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液相色谱—串联质谱法与胶体金免疫层析法对番茄中3种农药残留的动态监测效果
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作者 徐悦 徐敏权 +2 位作者 王耀 庄建玲 刘晓鹏 《蔬菜》 2025年第6期78-84,共7页
为了验证液相色谱—串联质谱法和胶体金免疫层析法对番茄中吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪残留量的检测效果,采用对比分析的方法,对药后7、15、30、40 d的3种农药残留进行动态监测。结果表明:药后7 d,吡虫啉残留量最低但仍超出检出值,噻虫嗪次... 为了验证液相色谱—串联质谱法和胶体金免疫层析法对番茄中吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪残留量的检测效果,采用对比分析的方法,对药后7、15、30、40 d的3种农药残留进行动态监测。结果表明:药后7 d,吡虫啉残留量最低但仍超出检出值,噻虫嗪次之亦超限;药后15 d,2者残留均降至检出限以下;药后30 d,噻虫嗪残留仅0.021 mg/kg,远低于检出限;全程啶虫脒残留量最高,故防治温室白粉虱优先推荐噻虫嗪,其次是吡虫啉。液相色谱—串联质谱法和胶体金免疫层析法的120次检测结果平均一致率达85%,胶体金免疫层析法仅在药后30 d出现了3次假阳性、9次假阴性。因此,当样本量较大时,建议先使用胶体金免疫层析法进行快速初筛,再对初筛结果中可疑样本采用液相色谱—串联质谱法进行进一步确认,这种组合策略为食品安全、环境监测等领域的检测工作提供了高效、节本且可行的解决方案。 展开更多
关键词 番茄 吡虫啉 啶虫脒 噻虫嗪 液相色谱—串联质谱 胶体金免疫层析 农药残留 快速筛查
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胶体金免疫层析法快速检测果蔬中烯酰吗啉和氟吗啉
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作者 张咏仪 梁颖琳 +4 位作者 罗鼎峰 赵金利 朱亮宇 陈浩宇 沈玉栋 《分析测试学报》 北大核心 2025年第9期1985-1993,共9页
该文将同时识别烯酰吗啉和氟吗啉的单克隆抗体与胶体金偶联作为识别元件,利用金纳米粒子在检测区域的富集作为检测信号,建立了一种同时定性或定量检测烯酰吗啉和氟吗啉的胶体金免疫层析方法。结果表明,在最佳工作条件下,该方法对果蔬样... 该文将同时识别烯酰吗啉和氟吗啉的单克隆抗体与胶体金偶联作为识别元件,利用金纳米粒子在检测区域的富集作为检测信号,建立了一种同时定性或定量检测烯酰吗啉和氟吗啉的胶体金免疫层析方法。结果表明,在最佳工作条件下,该方法对果蔬样品中烯酰吗啉的定量检出限为0.50~0.59 ng/g,检测范围为0.5~10 ng/g,裸眼消线值为4 ng/g;氟吗啉的定量检出限为0.63~1.06 ng/g,检测范围为0.50~10 ng/g,裸眼消线值为8 ng/g。此外,两种样品的平均加标回收率为75.0%~118%,与高效液相色谱-串联质谱法检测结果相关性良好(r^(2)=0.97)。所建立的方法对其他功能类似物的交叉率小于0.1%,特异性良好,且在10 min内可以准确完成目标分析物的定量检测,可用于大量果蔬样品中烯酰吗啉和氟吗啉的快速筛查。 展开更多
关键词 烯酰吗啉 氟吗啉 胶体金免疫层析 同时检测
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胶体金免疫层析法同步快速测定畜禽肉中3种兽药残留 被引量:6
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作者 郝秋艳 周嘉明 +2 位作者 智军海 贾先春 王玮 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期284-293,共10页
该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl... 该文旨在建立一种胶体金免疫层析技术同步测定猪肉和鸡肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素药物残留的方法。动物肌肉组织中呋喃唑酮代谢物、呋喃西林代谢物、氯霉素经酸化、衍生化及乙酸乙酯提取,并经含吐温-20的Tris-HCl缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、吐温-20添加量、衍生化试剂浓度和冻干保护剂种类等关键因素,并对检测卡的灵敏度、特异性和稳定性进行检测。结果显示,所建立的免疫层析方法可在35 min内检出猪肉和鸡肉中呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物和氯霉素药物,检出限分别为0.5、0.5、0.1μg/kg,灵敏度≥98%,假阳性率≤2%,假阴性率≤2%,稳定性可达到1年,且与现有标准方法检测结果一致。该方法操作简便、特异性强、灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。 展开更多
关键词 多兽药残留 畜禽肉 同步快速测定 胶体金免疫层析(gica)
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胶体金免疫层析法高通量测定动物肌肉组织中多兽药残留 被引量:5
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作者 贾先春 周嘉明 +3 位作者 智军海 郝秋艳 杨晓芳 王玮 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期967-978,共12页
