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黑豆-乳清双蛋白膳食对脂多糖诱导肠屏障损伤大鼠的保护作用 被引量：1
1
作者 孟维洪 李志明 +4 位作者 张家瑜 舒欣 梁得福 庄柯瑾 张东杰 《食品工业科技》 北大核心 2025年第2期324-333,共10页
本研究旨在探讨黑豆-乳清双蛋白(Black Bean-Whey Double Protein, B-WDP)膳食对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导肠屏障损伤大鼠的保护作用,以SD大鼠为试验对象,饲喂低、中、高剂量的BW DP对其进行28 d膳食干预,随后采用脂多糖诱导... 本研究旨在探讨黑豆-乳清双蛋白(Black Bean-Whey Double Protein, B-WDP)膳食对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导肠屏障损伤大鼠的保护作用,以SD大鼠为试验对象,饲喂低、中、高剂量的BW DP对其进行28 d膳食干预,随后采用脂多糖诱导大鼠肠屏障损伤。通过H&E染色观察大鼠的肠道形态、免疫组化检测紧密连接蛋白表达量、实时荧光定量PCR对TLR4、MyD88的表达水平进行测定。结果表明,与低剂量和高剂量B-W DP相比,中剂量的B-W DP能够极显著(P<0.01)地对LPS引起的肠屏障损伤起到预保护作用,使绒毛长度(Vuff Length,VL)数值增加26.69%,隐窝深度(Crypt Depth,CD)数值降低22.61%,二者比值提升了46.78%;三种剂量的B-W DP均能够对紧密连接蛋白起到不同的调节作用,中剂量干预效果最显著(P<0.01),使ZO-1、Claudin-1、Occludin的表达量分别提高了14.32%、31.80%、16.67%;三种剂量的B-W DP均能极显著(P<0.01)地抑制炎症传导途径,中剂量效果最明显,使TLR4和MyD88的表达水平分别降低了37.25%和33.04%。综上,中剂量B-W DP可改善肠道形态,提高肠道的消化吸收能力,增加紧密连接蛋白的表达量,维持上皮细胞完整,降低肠道通透性,下调TLR4和MyD88的表达水平,减轻炎症反应,对LPS诱导的肠屏障损伤产生了有效的保护作用。 展开更多
关键词 黑豆-乳清双蛋白 脂多糖 肠屏障损伤 肠道形态 紧密连接蛋白
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脂多糖免疫应激研究进展
2
作者 陆瑞 盛辉 +5 位作者 郭妍岩 张羽欣 姚大为 郭晓飞 阮维斌 张效生 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期946-958,共13页
近年来,脂多糖(LPS)引发的免疫应激已经成为畜牧业生产中潜在的威胁。LPS作为一种常见的细菌内毒素,具有多种免疫活性,在免疫调节和细胞信号转导中扮演重要角色。LPS能够快速激活动物的免疫系统,引发多种炎症因子如肿瘤坏死因子(TNF)和... 近年来,脂多糖(LPS)引发的免疫应激已经成为畜牧业生产中潜在的威胁。LPS作为一种常见的细菌内毒素,具有多种免疫活性,在免疫调节和细胞信号转导中扮演重要角色。LPS能够快速激活动物的免疫系统,引发多种炎症因子如肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1β(IL-1β)等的分泌。适度的LPS刺激可以提高动物的抗病能力,帮助其有效对抗感染和外界压力。然而,过量或长期的LPS暴露则可能导致动物的免疫系统过度激活,引起炎症性疾病的发生,甚至影响动物生产性能和健康状态。目前,LPS已被广泛应用于建立与免疫应激相关的动物模型,深入理解LPS对于不同动物免疫应激的影响对畜牧业的生产至关重要,也是兽医领域开发兽药的关键。笔者对LPS的结构和功能、不同动物经历LPS免疫应激的共性和差异、缓解LPS免疫应激的措施进行了综述,并对LPS免疫应激模型的建立方法及其在疾病中的应用进行了总结,对今后研究动物LPS免疫应激提出了建议和展望,以期为LPS的研究和畜牧业生产实践提供参考依据。 展开更多
关键词 脂多糖(LPS) 免疫应激 免疫调节 动物模型
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大麻二酚对脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎症反应和凋亡的抑制作用
3
作者 常欣欣 黄鑫 +4 位作者 范港 杨佳欣 张伟伟 杨清竹 田哲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期60-69,共10页
[目的]研究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞(HC11)炎症反应及细胞凋亡的影响。[方法]试验将HC11细胞分为对照组、LPS组和不同浓度CBD+LPS共处理组(CBD浓度分别为2、4、6μmol/L)。对照组细胞仅加入培养液,LPS组加入LP... [目的]研究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞(HC11)炎症反应及细胞凋亡的影响。[方法]试验将HC11细胞分为对照组、LPS组和不同浓度CBD+LPS共处理组(CBD浓度分别为2、4、6μmol/L)。对照组细胞仅加入培养液,LPS组加入LPS处理,CBD+LPS共处理组用不同浓度CBD预处理1 h后加入LPS,24 h后收集各组细胞样品。利用ELISA法检测细胞中炎症因子含量;使用实时荧光定量PCR、Western blotting分别检测细胞炎症因子及核因子κB(NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关基因mRNA和蛋白的表达水平;通过AnnexinV-FITC/碘化丙啶(PI)和JC-1染色法分别检测细胞凋亡率和线粒体膜电位水平。[结果]与对照组相比,LPS组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6含量及mRNA表达水平均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),NF-κB p65、核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)、细胞外信号调节激酶(ERK)、丝裂原活化蛋白激酶(p38)、应激活化蛋白激酶(JNK)的mRNA表达量和蛋白磷酸化水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。与LPS组相比,不同浓度CBD与LPS共处理后细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6含量及mRNA表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),NF-κB p65、IκBα、ERK、p38、JNK的mRNA表达量和蛋白磷酸化水平均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。细胞凋亡率和线粒体膜电位检测结果显示,与对照组相比,LPS组HC11细胞凋亡率显著升高(P<0.05),线粒体膜电位显著降低(P<0.05)。与LPS组相比,4μmol/L CBD和LPS共处理后,HC11细胞凋亡率显著降低(P<0.05),线粒体膜电位显著升高(P<0.05)。[结论]在LPS诱导的小鼠HC11细胞炎症及凋亡模型中,适宜浓度CBD能抑制NF-κB和MAPK信号通路的激活,从而抑制炎症因子的释放来缓解炎症反应;同时能降低LPS诱导的HC11细胞凋亡率、上调细胞线粒体膜电位,从而抑制细胞凋亡发生。 展开更多
关键词 大麻二酚 脂多糖 小鼠乳腺上皮细胞 炎症反应 细胞凋亡
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补肾通腑方对脂多糖诱导的认知障碍模型大鼠学习记忆能力的影响及作用机制研究 被引量：1
4
作者 张杰 李思敏 +5 位作者 宋晓雨 王旭 许玉珉 段建平 马云枝 赵敏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2110-2121,共12页
