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长链非编码RNA HULC对胶质母细胞瘤原位移植瘤模型肿瘤生长的促进作用 被引量:5
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作者 胡宇辰 尹恬恬 +3 位作者 李倩 叶珊 吴景 何杰 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期60-68,共9页
[目的]初步探讨LncRNAHULC对胶质母细胞瘤U87细胞株体内体外生长的作用机制。[方法]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胶质母细胞瘤U87细胞HULC过表达组(H ULC-over)及其对照组(V EC)和沉默表达组(H ULC-siRNA)及其对照组(N C)中HULC表达水... [目的]初步探讨LncRNAHULC对胶质母细胞瘤U87细胞株体内体外生长的作用机制。[方法]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胶质母细胞瘤U87细胞HULC过表达组(H ULC-over)及其对照组(V EC)和沉默表达组(H ULC-siRNA)及其对照组(N C)中HULC表达水平。CCK8增殖实验和克隆形成实验检测U87细胞增殖能力。流式细胞学技术检测U87细胞凋亡能力。小鼠异种原位移植模型按照注射U87细胞对应分为HULC-over组(n=10)和VEC组(n=10)及HULC-siRNA组(n=10)和NC组(n=10),观察各组小鼠生存期。免疫组化检测Ki67的表达。[结果]HULC-over组较VEC组HULC表达量显著升高,HULC-siRNA组较NC组HULC表达量显著降低(均P<0.01)。CCK8增殖实验显示HULC-over组较VEC组细胞增殖率显著升高;HULC-siRNA组较NC组细胞增殖率显著降低(第2、3、4天,均P<0.01)。细胞克隆实验显示VEC组和HULC-over组克隆形成率分别为(34.47±1.56)%和(95.4±2.74)%;NC组和HULC-siRNA组克隆形成率分别为(23.83±0.92)%和(10.23±0.61)%,过表达HULC克隆形成率升高,沉默表达HULC克隆形成率降低(均P<0.01)。细胞凋亡实验显示VEC组和HULC-over组早期凋亡率分别为(3.55±0.56)%和(0.09±0.01)%;NC组和HULC-siRNA组早期凋亡率分别为(2.89±0.67)%和(7.13±0.14)%,过表达HULC细胞早期凋亡率降低,沉默表达HULC细胞早期凋亡率升高(P<0.01)。小鼠生存期数据表明HULC-over组比VEC组存活时间更短,而HULC-siRNA组比NC组存活时间更长(P<0.05)。与VEC组相比,Ki67蛋白在HULC-over组中表达上调;与NC组相比,Ki67蛋白在HULC-siRNA组中表达下调(均P<0.05)。[结论]LncRNAHULC对胶质母细胞瘤U87细胞体内体外生长具有促进作用。 展开更多
关键词 LncRNA HULC 胶质母细胞 增殖 凋亡 异种原位移植模型
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人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立 被引量:7
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作者 王艳华 楚建杰 +9 位作者 李子敏 胡娜平 李会会 郑建民 张彩勤 师长宏 杨志福 奚苗苗 文爱东 翁琰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期735-739,共5页
目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-M... 目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。 展开更多
关键词 胶质 原位移植 裸鼠 动物模型 U87-MG细胞 HE染色 免疫组化
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人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立 被引量:2
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作者 王艳华 楚建杰 +3 位作者 杨志福 奚苗苗 文爱东 翁琰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1065-1065,共1页
目的建立成瘤率高、可靠稳定的人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型,为研究人脑胶质瘤的发病机制和治疗方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,分别将2.5×105个/5μL体外培养的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于15只雄性... 目的建立成瘤率高、可靠稳定的人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型,为研究人脑胶质瘤的发病机制和治疗方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,分别将2.5×105个/5μL体外培养的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于15只雄性裸鼠的右侧尾壳核区,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。分别于接种后7,14,21,28 d行活体动物体内荧光成像和核磁共振扫描动态观察肿瘤大小,之后采用心脏灌注技术固定裸鼠脑组织,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果接种U87-MG的裸鼠均于造模后14 d开始脑内出现肿瘤,成瘤率100%,直至28 d肿瘤持续增长,35 d内该造模裸鼠全部死亡,平均生存时间(30.67±2.03)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;接种后14 d左右是利用该模型进行实验的最佳时机。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制作的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型,简便易行、经济实用、成瘤率高、重复性好、颅外远隔部位转移率低、与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。 展开更多