[目的]本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法]动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取,并经含Tween 20的... [目的]本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法]动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取,并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后,与胶体金标记的单克隆抗体结合,抑制抗体与硝酸纤维素膜检测线(T线)上的抗原结合,从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线(C线)颜色深浅,对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果]本试验优化了pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素,磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35μg·kg^(-1),灵敏度≥97%,假阳性率≤2%,假阴性率≤3%,且与现有标准方法检测结果一致。[结论]该方法操作简便,灵敏度和准确度高,检测时间短且稳定性好,可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。 展开更多
关键词 多兽药残留 动物肌肉组织 胶体金免疫层析(gica) 高通量 检测
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胶体金免疫层析法在韭菜农药残留检测中的应用研究 被引量:3
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作者 张继梅 冯文霞 +1 位作者 白新明 李亚莉 《寒旱农业科学》 2024年第5期476-481,共6页
为验证胶体金免疫层析技术在韭菜农残检测中的可靠性和适用性,选用3种不同的农残胶体金免疫层析快速检测产品(胶体金农残快检试剂)检测韭菜中腐霉利、吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、克百威、三唑磷等6种农药残留,并将其与色谱质谱串联法进行... 为验证胶体金免疫层析技术在韭菜农残检测中的可靠性和适用性,选用3种不同的农残胶体金免疫层析快速检测产品(胶体金农残快检试剂)检测韭菜中腐霉利、吡虫啉、啶虫脒、多菌灵、克百威、三唑磷等6种农药残留,并将其与色谱质谱串联法进行比较,对其灵敏度、假阳性率及假阴性率进行验证评价。结果表明,在0.5 LOD的农药添加水平下,3种胶体金农残快检试剂对实验室空白样品的检测结果均为阴性;但当添加水平达到LOD或MLR时,其检测结果均为阳性,证明胶体金农残快检试剂灵敏度较高,且符合国家标准食品中农药最大残留限量要求;实验室加标试验和实际样品比对试验结果显示,胶体金农残快检技术与色谱质谱联用法的检测结果均无显著性差异(χ^(2)<3.84),其假阴性率和假阳性率均为0。故胶体金免疫层析法可在韭菜的农残快速检测中应用。 展开更多
关键词 韭菜 农药残留 胶体金免疫层析 快速检测 色谱质谱联用
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有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立 被引量:5
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作者 李洋洋 崔琳 +2 位作者 张宇彤 郑佳慧 艾金霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期428-434,共7页
目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试... 目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 多克隆抗体 有机磷农药 胶体金试纸条 免疫层析
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胶体金免疫层析法检测叶菜中联苯菊酯残留的应用 被引量:2
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作者 金雅慧 虞益江 +3 位作者 包鹏程 李阿根 顾万帆 秦丽 《农药科学与管理》 CAS 2024年第6期36-40,共5页
本文采用胶体金免疫层析法检测叶菜基质中联苯菊酯农药残留量,测试了检测灵敏度、特异性,并优化了检测过程的样品重量、提取液用量及稀释方法、固液分层方式及时间、孵育时间、反应时间等前处理方法条件。结果表明,胶体金法检测叶菜中... 本文采用胶体金免疫层析法检测叶菜基质中联苯菊酯农药残留量,测试了检测灵敏度、特异性,并优化了检测过程的样品重量、提取液用量及稀释方法、固液分层方式及时间、孵育时间、反应时间等前处理方法条件。结果表明,胶体金法检测叶菜中联苯菊酯的检出限为4.0 mg/kg,与6种拟除虫菊酯类农药均无交叉反应。本文简化了操作步骤,采用静置的分层方式替代原有的离心操作,降低对场地、设备、器具的要求,为后续开发使用低精度量器进行前处理操作的产品提供技术基础。 展开更多
关键词 叶菜 联苯菊酯 胶体金免疫层析
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应用胶体金免疫层析法快速检测甜椒中5种农药残留 被引量:4
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作者 卢燕平 《福建热作科技》 2024年第2期6-8,共3页
