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抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究 被引量:7
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作者 柯珍恋 徐虹 章军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期34-37,共4页
螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺... 螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺旋藻培养基培养72h以上 ,都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低 ;低于28℃(如24℃)培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。根据实验结果 ,建议在螺旋藻转化前72h开始低温、无Mg2 +培养 ,转化前16h提高培养基中EDTA的浓度至2mmol/L,就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻 ,有利于外源基因的转化。 展开更多
关键词 抑制 螺旋藻 胞内核酸酶活性 低温培养 EDTA处理 无Mg^2+培养 基因转化
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螺旋藻胞外和胞内核酸酶活性研究 被引量:6
2
作者 王高歌 杨官品 +2 位作者 茅云翔 张宝红 张学成 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第6期883-888,共6页
通过分析比较 2个螺旋藻物种 7个品系胞外和胞内核酸酶活性 ,确定了抑制胞外和胞内核酸酶活性的方法。用液体培养基清洗两次可消除胞外核酸酶活性 ,添加 EDTA(2 m mol L-1)可显著地抑制胞内核酸酶活性。高温 (6 5℃ )
关键词 螺旋藻 核酸酶活性 胞内核酸酶活性 EDTA
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3种钝顶螺旋藻株胞内核酸酶活性效果研究 被引量:1
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作者 胡晓倩 唐欣昀 +2 位作者 甘旭华 曹媛媛 叶霁 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期19-22,共4页
取钝顶螺旋藻A9、抗刀豆氨酸(CS)突变株A9c、藻体长直型A9L的无菌纯藻藻株胞内核酸酶粗提取液,分别对入-DNA或p8760进行酶切消化后研究酶活。对于A9藻株,p8760更适于作为酶切底物进行酶活研究;酶切最适反应温度为37~45℃,酶切最... 取钝顶螺旋藻A9、抗刀豆氨酸(CS)突变株A9c、藻体长直型A9L的无菌纯藻藻株胞内核酸酶粗提取液,分别对入-DNA或p8760进行酶切消化后研究酶活。对于A9藻株,p8760更适于作为酶切底物进行酶活研究;酶切最适反应温度为37~45℃,酶切最适反应时间为3h,50℃开始酶活被抑制;A9e藻株酶切最适反应温度为37℃,酶切最适反应时间为3~4h,45℃开始酶活被抑制;A9L藻株,λ-DNA更适于作为酶切底物进行酶活研究,酶切最适反应温度为37—55℃,酶切最适反应时间为2—3h,60℃开始酶活被抑制。对此3种无菌藻株胞内核酸酶活性效果的初步研究表明,藻株形态的变异或抗氨基酸类似物突变,都会影响和改变其胞内核酸酶的活性,这些可为控制胞内核酸酶对螺旋藻转基因操作的影响和选择合适的藻株用于螺旋藻的遗传转化奠定一定的基础。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻 胞内核酸酶 酶活 效果
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抑制螺旋藻胞内核酸酶酶活的研究 被引量:2
4
作者 胡晓倩 唐欣昀 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期419-424,共6页
有效抑制胞内核酸酶的活性对提高外源DNA导入和稳定表达具有重要作用,本文通过对钝顶螺旋藻A9、抗刀豆氨酸(CS)突变株A9c、藻体长直型A9L这3种藻株胞内核酸酶活性的研究发现,在培养液中添加EDTA或不同温度不同时间处理藻丝体,都能明显抑... 有效抑制胞内核酸酶的活性对提高外源DNA导入和稳定表达具有重要作用,本文通过对钝顶螺旋藻A9、抗刀豆氨酸(CS)突变株A9c、藻体长直型A9L这3种藻株胞内核酸酶活性的研究发现,在培养液中添加EDTA或不同温度不同时间处理藻丝体,都能明显抑制3种藻株胞内核酸酶的活性,并对合适的EDTA浓度、合适的处理温度和时间进行了探讨。 展开更多
关键词 抑制 螺旋藻 胞内核酸酶 酶活 EDTA
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