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人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞的分离培养与体外血管生成特性
被引量：
6
1
作者
蒋雪峰
卞修武
+3 位作者
王清良
卢佳友
赵雯
史景泉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期291-294,共4页
目的 建立人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞 (glioma derivedmicrovascularendothelialcells ,GDMEC)体外培养体系并观察其体外毛细血管样结构形成特性。方法 采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段 ,利用结合CD10 5...
目的 建立人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞 (glioma derivedmicrovascularendothelialcells ,GDMEC)体外培养体系并观察其体外毛细血管样结构形成特性。方法 采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段 ,利用结合CD10 5抗体的MACSMicroBeads免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化GDMEC ;应用光镜、透射电镜和免疫细胞化学等技术对所获得的GDMEC进行鉴定 ;采用三维培养模型 ,观察GDMEC受血管内皮生长因子 (VEGF)诱导下的小管样结构 (TLS)形成的特性。结果 所获GDMEC呈FⅧ RAg阳性 ,细胞纯度可达 98% ;电镜下见Weibel Palade小体 ;生长状态良好、可传代培养。这些细胞对VEGF刺激具有良好的反应性 ,体外易于形成TLS。结论 本研究摸索并建立了人脑GDMEC的分离培养方法 ,所获GDMEC对肿瘤血管生成研究具有重要价值。
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关键词
血管
生成
胶质
瘤
源
性
微血管
内皮
细胞
(
gdmec
)
免疫磁珠
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职称材料
胶质细胞源性神经营养因子(△N39)-R9神经营养活性和透过血脑屏障的研究
2
作者
崔敏
潘新
王丽梅
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期738-744,共7页
为了研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在中枢神经系统疾病中的治疗应用,运用基因突变、蛋白质融合表达和蛋白质纯化技术获得分子质量较小的GDNF(!N39)活性片段.将HIV-1Tat蛋白转导区(proteintransductiondomain,PTD)的9个碱性氨基酸4...
为了研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在中枢神经系统疾病中的治疗应用,运用基因突变、蛋白质融合表达和蛋白质纯化技术获得分子质量较小的GDNF(!N39)活性片段.将HIV-1Tat蛋白转导区(proteintransductiondomain,PTD)的9个碱性氨基酸49RKKRRQRRR57模拟物9个精氨酸(R9)与GDNF("N39)活性片段融合表达,获得纯度达95%以上的GDNF(#N39)-R9融合蛋白.将GDNF、GDNF($N39)、GDNF(%N39)-R9分别加入原代培养的中脑多巴胺能神经元和转染GDNF受体GFR&1和Ret的PC12细胞中,观察它们的神经营养活性和毒性.运用脑微血管内皮细胞株B-Endo3,观察GDNF(’N39)-R9蛋白穿越血管内皮细胞膜的功能;运用脑血管内皮细胞和Matrigel铺板模拟血脑屏障,Transwell法检测Tat-GDNF((N39)蛋白穿越脑血管内皮细胞和外周胶质膜的能力.结果显示:GDNF()N39)-R9蛋白具有类似GDNF的神经营养活性,促进原代培养的中脑多巴胺能神经元和稳定表达GFR*1和Ret受体的PC12-GFR+1-Ret细胞株的存活,没有显示毒性,并且能很好地穿过脑微血管内皮细胞层和模拟的血脑屏障.
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关键词
胶质
细胞
源
性
神经营养因子(GDNF)
融合蛋白
脑
微血管
内皮
细胞
(B-Endo
3)
蛋白质转运
血脑屏障
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职称材料
题名
人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞的分离培养与体外血管生成特性
被引量：
6
1
作者
蒋雪峰
卞修武
王清良
卢佳友
赵雯
史景泉
机构
第三军医大学西南医院病理科
第三军医大学西南医院神经外科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期291-294,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 30 2 70 52 6
30 370 552)~~
文摘
目的 建立人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞 (glioma derivedmicrovascularendothelialcells ,GDMEC)体外培养体系并观察其体外毛细血管样结构形成特性。方法 采用胰酶、胶原酶联合消化法分离人脑恶性胶质瘤微血管片段 ,利用结合CD10 5抗体的MACSMicroBeads免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化GDMEC ;应用光镜、透射电镜和免疫细胞化学等技术对所获得的GDMEC进行鉴定 ;采用三维培养模型 ,观察GDMEC受血管内皮生长因子 (VEGF)诱导下的小管样结构 (TLS)形成的特性。结果 所获GDMEC呈FⅧ RAg阳性 ,细胞纯度可达 98% ;电镜下见Weibel Palade小体 ;生长状态良好、可传代培养。这些细胞对VEGF刺激具有良好的反应性 ,体外易于形成TLS。结论 本研究摸索并建立了人脑GDMEC的分离培养方法 ,所获GDMEC对肿瘤血管生成研究具有重要价值。
关键词
血管
生成
胶质
瘤
源
性
微血管
内皮
细胞
(
gdmec
)
免疫磁珠
Keywords
angiogenesis
glioma-derived microvascular endothelial cell
MACS magnetic cell sorting system
分类号
R322.13 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R73-351 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
胶质细胞源性神经营养因子(△N39)-R9神经营养活性和透过血脑屏障的研究
2
作者
崔敏
潘新
王丽梅
机构
山东大学医学院生理研究所
山东大学齐鲁医院骨外科
中国海洋大学医学院海洋药物研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期738-744,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(30572171)
国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2003CB716400).~~
文摘
为了研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在中枢神经系统疾病中的治疗应用,运用基因突变、蛋白质融合表达和蛋白质纯化技术获得分子质量较小的GDNF(!N39)活性片段.将HIV-1Tat蛋白转导区(proteintransductiondomain,PTD)的9个碱性氨基酸49RKKRRQRRR57模拟物9个精氨酸(R9)与GDNF("N39)活性片段融合表达,获得纯度达95%以上的GDNF(#N39)-R9融合蛋白.将GDNF、GDNF($N39)、GDNF(%N39)-R9分别加入原代培养的中脑多巴胺能神经元和转染GDNF受体GFR&1和Ret的PC12细胞中,观察它们的神经营养活性和毒性.运用脑微血管内皮细胞株B-Endo3,观察GDNF(’N39)-R9蛋白穿越血管内皮细胞膜的功能;运用脑血管内皮细胞和Matrigel铺板模拟血脑屏障,Transwell法检测Tat-GDNF((N39)蛋白穿越脑血管内皮细胞和外周胶质膜的能力.结果显示:GDNF()N39)-R9蛋白具有类似GDNF的神经营养活性,促进原代培养的中脑多巴胺能神经元和稳定表达GFR*1和Ret受体的PC12-GFR+1-Ret细胞株的存活,没有显示毒性,并且能很好地穿过脑微血管内皮细胞层和模拟的血脑屏障.
关键词
胶质
细胞
源
性
神经营养因子(GDNF)
融合蛋白
脑
微血管
内皮
细胞
(B-Endo
3)
蛋白质转运
血脑屏障
Keywords
GDNF,fusion protein,B-Endo 3 cells,protein delivery,blood brain barrier
分类号
Q73 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脑恶性胶质瘤微血管内皮细胞的分离培养与体外血管生成特性
蒋雪峰
卞修武
王清良
卢佳友
赵雯
史景泉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
胶质细胞源性神经营养因子(△N39)-R9神经营养活性和透过血脑屏障的研究
崔敏
潘新
王丽梅
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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