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稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株的建立 被引量:1
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作者 彭小波 郭承涛 +5 位作者 应明真 李洁 宋乐乐 吴燕君 詹丽杏 湛先保 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期721-725,共5页
目的:构建hsa-micro RNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株。方法:设计miR-224前体过表达基因片段,应用q RT-PCR法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载... 目的:构建hsa-micro RNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株。方法:设计miR-224前体过表达基因片段,应用q RT-PCR法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析。用GV369-miR-224慢病毒感染胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞,建立稳定过表达miR-224的MCC1细胞株。荧光显微镜下观察GV369-NC及GV369-miR-224慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCC1、GV369-miR-224-MCC1和GV369-NC-MCC1组细胞中miR-224的表达水平。结果:成功构建GV369-miR-224慢病毒表达载体质粒。GV369-miR-224-MCC1、GV369-NC-MCC1细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光。miR-224表达水平在GV369-miR-224-MCC1细胞中显著高于阴性对照GV369-NC-MCC1细胞和空白对照MCC1细胞(23.45±1.94 vs2.11±0.38,1.46±0.11,均P<0.01),而两组对照组之间miR-224表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建稳定过表达miR-224的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株,为探讨miR-224在胰腺黏液性囊腺癌中的功能及发病机制提供新的细胞模型。 展开更多
关键词 miR-224 慢病毒载体 胰腺黏液性囊腺癌细胞株
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乙肝病毒X蛋白结合蛋白对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响
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作者 孟雪 齐晓宇 +2 位作者 刘维贤 王瑶 王秋旭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1082-1086,共5页
目的探讨乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响及其机制。方法采用siRNA转染法抑制腺样囊性癌细胞株ACC-2中HBXIP的表达;实时PCR和Western blotting检测HBXIP基因及蛋白表达水平;MTT法检测HBXIP-siRNA... 目的探讨乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)对腺样囊性癌细胞株ACC-2生物学行为的影响及其机制。方法采用siRNA转染法抑制腺样囊性癌细胞株ACC-2中HBXIP的表达;实时PCR和Western blotting检测HBXIP基因及蛋白表达水平;MTT法检测HBXIP-siRNA对细胞增殖的影响;transwell法检测HBXIP-siRNA对细胞侵袭的影响;划痕实验检测HBXIP-siRNA对细胞迁移的影响;蛋白印迹方法检测HBXIP-siRNA对PI3K/Akt信号通路中Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K及对S100A4蛋白表达量的影响。结果HBXIP在ACC-2中高表达,HBXIP-siRNA成功转染细胞株。MTT结果显示,48、72、96 h时实验组中存活的细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,实验组细胞迁移率明显低于对照组(P<0.01);transwell小室实验结果显示,实验组中细胞侵袭个数明显低于对照组(P<0.01);蛋白印迹结果显示,相对于对照组,实验组细胞中p-Akt、p-PI3K及S100A4的表达量随着HBXIP基因沉默而相对降低。结论 HBXIP可促进腺样囊性癌细胞株ACC-2增殖、迁移和侵袭,其机制可能与促进Akt、PI3K磷酸化及增加S100A4蛋白表达量有关。 展开更多
关键词 乙肝病毒X蛋白结合蛋白 癌细胞ACC-2 唾液 生物学功能 PI3K/AKT信号通路
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survivin基因沉默对腺样囊性癌细胞生长和凋亡的影响 被引量:7
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作者 汪欣 杨军 +2 位作者 许波 熊宇 张从纪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1053-1056,共4页
目的探讨RNA干扰下调survivin基因表达后腺样囊性癌细胞生物学行为变化及其与caspase-3基因表达的相关性。方法设计、合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),构建表达载体pGenesil-shRNA-survivin,将重组质粒导入人腺样囊性癌ACC-... 目的探讨RNA干扰下调survivin基因表达后腺样囊性癌细胞生物学行为变化及其与caspase-3基因表达的相关性。方法设计、合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),构建表达载体pGenesil-shRNA-survivin,将重组质粒导入人腺样囊性癌ACC-2细胞株,G418筛选阳性克隆。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot分别检测转染后的ACC-2细胞中survivin、caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖,原位细胞凋亡(TUNEL)法及透射电子显微镜研究细胞凋亡。结果测序证实表达载体构建成功,在pGenesil-shRNA-survivin的ACC-2细胞株中,survivin mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),caspase-3 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05),survivin与caspase-3的mRNA和蛋白表达呈显著负相关(r=-0.333,P<0.05)。ACC-2细胞增殖受到抑制,透射电镜及TUNEL法可见细胞出现凋亡。结论成功构建了survivin基因的RNAi真核表达载体,pGenesil-shRNA-survivin重组质粒能有效抑制腺样囊性癌细胞生长。 展开更多