【目的】探讨补肾通腑方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的认知障碍模型大鼠学习记忆能力的改善作用及抗炎保护机制。【方法】选取6周龄健康SPF级雄性SD大鼠,采用LPS侧脑室注射法制备认知障碍大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机... 【目的】探讨补肾通腑方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的认知障碍模型大鼠学习记忆能力的改善作用及抗炎保护机制。【方法】选取6周龄健康SPF级雄性SD大鼠,采用LPS侧脑室注射法制备认知障碍大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组,甘露特钠胶囊组,补肾通腑方高、中、低剂量组,并设假手术组。分别给予对应的药物灌胃,1次/d,连续8周,其中补肾通腑方高、中、低剂量组的灌胃剂量分别为15.12、7.56、3.78 g/kg,甘露特钠胶囊组灌胃剂量为0.094 g/kg。模型组和假手术组给予等体积的纯水灌胃。于第8周末,采用Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力的变化,采用苏木素伊红(HE)染色观察大鼠海马区病理形态学的变化,采用免疫荧光检测大鼠海马区小胶质细胞活化情况,采用Western blotting方法检测大鼠海马区肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、N-甲基-D-天门冬胺酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDA)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)等的表达。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠空间逃避潜伏期、游泳路程明显延长,撤除平台后跨越原平台次数显著减少(P<0.05);HE染色结果显示,细胞排列紊乱、稀疏,有细胞空洞等损伤表现;免疫荧光结果显示,诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)/离子钙结合适配器分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)共表达升高、精氨酸酶1(arginase-1,Arg1)/Iba1共表达降低(P<0.05);海马区TNF-α、IL-6、IL-1β等的表达显著升高,NMDA、GABA、Ach等的表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,补肾通腑方高、中、低剂量组甘露特钠胶囊组逃避潜伏期、游泳路程显著缩短,撤除平台后跨越原平台次数显著增多(P<0.05),HE染色结果显示细胞排列较紧密、整齐,细胞形态趋于正常,iNOS/Iba1共表达显著降低,仅补肾通腑方高剂量组Arg1/Iba1共表达显著升高(P<0.05);海马区TNF-α、IL-6、IL-1β等的表达显著降低,NMDA、GABA、Ach等的表达显著升高(P<0.05)。【结论】补肾通腑方能够改善LPS诱导的认知障碍模型大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与抑制促炎型小胶质细胞的激活,降低海马区TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症因子水平,提高海马区NMDA、GABA、Ach等记忆相关因子水平有关。 展开更多
关键词 认知障碍 补肾通腑方 中枢神经炎症 脂多糖
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壳寡糖通过调控SOCS3/STAT3信号通路改善脂多糖诱导的小鼠神经炎症 被引量：1
5
作者 何悦 陈红利 +1 位作者 孙雅煊 戴雪伶 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第10期90-98,共9页
目的探讨壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠神经炎症的改善作用及机制。方法通过对10周龄C57BL/6N小鼠腹腔注射LPS建立神经炎症模型。动物随机分为5组,分别是:对照(CON)组、LPS组、LPS+CO... 目的探讨壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠神经炎症的改善作用及机制。方法通过对10周龄C57BL/6N小鼠腹腔注射LPS建立神经炎症模型。动物随机分为5组,分别是:对照(CON)组、LPS组、LPS+COS低剂量(LPS+COS 50 mg/kg)组、LPS+COS中剂量(LPS+COS 100 mg/kg)组、LPS+COS高剂量(LPS+COS 200 mg/kg)组。LPS注射完毕后进行旷场实验、新物体识别、Morris水迷宫等行为学实验。处死动物后,收集脑组织,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析脑内促炎因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和抗炎因子白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达;Western blot分析脑内信号传导及转录激活蛋白(STAT3)、细胞因子信号抑制物(SOCS3)蛋白的表达水平。结果行为学实验结果表明,COS可以改善LPS诱发的小鼠认知障碍下降等表现。ELISA结果表明,LPS组小鼠的促炎细胞因子的释放量显著增加,抗炎细胞因子的释放量显著降低;而COS灌胃可逆转这一变化趋势。Western blot结果提示,与CON组相比,LPS的STAT3磷酸化水平显著升高,同时也促进SOCS3的蛋白表达升高;而COS则显著下调这两个蛋白的表达。结论COS可能通过抑制SOCS3/STAT3信号通路改善LPS引起的小鼠神经炎症。 展开更多
关键词 壳寡糖 脂多糖 神经炎症 SOCS3/STAT3信号通路
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脂多糖处理时间对山羊瘤胃上皮细胞损伤的影响
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作者 占今舜 江浩筠 +6 位作者 贾浩滨 王海波 谷志勇 潘月 钟小军 马月辉 霍俊宏 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期83-88,共6页
在山羊瘤胃上皮细胞(GRECs)基础培养基中加入1μg/mL脂多糖(LPS),培养3、6、9 h后,检测细胞活性、抗氧化指标、炎症因子及紧密连接蛋白基因的表达。结果发现:1)LPS处理3 h组GRECs的活性显著低于处理6 h和9 h组的,而处理6 h和9 h组GRECs... 在山羊瘤胃上皮细胞(GRECs)基础培养基中加入1μg/mL脂多糖(LPS),培养3、6、9 h后,检测细胞活性、抗氧化指标、炎症因子及紧密连接蛋白基因的表达。结果发现:1)LPS处理3 h组GRECs的活性显著低于处理6 h和9 h组的,而处理6 h和9 h组GRECs的活性无显著差异;2)LPS处理3 h组GRECs的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–PX)活性极显著低于处理6 h和9 h组的,但MDA含量的变化则相反,GRECs的SOD和CAT活性随LPS处理时间的延长而显著升高,ROS含量则随LPS处理时间的延长而极显著降低;3)LPS处理3h组GRECs的TNF–ɑ和IL–1β相对表达量极显著高于处理6h和9h组的,IL–1β相对表达量随LPS处理时间的延长而显著降低,各组间IL–6相对表达量无显著差异;4)LPS处理3 h组GRECs的ZO–1分布低,随着处理时间延长ZO–1分布增加,LPS处理3 h的GRECs紧密连接蛋白Claudin–1相对表达量显著高于处理6 h和9 h组的。说明随着LPS处理时间的延长,山羊瘤胃上皮细胞能够通过提高自身抗氧化和抗炎症能力来缓解氧化损伤,进而改善细胞屏障功能。 展开更多
