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铜绿假单胞菌对支气管扩张患者气道中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响 被引量：8
1
作者 金前 黄飞华 +2 位作者 周颖 张影清 柴秀娟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期384-389,共6页
目的对不同细菌感染的支气管扩张(BE)患者气道中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达进行研究,分析铜绿假单胞菌(PAE)对MMP-9、TIMP-1表达的影响。方法采用病例对照研究的方法,分设BE组及对照组,BE组又根... 目的对不同细菌感染的支气管扩张(BE)患者气道中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达进行研究,分析铜绿假单胞菌(PAE)对MMP-9、TIMP-1表达的影响。方法采用病例对照研究的方法,分设BE组及对照组,BE组又根据支气管肺泡灌洗液(BALF)培养结果分为PAE组及其他菌株组两个亚组。收集患者的BALF,ELISA法检测其中MMP-9和TIMP-1的浓度,并计算TIMP-1/MMP-9比值。同时取气管内膜活检组织,免疫组织化学法检测其中MMP-9及TIMP-1的表达。结果 MMP-9在PAE组及其他菌株组的BALF中均明显升高(P均=0.0000);MMP-9在PAE组(P=0.0421)及其他菌株组(P=0.0003)支气管内膜活检组织中的表达亦明显升高。TIMP-1在PAE组BALF中的浓度明显低于其他菌株组(P=0.0324);BALF中TIMP-1/MMP-9比值在BE组明显低于对照组(P=0.0000),PAE组明显低于其他菌株组(P=0.0026)及对照组(P=0.0000),而其他菌株组又明显低于对照组(P=0.0000)。结论 PAE感染可能是通过促使MMP-9分泌并抑制TIMP-1同步分泌而使BE病情恶化。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 支气管扩张 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制因子-1
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乳鼠心肌细胞中C反应蛋白对基质金属蛋白酶-10表达调控的研究 被引量：6
2
作者 崔传珏 魏英杰 +2 位作者 张秀芳 史强 胡盛寿 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2010年第6期476-479,共4页
目的:研究在乳鼠心肌细胞中C反应蛋白诱导基质金属蛋白酶-10(MMP-10)表达的作用及其分子机制。方法:培养乳鼠心肌细胞,以炎性因子C反应蛋白诱导MMP-10的表达。分别应用酶谱法和实时定量反转录—聚合酶链反应检测培养上清中MMP-10的活性... 目的:研究在乳鼠心肌细胞中C反应蛋白诱导基质金属蛋白酶-10(MMP-10)表达的作用及其分子机制。方法:培养乳鼠心肌细胞,以炎性因子C反应蛋白诱导MMP-10的表达。分别应用酶谱法和实时定量反转录—聚合酶链反应检测培养上清中MMP-10的活性和细胞中MMP-10信使核糖核酸(mRNA)表达水平的变化,应用蛋白免疫印迹杂交技术观察胞外调节激酶(ERK)通路以及转录因子活化蛋白-1的蛋白水平的变化。实验分为4组:对照组,C反应蛋白组,C反应蛋白+抑制剂组和抑制剂组。结果:心肌细胞给予C反应蛋白(5μg/ml)刺激后24 h,细胞培养上清中MMP-10活性较对照组升高了9.23倍(P<0.01);细胞MMP-10 mRNA水平与0 h相比,6 h增加了0.83倍(P<0.05),12 h达最高,增加了2.67倍(P<0.05),24 h略有下降,增加了1.92倍(P<0.05),差异均有统计学意义。C反应蛋白可激活心肌细胞p-ERK1和p-ERK2,从15 min开始,可持续到240 min;C反应蛋白刺激细胞4 h,活化蛋白-1的蛋白水平与0 h相比,增加了3.66倍(P<0.01),差异有统计学意义;ERK抑制剂PD98059预处理心肌细胞,可阻断C反应蛋白引起的活化蛋白-1的蛋白水平的上调作用以及MMP-10活性的增加及MMP-10 mRNA的表达。结论:C反应蛋白通过ERK通路,上调转录因子活化蛋白-1的蛋白水平,从而对心肌细胞中MMP-10基因的转录和表达进行调节。 展开更多
