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胞质3-磷酸甘油醛脱氢酶在ABA与H2O2介导的氧化应激中的潜在作用
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作者 罗娅 杨敏 葛聪 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期805-811,861,共8页
【目的】研究胞质3-磷酸甘油醛脱氢酶(cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC)在植物脱落酸(abscisic acid,ABA)和过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)介导的氧化应激中的潜在作用。【方法】通过目前的研究结果对ABA和H... 【目的】研究胞质3-磷酸甘油醛脱氢酶(cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC)在植物脱落酸(abscisic acid,ABA)和过氧化氢(hydrogen peroxide,HO)介导的氧化应激中的潜在作用。【方法】通过目前的研究结果对ABA和HO信号转导过程及GAPC的多功能性进行总结。【结果】ABA是响应植物非生物胁迫和气孔关闭的重要激素,HO是ABA介导应激反应的关键信号分子,GAPC因半胱氨酸残基上存在易被氧化修饰的巯基分子,所以在本身的催化功能之外还具有信号转导功能。在氧化胁迫下,GAPC参与了植物HO依赖性信号转导的过程,并作为修饰蛋白发挥其多功能性。【结论】GAPC通过“兼职”或调控初生代谢的转变来响应氧化胁迫。 展开更多
关键词 胞质3-磷酸甘油醛脱氢酶 氧化胁迫 过氧化 落酸
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植物3-磷酸甘油醛脱氢酶的多维本质(英文) 被引量:26
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作者 王幼宁 刘孟雨 李霞 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期607-614,共8页
3-磷酸甘油醛脱氢酶 GAPDH 作为一种糖酵解蛋白在糖酵解的能量产生中发挥着重要作用 .它通常作为一种模式蛋白用于蛋白和酶的分析 ,也可以用作研究基因表达量的内在对照 .然而 ,最近的相关研究表明 ,真核及原核生物的 3-磷酸甘油醛脱... 3-磷酸甘油醛脱氢酶 GAPDH 作为一种糖酵解蛋白在糖酵解的能量产生中发挥着重要作用 .它通常作为一种模式蛋白用于蛋白和酶的分析 ,也可以用作研究基因表达量的内在对照 .然而 ,最近的相关研究表明 ,真核及原核生物的 3-磷酸甘油醛脱氢酶实际上存在着一种多维本质 ,研究证明它在 DNA修复、细胞凋亡、核 RNA输出、及其在细胞周期中都发挥着重要的作用 .尽管该酶在植物中的研究不如在哺乳动物中的深入 ,但研究已经陆续证明 ,3-磷酸甘油醛脱氢酶在植物中同样具有许多未被发现的功能 ,目前已经报道该酶在厌氧、热激、伤害以及能量供应中可能发挥着重要作用 .本文旨在就国内外对于该酶在植物中的研究作一总结论述 ,以期推进科学界对它的更深入认识和研究 . 展开更多
关键词 3-磷酸甘油(GAPDH) 光和CO2依赖的厌氧诱导 时空调控诱导 热激胁迫 糖源效应
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牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 李昂 徐红艳 +3 位作者 石建峰 朱春晖 饶国洲 苟建重 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期199-202,共4页
目的克隆牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),并将其置于大肠杆菌中作融合表达。方法利用PCR技术,克隆GAPDH,插入克隆载体pMD18-T中得到克隆重组子pMD18-T-GAPDH。克隆重组子与表达载体pET-32a双酶切后连接构建表达质粒pE... 目的克隆牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH),并将其置于大肠杆菌中作融合表达。方法利用PCR技术,克隆GAPDH,插入克隆载体pMD18-T中得到克隆重组子pMD18-T-GAPDH。克隆重组子与表达载体pET-32a双酶切后连接构建表达质粒pET-32a-GAPDH。重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果核酸序列测定与分析表明:表达重组子pET-32a-GAPDH与NCBI核酸数据库中收录的GAPDH序列同源性达99.802%;在最佳浓度的IPTG诱导下,GAPDH可高效表达。结论本实验成功克隆了牙龈卟啉单胞菌GAPDH基因,并在大肠杆菌中表达了GAPDH蛋白,为后续实验研究GAPDH的免疫学性能及相应的抗体制备奠定了基础。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单 3-磷酸甘油 原核表达
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环形泰勒虫3-磷酸甘油醛脱氢酶的原核表达、多克隆抗体制备及亚细胞定位
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作者 赵洪喜 刘军龙 +6 位作者 杨聪山 赵帅阳 刘娟 刘光远 殷宏 关贵全 罗建勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期304-310,共7页