关键词 脂多糖 山羊瘤胃上皮细胞 抗氧化性能 抗炎性 紧密连接蛋白
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MUC2基因沉默对脂多糖干扰Caco-2/HT-29细胞紧密连接蛋白表达的影响
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作者 严杜建 田甜 +2 位作者 曹雅芳 陈德娟 吴晨晨 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期53-58,共6页
肠道黏膜屏障阻碍病原物质入侵的第一道防线是由黏蛋白-2(MUC2)组成的肠道黏液层,覆盖于上皮细胞表面,由杯状细胞分泌而成。脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)可通过损伤肠黏膜从而干扰屏障功能的正常发挥。论文对Caco-2/HT-29(3∶1)共... 肠道黏膜屏障阻碍病原物质入侵的第一道防线是由黏蛋白-2(MUC2)组成的肠道黏液层,覆盖于上皮细胞表面,由杯状细胞分泌而成。脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)可通过损伤肠黏膜从而干扰屏障功能的正常发挥。论文对Caco-2/HT-29(3∶1)共培养模拟肠道上皮细胞,通过沉默黏蛋白-2(siMUC2)分析脂多糖对肠道黏液层屏障及其上皮紧密连接结构的影响。结果显示,与对照组相比,LPS组E-钙黏素(E-cadherin)、闭合蛋白mRNA表达量均明显降低。与LPS组相比,LPS+siMUC2组中连接蛋白(claudin)、连接附着分子(JAMA)、E-cadherin以及桥粒(desmosome) mRNA水平显著降低,细胞连接蛋白mRNA水平的下调可能影响细胞通透性进而导致屏障功能紊乱。说明黏蛋白-2作为黏液层骨架蛋白成分可以保护细胞紧密连接蛋白免受LPS的干扰。LPS可诱导Caco-2/HT-29细胞模型黏蛋白-2表达增多以及E-cadherin、闭合蛋白mRNA表达下调。当黏蛋白-2基因被沉默后,LPS可导致细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的显著下降,提示肠道上皮细胞紧密连接的屏障功能可能被破坏。 展开更多
关键词 脂多糖 黏蛋白-2 细胞连接 肠道黏膜屏障
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匹莫齐特对脂多糖诱导RAW264.7细胞诱导型一氧化氮合成酶表达的调控及其作用机制
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作者 刘佳 《河南医学研究》 CAS 2024年第7期1175-1180,共6页
目的运用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞株,探究匹莫齐特(Pimozide)对一氧化氮和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)合成的影响和作用机制。方法用含10%胎牛血清、100 U·mL^(-1)的青链霉素DMEM培养液将RAW264.7细胞稀释为每孔2&... 目的运用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞株,探究匹莫齐特(Pimozide)对一氧化氮和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)合成的影响和作用机制。方法用含10%胎牛血清、100 U·mL^(-1)的青链霉素DMEM培养液将RAW264.7细胞稀释为每孔2×105个接种于24孔板中进行培养,分为空白对照组(仅含DMEM培养液+RAW264.7细胞)、Pimozide组(仅含RAW264.7细胞和10μmol·L^(-1)Pimozide培养液)、LPS诱导(LPS 1 mg·L^(-1))组(LPS+RAW264.7细胞)、药物处理组[含细胞和不同浓度药物,包括Pimozide低(LPS+2.5μmol·L^(-1))、中(LPS+5μmol·L^(-1))、高(LPS+10μmol·L^(-1))组]。各组培养上清液中一氧化氮水平测定采用Griess法进行检测。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫蛋白印迹法分别检测iNOS mRNA表达水平和iNOS和磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5的蛋白表达相对水平。结果用含10%胎牛血清、100 U·mL^(-1)的青链霉素DMEM培养液培养RAW264.7细胞24 h后,各组培养上清液一氧化氮表达水平差异有统计学意义(F=25.69,P<0.05);Pimozide低(LPS+2.5μmol·L^(-1))、中(LPS+5μmol·L^(-1))、高(LPS+10μmol·L^(-1))组一氧化氮释放的抑制率差异有统计学意义(F=132.49,P<0.05)。各组iNOS mRNA和蛋白水平表达差异有统计学意义(F=118.59和23.37,P<0.05),同时发现各组磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5/信号传导及转录激活因子通路-5比值差异有统计学意义(F=12.07,P<0.05)。结论Pimozide可抑制RAW264.7细胞中iNOS表达和一氧化氮的生成,其作用机制可能与抑制磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5的生成相关。 展开更多
关键词 匹莫齐特 脂多糖 RAW264.7细胞 信号传导及转录激活因子通路 诱导型一氧化氮合成酶
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积雪草酸通过调控细胞凋亡和自噬缓解脂多糖诱导肉鸡急性肾损伤的研究 被引量：2
9
作者 邱文粤 苏依曼 +7 位作者 叶嘉莉 章心婷 庞晓玥 王荣梅 谢子茂 张辉 唐兆新 苏荣胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期809-821,共13页
旨在探讨积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡肾细胞凋亡和自噬的影响。将40只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为对照组(Con)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))和高剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))。AA预... 旨在探讨积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡肾细胞凋亡和自噬的影响。将40只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为对照组(Con)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))和高剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))。AA预处理组的肉鸡连续14 d每日灌胃相应剂量AA。除Con组,其余组肉鸡在第16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg^(-1)剂量的LPS构建急性肾损伤(AKI)模型;第21日龄时处死肉鸡并采集肾组织样品。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;计算肾脏系数和检测肾组织抗氧化酶水平;实时荧光定量(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测凋亡和自噬相关基因及蛋白的表达;免疫组织化学和免疫荧光检测细胞色素c(Cytc)和微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白在肾组织的表达与分布;TUNEL染色检测肾细胞凋亡率。