCR方法观察了16名成人腹部皮下和网膜脂肪组织中脂联素mRNA表达水平以及与肥胖的关系。通过体外培养,观察地塞米松(dexamethasone,DEX)和/或PPARγ激动剂(troglitazone,TGZ)对不同部位脂肪组织脂联素的表达和分泌的调控作用。结果:皮下和网膜脂肪组织脂联素mRNA表达丰富但无显著部位差异,网膜脂肪组织脂联素mRNA水平与BMI呈显著负相关(r=0.56,P<0.05)。体外培养24h后,TGZ处理组脂肪组织脂联素基因的表达明显增加(皮下:70%;网膜:102%),且网膜脂肪组织脂联素的分泌明显高于对照组(P<0.05);DEX则下调网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平36%,TGZ可逆转这种抑制作用。结论:网膜脂肪组织中脂联素mRNA的表达随BMI增加而下降,并受到糖皮质激素及PPARγ激动剂调控。脂联素的部位特异性表达和调控可能是内脏型肥胖连接胰岛素抵抗的重要分子机制。 展开更多
关键词 脂联素 脂肪组织 部位异性 BMI
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SUMO特异性蛋白酶1在结肠癌肿瘤血管中的作用及机制研究 被引量:3
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作者 程金科 徐颖 +1 位作者 左勇 陈国强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2008-2008,共1页
关键词 结肠癌 SUMO 肿瘤血管 异性蛋白 内皮细胞 低氧 血管内皮 基因敲除小 基因沉默 信号通路
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毛腿鼠耳蝠Myotis fimbriatus不同组织酯酶同工酶的比较 被引量:4
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作者 牛红星 王艳梅 余燕 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期143-145,共3页
采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直板活性电泳,分析了毛腿鼠耳蝠的心脏、肝脏、肾脏、胸肌、肺、胃、小肠、舌8种组织的酯酶.结果表明:毛腿鼠耳蝠8种组织的酯酶同工酶存在差异,其分布和活性具有明显的组织特异性,与器官或组织所执行的功能有关.
关键词 毛腿耳蝠 酯酶同工酶 电泳 组织异性
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西南鼠耳蝠7种组织乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的比较 被引量:1
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作者 黄小燕 《贵州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第4期1-3,共3页
采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直板电泳和日本岛津CS 90 0 0双波长薄层扫描仪 ,研究了西南鼠耳蝠 7种组织的乳酸脱氢酶同工酶 (LDH) ,结果表明 :西南鼠耳蝠 7种组织LDH同工酶谱有较大的差异 。
关键词 西南耳蝠 乳酸脱氢酶同工酶 电泳 组织异性 分布 含量 翼手目 哺乳动物
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生长激素受体基因敲除小鼠模型 被引量:5
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作者 王小双 米艾 +4 位作者 孙捷 王丹 曾丽 冉丽媛 吴英杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期662-666,共5页
由脑垂体合成并分泌的生长激素(GH)不仅控制机体生长发育,还在许多代谢疾病中起关键调控作用。GH的生物学功能通过与其表面受体(GHR)结合而启动,基于分子生物学技术构建各种GHR敲除小鼠模型成为揭示GH调控机制的基础。利用Cre-LoxP重组... 由脑垂体合成并分泌的生长激素(GH)不仅控制机体生长发育,还在许多代谢疾病中起关键调控作用。GH的生物学功能通过与其表面受体(GHR)结合而启动,基于分子生物学技术构建各种GHR敲除小鼠模型成为揭示GH调控机制的基础。利用Cre-LoxP重组酶系统,迄今已在小鼠全身或组织特异性(如肝,骨骼肌,脂肪,巨噬细胞和胰岛β细胞等)敲除ghr基因,并从中探索GH/GHR信号转导及其与其他信号通路的相互作用。本文综述并讨论了这些ghr基因敲除小鼠模型的表型特征和应用,从不同方面介绍了GH/GHR相关信号通路研究现状。 展开更多
关键词 生长激素受体 全身敲除 组织异性敲除 代谢疾病 CRE/LOXP系统
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GLUT4-Cre转基因模型建立与Cre酶特异性表达
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作者 孔辉 骆惠均 +4 位作者 陈玉英 王龙 陆振虞 费俭 王铸钢 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第10期789-792,832,共5页
目的 建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠,以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法 选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达,利用基因重组技术,构建GLUT4-Cre转基因表... 目的 建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠,以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法 选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达,利用基因重组技术,构建GLUT4-Cre转基因表达质粒。通过显微注射法将该质粒导入小鼠受精卵细胞核,获得的新生鼠经PCR和Southern杂交方法进行基因型的分析鉴定,常规方法培育、传代转基因鼠。用RT-PCR和免疫组化法对Cre酶在阳性转基因鼠体内mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 获得5只阳性转基因首建鼠,其中3只已建系并稳定传代。在脑、脂肪组织中检测到Cre基因表达,而心肌、骨骼肌及肝脏组织中未检出转基因表达。结论 成功构建了在脑、脂肪组织中特异性表达Cre的转基因鼠,为研究与2型糖尿病、胰岛素抵抗等相关的条件性基因剔除小鼠模型的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 异性表达 GLUT4 脂肪组织 阳性 转基因 骨骼肌 质粒 CRE重组酶 CRE基因 建系
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大鼠主要组织相容性抗原RT.BM1
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作者 杨新 胡雪梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1145-1148,共4页
关键词 主要组织相容性抗原 主要组织相容性复合体 母胎免疫耐受 Ⅱ类基因 抗原异性 免疫应答 Ⅰ类分子
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