目的:探讨脂肪因子Vaspin与妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗的内在联系。方法:复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞,构建Vaspin过表达载体,转化、培养和提取;以4个过表达梯度(0.0、1.0、2.5、5.0μg)转染传代脂肪细胞,Q-PCR检测Vaspin、胰...目的:探讨脂肪因子Vaspin与妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗的内在联系。方法:复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞,构建Vaspin过表达载体,转化、培养和提取;以4个过表达梯度(0.0、1.0、2.5、5.0μg)转染传代脂肪细胞,Q-PCR检测Vaspin、胰岛素受体底物-1/2(IRS-1/2)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K(P85a))m RNA表达,WB检测Vaspin、IRS-1/2、PI3K(P85a)蛋白表达及IRS-1/2磷酸化水平,[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取测定法检测各组葡萄糖摄取率的变化。结果:(1)Vaspin m RNA及蛋白表达随转染浓度梯度升高而表达量增加,所构建Vaspin过表达载体有效;(2)随Vaspin表达增加,IRS-1/2、PI3K(P85a)m RNA、蛋白表达及IRS-1/2酪氨酸磷酸化程度均未出现明显变化;(3)脂肪细胞葡萄糖摄取率与Vaspin过表达浓度变化无明显关系。结论:Vaspin在GDM血清及网膜脂肪组织中的高表达与GDM胰岛素抵抗的发生没有必然联系。展开更多
文摘目的:探讨脂肪因子Vaspin与妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗的内在联系。方法:复苏、传代及诱导分化GDM前脂肪细胞,构建Vaspin过表达载体,转化、培养和提取;以4个过表达梯度(0.0、1.0、2.5、5.0μg)转染传代脂肪细胞,Q-PCR检测Vaspin、胰岛素受体底物-1/2(IRS-1/2)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K(P85a))m RNA表达,WB检测Vaspin、IRS-1/2、PI3K(P85a)蛋白表达及IRS-1/2磷酸化水平,[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取测定法检测各组葡萄糖摄取率的变化。结果:(1)Vaspin m RNA及蛋白表达随转染浓度梯度升高而表达量增加,所构建Vaspin过表达载体有效;(2)随Vaspin表达增加,IRS-1/2、PI3K(P85a)m RNA、蛋白表达及IRS-1/2酪氨酸磷酸化程度均未出现明显变化;(3)脂肪细胞葡萄糖摄取率与Vaspin过表达浓度变化无明显关系。结论:Vaspin在GDM血清及网膜脂肪组织中的高表达与GDM胰岛素抵抗的发生没有必然联系。