为了研究环形泰勒虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)的功能,本试验利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增环形泰勒虫GAPDH(TaGAPDH)基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,并转入大肠... 为了研究环形泰勒虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)的功能,本试验利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增环形泰勒虫GAPDH(TaGAPDH)基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合蛋白诱导表达,融合蛋白纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,分别用间接ELISA和Western blotting检测抗体的效价和特异性;利用激光共聚焦荧光显微镜观察TaGAPDH蛋白在环形泰勒虫裂殖体中的亚细胞定位。结果显示,克隆得到了TaGAPDH全长基因,大小为1 020bp;SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白大小约44ku,且以包涵体形式存在。制备的多克隆抗体效价高达1∶12 800,具有很高的特异性;亚细胞定位显示TaGAPDH蛋白主要分布于环形泰勒虫裂殖体细胞质内。以上结果表明本试验成功克隆表达了TaGAPDH基因,并制备了针对TaGAPDH蛋白的兔多克隆抗体,为筛选环形泰勒虫病疫苗、药物靶点及研究环形泰勒虫能量代谢奠定了基础。 展开更多
关键词 环形泰勒虫 3-磷酸甘油 多克隆抗体
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谷子3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与结构分析 被引量:10
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作者 崔润丽 王永芳 +4 位作者 智慧 李伟 李海权 黄占景 刁现民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期10-14,共5页
3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)在谷子盐旱胁迫早期高频率表达,为研究该基因在胁迫反应及其他代谢中的详细功能,本研究利用RACE技术克隆了谷子的GAPDH基因。该基因cDNA全长1 328 bp,包括1 008 bp的开放阅读框,共编码338个氨基酸,肽段的... 3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)在谷子盐旱胁迫早期高频率表达,为研究该基因在胁迫反应及其他代谢中的详细功能,本研究利用RACE技术克隆了谷子的GAPDH基因。该基因cDNA全长1 328 bp,包括1 008 bp的开放阅读框,共编码338个氨基酸,肽段的分子量为35 911.03 Da,极性氨基酸占29.12%。序列比较分析发现,谷子的GAPDH同玉米的同源序列表现了最高的相似性,同水稻和小麦同源序列的相似性次之,同双子叶植物的同源序列则相差较远。 展开更多
关键词 谷子 3-磷酸甘油(GAPDH) 基因克隆
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龙眼子叶胚3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:8
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作者 卢秉国 何炜毅 +4 位作者 申艳红 蒋际谋 陈晓静 陈伟 吕柳新 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第5期507-511,共5页
从龙眼子叶胚中分离得到一个大量表达的表达序列标签(EST),该EST编码序列与金鱼草3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的同源性为84%,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆了龙眼GAPDH基因全长序列.序列分析表明,龙眼GAPDH基因的cDNA全长... 从龙眼子叶胚中分离得到一个大量表达的表达序列标签(EST),该EST编码序列与金鱼草3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的同源性为84%,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆了龙眼GAPDH基因全长序列.序列分析表明,龙眼GAPDH基因的cDNA全长为1395 bp,包括一个长1008 bp、编码336个氨基酸的开放阅读框(ORF),5′端非编码区(UTR)长71 bp,3′-UTR长316 bp.龙眼GAPDH基因编码的氨基酸序列与水稻、葡萄、小果野蕉、拟南芥、银杏等GAPDH基因的氨基酸序列同源性均高达85%以上,该基因在GenBank中的登录号为FJ694011. 展开更多
关键词 龙眼 子叶胚 3-磷酸甘油 基因克隆 序列分析
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顶复门原虫3-磷酸甘油醛脱氢酶功能及其应用研究进展 被引量:2
