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OPN-siRNA对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用
1
作者 王慧 杨国安 +2 位作者 骆康凯 窦晶莉 王永福 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期15-19,共5页
目的:观察骨桥蛋白(OPN)的小干扰RNA(siRNA)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的治疗作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原建立CIA小鼠,未做任何处理的DBA1小鼠为空白组,将CIA小鼠随机分为模型组、空载体组、OPN-siRNA1组及OPN-siRNA2组,每组3只,将成... 目的:观察骨桥蛋白(OPN)的小干扰RNA(siRNA)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的治疗作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原建立CIA小鼠,未做任何处理的DBA1小鼠为空白组,将CIA小鼠随机分为模型组、空载体组、OPN-siRNA1组及OPN-siRNA2组,每组3只,将成功构建的OPN-siRNA表达载体尾静脉注射CIA小鼠,模型组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液(PBS)和p GFP-V-RS空载体。每周注射一次,每次注射100μl,共注射8次。注射后28 d处死小鼠。RT-PCR法检测小鼠肺脏组织中OPN mRNA的表达水平;免疫组化法检测小鼠肺脏组织和踝关节中OPN蛋白的表达水平;病理切片苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肺脏及踝关节的病理变化; ELISA检测小鼠血清中IL-17、IL-10及IFN-γ水平;流式细胞检测小鼠脾细胞Th17及Treg水平。结果:(1)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠肺组织中OPN mRNA的表达明显低于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P<0. 05)。(2)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠肺脏和踝关节中OPN蛋白的表达明显低于模型组和空载体组(P<0. 05)。(3)光镜下观察踝关节的HE染色病理切片,与模型组和空载体组比较:OPNsiRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠踝关节炎性细胞浸润减少,关节肿胀程度减轻;肺组织炎细胞浸润减轻,间质性肺病明显改善。(4)小鼠血清IL-10水平OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组明显高于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P<0. 05);血清IFN-γ水平OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组低于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P<0. 05)。(5)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组的Th17细胞下降,Treg细胞升高,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:OPN-siRNA抑制RA模型鼠体内OPN基因和蛋白表达和炎症介质的水平,同时改善CIA小鼠肺脏和踝关节的病理变化,因此,OPN可能成为RA治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 胶原诱导关节炎小鼠 骨桥蛋白 小干扰RNA
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黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠脾组织T-bet及GATA-3表达的影响 被引量：9
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作者 张娜 赵俊云 +4 位作者 薛慧清 刘慧 李彩彩 杨向竹 周然 《世界中医药》 CAS 2017年第5期1109-1113,共5页
目的:探讨黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)小鼠特异性转录因子T-bet和GATA-3表达的影响,阐述黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机制。方法:建立牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,随机分为CIA... 目的:探讨黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)小鼠特异性转录因子T-bet和GATA-3表达的影响,阐述黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机制。方法:建立牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,随机分为CIA模型组、氢化可的松阳性对照组、黄芪糖蛋白低剂量组、中剂量组、高剂量组;HE染色观察CIA小鼠脾组织损伤程度;采用流式细胞术检测CIA小鼠外周血IFN-γ和IL-4的水平;Western blot法检测CIA小鼠脾组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,黄芪糖蛋白改善了CIA小鼠脾组织损伤情况,减轻炎性反应细胞浸润,下调了外周血IFN-γ和IL-4水平(P<0.05);同时,降低了T-bet和GATA-3蛋白的表达(P<0.05)。结论:黄芪糖蛋白对CIA小鼠的治疗作用,可能是与降低T-bet、GATA-3表达,调整Th1/Th2功能失衡有关。 展开更多
关键词 黄芪糖蛋白 牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠 GATA-3 T-BET
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PAD4-siRNA调控T细胞亚群缓解CIA小鼠的疾病进展
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作者 芦彦蓉 赵凯 庞春艳 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期272-278,共7页
目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)的小干扰RNA(siRNA)载体病毒和感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠治疗效果和潜在作用机制。方法实验分对照组、模型组、治疗1组、治疗2组,每组7只小鼠。对照组小鼠不做任何处... 目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)的小干扰RNA(siRNA)载体病毒和感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠治疗效果和潜在作用机制。方法实验分对照组、模型组、治疗1组、治疗2组,每组7只小鼠。对照组小鼠不做任何处理,其余3组小鼠构建CIA模型,模型组小鼠注射磷酸盐缓冲液(PBS),治疗1组的小鼠注射PAD4-siRNA病毒载体;治疗2组的小鼠注射含有PAD4-siRNA病毒载体的小鼠脾细胞,每周1次,共8周。实验结束后处死小鼠,检测小鼠脾脏中滤泡辅助T(Tfh)细胞、滤泡调节T(Tfr)细胞、1型辅助T(Th1)细胞和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞的变化;观察CIA小鼠关节和软骨的病理变化。结果与对照组比较,模型组小鼠的脾脏Tfh和Th1细胞的比例增加(P<0.05),Tfr和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞比例无明显变化;与模型组比较,Tfh和Th1细胞在治疗1组和治疗2组的比例下降(P<0.05),Tfr和CD4^(+)IL-10^(+)T细胞的比例无明显变化。对照组小鼠关节面光滑,模型组小鼠关节有炎性细胞浸润、关节面粗糙、软骨受损的现象;PAD4-siRNA作用后,治疗1组CIA小鼠后爪的关节炎细胞浸润减少、软骨破坏程度降低;治疗2组CIA小鼠前爪和后爪的炎细胞浸润现象有所减轻,软骨损伤程度也得到了缓解。结论抑制PAD4基因的表达后,CIA小鼠脾脏Tfh和Th1细胞的相对数量下降,小鼠后爪的关节和软骨损伤得到缓解;注射感染PAD4-siRNA病毒的小鼠脾细胞,可缓解CIA小鼠前爪的病理变化。PAD4-siRNA可以通过调控小鼠脾脏T细胞亚群对CIA小鼠发挥潜在治疗价值。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 肽基精氨酸脱亚氨酶4 小干扰RNA 1型辅助T细胞 滤泡辅助T细胞 胶原诱导关节炎小鼠
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