结果发现,AA可减轻LPS诱导的肉鸡肾病理损伤,显著降低肾脏系数和肾组织丙二醛(MDA)含量,显著升高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性(P<0.05)。AA显著降低了LPS诱导的AKI中P 53、BAX和Caspase 3的mRNA表达,显著促进了LPS诱导的AKI中BCl2、Beclin1、ATG5、LC 3-Ⅰ和LC 3-Ⅱ的mRNA表达(P<0.05);此外,AA预处理显著降低了LPS诱导的AKI中P53、Bak1、BAX和Cleaved-Caspase3的蛋白表达(P<0.05),显著促进了LPS诱导的AKI中Beclin1、ATG5、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达(P<0.05)。免疫组织化学和免疫荧光结果表明,AA预处理显著降低了LPS诱导的AKI中Cytc蛋白的表达与分布(P<0.001),促进了LC3蛋白在LPS诱导的AKI中的表达与分布(P<0.001)。TUNEL结果表明,AA显著降低了LPS诱导的肉鸡肾细胞凋亡率(P<0.001)。总之,AA通过抑制氧化应激、促进细胞自噬和降低细胞凋亡,缓解了LPS诱导的肉鸡AKI。此结果为AA成为潜在饲料添加剂和预防LPS诱导肉鸡AKI提供了理论依据。 展开更多
关键词 凋亡 自噬 积雪草酸 脂多糖 急性肾损伤 肉鸡
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积雪草酸通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻脂多糖诱导肉鸡肾细胞焦亡 被引量：1
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作者 苏依曼 叶嘉莉 +5 位作者 邱文粤 章心婷 庞晓玥 王荣梅 唐兆新 苏荣胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1777-1786,共10页
旨在研究积雪草酸(asiatic acid, AA)通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导肉鸡肾细胞焦亡的作用机制。将40只1日龄健康黄羽肉鸡适应性饲养至7日龄,随机分成4组:空白对照组(CON)、LPS诱导模型组(LPS)... 旨在研究积雪草酸(asiatic acid, AA)通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导肉鸡肾细胞焦亡的作用机制。将40只1日龄健康黄羽肉鸡适应性饲养至7日龄,随机分成4组:空白对照组(CON)、LPS诱导模型组(LPS)、AA低剂量组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))和AA高剂量组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))。AA处理组的肉鸡用对应剂量的AA预处理14 d。除空白对照组外,其余肉鸡在16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg^(-1)的LPS构建急性肾损伤模型,在20日龄,腹腔注射LPS 12 h后处死肉鸡,并采集肾组织样品。采用苏木精-伊红染色(HE)观察肾组织病理变化;RT-qPCR法检测肾组织中HMGB1、TLR4、NF-κB、IκB、NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平;Western blot法检测肾组织中HMGB1、TLR4、P-NF-κB、NLRP3、GSDMD、IL-1β和Cleaved caspase-1/Caspase-1的蛋白表达水平;免疫组化技术检测P-IκB蛋白在肾组织中的表达水平;免疫荧光技术检测HMGB1、NLRP3和ASC蛋白在肾组织中的表达水平。结果显示,LPS会引发肾小管上皮细胞产生空泡变性以及肾小球发育不良,而经AA处理可以改善由LPS诱导引起的病理损伤。同时,LPS使肉鸡肾组织中HMGB1/TLR4/NF-κB通路和焦亡相关基因蛋白表达升高(P<0.05),AA可以显著下调由LPS诱导所导致的肾组织中HMGB1、TLR4、NF-κB、IκB、NLRP3、Caspase-1、TNF-α和IL-18的mRNA水平升高(P<0.05);TLR4、P-NF-κB、NLRP3、IL-1β和Cleaved caspase-1/Caspase-1的蛋白水平显著下降(P<0.05);免疫组化和免疫荧光结果表明,AA可以显著降低LPS所诱导的肾组织中P-IκB、HMGB1、NLRP3和ASC蛋白的表达与分布。综上所述,AA能够通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻LPS诱导肉鸡肾细胞焦亡。 展开更多
关键词 积雪草酸 脂多糖 HMGB1/TLR4/NF-κB通路 肾 细胞焦亡
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基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路探讨益气康肺方对脂多糖感染急性肺损伤地鼠氧化损伤的影响 被引量：1
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作者 赵秋娟 雷根平 +3 位作者 冯喆 王旭钊 何旭恺 张玲 《环球中医药》 CAS 2024年第9期1724-1730,共7页
目的基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)信号通路探讨益气康肺方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染的金黄地鼠肺氧化损伤的影响及其作用机制。方法将6... 目的基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)信号通路探讨益气康肺方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染的金黄地鼠肺氧化损伤的影响及其作用机制。方法将60只SPF级叙利亚金黄地鼠,随机分为空白组、模型组、地塞米松组、益气康肺方低剂量组、益气康肺方中剂量组、益气康肺方高剂量组,每组雌性5只,雄性5只。造模开始前予以预防性给药,空白组和模型组予以等量生理盐水灌胃,地塞米松组于造模前连续腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液4天,益气康肺方低、中、高剂量组于造模前连续灌胃给予相应剂量中药混悬液14天。预防性给药结束后第2天,开始LPS气管滴注建立急性肺损伤(acute lung injury,ALI)地鼠模型,造模结束48小时后解剖取材。BCA法检测肺泡灌洗液蛋白含量水平并计算地鼠肺指数;HE染色检测肺组织病理改变;荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;TBA法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;WST-1法检测肺组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活力;Western blot法检测肺组织Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组肺指数及BALF中蛋白浓度升高,肺组织病理损伤严重,ROS及MDA水平升高,SOD和GSH-PX活力较低,Nrf2、HO-1蛋白含量较低。药物干预处理后,与模型组比较,地塞米松和各中药组肺指数及BALF中蛋白浓度较低,肺组织病理损伤轻,ROS及MDA水平低,SOD和GSH-PX活力高,Nrf2、HO-1蛋白含量高,尤以益气康肺方高剂量组疗效最为显著(P<0.05)。结论益气康肺方可能是通过激活Nrf2/HO-1通路,增强SOD、GSH-PX的活力,抑制LPS引起的炎症和氧化损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 益气康肺方 氧化应激 炎症 核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路 脂多糖