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作者 廖申权 戚南山 +4 位作者 吴彩艳 吕敏娜 袁建丰 余劲术 孙铭飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期71-74,共4页
糖酵解途径广泛存在于各类生物中,是顶复门原虫的主要供能方式。3-磷酸甘油醛脱氢酶是糖酵解途径的重要酶,与顶复门原虫的生存密切相关,可以作为抗寄生虫药物研发的重要靶标。文章主要从顶复门原虫糖酵解途径、3-磷酸甘油醛脱氢酶的基... 糖酵解途径广泛存在于各类生物中,是顶复门原虫的主要供能方式。3-磷酸甘油醛脱氢酶是糖酵解途径的重要酶,与顶复门原虫的生存密切相关,可以作为抗寄生虫药物研发的重要靶标。文章主要从顶复门原虫糖酵解途径、3-磷酸甘油醛脱氢酶的基因分析、作用机理及应用等方面进行综述。 展开更多
关键词 顶复门原虫 3-磷酸甘油 药物靶标
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美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达 被引量:1
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作者 龙高群 王赟 张春林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期113-117,共5页
旨在通过5'-RACE获得美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达载体,诱导重组蛋白表达,为进一步研究其功能奠定基础。通过3'-RACE技术,PCR扩增获取编码美洲大蠊GAPDH蛋白的全长cDN... 旨在通过5'-RACE获得美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达载体,诱导重组蛋白表达,为进一步研究其功能奠定基础。通过3'-RACE技术,PCR扩增获取编码美洲大蠊GAPDH蛋白的全长cDNA序列;采用生物信息学方法推导出该序列编码的氨基酸序列及其理化性质;预测信号肽、蛋白疏水性、可溶性、跨膜区结构、二级结构、三级结构,并构建系统发育树;构建原核表达载体pET28a-GAPDH,IPTG诱导重组蛋白表达,并用His-tag抗体Western blotting验证。结果显示,美洲大蠊GAPDH基因,其完整阅读框含999个碱基,编码332个氨基酸。序列分析显示,该蛋白与家蚕GAPDH相似性为89%,具有GAPDH保守功能域,经IPTG诱导获得重组蛋白。 展开更多
关键词 美洲大蠊 3-磷酸甘油 克隆 序列分析 原核表达
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胞质甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPC2参与番茄果实成熟的调控 被引量:1
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作者 杨敏 龙宇 +4 位作者 王良新 刘晓阳 侯国艳 蒋语嫣 罗娅 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2022年第2期156-162,171,共8页
【目的】研究异源胞质甘油醛-3-磷酸脱氢酶2(cytoplasm glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC2)对番茄果实成熟的影响。【方法】构建“红颜”草莓FaGAPC2过表达载体,采用瞬时过表达技术在樱桃番茄“罗纳”的破色期过表达FaGA... 【目的】研究异源胞质甘油醛-3-磷酸脱氢酶2(cytoplasm glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC2)对番茄果实成熟的影响。【方法】构建“红颜”草莓FaGAPC2过表达载体,采用瞬时过表达技术在樱桃番茄“罗纳”的破色期过表达FaGAPC2。【结果】FaGAPC2的表达量为对照组的2.39倍,过表达FaGAPC2能够显著抑制番茄果皮颜色变红并显著提高其硬度(3.76N)、降低可溶性糖含量,其类胡萝卜素含量和总叶绿素含量分别是对照组的0.37倍和1.5倍。进一步通过实时荧光定量分析结果表明,过表达FaGAPC2较对照能显著降低乙烯合成途径中ACO1(12.89倍)、ACO3(3.87倍)和ERF1(3.51倍);类胡萝卜合成途径中PSY1(12.39倍)、CYC-B(1.49倍);果实成熟相关基因E4(4.48倍)、PG(41.35倍)和MADS转录因子RIN(6.67倍)的表达量,其中果实成熟相关基因E8、LOXB相比于对照表达量几乎为零。【结论】表明FaGAPC2作为一个负调节因子参与番茄果实成熟的调控。 展开更多
关键词 樱桃番茄 果实成熟 甘油-3-磷酸2
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3-磷酸甘油醛脱氢酶与酵母线粒体基因组维持蛋白Mgm101的相互作用
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作者 薛冬桦 王丽 左小明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期646-650,共5页