关键词 C反应蛋白 心肌细胞 基质金属蛋白酶-10 胞外调节激酶通路 活化蛋白-1
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正肝汤对肝硬化大鼠肠道紧密连接蛋白OCLN和ZO-1表达的影响 被引量：6
3
作者 陈建永 徐虹 +3 位作者 施琳琳 徐建军 蒋霞 刘敏 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第12期2991-2994,I0031,共5页
目的:探讨正肝汤对肝硬化大鼠肠道紧密连接蛋白OCLN和ZO-1表达的影响。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和正肝汤组,每组各30只。制备四氯化碳肝硬化大鼠模型,正肝汤组大鼠予正肝汤(1.5 g/100 g·d)灌胃干预。对肝组织进行苏... 目的:探讨正肝汤对肝硬化大鼠肠道紧密连接蛋白OCLN和ZO-1表达的影响。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和正肝汤组,每组各30只。制备四氯化碳肝硬化大鼠模型,正肝汤组大鼠予正肝汤(1.5 g/100 g·d)灌胃干预。对肝组织进行苏木素-伊红染色,透射电镜观察小肠组织的超微结构,免疫印迹法检测小肠组织中OCLN和ZO-1的蛋白表达。结果:与正常组相比较,模型组大鼠的肝组织中胶原纤维广泛增生,纤维间隔相互连接,徦小叶形成,电镜见小肠黏膜上皮细胞表面微绒毛稀疏,减少、变短,排列不规则,部分断裂扭曲,脱落明显。正肝汤组大鼠的肠黏膜损伤较模型组明显减轻。正常组大鼠小肠组织中OCLN和ZO-1的表达量分别是模型组2.94和3.91倍,均P<0.01,差异显著。正肝汤组的小肠组织中OCLN和ZO-1的表达量分别是模型组1.74和1.91倍,与模型组相比均P<0.05,有统计学差异。结论:正肝汤能显著减轻肝硬化大鼠的肠黏膜损伤,并上调小肠组织中OCLN和ZO-1的蛋白表达。 展开更多
关键词 正肝汤 肝硬化 紧密联接 闭合蛋白 胞质紧密粘连蛋白-1
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Janus激酶1/胞外信号调节激酶通路参与C反应蛋白诱导的心肌细胞MMP-10活性上调 被引量：1
4
作者 崔传珏 魏英杰 +2 位作者 史强 刘晓艳 白媛媛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期885-888,共4页
为探讨心肌细胞中Janus激酶1(JAK1)在C反应蛋白(CRP)诱导的基质金属蛋白酶(MMP)-10活性上调过程中的作用,本研究以炎症细胞因子CRP诱导MMP-10上调的原代乳鼠心肌细胞为研究对象,使用JAK1的特异磷酸化抗体,用Western印迹技术检查JAK1的... 为探讨心肌细胞中Janus激酶1(JAK1)在C反应蛋白(CRP)诱导的基质金属蛋白酶(MMP)-10活性上调过程中的作用,本研究以炎症细胞因子CRP诱导MMP-10上调的原代乳鼠心肌细胞为研究对象,使用JAK1的特异磷酸化抗体,用Western印迹技术检查JAK1的磷酸化水平的激活情况.应用Western印迹技术和酶谱法分别检测胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化水平和MMP-10的活性变化.实验分为4组:对照组,CRP组,CRP+抑制剂组和抑制剂组.结果显示,磷酸化的JAK1在CRP刺激后1/12 h即可出现,在1 h达到高峰,而总的JAK1不改变;JAK1抑制剂piceatannol可以使磷酸化的ERK水平减弱,也可以使MMP-10的活性明显降低(P<0.01).研究结果提示,JAK1是通过激活ERK,从而上调MMP-10的活性,为心力衰竭提供了一个可能的治疗靶点. 展开更多
关键词 Janus激酶1 胞外信号调节激酶 基质金属蛋白酶-10 心肌细胞 C反应蛋白
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TGF-β1和MMP-9在宫腔粘连子宫内膜组织中表达上调 被引量：13
5
作者 吴玺玺 周勤 +1 位作者 胡建国 袁瑞 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期394-400,共7页