采用胶体金免疫层析技术(Colloidal Gold Immunochromatographic,GICA)检测甜椒中的毒死蜱、克百威、氟虫腈、灭多威、啶虫脒5种农药,并对其检测结果的准确性、特异性进行测定和评价,采用液质联用仪(UPLC-MS/MS)进行确证。实际样本的胶... 采用胶体金免疫层析技术(Colloidal Gold Immunochromatographic,GICA)检测甜椒中的毒死蜱、克百威、氟虫腈、灭多威、啶虫脒5种农药,并对其检测结果的准确性、特异性进行测定和评价,采用液质联用仪(UPLC-MS/MS)进行确证。实际样本的胶体金免疫层析法检测结果与液相色谱-质谱联用法检测结果基本一致。胶体金免疫层析法具有灵敏度高、成本低、速度快、操作简单等优点,适合推广使用。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析 甜椒 农药 残留
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不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析 被引量:3
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作者 汪洪冰 郭永祥 +3 位作者 张朝阳 黄建龙 张坤 林源 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期99-102,共4页
为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡(简称试纸条/卡)检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验(RBPT)初筛和竞争酶... 为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡(简称试纸条/卡)检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验(RBPT)初筛和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示:不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%~70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%~100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析 布鲁氏菌病 效果分析
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胶体金免疫层析法测定生乳中抗生素含量的不确定度
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作者 陈炜楠 杨爱君 +2 位作者 何瑛 梁俊健 曹学思 《中国乳业》 2024年第12期104-108,共5页
[目的]研究胶体金免疫层析法测定生乳中抗生素——氯霉素、氟喹诺酮类含量读数结果的不确定度评定。[方法]氯霉素含量测定采用“易瑞乳中氯霉素单检快速检测试纸条”、氟喹诺酮类含量测定采用“易瑞乳中氟喹诺酮类抗生素快速检测试纸条... [目的]研究胶体金免疫层析法测定生乳中抗生素——氯霉素、氟喹诺酮类含量读数结果的不确定度评定。[方法]氯霉素含量测定采用“易瑞乳中氯霉素单检快速检测试纸条”、氟喹诺酮类含量测定采用“易瑞乳中氟喹诺酮类抗生素快速检测试纸条”,通过分析不确定度来源,构建数学模型,分析、评定模型每一部分,合成相对标准不确定度,并进一步扩展,得出生乳中抗生素——氯霉素、氟喹诺酮类含量的扩展不确定度。[结果]均取置信度为95%时,得到生乳中抗生素含量读数结果分别为:X(氯霉素)=3.20±0.059 6,取k=2,扩展不确定度U=0.059 6、X(氟喹诺酮类)=3.00±0.059 4,取k=2,扩展不确定度U=0.059 4。[结论]试验过程的不确定度主要来源于样品重复性、取样量、试纸读数仪、结果计算引入不确定度。该方法可为免疫分析法(胶体金免疫层析法)测定生乳中抗生素含量的不确定度评定提供参考。 展开更多
关键词 免疫分析 生乳 胶体金免疫层析 抗生素 不确定度
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胶体金免疫层析法检测结核分枝杆菌特异性IgG/IgM抗体对结核病诊断的应用价值 被引量:26
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作者 李霜君 张治国 +6 位作者 余琴 罗巧 王莉 李晓琴 李马超 刘海灿 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期139-143,149,共6页
目的评价胶体金免疫层析法检测血清中结核分枝杆菌特异性IgG/IgM抗体在结核病诊断中的应用价值。方法收集结核病患者和健康人的血清样本共332份及其背景资料,采用胶体金法检测血清中特异性结核抗体IgG/IgM,与临床诊断和细菌学检测结果比... 目的评价胶体金免疫层析法检测血清中结核分枝杆菌特异性IgG/IgM抗体在结核病诊断中的应用价值。方法收集结核病患者和健康人的血清样本共332份及其背景资料,采用胶体金法检测血清中特异性结核抗体IgG/IgM,与临床诊断和细菌学检测结果比较,使用SPSS 22.0统计软件对结果进行比较分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果胶体金免疫层析法检测结核病患者中特异性结核抗体IgG/IgM的灵敏度为41.15%、特异性为91.67%,检测菌阳和菌阴结核病患者的敏感性分别为51.38%和33.77%。在全部结核病患者中,特异性结核抗体IgG/IgM检测检出率(41.15%)显著高于痰涂片法(18.84%)和痰菌培养法(36.15%)(P<0.05)。结核抗体检测、痰涂片法和痰培养法三种方法联合检测阳性率为61.54%,高于单种方法检测或其中两种方法联合检测。结论胶体金免疫层析法检测血清中结核分枝杆菌抗体具有灵敏、特异、快速和简便等优点,可用于结核病的筛查,同时该方法也具有一定的局限性,敏感度和特异度有待进一步的提高,因此不可单独用于诊断结核病,可配合痰细菌学、影像学和临床表现等进行辅助诊断。 展开更多
