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人类肥胖相关新基因LYRM1真核表达载体的构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立
1
作者
邱洁
张敏
+4 位作者
周晓玉
程锐
曹兴国
王玢
郭锡熔
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期493-497,共5页
目的:构建人LYRM1基因的真核表达载体,转染3T3-L1前体脂肪细胞,建立稳定过表达人LYRM1基因的3T3-L1前体脂肪细胞系。方法:运用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中分离LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His B,...
目的:构建人LYRM1基因的真核表达载体,转染3T3-L1前体脂肪细胞,建立稳定过表达人LYRM1基因的3T3-L1前体脂肪细胞系。方法:运用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中分离LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His B,脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的3T3-L1前体脂肪细胞系,并利用Westernblot方法鉴定其表达。结果:PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确。建立了稳定转染LYRM1的3T3-L1前体脂肪细胞,成功地表达目的基因。结论:LYRM1真核表达载体的成功构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立为进一步研究其功能奠定了良好的实验基础。
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关键词
肥胖症/遗传学
脂细胞/细胞学
基因表达
逆转录聚合酶链反应
克隆
分子
序列分析
DNA
遗传载体
转染
质粒
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职称材料
题名
人类肥胖相关新基因LYRM1真核表达载体的构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立
1
作者
邱洁
张敏
周晓玉
程锐
曹兴国
王玢
郭锡熔
机构
南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科
南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期493-497,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30801256)
江苏省自然科学基金(No.BK20080778)
文摘
目的:构建人LYRM1基因的真核表达载体,转染3T3-L1前体脂肪细胞,建立稳定过表达人LYRM1基因的3T3-L1前体脂肪细胞系。方法:运用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中分离LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His B,脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的3T3-L1前体脂肪细胞系,并利用Westernblot方法鉴定其表达。结果:PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确。建立了稳定转染LYRM1的3T3-L1前体脂肪细胞,成功地表达目的基因。结论:LYRM1真核表达载体的成功构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立为进一步研究其功能奠定了良好的实验基础。
关键词
肥胖症/遗传学
脂细胞/细胞学
基因表达
逆转录聚合酶链反应
克隆
分子
序列分析
DNA
遗传载体
转染
质粒
Keywords
Obesity/genet
Adipocytes/cytol
Gene expression
Reverse transcriptase polymerase chain reaction
Cloning, molecular
Sequence analysis, DNA Genetic vectors
Transfection
Plasmids
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人类肥胖相关新基因LYRM1真核表达载体的构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立
邱洁
张敏
周晓玉
程锐
曹兴国
王玢
郭锡熔
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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