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人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗和逆转模型中FoxO1 mRNA和蛋白表达水平及其意义
被引量:
1
1
作者
孙静
魏虎来
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期709-714,共6页
目的:探讨人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型(HepG2/IR)和逆转模型(HepG2/IRPH)中叉头状转录因子O1(FoxO1)的mRNA和蛋白表达水平,阐明该基因参与IR的作用机制。方法:选择人源肝癌HepG2细胞,采用终浓度1×10^(-10)、1×10^(-9...
目的:探讨人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型(HepG2/IR)和逆转模型(HepG2/IRPH)中叉头状转录因子O1(FoxO1)的mRNA和蛋白表达水平,阐明该基因参与IR的作用机制。方法:选择人源肝癌HepG2细胞,采用终浓度1×10^(-10)、1×10^(-9)、1×10^(-8)、1×10^(-7)、1×10^(-6)和1×10^(-5) mol·L^(-1)胰岛素诱导24、48和72h,对照组细胞不加胰岛素,用葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖水平,计算各组细胞的葡萄糖消耗量,以确定IR模型建立的最佳诱导条件;采用终浓度为0.156、0.313、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000mmol·L^(-1)盐酸吡咯列酮(PH)诱导HepG2建立逆转抵抗模型,同时设立对照组,MTT法检测细胞增殖活性,确定PH的最佳逆转浓度;利用Real-time PCR法和Western blotting法检测各组细胞FoxO1mRNA和蛋白表达水平。结果:1×10-7 mol·L^(-1)胰岛素作用36h,葡萄糖消耗量减少45.84%,发生明显的IR,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,1.25mmol·L^(-1)PH逆转抵抗24h,细胞增殖活性无明显变化(P>0.05)。人源肝癌HepG2细胞发生IR时,与对照组比较,FoxO1mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);IR模型逆转后,与对照组比较,FoxO1mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人源肝癌HepG2细胞IR与FoxO1mRNA的表达有关联性,FoxO1mRNA表达水平检测有可能作为胰岛素增敏剂的药效评估指标,降低FoxO1mRNA表达水平可作为2型糖尿病治疗的新靶点。
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关键词
人源肝癌HepG2细胞
胰岛素
抵抗
胰岛素抵抗逆转
叉头状转录因子O1基因
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题名
人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗和逆转模型中FoxO1 mRNA和蛋白表达水平及其意义
被引量:
1
1
作者
孙静
魏虎来
机构
兰州大学第二医院内分泌代谢科
兰州大学基础医学院医学试验中心
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期709-714,共6页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助课题(861174)
甘肃省科技厅自然科学基金青年科研基金资助课题(1308RJYA065)
甘肃省卫计委卫生行业计划项目资助课题(GSWSKY-2015-64)
文摘
目的:探讨人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型(HepG2/IR)和逆转模型(HepG2/IRPH)中叉头状转录因子O1(FoxO1)的mRNA和蛋白表达水平,阐明该基因参与IR的作用机制。方法:选择人源肝癌HepG2细胞,采用终浓度1×10^(-10)、1×10^(-9)、1×10^(-8)、1×10^(-7)、1×10^(-6)和1×10^(-5) mol·L^(-1)胰岛素诱导24、48和72h,对照组细胞不加胰岛素,用葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖水平,计算各组细胞的葡萄糖消耗量,以确定IR模型建立的最佳诱导条件;采用终浓度为0.156、0.313、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000mmol·L^(-1)盐酸吡咯列酮(PH)诱导HepG2建立逆转抵抗模型,同时设立对照组,MTT法检测细胞增殖活性,确定PH的最佳逆转浓度;利用Real-time PCR法和Western blotting法检测各组细胞FoxO1mRNA和蛋白表达水平。结果:1×10-7 mol·L^(-1)胰岛素作用36h,葡萄糖消耗量减少45.84%,发生明显的IR,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,1.25mmol·L^(-1)PH逆转抵抗24h,细胞增殖活性无明显变化(P>0.05)。人源肝癌HepG2细胞发生IR时,与对照组比较,FoxO1mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);IR模型逆转后,与对照组比较,FoxO1mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人源肝癌HepG2细胞IR与FoxO1mRNA的表达有关联性,FoxO1mRNA表达水平检测有可能作为胰岛素增敏剂的药效评估指标,降低FoxO1mRNA表达水平可作为2型糖尿病治疗的新靶点。
关键词
人源肝癌HepG2细胞
胰岛素
抵抗
胰岛素抵抗逆转
叉头状转录因子O1基因
Keywords
HepG2 cells, insulin resistance, insulin resistance reversal, forkhead transcription factor
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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作者
出处
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1
人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗和逆转模型中FoxO1 mRNA和蛋白表达水平及其意义
孙静
魏虎来
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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