关键词 RNA干扰 癌细胞 SURVIVIN CASPASE-3
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胰腺黏液性囊腺瘤和囊腺癌23例分析 被引量:1
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作者 徐琳 郁丰荣 +1 位作者 孙勇伟 吴志勇 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期840-844,共5页
目的 探讨胰腺黏液性囊腺瘤和囊腺癌的诊断和治疗。方法 对我院1993年5月~2005年10月收治的均经病理证实为胰腺黏液性囊腺瘤和囊腺癌患者23例f临床特点和治疗结果进行回顾性分析。结果 本组胰腺黏液性囊腺瘤15例、黏液性囊腺癌4例、黏... 目的 探讨胰腺黏液性囊腺瘤和囊腺癌的诊断和治疗。方法 对我院1993年5月~2005年10月收治的均经病理证实为胰腺黏液性囊腺瘤和囊腺癌患者23例f临床特点和治疗结果进行回顾性分析。结果 本组胰腺黏液性囊腺瘤15例、黏液性囊腺癌4例、黏液性囊腺瘤癌变4例。B超、CT和MRI/MRCP诊断正确率分别为73.7%、68.8%和83.3%。肿瘤平均长径为9.4cm,最大长径为20cm。根据肿瘤部位分别行胰十二指肠切除术、胰体尾切除+脾脏切除术、囊腺瘤单纯切除术等术式,手术切除率为82.6%。随访21例(随访率为91.3%),黏液性囊腺瘤14例,均健在,随访时间4月~11年。黏液性囊腺瘤癌变2例健在.随访时间分别为5月和4年,另2例死亡,术后生存时间分别为15月和18月。黏液性囊腺癌1例随访5月健在,2例死亡,术后存活分别为7月和13月。结论 黏液性囊腺瘤有潜在恶性倾向。囊腺癌属低度恶性,手术切除率高,切除预后好。手术应尽量保证肿瘤完整切除,切除范围应包括所在部位的部分胰腺,根据肿瘤部位可选择胰十二指肠切除或胰体尾切除等术式。 展开更多
关键词 肿瘤 黏液 胰腺
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胰腺黏液性囊腺癌基因突变的检测及其临床意义 被引量:1
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作者 郭承涛 彭小波 湛先保 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期440-444,共5页
目的:利用高通量测序平台研究胰腺黏液性囊腺癌(PMCC)组织中基因突变的分布特点及其临床意义。方法:收集2012年1月至2016年12月经外科手术切除的4例PMCC患者癌及癌旁组织石蜡标本,通过Illumina Hiseq 2500平台进行二代基因测序(NGS),结... 目的:利用高通量测序平台研究胰腺黏液性囊腺癌(PMCC)组织中基因突变的分布特点及其临床意义。方法:收集2012年1月至2016年12月经外科手术切除的4例PMCC患者癌及癌旁组织石蜡标本,通过Illumina Hiseq 2500平台进行二代基因测序(NGS),结合患者临床病理资料分析PMCC患者癌组织的基因突变特征。结果:在4个PMCC样本中,均检测到7个高频突变基因(SMG),分别是KRAS、AHNAK2、MUC16、MUC17、MUC19、MUC3A和MUC4。3个样本中检测到24个SMG,分别为ADAMTS9、ALDH3B1、CARD14、CSMD3、MKI67、OR1N2、PKHD1、PLCE1、RTL1、SIGLEC12、CCDC168、CEP295、CUBN、DST、HRNR、LAMA5、OR10G4、OR2T4、PLEKHG4B、RP1L1、SLC15A5、SVEP1、TAS1R1和TNRC18。所有样本中均检测到KRAS驱动基因突变,其中3例检测到KRAS的K12热点突变,另1例检测到KRAS的D33E非热点突变。结论:PMCC患者的高突变KRAS和MUC家族,可能成为PMCC精准治疗的潜在靶点和生物标志物。 展开更多
关键词 胰腺黏液 高通量测序 基因突变 KRAS基因
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胰腺囊性病变60例分析 被引量:1
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作者 王烈 陈少全 +2 位作者 邹忠东 王瑜 姚和祥 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期695-696,共2页
胰腺囊性病变包括多种类型,但常见的囊性病变是胰腺假性囊肿、浆液性囊腺瘤、黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌。1980年10月到2005年10月我院收治上述囊性病变60例,现将其诊治体会报告如下。1 临床资料 1.1一般资料 本组60例,男35例,女2... 胰腺囊性病变包括多种类型,但常见的囊性病变是胰腺假性囊肿、浆液性囊腺瘤、黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌。1980年10月到2005年10月我院收治上述囊性病变60例,现将其诊治体会报告如下。1 临床资料 1.1一般资料 本组60例,男35例,女25例,年龄21~75岁,中位年龄44岁,有急性或慢性胰腺炎病史45例; 展开更多
关键词 胰腺疾病 浆液 黏液 黏液
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浆液性与黏液性卵巢囊腺癌线粒体超微结构及体视学研究
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作者 谭树芬 杨宏英 李树清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2021-2022,共2页
关键词 卵巢 黏液 线粒体超微结构 体视学方法 卵巢癌细胞 超微结构改变 细胞线粒体 妇科恶肿瘤 面密度 线粒体肿胀
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Rnf43缺失促进Kras活化突变介导的胰腺癌前病变和恶性转化
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《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期69-69,共1页
成年人中有8%胰腺囊性病变(pancreatic cystic lesions, PCLs)。PCLs是一组无症状、异质性强的良性肿瘤,其中一部分导管内乳头状黏液性肿瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm, IPMN)最终会演变为胰腺导管腺癌(pancreatic ductal... 成年人中有8%胰腺囊性病变(pancreatic cystic lesions, PCLs)。PCLs是一组无症状、异质性强的良性肿瘤,其中一部分导管内乳头状黏液性肿瘤(intraductal papillary mucinous neoplasm, IPMN)最终会演变为胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)。胰腺癌素有"癌症之王"的称号,确诊后5年生存率约为10%,预后极差。由于没有办法鉴别哪些PCLs可能发展为胰腺癌,保守监测还是手术干预是临床一大难题。因此,寻找此类囊肿发展为癌的分子机制,对于高危PCLs和PDAC的治疗极为重要。 展开更多
关键词 导管内乳头状黏液肿瘤 胰腺导管 胰腺病变 无症状 癌前病变 NEOPLASM 转化 lesions
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