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脂多糖调节SH-SY5Y细胞线粒体融合在阿尔茨海默病中的作用 被引量：1
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作者 王睿 尹亚萍 +3 位作者 李国平 马焜 靖雪妍 陈丽丽 《中国实用医药》 2024年第9期172-177,共6页
目的 探讨脂多糖(LPS)调节人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)线粒体融合在阿尔茨海默病(AD)中的作用。方法 选取SH-SY5Y细胞株进行常规培养,于细胞对数生长期以25、50、100μg/ml的LPS处理SH-SY5Y细胞48 h,分别设置为25μg/ml组、50μg/m... 目的 探讨脂多糖(LPS)调节人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)线粒体融合在阿尔茨海默病(AD)中的作用。方法 选取SH-SY5Y细胞株进行常规培养,于细胞对数生长期以25、50、100μg/ml的LPS处理SH-SY5Y细胞48 h,分别设置为25μg/ml组、50μg/ml组、75μg/ml组,同时设置空白对照组。采用细胞计数试剂(CCK-8)法检测细胞存活率;光镜检测细胞内线粒体损伤情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测动力相关蛋白1 (Drp1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)和视神经萎缩因子1(Opa1)微小核糖核酸(mRNA)表达和蛋白表达水平。分析LPS对SH-SY5Y细胞存活率和β-淀粉样蛋白(Aβ)含量, SH-SY5Y细胞线粒体形态, SH-SY5Y细胞内SOD、MDA、NO和TNF-α, SH-SY5Y细胞内mRNA表达的影响。结果 CCK-8法检测结果显示,与空白对照组相比,在48 h给药时间下, 25、50、100μg/ml组中SH-SY5Y细胞存活率明显下降, Aβ含量显著升高;随着LPS剂量的增加, SH-SY5Y细胞存活率呈剂量依赖性降低, Aβ含量呈剂量依赖性增长,差异具有统计学意义(P<0.05)。光镜结果显示,与空白对照组相比,在48 h给药时间下, 25、50、100μg/ml组中SH-SY5Y细胞内线粒体出现明显变大变圆,体积增大,线粒体出现肿胀和线粒体空泡化等改变,并伴有线粒体自噬的发生。ELISA结果显示,与空白对照组相比,在48 h给药时间下, 25、50、100μg/ml组中SH-SY5Y细胞内SOD表达分别显著降低24.16%、69.08%和123.78%, MDA表达分别显著增加37.65%、52.13%和101.85%, NO表达分别显著增加54.34%、119.08%和167.78%, TNF-α表达分别显著增加54.34%、119.08%和167.78%,随着LPS剂量的增加, SOD含量变化具有剂量依赖性降低, NO、MDA、TNF-α含量变化呈剂量依赖性增长,差异具有统计学意义(P<0.05)。Real-Time PCR结果显示,与空白对照组相比,在48 h给药时间下, 25、50、100μg/ml组中SH-SY5Y细胞内Drp1、Mnf1和Mnf2 mRNA含量随着LPS剂量的增加而显著增加, SH-SY5Y细胞内Opa1 mRNA含量随着LPS剂量的增加而显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LPS可明显加速SH-SY5Y细胞线粒体融合分裂,降低细胞的存活率,在阿尔茨海默病的发病机制中具有重要作用。 展开更多
关键词 脂多糖 人神经母细胞瘤细胞 线粒体 阿尔茨海默病
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基于TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨热毒宁注射液抑制脂多糖刺激的BEAS-2B细胞炎症因子表达的作用机制 被引量：1
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作者 康建英 颜丽珊 +4 位作者 顾春宇 邱新宇 王亦巍 罗赣 张翼 《中国现代中药》 CAS 2024年第11期1938-1946,共9页
目的:基于Toll样受体4(TLR4)/磷脂肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探究热毒宁注射液(RDN)对脂多糖(LPS)刺激的人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症因子表达的影响及机制。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定RD... 目的:基于Toll样受体4(TLR4)/磷脂肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探究热毒宁注射液(RDN)对脂多糖(LPS)刺激的人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症因子表达的影响及机制。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定RDN冻干粉中栀子苷和绿原酸含量;采用分子对接技术评估栀子苷和绿原酸与TLR4的结合能力。通过体外实验构建LPS(1μg·mL^(–1))刺激的BEAS-2B细胞气道炎症模型;采用噻唑蓝(MTT)法检测LPS诱导的BEAS-2B细胞活力;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测LPS诱导的BEAS-2B细胞炎症因子mRNA的表达;通过免疫印迹法(WB)检测LPS诱导的BEAS-2B细胞TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白质的表达;采用免疫荧光法(IF)检测转录因子c-Jun和p65的入核情况。结果:RDN冻干粉中栀子苷和绿原酸的质量分数分别为127.00、70.26 mg·g^(–1);栀子苷和绿原酸均能与TLR4结合,结合能分别为–7.0、–7.9 kcal·mol^(–1)。质量浓度为12.5~400.0μg·mL^(–1)时,RDN对LPS刺激的BEAS-2B细胞活力无显著的抑制作用;质量浓度为200.0~400.0μg·mL^(–1)时,RDN能明显下调白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、趋化因子CXC配体2(CXCL2)、CXCL5、趋化因子配体5(CCL5)、CCL20 mRNA的表达。此外,RDN能降低TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白质PI3K、Akt、TANK结合激酶1(TBK1)、IκB激酶(IKK)α/β、NF-κB抑制因子α(IκBα)、p65、p38、c-Jun N-末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶(ERK)和c-Jun的磷酸化水平,同时抑制LPS激活的BEAS-2B细胞p65和c-Jun的入核。结论:RDN能下调LPS诱导的BEAS-2B细胞炎症因子mRNA的表达,其机制与RDN阻断TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 热毒宁注射液 气道炎症 人支气管上皮细胞 Toll样受体4/磷脂肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/核转录因子-κB信号通路 脂多糖
