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卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体的构建和鉴定 被引量:1
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作者 唐滢浍 姚云清 +4 位作者 谭燕 王莉妮 李文桂 刘成伟 陈雅棠 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期877-879,共3页
目的:构建和鉴定大鼠卡氏肺孢子(Pneumocystis carinii,PC)胸腺嘧啶核苷酸合酶(Thymidylate synthase,TS)基因的siRNA(Short interfering RNA)表达载体。方法:人工合成针对PCTS基因的1对shRNA(Short hairpin RNA)序列并定向克隆到空载体... 目的:构建和鉴定大鼠卡氏肺孢子(Pneumocystis carinii,PC)胸腺嘧啶核苷酸合酶(Thymidylate synthase,TS)基因的siRNA(Short interfering RNA)表达载体。方法:人工合成针对PCTS基因的1对shRNA(Short hairpin RNA)序列并定向克隆到空载体pTZU6+1上,构建siRNA表达重组质粒pPC-TS,并采用双酶切产物凝胶电泳和基因测序法鉴定。结果:酶切电泳和基因测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。结论:成功构建卡氏肺孢子胸腺嘧啶核苷酸合酶基因siRNA表达载体。 展开更多
关键词 卡氏肺孢子 核苷合酶基因 SIRNA表达载体
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应用大肠杆菌的核苷磷酸化酶合成胸苷 被引量:10
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作者 沈荣坤 邱蔚然 孙南翔 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第6期701-706,共6页
通过大肠杆菌(E.coli)核苷磷酸化酶的转脱氧核糖基作用,从胸腺嘧啶和2'-脱氧核苷合成胸苷。优化了以dU为底物合成胸苷的反应条件。以30mmol/L dU为底物其合成胸苷的转化率可达55.3%;以dA、dC、dU... 通过大肠杆菌(E.coli)核苷磷酸化酶的转脱氧核糖基作用,从胸腺嘧啶和2'-脱氧核苷合成胸苷。优化了以dU为底物合成胸苷的反应条件。以30mmol/L dU为底物其合成胸苷的转化率可达55.3%;以dA、dC、dU、dG的混合物为底物转化率为52.6%;以DNA降解后的2'-脱氧核苷混合液作底物,反应液中胸苷浓度从9.2mmol/L提高到17.9mmol/L。 展开更多
关键词 核苷 大肠杆菌 核苷磷酸化酶 酶法
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新发基因突变致成人线粒体神经胃肠脑肌病 被引量:2
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作者 谭蓓 冯云路 +3 位作者 吴东 朱以诚 陈钰 钱家鸣 《协和医学杂志》 2014年第3期302-306,共5页
目的探讨线粒体神经胃肠脑肌病患者的临床表现及基因突变情况。方法分析1例成人线粒体神经胃肠脑肌病患者临床资料,对患者及其家系线粒体病相关基因应用NimbleGen固相芯片进行目标区域捕获测序。结果该患者表现为进行性加重的假性胃肠... 目的探讨线粒体神经胃肠脑肌病患者的临床表现及基因突变情况。方法分析1例成人线粒体神经胃肠脑肌病患者临床资料,对患者及其家系线粒体病相关基因应用NimbleGen固相芯片进行目标区域捕获测序。结果该患者表现为进行性加重的假性胃肠梗阻、脑白质病、恶液质、周围神经病、眼外肌无力及多种代谢紊乱。基因检测发现TYMP基因c.217G>A纯合突变为该患者的致病突变,患者父母(近亲婚配)及姐姐均为该突变杂合子,该突变为新发突变。结论经基因检测确诊TYMP基因新发突变致成人线粒体神经胃肠脑肌病。 展开更多
关键词 线粒体神经胃肠脑肌病 胸腺嘧啶核苷酸磷酸化酶基因 基因突变
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三个优质地方鸡种中鱼腥味基因的检测 被引量:7
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作者 初芹 张爱平 +3 位作者 张剑 王海宏 耿爱莲 刘华贵 《中国家禽》 北大核心 2010年第21期55-56,共2页
2005年Honkatukia等研究发现,位于鸡8号染色体上的含黄素单氧化酶3(FMO3)基因的一个错义突变是导致鱼腥味鸡蛋产生的原因。该突变位于FMO3基因的第7外显子上,突变个体cDNA序列的第1034位碱基腺嘌呤核苷酸(A)被胸腺嘧啶核苷酸(T... 2005年Honkatukia等研究发现,位于鸡8号染色体上的含黄素单氧化酶3(FMO3)基因的一个错义突变是导致鱼腥味鸡蛋产生的原因。该突变位于FMO3基因的第7外显子上,突变个体cDNA序列的第1034位碱基腺嘌呤核苷酸(A)被胸腺嘧啶核苷酸(T)取代,这使得编码蛋白的第329位氨基酸由苏氨酸(T)转变为丝氨酸(S), 展开更多
关键词 地方鸡种 鱼腥味 基因 嘌呤核苷 检测 优质 CDNA序列
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HSV-tk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤的体外抗肿瘤效应 被引量:5
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作者 李涛 张虹 +4 位作者 王骞 梁峰 李伟 李贵刚 卢运萍 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期533-537,共5页