采用酵母双杂交方法,以Mgm101p为诱饵,筛选酵母cDNA文库.分离鉴定15个与Mgm101p相互作用的蛋白因子,其中5个阳性克隆均为GPD1编码的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH).克隆了GPD1在S.cerevisi-ae的同系物ScTDH2基因,进行绿色荧光蛋白GFP标记、... 采用酵母双杂交方法,以Mgm101p为诱饵,筛选酵母cDNA文库.分离鉴定15个与Mgm101p相互作用的蛋白因子,其中5个阳性克隆均为GPD1编码的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH).克隆了GPD1在S.cerevisi-ae的同系物ScTDH2基因,进行绿色荧光蛋白GFP标记、亚细胞组分分离和蛋白质印迹分析,结果表明,GAP-DH除了在细胞质为糖酵解酶的主要作用外,可能为多功能蛋白,在酵母线粒体中与Mgm101p相互作用参与线粒体DNA维持的生物过程. 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 酵母线粒体DNA 酵母双杂交 Mgm101蛋白
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细胞内铁沉积对PC12细胞凋亡及表达3-磷酸甘油醛脱氢酶的影响
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作者 田香珠 刘学源 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期818-821,共4页
目的铁是重要的金属元素,参与了各种生命活动。文中探讨细胞内铁沉积对PC12细胞凋亡的影响,及其对3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehy de-3-phospha te dehydrog enase,GAPDH)表达的影响。方法实验分为对照组、50μmol/L FeCl_3组、100μm... 目的铁是重要的金属元素,参与了各种生命活动。文中探讨细胞内铁沉积对PC12细胞凋亡的影响,及其对3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehy de-3-phospha te dehydrog enase,GAPDH)表达的影响。方法实验分为对照组、50μmol/L FeCl_3组、100μmol/L FeCl_3组、500μmol/L FeCl_3组。以FeCl_3与PC12细胞共育,建立体外铁沉积于细胞模型,CCK-8检测细胞增殖生长能力;TUNEL法观察细胞凋亡情况;荧光定量PCR测定GAPDH基因mRNA表达;Western blot测定GAPDH蛋白的表达情况;免疫荧光法检测细胞核内GAPDH表达。结果 CCK-8检测结果显示,与对照组的细胞增殖率(100%)比较,50μmol/L FeCl_3组增殖率[(77.13±3.9)%]下降,但差异无统计学意义(P>0.05);100μmol/L FeCl_3组、500μmol/L FeCl_3组增殖率[(66.19±3.37)%、(13.84±0.43)%]明显下降(P<0.05)。荧光定量PCR检测GAPDH mRNA表达显示,与对照组GAPDH mRNA表达量(1.00±0.00)相比,50μmol/L FeCl_3组表达量升高(1.42±0.03),但差异无统计学意义(P>0.05),100μmol/L FeCl_3组、500μmol/L FeCl_3组表达量(1.93±0.07、2.33±0.15)明显升高(P<0.05)。与对照组GAPDH蛋白表达(1.00±0.00)比较,50μmol/L FeCl_3组表达(0.94±0.11)下降(P>0.05),50μmol/L FeCl_3组、100μmol/L FeCl_3组表达(1.45±0.13、1.79±0.07)明显升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,铁沉积后,细胞GAPDH发生亚细胞定位改变,由细胞浆转移至细胞核,发生核聚集现象。结论铁沉积于PC12细胞致细胞凋亡增加,其原因与核内GAPDH表达增强有关。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 凋亡
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加强表达3-磷酸甘油醛脱氢酶对谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的影响 被引量:2
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作者 郭雯 赖联贺 +2 位作者 张晓梅 史劲松 许正宏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期15-20,共6页
在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中,由3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)催化的反应是糖酵解途径的限速步骤,该反应还直接影响了L-丝氨酸的前体3-磷酸甘油酸的合成。研究首先比较了产L-... 在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中,由3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)催化的反应是糖酵解途径的限速步骤,该反应还直接影响了L-丝氨酸的前体3-磷酸甘油酸的合成。研究首先比较了产L-丝氨酸的野生型菌株C.glutamicum SYPS-062与模式菌株C.glutamicum ATCC14067的GAPDH酶活力,发现SYPS-062的GAPDH酶活力比ATCC14067高了55.8%。进一步采用在C.glutamicum33a△SS基因组上增加gap A拷贝数的方法加强表达GAPDH,构建了重组菌C.glutamicum33a△SS-2gap A。重组菌GAPDH转录水平和酶活力分别提高119%和53%,最大比生长速率提高10.6%,总糖耗速率提高4.4%,L-丝氨酸产量提高17.4%,糖酸转化率提高12.2%,生产强度提高17.4%。结果表明,加强表达GAPDH能够提高重组菌的生长和糖耗速率,并能够提高L-丝氨酸的产量、糖酸转化率和生产强度。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 谷氨酸棒杆菌 L-丝氨酸