关键词 结核抗体 结核分枝杆菌 胶体金免疫层析 诊断
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胶体金免疫层析法快速检测鼠疫耶尔森菌F1抗体 被引量:17
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作者 胡孔新 王静 +7 位作者 周蕾 闫中强 李伟 姚李四 牛春莉 李瑾 马颖 陈维娜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期198-201,共4页
目的建立检测鼠疫耶尔森菌F1抗体的胶体金标记免疫层析方法。方法胶体金标记纯化鼠疫F1抗原,双抗原夹心法原理制成免疫层析检测试纸条,并对兔、羊、人和黄鼠血清进行检测评价。结果用80份不同动物种属的阴性血清进行检测,未出现非特异... 目的建立检测鼠疫耶尔森菌F1抗体的胶体金标记免疫层析方法。方法胶体金标记纯化鼠疫F1抗原,双抗原夹心法原理制成免疫层析检测试纸条,并对兔、羊、人和黄鼠血清进行检测评价。结果用80份不同动物种属的阴性血清进行检测,未出现非特异性反应,对5份恢复期病人血清、13份免疫兔血清和2份免疫羊血清检测也取得阳性结果,对于8份I HA临界阳性(滴度1∶20)的达乌尔黄鼠血清检出阳性6份。结论建立了可以用于现场快速检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析方法。 展开更多
关键词 鼠疫菌 F1抗原 胶体金 免疫层析
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检测狂犬病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用 被引量:20
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作者 徐葛林 胡巧玲 +2 位作者 吴杰 郑新雄 张燕 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期236-237,240,共3页
目的 建立一种简易快速、适用于野外的胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测动物脑或唾液中的狂犬病街毒抗原。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗狂犬病毒单抗 ,制成免疫层析测试条。样品中的狂犬病毒抗原与测试条上金标... 目的 建立一种简易快速、适用于野外的胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测动物脑或唾液中的狂犬病街毒抗原。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗狂犬病毒单抗 ,制成免疫层析测试条。样品中的狂犬病毒抗原与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果 GICA测试条只与狂犬病毒抗原有特异性反应 ,与乙型脑炎病毒、正常小鼠脑组织等无交叉反应。GICA与EIA比较检测了 4 8份可疑狂犬病犬唾液样品 ,两法的符合率为 88 2 %。结论 GICA检测样品中的狂犬病毒抗原特异性强、、灵敏度高、简便快速、无需仪器设备 ,对基层单位开展初步鉴定狂犬病毒样品工作而言 ,不失为一种有效的方法。 展开更多
关键词 检测 狂犬病毒 胶体金 免疫层析
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重金属铬离子胶体金免疫层析快速检测法的建立 被引量:12
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作者 刘茜 唐勇 +2 位作者 向军俭 邹军辉 翟一凡 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期397-402,共6页
建立了水样中铬离子(Cr3+)检测的免疫试纸条检测方法。将自制的抗Cr3+-EDTA单克隆抗体标记于金颗粒后,包被于玻璃纤维上,将Cr3+-EDTA-BSA抗原和羊抗鼠IgG二抗分别结合于硝酸纤维膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),组装试纸条。该试纸条... 建立了水样中铬离子(Cr3+)检测的免疫试纸条检测方法。将自制的抗Cr3+-EDTA单克隆抗体标记于金颗粒后,包被于玻璃纤维上,将Cr3+-EDTA-BSA抗原和羊抗鼠IgG二抗分别结合于硝酸纤维膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),组装试纸条。该试纸条可检测经亚硫酸氢钠还原为Cr3+的Cr6+,检出限为50μg/L;与10种重金属进行交叉实验验证,除与1 000μg/L的Fe3+有微弱交叉外,与其他重金属均无交叉反应;比较试纸条与仪器法ICP检测加标水样,两种方法的结果呈正相关。该试纸条可在3~5 min内肉眼观察结果,适用于现场检测,满足水样或土壤中重金属铬残留的监测要求。 展开更多
关键词 铬离子 胶体金 免疫层析 水样 单克隆抗体
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检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用 被引量:11