目的:探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUAs)子宫内膜中的表达及其意义。方法:人群实验:收取20例宫腔镜诊断治... 目的:探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUAs)子宫内膜中的表达及其意义。方法:人群实验:收取20例宫腔镜诊断治疗时所得重度IUAs患者子宫内膜组织、非IUAs者子宫内膜组织15例(对照组)。动物实验:运用95%无水乙醇持续注射8 min构造IUAs大鼠模型(对照组注射相应的生理盐水),分别获取对照组及实验组(术后第1、3、5、10天)子宫内膜组织。采用组织化学染色方法(HE、Masson、IHC)观察大鼠子宫内膜形态变化并检测子宫内膜相关指标(keratin)的表达情况,分别采用逆转录实时定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测IUAs患者和大鼠子宫内膜MMP-9及TGF-β1的m RNA和蛋白水平表达。结果:(1)临床样本显示IUAs患者子宫内膜中MMP-9(F=1.027,P=0.001)及TGF-β1(F=1.156,P=0.000)的蛋白表达明显高于对照组;(2)成功构建大鼠IUAs动物模型,Masson染色提示子宫内膜纤维化形成,IUAs形成过程中子宫内膜腺上皮或腔上皮标志物角蛋白(keratin)表达显著降低(与对照组相比,术后5d:F=35.200,P=0.000;术后10d:F=26.098,P=0.000);(3)术后1d,3d,5d,10d组MMP-9 m RNA含量分别是对照组的1.02倍、1.80倍、2.33倍、4.58倍,TGF-β1 m RNA含量分别是对照组的2.53倍、2.82倍、3.55倍、4.33倍;与对照组(MMP-9:1.405±0.146,TGF-β1:0.251±0.079)相比,术后1d,3d,5d,10d MMP-9蛋白含量分别为1.552±0.093、1.759±0.036、1.577±0.125、3.825±0.712,其中在术后第10天显著高于对照组(P=0.000),TGF-β1蛋白含量分别为0.709±0.105、0.756±0.090、0.920±0.671、0.717±0.243,总体呈现上升趋势,显著高于对照组(P=0.000,000,0.000,0.003)。结论:TGF-β1与MMP-9在IUAs的形成过程中明显升高,提示IUAs的发生发展可能和MMP-9与TGF-β1表达上调有关。 展开更多
关键词 宫腔粘连 基质金属蛋白酶-9 转化生长因子-Β1
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miR-450b-5p调控IL-1β诱导人牙龈上皮细胞粘附和迁移 被引量：1
6
作者 禹翠翠 叶潇元 +3 位作者 董志恒 王爱芹 高艳 高玉光 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期572-577,共6页
目的:本研究旨在明确miR-450b-5p对炎症因子IL-1β调控人牙龈上皮细胞(HGEs)粘附与迁移的作用。方法:体外培养HGEs,在对数生长期饥饿培养12 h,5 ng/mL IL-1β刺激3 h,RNAiso Plus提取总RNA,进行small RNA测序以及实时荧光定量-聚合酶链... 目的:本研究旨在明确miR-450b-5p对炎症因子IL-1β调控人牙龈上皮细胞(HGEs)粘附与迁移的作用。方法:体外培养HGEs,在对数生长期饥饿培养12 h,5 ng/mL IL-1β刺激3 h,RNAiso Plus提取总RNA,进行small RNA测序以及实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)分析;细胞划痕实验观察IL-1β调控HGEs迁移;转染miR-450b-5p mimic、inhibitor和NC慢病毒质粒,qRT-PCR检测IL-1β调控HGEs中miR-450b-5p、Integrinβ6(ITGβ6)、Lamininγ2(LAMC2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:测序结果和qRT-PCR示IL-1β诱导miR-450b-5p表达降低;IL-1β诱导ITGβ6、LAMC2和MMP-9表达升高;过表达miR-450b-5p抑制ITGβ6、LAMC2和MMP-9基因表达,部分挽救IL-1β诱导的ITGβ6、LAMC2和MMP-9表达升高,敲低miR-450b-5p则出现相反结果;细胞划痕实验示过表达miR-450b-5p抑制IL-1β诱导的HGEs迁移。结论:miR-450b-5p抑制IL-1β诱导HGEs粘附与迁移,提示miR-450b-5p对维持HGEs稳定、抑制细胞迁移以及保护牙龈上皮屏障有重要作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-1Β 微小RNA-450b-5p 层粘连蛋白γ2 整合素β6 基质金属蛋白酶-9