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3-磷酸甘油醛脱氢酶促进谷氨酸棒杆菌发酵生产L-精氨酸和L-鸟氨酸 被引量:1
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作者 阚宝军 董晋军 +4 位作者 刘晖 占米林 许国超 韩瑞枝 倪晔 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期9-16,共8页
在谷氨酸棒状杆菌( Corynebacterium glutamicum )SNK118中表达NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因,提高胞内NADPH水平,以提高 L -精氨酸( L -Arginine)和 L -鸟氨酸(L-Ornithine)发酵产量。通过NCBI数据库检索,选取了3个不同来... 在谷氨酸棒状杆菌( Corynebacterium glutamicum )SNK118中表达NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因,提高胞内NADPH水平,以提高 L -精氨酸( L -Arginine)和 L -鸟氨酸(L-Ornithine)发酵产量。通过NCBI数据库检索,选取了3个不同来源的3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因。经测定酶活力,最终选择糖丁基梭菌( Clostridium saccharobutylicum) DSM13864来源的NADP +依赖型的3-磷酸甘油醛脱氢酶基因( CsgapC )。构建了产 L -精氨酸的重组菌SNK118/pXMJ19- CsgapC,当摇瓶发酵70 h时产 L -精氨酸11.55 g/L,糖酸转化率0.13 g/g,与对照菌SNK118/pXMJ19相比,精氨酸产量和糖酸转化率分别提高了26%和10.2%。在 L -鸟氨酸生产菌株SNK118Δ argF Δ argR 中重组表达 CsgapC,重组菌SNK118Δ argF Δ argR /pXMJ19- CsgapC 摇瓶发酵70 h产 L -鸟氨酸27.76 g/L,糖酸转化率0.274 g/g,与对照菌SNK118Δ argF Δ argR /pXMJ19相比, L -鸟氨酸产量和糖酸转化率分别提高了20.1%和15.6%。结果表明,异源表达 CsgapC 有助于提高谷氨酸棒杆菌发酵生产 L -精氨酸和 L -鸟氨酸的水平。 展开更多
关键词 谷氨酸棒状杆菌 3-磷酸甘油 NADPH L-精氨酸 L-鸟氨酸
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3-磷酸甘油醛脱氢酶通过调控磷酸甘油酸脱氢酶促进肝癌的形成 被引量:1
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作者 刘姗姗 郑凌 黄昆 《临床肝胆病杂志》 CAS 2017年第6期1151-1151,共1页
【据《Hepatology)2017年4月报道】题:3-磷酸甘油醛脱氢酶通过调控磷酸甘油酸脱氢酶促进肝癌的形成(作者Liuss等)
关键词 3-磷酸甘油 磷酸甘油 肝癌 调控
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细粒棘球绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆、表达及其分子特征的生物信息学分析 被引量:3
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作者 王家海 王凝 +5 位作者 胡丹丹 钟秀琴 宋星桔 古小彬 汪涛 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1629-1637,共9页
三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的关键酶,现已发现该酶可作为一些寄生虫的疫苗候选分子和药物靶标。然而,有关绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶的研究报道较少。为探究细粒棘球绦虫GAPDH(EgGAPDH)的分子特征与应用价值,克隆细粒棘球绦... 三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的关键酶,现已发现该酶可作为一些寄生虫的疫苗候选分子和药物靶标。然而,有关绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶的研究报道较少。为探究细粒棘球绦虫GAPDH(EgGAPDH)的分子特征与应用价值,克隆细粒棘球绦虫的GAPDH基因,并以生物信息学方法对其进行系统的分析。结果显示:EgGAPDH基因全长1 011bp,编码336个氨基酸。EgGAPDH是由4个结构相同的单体蛋白(O、P、Q、R)组成的一个同源四聚体,每个单体蛋白质含有3个活性中心,即NAD+绑定区域(aa 4-151和aa 315-336)、催化结合区域(aa 156-314)和一个酶活性位点(aa 149-156)。通过对EgGAPDH的氨基酸序列的抗原表位预测得到了16个B细胞抗原表位和9个T细胞结合位点;Western blot显示原核表达的重组EgGAPDH能与感染细粒棘球蚴的小鼠血清发生特异性结合;以纯化的重组EgGAPDH蛋白为抗原通过ELISA法检测17份细粒棘球蚴小鼠阳性血清,阳性检出率为100%。试验结果表明:成功克隆并表达细粒棘球绦虫的EgGAPDH基因,EgGAPDH蛋白具有3个酶功能区域和多个免疫结合位点,Western blot和ELISA结果显示,该蛋白质可能具有作为抗细粒棘球蚴的药物靶标和疫苗候选分子的潜力。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 3-磷酸甘油(GAPDH) 分子特征