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阿魏酸对脂多糖应激的吉林白鹅生长性能和肠道抗氧化指标的影响 被引量：1
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作者 刘应昆 郭玮 +3 位作者 付增宇 孙萌 李昊佳 周海柱 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期521-529,共9页
[目的]研究阿魏酸(FA)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激吉林白鹅生长性能、脏器系数以及肠道抗氧化指标的影响,为FA在鹅养殖过程中缓解氧化应激提供参考。[方法]选取7日龄健康雄性吉林白鹅120只,并随机分成6组(每组5个重复,每个重复4只):K组... [目的]研究阿魏酸(FA)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激吉林白鹅生长性能、脏器系数以及肠道抗氧化指标的影响,为FA在鹅养殖过程中缓解氧化应激提供参考。[方法]选取7日龄健康雄性吉林白鹅120只,并随机分成6组(每组5个重复,每个重复4只):K组(空白对照组,基础饲粮)、L组(LPS对照组,基础饲粮)和A、B、C、D组(基础饲粮中分别添加60、120、180和240 mg/kg FA),在正式试验第14、17、20天时,L、A、B、C和D组腹腔注射0.5 mg/kg LPS,K组注射等体积的生理盐水,第21天时每组随机选取10只进行屠宰,取心脏、肝脏、脾脏、肾脏、法氏囊、胸腺,称重并计算脏器系数;分离十二指肠、空肠和回肠,用于测定肠道抗氧化指标。[结果](1)第1~14天,与L组相比,C组的终末体重(FB)、平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)显著升高,而料重比(F/G)显著下降(P<0.05),且除ADFI显著高于K组外,其他指标均与K组差异不显著(P>0.05);第15~21天,与L组相比,A、B、C和D组FB、ADG、ADFI显著升高,F/G显著降低(P<0.05),且部分指标与K组无显著差异(P>0.05);第1~21天,与L组相比,B、C组ADG和ADFI显著升高,F/G显著下降(P<0.05),且与K组无显著差异(P>0.05)。(2)脏器系数中D组胸腺指数显著高于L和K组(P<0.05)。(3)十二指肠中,A、C和D组丙二醛(MDA)含量显著低于L组(P<0.05),且与K组相比无显著差异(P>0.05)。(4)空肠中,C组MDA含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于L组(P<0.05),且与K组相比均无显著差异(P>0.05);C组过氧化氢酶(CAT)活性显著高于L和K组(P<0.05)。(5)回肠中,B和C组MDA含量显著低于L组,C组GSH-Px活性显著高于L组(P<0.05),且均与K组差异不显著(P>0.05)。[结论]饲粮中添加180 mg/kg阿魏酸能够促进鹅生长,缓解各肠段氧化应激损伤。 展开更多
关键词 阿魏酸 吉林白鹅 脂多糖应激 生长性能 肠道抗氧化能力
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积雪草酸通过抑制氧化应激和铁死亡减轻脂多糖诱导的肉鸡心肌损伤的研究
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作者 章心婷 邱文粤 +7 位作者 庞晓玥 苏依曼 叶嘉莉 黄健佳 周水莲 唐兆新 王荣梅 苏荣胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1787-1799,共13页
旨在探讨不同浓度积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡心肌氧化应激和铁死亡的影响。选取50只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为5组,即对照组(Control)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))、中剂量AA组(LPS+AA 30 ... 旨在探讨不同浓度积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡心肌氧化应激和铁死亡的影响。选取50只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为5组,即对照组(Control)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg^(-1))、中剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg^(-1))、高剂量AA组(LPS+AA 60 mg·kg^(-1))。所有AA组用相应剂量的AA连续灌胃14 d。在16、18和20日龄时,所有LPS组肉鸡腹腔注射0.5 mg·kg^(-1) LPS以建立急性心肌损伤(AMI)模型并于21日龄时处死肉鸡并采集心肌样品。通过苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化;使用谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)试剂盒检测心肌组织氧化应激指标;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测心肌组织氧化应激和铁死亡相关基因和蛋白的表达情况;通过免疫组织化学法检测心肌组织中Nrf2和SLC7A11的阳性表达率;通过免疫荧光法检测心肌组织中GPX4的阳性表达率。结果发现,AA预处理可以减轻LPS诱导的心肌病理损伤;与LPS组相比,中剂量AA预处理后心肌中GSH-Px的活性显著升高(P<0.01),AA预处理均显著降低MDA的含量(P<0.05);此外,AA预处理降低了LPS诱导的心肌Keap1、HMGB1和PTGS2的mRNA表达(P<0.05),促进了Nrf2、HO1、NQO1、GCLC、GCLM、SLC7A11、FTH1和GPX4的mRNA表达(P<0.05),同时,也降低了Keap1、HMGB1的蛋白表达,促进了Nrf2、HO1、NQO1、SLC7A11、FTH1和GPX4的蛋白表达(P<0.05);免疫组织化学和免疫荧光结果表明,AA预处理可促进Nrf2(P<0.01)、SLC7A11(P<0.01)和GPX4(P<0.05)的表达。本结果首次表明,AA可通过调节氧化应激和铁死亡缓解LPS诱导的急性心肌损伤(AMI)。AA有望成为未来预防LPS诱导肉鸡AMI的潜在食品添加剂。 展开更多
关键词 积雪草酸 急性心肌损伤 脂多糖 氧化应激 铁死亡
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百事乐加味方对氧糖剥夺联合脂多糖诱导海马神经元细胞损伤的保护作用及机制研究
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作者 袁霞红 刘志恒 +6 位作者 刘检 雷诗卉 刘羽 李薇 邵乐 邓桂明 刘林 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第2期116-122,共7页