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作者 蒋韬 梁仲 +5 位作者 陈涓 何继军 吕律 马维民 刘在新 刘湘涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1021-1024,共4页
目的:建立一种快速、简便的检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,用其标记纯化的AsiaⅠ型口蹄疫抗体后包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的AsiaI型口蹄疫抗体和纯化的羊抗豚... 目的:建立一种快速、简便的检测AsiaⅠ型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,用其标记纯化的AsiaⅠ型口蹄疫抗体后包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的AsiaI型口蹄疫抗体和纯化的羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜按顺序组装成胶体金快速诊断试纸条,通过系列实验验证其灵敏度、特异性、重复性及稳定性。结果:研制的AsiaⅠ型口蹄疫快速检测试纸条对AsiaⅠ型口蹄疫病毒的检测灵敏度为0.116mg/L,对阳性样品进行重复性试验3次检测结果完全相同。交叉反应证实该方法与其他血清型口蹄疫抗原和猪水疱病抗原(SVD)无交叉反应。检测田间样品,GICA与反向间接血凝的定型的符合率为96.87%。稳定性实验证实试纸条可保存12个月。结论:建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的FMD抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。 展开更多
关键词 ASIA I型口蹄疫病毒 胶体金 免疫层析
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柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法 被引量:12
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作者 王伯阳 姜义仁 +4 位作者 臧敏 石生林 杨瑞生 包臣 秦利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期97-101,共5页
利用柞蚕微孢子虫孢子液直接免疫家兔获得柞蚕微孢子虫多克隆抗体后,分别采用双抗夹心法和竞争法制作胶体金免疫层析试纸条,建立能简便、快捷、准确诊断柞蚕微粒子病的柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法。双抗夹心法和竞争法分别是将柞... 利用柞蚕微孢子虫孢子液直接免疫家兔获得柞蚕微孢子虫多克隆抗体后,分别采用双抗夹心法和竞争法制作胶体金免疫层析试纸条,建立能简便、快捷、准确诊断柞蚕微粒子病的柞蚕微孢子虫胶体金免疫层析检测法。双抗夹心法和竞争法分别是将柞蚕微孢子虫多克隆抗体与25 nm和17 nm的胶体金颗粒结合并固定在金标垫上,然后均将羊抗兔二抗包被在硝酸纤维素膜上作为质控点(C),但是2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的反应模式不同:前者是以柞蚕微孢子虫多克隆抗体作为检测点(T),而后者以柞蚕微孢子虫孢壁蛋白作为检测点(T)。2种方法制作的胶体金免疫层析试纸条的检测时间均为10 min,检测灵敏度为0.8×107个/mL,与柞蚕血淋巴无交叉反应,特异性强,操作简单,其中,以双抗夹心法制作的试纸条显色更清晰,结果更可靠,更具实用价值。 展开更多
关键词 柞蚕微孢子虫 多克隆抗体 胶体金 免疫层析 双抗夹心 竞争
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玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析法的建立 被引量:15
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作者 骆敏儿 唐勇 +3 位作者 向军俭 张晓丽 付强强 王宏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期729-733,共5页
目的制备并鉴定玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体(mAb),并初步建立ZEN的胶体金免疫层析检测方法。方法采用活泼酯法制备人工抗原ZEN-OVA和ZEN-BSA,以ZEN-OVA作为免疫原制备ZEN mAb。ELISA法鉴定抗体效价、亚类、特异性等。ZEN mAb-胶体金复... 目的制备并鉴定玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体(mAb),并初步建立ZEN的胶体金免疫层析检测方法。方法采用活泼酯法制备人工抗原ZEN-OVA和ZEN-BSA,以ZEN-OVA作为免疫原制备ZEN mAb。ELISA法鉴定抗体效价、亚类、特异性等。ZEN mAb-胶体金复合物包被于胶体金结合垫上,检测原ZEN-BSA和山羊抗小鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),建立ZEN的胶体金免疫层析检测法。结果经紫外分光光度法和SDS-PAGE鉴定,ZEN人工抗原合成成功。经3次克隆化后,筛选出1株能稳定分泌ZEN mAb的杂交瘤细胞株1G4,腹水效价为1∶1.6×105;抗体亚类为IgG2b;对ZEN的IC50为10.2 ng/mL,检测限为0.58 ng/mL。mAb对ZEN具有高度的特异性,除与β-玉米赤霉烯醇的交叉反应率为12.8%外,与其他ZEN代谢物α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮及其他相似毒素呕吐毒素、伏马毒素、赭曲霉素A等几乎无交叉反应。制备的胶体金免疫层析试纸条在5 min内即可肉眼观察到结果,对ZEN的最低检测限为100 ng/mL。结论成功制备出1株ZEN mAb,并初步建立了其胶体金免疫层析检测方法,最低检测限为100 ng/mL。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 胶体金免疫层析