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G3PD的修饰蛋白对急性肾功能衰竭大鼠丙二醛和超氧化物歧化酶的影响 被引量:4
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作者 吴岚 任青 +1 位作者 王力宁 周希静 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期358-360,共3页
目的 :研究 3 磷酸甘油醛脱氢酶的修饰蛋白 (modifierprotein ,MP)对急性肾功能衰竭 (acuterenalfail ure ,ARF)大鼠丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)的影响。 方法 :利用庆大霉素致ARF的动物... 目的 :研究 3 磷酸甘油醛脱氢酶的修饰蛋白 (modifierprotein ,MP)对急性肾功能衰竭 (acuterenalfail ure ,ARF)大鼠丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase,SOD)的影响。 方法 :利用庆大霉素致ARF的动物模型 ,将大鼠随机分成 4组 :正常对照组、阴性对照组、阳性对照组和实验组 ,采用硫代巴比妥酸法和羟胺法分别测定血清及肾皮质匀浆MDA和SOD ,光镜、电镜观察肾组织学改变 ,同时测定血肌酐(Scr)。结果 :实验组、阳性对照组血清及肾皮质匀浆MDA明显下降 ,SOD明显上升 ,P <0 .0 1。同时Scr下降。光镜、电镜示实验组、阳性对照组肾脏病理仅呈灶状改变。比阴性对照组减轻。结论 :MP可以缓解氧自由基损伤 ,减轻ARF时的肾脏病理改变 。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 修饰蛋白 丙二 超氧化物岐化 急性肾功能衰竭
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食窦魏斯氏菌降解桑葚果酒组胺关键酶及其作用位点的挖掘
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作者 叶欣怡 罗文珊 +5 位作者 陈晓维 徐玉娟 余元善 彭健 肖更生 李璐 《食品工业科技》 北大核心 2025年第14期214-223,共10页
以具有降解桑葚果酒组胺能力的食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)M165为研究对象,解析食窦魏斯氏菌M165降解组胺的关键酶。通过对食窦魏斯氏菌M165进行全基因组测序筛选出其降解桑葚果酒组胺的潜在关键基因(3-磷酸甘油醛脱氢酶基因),通... 以具有降解桑葚果酒组胺能力的食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)M165为研究对象,解析食窦魏斯氏菌M165降解组胺的关键酶。通过对食窦魏斯氏菌M165进行全基因组测序筛选出其降解桑葚果酒组胺的潜在关键基因(3-磷酸甘油醛脱氢酶基因),通过重组表达和组胺降解能力分析明确3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是食窦魏斯氏菌M165降解组胺的关键酶。结果表明,GAPDH对桑葚果酒组胺的降解率为31.88%,且其对桑葚果酒活性物质的含量无负面影响。为了进一步挖掘GAPDH降解桑葚果酒组胺的关键作用位点,通过分子对接筛选出GAPDH降解桑葚果酒组胺的潜在关键作用位点(Ser 125、Cys 155、Phe 322),并将这些位点突变为丙氨酸。与未突变的GAPDH相比,突变蛋白酶活和组胺降解率均显著(P<0.0001)提高,其中突变酶GAPDH-C155A和GAPDH-F322A的酶活和组胺降解率变化较大,酶活力分别提高了62%和97%,组胺降解率也分别提高了31.51%和39.58%。上述结果表明Cys 155和Phe 322位点是GAPDH降解桑葚果酒组胺的关键作用位点,可作为GAPDH组胺降解能力提升的改造靶点。 展开更多
关键词 桑葚果酒 组胺降解 食窦魏斯氏菌 3-磷酸甘油 分子对接 关键作用位点
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利福平对鱼藤酮诱导的神经细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用 被引量:3
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作者 徐鋆阳 王涛 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期329-331,共3页