目的观察百事乐加味方对体外培养的海马神经元细胞的保护作用,探讨其治疗卒中后抑郁的作用机制。方法体外分离培养乳鼠海马神经元细胞,以氧糖剥夺联合脂多糖诱导海马神经元细胞损伤。将细胞分为正常组、模型组、空白血清组(10%)和百事... 目的观察百事乐加味方对体外培养的海马神经元细胞的保护作用,探讨其治疗卒中后抑郁的作用机制。方法体外分离培养乳鼠海马神经元细胞,以氧糖剥夺联合脂多糖诱导海马神经元细胞损伤。将细胞分为正常组、模型组、空白血清组(10%)和百事乐加味方含药血清组(10%),倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst33342染色观察细胞凋亡情况,ELISA检测细胞上清液神经递质谷氨酸(Glu)、5-羟色胺(5-HT)及促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量,免疫荧光染色检测嘌呤能P2X7受体(P2X7R)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达。结果与正常组比较,模型组海马神经元细胞形态发生明显变化,细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡增加(P<0.01),细胞上清液Glu、TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.05,P<0.01),5-HT含量显著减少(P<0.01),海马神经元P2X7R和NLRP3表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,百事乐加味方含药血清组海马神经元细胞形态明显改善,细胞存活率显著升高(P<0.01),细胞凋亡减少(P<0.01),细胞上清液Glu、TNF-α、IL-1β含量显著减少(P<0.05,P<0.01),5-HT含量显著增加(P<0.01),海马神经元P2X7R和NLRP3表达显著降低(P<0.01)。结论百事乐加味方可能通过抑制P2X7R/NLRP3信号通路、调节神经递质分泌、抑制炎症因子释放发挥对氧糖剥夺联合脂多糖诱导的海马神经元细胞炎症损伤的保护作用,从而治疗卒中后抑郁。 展开更多
关键词 百事乐加味方 卒中后抑郁 海马神经元 氧糖剥夺 脂多糖 P2X7R/NLRP3信号通路
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HIF-1α信号通路对脂多糖诱导鸡巨噬细胞炎症的调节作用研究
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作者 冯晓梦 高超 +6 位作者 陶新磊 李小方 吕晓萍 高雪丽 赵一 李亚楠 刘超男 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2071-2080,共10页
【目的】探究鸡巨噬细胞(HD11)在脂多糖(LPS)诱导条件下,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路和线粒体功能对细胞炎症反应的影响。【方法】试验以HD11细胞为研究对象,分别用不同浓度LPS作用于细胞,培养24 h后检测细胞活力,筛选LPS最佳作... 【目的】探究鸡巨噬细胞(HD11)在脂多糖(LPS)诱导条件下,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路和线粒体功能对细胞炎症反应的影响。【方法】试验以HD11细胞为研究对象,分别用不同浓度LPS作用于细胞,培养24 h后检测细胞活力,筛选LPS最佳作用浓度;同时在最佳LPS作用浓度下,筛选LPS最佳作用时间。将HD11细胞分为对照组和模型组,模型组加入最佳作用浓度LPS培养,对照组加等量的完全培养液,按照LPS最佳作用时间培养后,提取细胞总RNA进行转录组测序,并对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HIF-1α信号通路相关因子mRNA和蛋白表达量;通过流式细胞术检测线粒体膜电位和活性氧(ROS)水平变化。【结果】LPS诱导的HD11细胞炎症模型中最适条件为1μg/mL LPS培养12 h,以此条件成功建立了细胞炎症模型。与对照组相比,模型组共检测到2063个差异表达基因,其中1319个上调,744个下调。GO功能注释结果显示,差异表达基因显著富集到免疫系统应答、对外部刺激的反应和细胞因子受体结合等过程。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因显著富集在50条信号通路,主要涉及免疫细胞介导的炎症反应和Toll样受体、核转录因子-κB(NF-κB)、HIF-1α等信号通路。其中有13个显著上调表达的基因集中在HIF-1α相关信号通路,包括Toll样受体4(TLR4)、NF-κB、HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)基因等。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,NF-κB p65、HIF-1α、VEGF等mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,模型组线粒体膜电位极显著下降(P<0.01),ROS水平显著升高(P<0.05)。【结论】成功建立LPS诱导鸡巨噬细胞炎症模型,HIF-1α与NF-κB信号通路相互串扰共同参与LPS诱导的细胞炎症过程。同时,细胞线粒体功能下降,导致ROS生成增多,进而促进HIF-1α的表达,共同加重了炎性反应和代谢紊乱。 展开更多
关键词 鸡巨噬细胞 脂多糖(LPS) HIF-1Α 炎症反应 线粒体功能
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诃子提取物对脂多糖刺激肉鸡肠道和肝脏损伤的影响
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作者 张晓涵 孙岚源 +2 位作者 宋转 侯永清 吴涛 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3267-3278,共12页
[目的]研究诃子提取物(chebuli extract,CE)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激肉鸡肠道形态、肠道和肝脏炎症反应的影响,以期为功能性饲料添加剂的开发提供理论依据。[方法]采用双因素试验设计,选取40只健康的1日龄罗斯308肉鸡,随... [目的]研究诃子提取物(chebuli extract,CE)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激肉鸡肠道形态、肠道和肝脏炎症反应的影响,以期为功能性饲料添加剂的开发提供理论依据。[方法]采用双因素试验设计,选取40只健康的1日龄罗斯308肉鸡,随机分为2组:对照组和CE处理组,每组5个重复,每个重复4只鸡。对照组肉鸡饲喂基础饲粮,CE处理组肉鸡在基础饲粮基础上添加1000 mg/kg诃子提取物。试验期29 d。第29天,从每个重复中取2只肉鸡腹腔注射1 mg/kg BW LPS,另2只肉鸡腹腔注射等体积生理盐水。注射LPS 3 h后屠宰肉鸡,采集肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊并称重,计算脏器系数,并检测肠道组织形态、肠道屏障功能相关基因、肠道和肝脏炎症反应相关基因的表达水平。[结果]①与未经LPS刺激肉鸡相比,LPS刺激显著降低了肉鸡十二指肠的绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度和绒毛面积,以及空肠绒毛高度、回肠绒毛面积(P<0.05);添加诃子提取物显著降低了肉鸡空肠的隐窝深度,显著升高了空肠和回肠的绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度、绒毛面积(P<0.05)。在LPS刺激下,添加诃子提取物显著升高了肉鸡十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度,以及十二指肠和回肠的绒毛高度/隐窝深度、空肠和回肠的绒毛面积(P<0.05)。②与未经LPS刺激肉鸡相比,添加诃子提取物显著提高了肉鸡黏蛋白2(Mucin-2)、闭锁小带蛋白1(zonula occluden-1,ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)基因表达量(P<0.05)。在LPS刺激下,添加诃子提取物显著上调了肉鸡Claudin-1、Mucin-2、ZO-1基因表达量(P<0.05)。③与未经LPS刺激肉鸡相比,LPS刺激显著提高了肉鸡肝脏基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP9)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因表达量(P<0.05);添加诃子提取物显著下调了肉鸡肝脏MMP 9、IL-1β和IL-8基因表达量(P<0.05)。在LPS刺激下,添加诃子提取物显著下调了肉鸡肝脏MMP 9和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)基因表达量(P<0.05)。[结论]诃子提取物改善了LPS刺激肉鸡肠道形态结构,提高了肠道屏障功能,且具有缓解LPS刺激肉鸡肝脏炎症反应作用。研究结果为将诃子提取物作为天然饲料添加剂的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 诃子提取物 脂多糖 肉鸡 肝脏 肠道健康