关键词 胶质 原位移植 裸鼠 动物模型 U87-MG细胞
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人CHG-5胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性分析 被引量:6
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作者 徐承平 卞修武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期287-290,共4页
目的 建立人脑胶质瘤裸鼠脑内原位移植动物模型并探讨其生物学特性。方法 采用瘤细胞悬液接种法 ,将人脑CHG 5胶质瘤细胞接种于裸鼠大脑实质内。分别于接种后 8、14、19、2 4和 3 0d处死动物并行病理检查、胶质纤维酸性蛋白免疫组化... 目的 建立人脑胶质瘤裸鼠脑内原位移植动物模型并探讨其生物学特性。方法 采用瘤细胞悬液接种法 ,将人脑CHG 5胶质瘤细胞接种于裸鼠大脑实质内。分别于接种后 8、14、19、2 4和 3 0d处死动物并行病理检查、胶质纤维酸性蛋白免疫组化、染色体核型分析及透射电镜检查。结果 肿瘤移植成瘤率为 10 0 % ,肿瘤生长稳定 ,肿瘤病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型。结论 本移植瘤模型能作为研究胶质瘤发生、生物学特性以及治疗研究的可靠动物模型。接种后 展开更多
关键词 CHG-5 胶质细胞 原位移植模型 生物学特性 中枢神经系统肿
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神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型的建立 被引量:2
5
作者 刘波 苗佳宁 +1 位作者 张斯萌 李志杰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期1-6,共6页
目的建立神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型,探讨其相对于传统皮下异位肿瘤移植模型的优势。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞,开腹接种于SCID-Beige小鼠左侧肾上腺周围脂肪内,并分别在肿瘤细胞接种后第14、21、28天取瘤组织,与传统... 目的建立神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型,探讨其相对于传统皮下异位肿瘤移植模型的优势。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞,开腹接种于SCID-Beige小鼠左侧肾上腺周围脂肪内,并分别在肿瘤细胞接种后第14、21、28天取瘤组织,与传统皮下异位移植的肿瘤比较成瘤率、肿瘤生长速度及组织病理等指标。结果注射相同数量肿瘤细胞后,原位移植鼠成瘤率在3个取材时间点均为100%,而皮下异位移植鼠成瘤率在3个取材时间点分别为33%、67%、78%,原位移植瘤成瘤率高于皮下异位移植瘤。接种肿瘤细胞的第14、21、28天原位移植瘤肿瘤体积分别为(116.21±78.82)、(245.32±97.31)、(3091.21±2042.39)mm^(3),皮下异位移植瘤肿瘤体积分别为(7.26±6.04)、(41.67±38.52)、(292.14±167.12)mm^(3),与皮下异位移植瘤相比,原位移植瘤生长速度更快、种瘤体积更大。肿瘤组织HE染色提示原位移植瘤肿瘤组织较皮下异位移植瘤肿瘤细胞密度更大。结论神经母细胞瘤肾上腺原位移植瘤动物模型技术可行,与皮下异位移植瘤模型相比具有成瘤率高、肿瘤生长速度快的优势;比皮下异位移植瘤更符合临床神经母细胞瘤生长位置,为深入研究神经母细胞瘤提供更准确和高效的动物模型。 展开更多
关键词 神经母细胞 肾上腺原位移植 动物模型 SCID-Beige鼠
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神经母细胞瘤肝及肾上腺移植模型比较
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作者 陈红霞 谭志刚 +6 位作者 林惠然 冯露平 郑楚雅 廖文峰 曾如凤 刘锦信 卓振建 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期100-108,共9页
目的 建立神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)肝移植模型,并与肾上腺原位移植模型进行比较,探索模型的特征。方法 采用微量注射针将含有5×10^(5)(SK-N-SH)细胞溶液沿肝叶长轴种植于小鼠肝左叶,造模结束后检测肿瘤的生长、转移情况、... 目的 建立神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)肝移植模型,并与肾上腺原位移植模型进行比较,探索模型的特征。方法 采用微量注射针将含有5×10^(5)(SK-N-SH)细胞溶液沿肝叶长轴种植于小鼠肝左叶,造模结束后检测肿瘤的生长、转移情况、相关基因表达及肿瘤组织病理学变化。结果 小鼠接种肿瘤细胞21 d后成瘤率达100%,肿瘤的生长、转移、相关基因表达及病理特征明显。结论 本文通过更为简单的手术造模方法,成功构建了一种神经母细胞瘤肝移植模型,为NB研究者今后科学实验提供了更多理想的模型选择。 展开更多
关键词 神经母细胞 肾上腺原位移植 移植 疾病模型