目的探讨利福平对鱼藤酮所诱导的人多巴胺能神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用。方法采用100nmol/L鱼藤酮作用SH-SY5Y细胞24h,建立SH-SY5Y细胞凋亡模型;再用100、200、300μmol/L不同浓度的利福平进行干预,采用MTT比色法检测细胞活... 目的探讨利福平对鱼藤酮所诱导的人多巴胺能神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡的抑制作用。方法采用100nmol/L鱼藤酮作用SH-SY5Y细胞24h,建立SH-SY5Y细胞凋亡模型;再用100、200、300μmol/L不同浓度的利福平进行干预,采用MTT比色法检测细胞活性,采用流式细胞术(FCM)及原位缺口末端标记染色法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western blot法检测前凋亡蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的表达水平。结果用100nmol/L鱼藤酮作用SH-SY5Y细胞24h,能够诱导该细胞产生凋亡并降低其活性;利福平干预后,鱼藤酮所诱导的SH-SY5Y细胞凋亡被抑制,并且这一抑制作用与利福平浓度有明显的剂量-效应关系;而且利福平干预后能降低GAPDH蛋白的表达水平。结论利福平对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有明显的抑制作用,这一抑制作用可能是通过下调GAPDH蛋白的表达而得以实现。 展开更多
关键词 帕金森 鱼藤酮 利福平 凋亡 3-磷酸甘油
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产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因CgGPD1多拷贝表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 王震 饶志明 +3 位作者 诸葛斌 沈微 方慧英 诸葛健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期50-56,共7页
采用PCR的方法从产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)中扩增出3-磷酸甘油脱氢酶的编码基因及侧翼序列CgGPD1,分别构建了含不同CgGPD1拷贝数的根癌农杆菌双元载体pCAM3300?zeocin-CgGPD1(Ⅰ)、pCAM3300-zeocin-CgGPD1-CgGPD1(Ⅱ)和pC... 采用PCR的方法从产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)中扩增出3-磷酸甘油脱氢酶的编码基因及侧翼序列CgGPD1,分别构建了含不同CgGPD1拷贝数的根癌农杆菌双元载体pCAM3300?zeocin-CgGPD1(Ⅰ)、pCAM3300-zeocin-CgGPD1-CgGPD1(Ⅱ)和pCAM3300-zeocin-Cg GPD1-CgGPD1-CgGPD1(Ⅲ)。在大肠杆菌JM109中,研究了其在不同质量浓度NaCl、葡萄糖胁迫下表达情况。结果表明,在大肠杆菌中GPDH的活性随着NaCl、葡萄糖质量浓度的升高而增加。当NaCl质量浓度达到2.5 g/dL时,GPDH的酶活比在0.5 g/dL NaCl下平均提高31.2%;当葡萄糖质量浓度提高至10 g/dL时,GPDH的酶活比2 g/dL葡萄糖下平均提高31.8%;在相同的NaCl、葡萄糖质量浓度下,GPDH的活性随着CgGPD1拷贝数的增加而升高,JM109(Ⅱ)比JM109(Ⅰ)的GPDH酶活平均提高8.2%,JM109(Ⅲ)比JM109(Ⅱ)的GPDH酶活平均提高9.9%。以上结果表明,在大肠杆菌中CgGPD1基因的表达同样受渗透压胁迫调节。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 甘油假丝酵母 渗透压胁迫
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G3PD的修饰蛋白对急性肾功能衰竭大鼠中细胞间粘附分子的影响
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作者 吴岚 任青 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期470-472,共3页
目的 :观察 3 磷酸甘油醛脱氢酶的修饰蛋白 (modifierprotein ,MP)对急性肾功能衰竭 (acuterenalfailure ,ARF)大鼠肾间质内细胞间粘附分子 1(intercellularadhesionmolecule - 1,ICAM 1)的影响。方法 :利用庆大霉素致ARF的动物模型 ,... 目的 :观察 3 磷酸甘油醛脱氢酶的修饰蛋白 (modifierprotein ,MP)对急性肾功能衰竭 (acuterenalfailure ,ARF)大鼠肾间质内细胞间粘附分子 1(intercellularadhesionmolecule - 1,ICAM 1)的影响。方法 :利用庆大霉素致ARF的动物模型 ,将大鼠随机分成 3组 ,即正常对照组、模型组和MP组。分别测定各组血肌酐 (Scr) ,利用光镜、电镜观察肾组织学改变 ,并免疫组化染色标记ICAM 1的变化。结果 :MP组ICAM 1表达明显降低 ,与模型组相比 ,P<0 .0 1。同时光镜、电镜示MP组比模型组肾脏病理明显减轻。Scr下降 ,P <0 .0 1。结论 :MP可以降低ICAM 1表达 ,减轻ARF大鼠的肾脏病理改变 。 展开更多
关键词 3-磷酸甘油 修饰蛋白 间粘附分子-1 急性肾功能衰竭
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