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胶体金免疫层析法检测蜂蜜中氯霉素残留的前处理方法研究 被引量:8
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作者 王元凤 白亚龙 魏新林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期267-271,共5页
本实验通过肉眼观测试纸条显色情况、金标图像分析和ELISA试剂盒检测回收率,并结合试剂条自身特性比较了六种不同前处理方法对胶体金免疫层析法检测蜂蜜中氯霉素残留的影响,研究发现采用以下的前处理方法,蜂蜜样品氯霉素残留的回收率最... 本实验通过肉眼观测试纸条显色情况、金标图像分析和ELISA试剂盒检测回收率,并结合试剂条自身特性比较了六种不同前处理方法对胶体金免疫层析法检测蜂蜜中氯霉素残留的影响,研究发现采用以下的前处理方法,蜂蜜样品氯霉素残留的回收率最高。方法步骤如下:称取4g试样于15ml离心管中,加入2ml蒸馏水振荡充分溶解。加入8ml乙酸乙酯,上下翻转振荡8min,静置至上层有机相澄清,转移5ml上层有机溶剂于5ml刻度冷冻管中,电吹风吹干。加入160μlPBST缓冲液,溶解试管壁残留,再加入1ml正己烷充分振荡后静置分层,吸取下层水相进行待检。 展开更多
关键词 蜂蜜 氯霉素 胶体金免疫层析 前处理 ELISA
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胶体金免疫层析法快速检测食品中庆大霉素残留 被引量:5
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作者 杨俊 余晓峰 +3 位作者 周伟伟 李红卫 王开萍 刘国庆 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期291-294,共4页
应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测食品中庆大霉素残留的方法。采用免疫竞争法,柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记抗庆大霉素单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,庆大霉素偶联抗原和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(... 应用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测食品中庆大霉素残留的方法。采用免疫竞争法,柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记抗庆大霉素单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,庆大霉素偶联抗原和羊抗兔二抗分别包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线)和控制线(C线),制备检测庆大霉素的胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性、准确性和稳定性进行测定。测试结果表明:庆大霉素快速检测试纸条的灵敏度为0.7μg/mL,检测时间为10min,稳定性和特异性良好,与其他同类物质无交叉反应,其检测结果与酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果呈现了很好的一致性。该方法快速简便、灵敏度高、特异性强、准确性和稳定性好,非常适合现场快速检测庆大霉素。 展开更多
关键词 庆大霉素 胶体金免疫层析 试纸条 快速检测
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胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用 被引量:17
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作者 薛晓 荣霞 +1 位作者 叶自霞 刘力 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期179-182,共4页
随着规模化、集约化畜牧业的发展,兽药的应用品种和数量不断增加,食品动物及产品中兽药残留成为危害人类健康和影响畜产品质量安全的重要因素。虽然兽药残留检测的方法很多,但是,多数皆因其仪器昂贵、操作繁琐、费时而受到基层应用的限... 随着规模化、集约化畜牧业的发展,兽药的应用品种和数量不断增加,食品动物及产品中兽药残留成为危害人类健康和影响畜产品质量安全的重要因素。虽然兽药残留检测的方法很多,但是,多数皆因其仪器昂贵、操作繁琐、费时而受到基层应用的限制。而胶体金免疫层析法具有敏感、特异、方便、快速、不需辅助仪器和试剂等特点,已在兽药残留检测的初筛中得到广泛研究与应用。论文就胶体金免疫层析法的原理,在畜禽产品兽药残留检测中的研究应用以及发展前景做了较为详细的阐述,为实现"从农田到餐桌"的动物性食品安全监控技术提供参考。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析 兽药残留 检测
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