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双荧光标记的胶质瘤原位移植瘤模型的建立 被引量:2
7
作者 李旺 黄焱 +3 位作者 田新华 李良成 穆军博 童俊江 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期1-8,共8页
目的建立一种稳定、可实时监测的胶质瘤原位移植瘤裸鼠模型。方法用带有荧光素酶(luciferase-Luc)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein-GFP)基因的慢病毒感染U251神经胶质瘤细胞,流式细胞仪筛选稳定表达GFP-Luc荧光的细胞系,并通... 目的建立一种稳定、可实时监测的胶质瘤原位移植瘤裸鼠模型。方法用带有荧光素酶(luciferase-Luc)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein-GFP)基因的慢病毒感染U251神经胶质瘤细胞,流式细胞仪筛选稳定表达GFP-Luc荧光的细胞系,并通过CCK-8实验、细胞周期实验、Transwell肿瘤迁移及侵袭实验等评价荧光细胞的增殖、迁移和侵袭能力是否改变;将细胞接种至裸鼠大脑尾状核,建立胶质瘤原位移植瘤模型,利用小鼠活体成像系统监测脑内肿瘤的生长情况,并通过石蜡切片,HE染色评价细胞在裸鼠脑内的病理特征及成瘤能力。结果成功构建稳定表达GFP荧光和luciferase荧光的U251胶质瘤细胞系及动物模型,慢病毒整合并未改变细胞的增殖、迁移及侵袭能力;模型生长周期适中,成瘤率高,瘤体在颅内生长稳定,HE切片符合人胶质瘤特征。结论双荧光标记的胶质瘤细胞相比于传统细胞更有利于胶质瘤动物模型的实验研究;U251-GFP-Luc胶质瘤细胞裸鼠模型,其肿瘤生长和病理特性与人胶质瘤相似,且可实时观察肿瘤生长,可作为胶质瘤实验研究的理想动物模型。 展开更多
关键词 神经胶质 荧光 活体成像 模型 动物 原位移植
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人胶质母细胞瘤细胞系Y1203的构建及应用 被引量:1
8
作者 郑义 宋莱荣 +5 位作者 徐晓颖 吴震 李晓杰 解磊 陈峰 李文斌 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期733-740,共8页
目的构建一株具备干细胞表型的胶质母细胞瘤细胞系Y1203,用于研究肿瘤细胞干性维持以及治疗耐药的潜在机制。方法Y1203细胞来源于一位49岁女性胶质母细胞瘤患者复发再手术切除的肿瘤组织。使用Y1203细胞构建人源胶质母细胞瘤原位及皮下... 目的构建一株具备干细胞表型的胶质母细胞瘤细胞系Y1203,用于研究肿瘤细胞干性维持以及治疗耐药的潜在机制。方法Y1203细胞来源于一位49岁女性胶质母细胞瘤患者复发再手术切除的肿瘤组织。使用Y1203细胞构建人源胶质母细胞瘤原位及皮下移植(patient derived tumor xenograft,PDX)模型。采用流式细胞术检测不同代数Y1203细胞的细胞周期。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Y1203细胞的干细胞标志物转录因子SOX-2(transcription factor SOX-2,SOX2)和细胞黏附分子分化抗原簇-44(cluster of differentiation-44,CD44)表达。基于转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-Seq)比较Y1203细胞和U87细胞表达谱差异。结果短串联重复序列(short tandem repeats,STR)鉴定确认Y1203细胞与患者肿瘤组织同源,且其与ExPASy数据库中涵盖的常见细胞系完全不同。基因检测结果提示异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)无突变,端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)启动子突变,原癌基因(B-Raf proto-oncogene,BRAF V600E)、抑癌基因(tumor protein p53,TP53)和转录调控因子(ATRX chromatin remodeler,ATRX)基因突变。人胶质母细胞瘤细胞系Y1203可实现在体外无限增殖并用于建立PDX模型。与其他胶质瘤细胞系相比,Y1203细胞中高表达的肿瘤干细胞标志物为SOX2和CD44,并显著富集胶质瘤干细胞相关通路。结论人胶质母细胞瘤细胞系Y1203分化低,恶性程度较高,对放射性治疗和化学治疗抵抗性强,具有胶质母细胞瘤干细胞特性。该细胞系的建立为胶质母细胞瘤临床前研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 胶质母细胞 原代培养 细胞特性 胶质母细胞瘤原位及皮下移植模型
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人胰腺癌裸小鼠胰腺内原位移值模型的超微结构研究 被引量:1
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作者 刘秋珍 脱朝伟 +3 位作者 张龙石 唐德缓 张艳华 丁铭 《中国医学影像技术》 CSCD 1992年第2期41-43,共3页
人胰腺癌裸小鼠胰腺内原位移值模型的建立对胰腺癌的基础理论研究及实验治疗均有重要意义。我院自1990年5月至11月分别将人胰腺癌成功地植到裸小鼠胰腺内。建立了我国第一株人胰腺癌裸小鼠胰腺内移植模型。命名为:PTNMP-1(人胰腺鳞癌裸... 人胰腺癌裸小鼠胰腺内原位移值模型的建立对胰腺癌的基础理论研究及实验治疗均有重要意义。我院自1990年5月至11月分别将人胰腺癌成功地植到裸小鼠胰腺内。建立了我国第一株人胰腺癌裸小鼠胰腺内移植模型。命名为:PTNMP-1(人胰腺鳞癌裸小鼠胰腺内原位移植);PTNMP-2(人胰腺腺癌裸小鼠胰腺内原位移植)。本文报告对其超微结构系统观察的结果。 展开更多
关键词 裸小鼠 胰腺肿 超微结构 移植模型 原位移植 位移值 实验治疗 核染色质 移植 皮下移植
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