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金荞麦总黄酮对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响
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作者 郝洁 林红英 +2 位作者 彭金菊 谢为天 陈志宝 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期215-225,共11页
该研究旨在探讨金荞麦总黄酮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性肺损伤的影响。应用金荞麦根以乙醇为提取溶剂获得金荞麦总黄酮,采用昆明小鼠连续12 d灌胃金荞麦总黄酮(25、50、100 mg/kg),1 mg/kg LPS滴鼻12 h诱导小鼠急性... 该研究旨在探讨金荞麦总黄酮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性肺损伤的影响。应用金荞麦根以乙醇为提取溶剂获得金荞麦总黄酮,采用昆明小鼠连续12 d灌胃金荞麦总黄酮(25、50、100 mg/kg),1 mg/kg LPS滴鼻12 h诱导小鼠急性肺损伤;通过20μg/mL LPS和RAW 264.7细胞共孵育建立细胞损伤模型,应用10、20、30μg/mL金荞麦总黄酮处理RAW 264.7细胞。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶(dehydrogenase,LDH)释放量对LPS和金荞麦总黄酮进行RAW 264.7细胞毒性评价;采用ELISA检测炎性细胞因子[白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)和白细胞介素18(interleukin-18,IL-18))]含量;分光光度计法检测氧化生物标志物[活性氧(reactive oxygen,ROS)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和H_(2)O_(2)]水平;Hoechst 33342/PI双染色检测RAW 264.7细胞凋亡水平。结果表明,金荞麦总黄酮可减轻小鼠肺病理损伤及肺组织水肿程度,显著降低LPS染毒小鼠的血清中IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌和氧化应激产物的水平,并增强CAT活力;金荞麦总黄酮能抑制RAW 264.7细胞向M1极化进而减少促炎介质分泌;降低LDH的释放量,清除积累的ROS和MDA,升高SOD及CAT活性,提高GSH的含量,并抵御LPS诱导细胞凋亡,且呈现浓度依赖性。金荞麦总黄酮能有效抑制促炎介质的产生,逆转氧化生物标志物的表达,抵御细胞凋亡,抑制巨噬细胞向M1极化,缓解LPS诱导的小鼠急性肺损伤。 展开更多
关键词 金荞麦总黄酮 急性肺损伤 RAW 264.7 脂多糖 炎症
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单宁酸对脂多糖应激仔猪肝组织的功能、抗氧化能力和炎症应答的影响 被引量：3
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作者 周琦璐 刘金松 +3 位作者 吴超 杨彩梅 刘玉兰 张瑞强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2519-2529,共11页
旨在研究断奶仔猪饲粮添加单宁酸(tannic acid, TA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)应激断奶仔猪肝组织功能、抗氧化能力、炎症应答反应及相关基因表达的影响。本试验分为两部分。第一部分选择72头体重相近、健康状况良好的28日龄三... 旨在研究断奶仔猪饲粮添加单宁酸(tannic acid, TA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)应激断奶仔猪肝组织功能、抗氧化能力、炎症应答反应及相关基因表达的影响。本试验分为两部分。第一部分选择72头体重相近、健康状况良好的28日龄三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪,随机分为2组,分别为基础饲粮饲喂组(饲喂基础饲粮)和单宁酸饲喂组(饲喂在基础饲粮中额外添加1 000 mg·kg^(-1)单宁酸的试验饲粮),每组6个重复,每个重复6头猪,试验期为28 d。第二部分于第一部分试验结束时,分别从基础饲粮饲喂组和单宁酸饲喂组各选取12头体重接近平均体重、健康状况良好的56日龄仔猪,将其分为4组,每组6头仔猪。对照组(CON)和LPS应激组(LPS)的仔猪来自第一部分试验的基础饲粮饲喂组;单宁酸组(TA)和单宁酸+LPS组(TA+LPS)的仔猪来自第一部分试验的单宁酸饲喂组。在仔猪56日龄早上8:00,给LPS组和TA+LPS组仔猪腹腔注射1.5 mL浓度为1 mg·mL^(-1)的LPS,给CON组和TA组仔猪腹腔注射1.5 mL生理盐水,注射1.5 h后屠宰采样。结果发现,LPS应激增加了仔猪的肝脏指数,提高了血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)活性,降低了仔猪肝组织过氧化氢酶(catalase, CAT)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)水平,提高了仔猪肝组织基因Kelch-1ike ECH-associated protein-1(Keap1)、Toll-like receptor 4(TLR4)、Myeloid differentiation factor 88(MyD88)、Nod-like receptor protein 3(NLRP3)、Interleukin-6(IL-6)和Tumor necrosis factor-α(TNF-α)的表达水平,降低了Nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2)、NADH Quinone Oxidoreductase 1(NQO1)、Manganese superoxide dismutase(Mn-SOD)和Catalase(CAT)的表达水平(P<0.05)。饲粮中添加TA可降低仔猪血清中AST和ALT水平,提高仔猪肝组织CAT和T-SOD水平,显著影响仔猪肝组织IL-6、IL-10和TNF-α含量,下调仔猪肝组织基因Keap1、TLR4、MyD88、NLRP3、IL-6和TNF-α的表达水平,上调Nrf2、NQO1、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和CAT的表达水平(P<0.05)。与CON组相比,TA+LPS组仔猪血清中AST的水平降低(P<0.05)。与LPS组相比,TA+LPS组血清中AST和ALT水平降低,IL-6和TNF-α含量减少,基因Keap1、TLR4、IL-6和TNF-α表达水平降低,Mn-SOD和CAT的表达量增加(P<0.05)。综上,在本试验条件下,单宁酸通过调节仔猪肝脏指数,改善肝抗氧化能力,抑制肝组织炎症因子的分泌,调控Nrf2信号、TLR4信号和NLRP3炎症小体信号相关基因表达,缓解LPS应激引起的仔猪肝应激损伤状态。 展开更多
关键词 单宁酸 脂多糖 猪 肝 应激
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