目的 研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 /更昔洛韦 (herpessimplexvirusthymidinekinase /gancyclovir,HSV tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制。方法 应用脂质体... 目的 研究单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 /更昔洛韦 (herpessimplexvirusthymidinekinase /gancyclovir,HSV tk/GCV)自杀基因系统对视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)细胞的体外杀伤作用以及旁观者效应发生的机制。方法 应用脂质体将pCMV/hytk IRES hrGFP质粒导入HXO Rb44细胞株。用潮霉素筛选出阳性细胞克隆并命名为HXO Rb44/tk。RT PCR鉴定hytk基因在HXO Rb44/tk细胞中的转录结果。比较HXO Rb44和HXO Rb44/tk细胞的形态特征及生长特性。通过MTT法检测GCV对不同比例HXO Rb44/tk和HXO Rb44混合细胞的杀伤作用 (“旁观者效应”)。并通过上清移换实验研究旁观者效应发生的机制。结果 HXO Rb44/tk细胞经RT PCR可检测出 5 30bp的hytk基因片段。HXO Rb44/tk和HXO Rb44细胞的形态特征及生长特性无明显差异。HXO Rb44/tk细胞仅占很低比例时即可观察到明显的旁观者效应 ,而GCV作用的HXO Rb44/tk细胞上清对HXO Rb44细胞无杀伤作用。结论 HSV tk基因转移联合GCV治疗可作为Rb基因治疗的一种有效方法 。 展开更多
关键词 HSV—tk/GCV 自杀基因系统 视网膜母细胞瘤 体外抗肿瘤效应 基因疗法 核苷激酶
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罗氏海盘车(Asterias rollestoni)中几种化合物的提取分离和结构鉴定 被引量:9
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作者 张立新 范晓 韩丽君 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2005年第1期35-37,共3页
罗氏海盘车的 95 %EtOH提取物用大孔吸附树脂柱、凝胶柱和硅胶柱进行反复分离得到 4个化合物 ,用NMR、MS和IR分析技术分别鉴定为苯丙氨酸、2′- 脱氧胸腺嘧啶核苷、2′- 脱氧次黄嘌呤核苷- 5′- 单磷酸盐和 5 - 甲氧基 -1- 十三醇。
关键词 核苷 结构鉴定 提取分离 苯丙氨 硅胶柱 MS 提取物 OH 甲氧基 化合物
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阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 沈霖 武嘉林 +5 位作者 李蕾 夏远军 高兰 谢晶 周丕琪 杨艳萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期251-254,共4页
目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照... 目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制。方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液。培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养。采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml/L时最强,与雌激素组比较无显著性差异(P>0 05),且明显高于对照组(P<0.05)。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml/L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P<0 05),且明显低于对照组(P<0.05)。结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节 OPG/RANKL表达而治疗骨质疏松。 展开更多
关键词 阿胶强骨口服液 含药血清 护骨素配体 胎鼠 基因mRNA表达 RANKL Wistar大鼠 MTT比色分析 显著性差异 颅骨成骨细胞 新生SD大鼠 成骨细胞增殖 核苷 骨质疏松 对照组 单细胞悬液 放免法测定 PCR测定 OPG 雌激素 分子机制
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^(18)F-FLT与^(18)F-FDGPET/CT诊断肺癌的Meta分析 被引量:8
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作者 王龙龙 王警建 +3 位作者 韩冰 高延忠 赵清 吴敏娟 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期50-55,共6页
目的评价18F-FDG与18F-FLT PET/CT对肺癌诊断的价值。资料与方法计算机检索Cochrane图书馆、Pub Med、EMbase、Medline以及中国科技期刊全文数据库、万方数据库中建库至2014年5月的文献。收集18F-FDG与18F-FLT PET/CT显像诊断肺癌的文献... 目的评价18F-FDG与18F-FLT PET/CT对肺癌诊断的价值。资料与方法计算机检索Cochrane图书馆、Pub Med、EMbase、Medline以及中国科技期刊全文数据库、万方数据库中建库至2014年5月的文献。收集18F-FDG与18F-FLT PET/CT显像诊断肺癌的文献,并按照QUADAS质量评价标准对符合纳入标准的文献进行质量评价,采用Meta Disc软件对2种方法诊断肺癌的敏感度、特异度、诊断优势比进行合并分析和异质性检验,并绘制SROC曲线,计算曲线下面积与Q*。结果最终纳入10个研究。Meta分析结果显示,18F-FDG PET/CT诊断肺癌的合并敏感性、特异性、诊断优势比、曲线下面积和Q*分别为0.88、0.56、9.10、0.8102、0.7448;18F-FLT PET/CT诊断肺癌的合并敏感度、特异度、诊断优势比、曲线下面积和Q*分别为0.79、0.78、12.50、0.8440、0.7756。结论 18F-FDG与18F-FLT PET/CT均对肺癌有较好的诊断价值,但在诊断肺癌的特异性方面,18F-FLT较18F-FDG PET/CT更有优势。 展开更多
关键词 肺肿瘤 正电子发射断层显像术 体层摄影术 X线计算机 氟脱氧葡萄糖F18 核苷 造影剂 META分析
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