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降糖丸抑制TGF-β1改善糖尿病肾病小鼠肾损伤及纤维化 被引量：9
7
作者 任宇晴 唐堂 +5 位作者 李颖 段应铃 李宁 代睿欣 范辉 兰天 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1988-1993,共6页
目的探讨降糖丸对糖尿病肾病小鼠的治疗作用,研究其改善糖尿病肾病肾损伤及纤维化的分子机制。方法C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、二甲双胍组和降糖丸组。造模小鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)合并高脂喂养... 目的探讨降糖丸对糖尿病肾病小鼠的治疗作用,研究其改善糖尿病肾病肾损伤及纤维化的分子机制。方法C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、二甲双胍组和降糖丸组。造模小鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)合并高脂喂养诱导糖尿病肾病模型,持续8周。记录小鼠体质量、空腹血糖变化;检测尿蛋白、血肌酐评价肾功能;检测血清TC、TG评价脂代谢情况;HE、PAS、Masson染色观察肾脏病理变化;IHC检测小鼠肾组织纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)蛋白表达;RT-PCR检测FN、TGF-β1、CollagenⅣ的mRNA表达水平;Western blot检测小鼠肾脏中FN、Smad 3及p-Smad 3蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组空腹血糖明显升高(P<0.01);24 h尿量、24 h尿蛋白含量、血肌酐值、血清TC、TG明显升高(P<0.01),糖原堆积、间质纤维化明显增加;小鼠肾组织中FN蛋白表达明显增多(P<0.01);FN、TGF-β1与CollagenⅣ的mRNA表达明显升高(P<0.01);小鼠肾脏中FN、Smad 3及p-Smad 3蛋白的表达量明显升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组相比,降糖丸组能够明显逆转上述变化。结论降糖丸能够有效地改善STZ合并高脂饮食诱导的小鼠糖尿病肾病,其机制可能是通过抑制FN及TGF-β1的表达从而改善肾间质纤维化。 展开更多
关键词 降糖丸 糖尿病肾病 肾损伤 间质纤维化 纤维粘连蛋白 转化生长因子-Β1
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CLDN1上调MMP1的表达促进食管鳞癌细胞TE10侵袭及转移 被引量：3
8
作者 曾义波 吴剑 +3 位作者 李俊 张大伟 任德莲 戴天阳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期712-716,共5页
目的:研究紧密连接蛋白-1(tight junction protein 1,CLDN1)在食管鳞癌细胞TE10中的生物学功能及机制。方法:体外构建CLDN1过表达病毒,按感染复数(multiplicity of infection,MOI)=20的比例感染食管鳞癌细胞TE10。通过蛋白质印迹(Wester... 目的:研究紧密连接蛋白-1(tight junction protein 1,CLDN1)在食管鳞癌细胞TE10中的生物学功能及机制。方法:体外构建CLDN1过表达病毒,按感染复数(multiplicity of infection,MOI)=20的比例感染食管鳞癌细胞TE10。通过蛋白质印迹(Western blot)检测CLDN1过表达效果。分别采用细胞增殖及毒性检测试剂(cell counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力,肿瘤细胞迁移及侵袭实验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭能力变化。通过基因芯片分析过表达CLDN1对TE10基因表达谱的影响,分析下游靶基因并通过Western blot和回复实验研究CLDN1对MMP1的表达调控。结果:与NC组相比,过表达组TE10细胞中基质金属蛋白酶1(matrix metallopeptidase-1,MMP1)蛋白表达为(2.68±0.10),明显升高(P<0.05);CCK-8实验结果表明,过表达组细胞在24、48、72 h时的吸光度明显高于阴性对照组(P<0.05);迁移实验结果显示过表达组TE-10细胞迁移细胞数明显高于阴性对照组[(54.8±3.4)vs.(24.6±2.1)];侵袭实验结果显示,过表达组TE-10细胞侵袭数目高于阴性对照组[(34.5±2.6)vs.(11.5±1.6)(P<0.05)。信使核糖核酸(messenger RNA,m RNA)芯片分析发现,过表达CLDN1后TE10细胞的MMP1基因表达明显升高(P<0.05),定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及Western blot证实CLDN1能够促进MMP1的表达;功能回复实验结果显示,干扰MMP1能够抑制CLDN1对TE10细胞的增殖和侵袭转移能力的促进作用。结论:CLDN1可通过上调MMP1的表达促进食管鳞癌TE10细胞的增殖和侵袭转移,发挥癌基因的功能。 展开更多
关键词 食管鳞癌 紧密连接蛋白1 基质金属蛋白酶-1 肿瘤增殖和转移
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咪唑克生对体外血脑屏障炎症模型通透性的影响 被引量：6
9
作者 王新施 朱攀 +3 位作者 朱振国 夏念格 李佳 郑荣远 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期669-674,共6页
目的:观察咪唑克生(idazoxan,IDA)对体外血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)炎症模型的通透性、紧密连接蛋白ZO-1表达和分布及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和MMP-9抑制物——金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inh... 目的:观察咪唑克生(idazoxan,IDA)对体外血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)炎症模型的通透性、紧密连接蛋白ZO-1表达和分布及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和MMP-9抑制物——金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法:采用培养7 d的小鼠脑微血管内皮细胞株b.End3建立体外BBB模型,采用TNF-α(10 nmol/L)处理24 h诱导BBB炎症模型,并对BBB炎症模型分别采用IDA 50、100、200μmol/L预处理6 h以观察IDA对BBB炎症模型的作用。通过检测异硫氰酸荧光标记的葡聚糖通过率来确立模型的通透性,采用Western blot法检测紧密连接蛋白ZO-1的表达,通过免疫荧光法观察ZO-1的分布情况,并通过RT-PCR法检测MMP-9/TIMP-1的表达。结果:培养7 d的b.End3细胞汇合成稳定的单层连接,有较好的屏障功能,而采用TNF-α处理24 h后诱导的BBB炎症模型的通透性明显升高,紧密连接蛋白ZO-1在膜上的表达明显减少、不连续,Western blot法显示ZO-1蛋白表达水平明显下降,MMP-9的表达明显升高;而采用IDA 50、100、200μmol/L预处理6 h能明显降低其通透性,增加ZO-1蛋白的表达和改善ZO-1的分布异常,降低MMP-9的表达,其中200μmol/L IDA作用最明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:IDA能够直接作用于脑血管内皮细胞,降低TNF-α诱导的体外BBB炎症模型MMP-9的表达,增加紧密连接蛋白ZO-1的表达、修复紧密连接ZO-1的异常分布,从而改善其异常增高的通透性。 展开更多
关键词 咪唑克生 血脑屏障 紧密连接 ZO-1 基质金属蛋白酶-9 组织型基质金属蛋白酶抑制物-1
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