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胚胎玻璃化冷冻保存技术及其在牛和猪应用的研究进展 被引量：6
1
作者 谭世俭 《广西畜牧兽医》 2002年第3期38-41,共4页
关键词 胚胎玻璃化冷冻保存技术 牛 猪 应用 胚胎移植
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早期胚胎玻璃化冷冻保存技术研究进展 被引量：1
2
作者 许伍霞 薛立群 《中国奶牛》 2006年第12期28-31,共4页
本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理,比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点,分析了胚胎玻璃化冷冻的影响因素,展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。
关键词 胚胎 玻璃化 冷冻保存 胚胎移植
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牛胚胎玻璃化冷冻保存技术及国内近期研究进展 被引量：2
3
作者 丁昕颖 《黑龙江动物繁殖》 2007年第3期17-19,共3页
本文就胚胎玻璃化冷冻保存的原理、冷冻保护剂的作用和冷冻方法及近期国内牛胚胎玻璃化冷冻的研究进展情况进行了详细的综述。
关键词 牛胚胎 冷冻保存 玻璃化 保护剂
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基于Smart-seq2技术探究玻璃化冷冻对牛活检囊胚基因表达的影响
4
作者 董建华 杨柏高 +3 位作者 张笑梦 冯肖艺 赵学明 吕丽华 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第5期754-766,共13页
为探究胚胎活检及后续玻璃化冷冻处理对牛体外受精囊胚基因表达的影响,以牛体外囊胚为研究对象,设置新鲜组(未经任何体外操作的原始胚胎)、活检组(经滋养外胚层活检的胚胎)、活检后玻璃化冷冻组(活检后的胚胎经玻璃化冷冻保存),每组选取... 为探究胚胎活检及后续玻璃化冷冻处理对牛体外受精囊胚基因表达的影响,以牛体外囊胚为研究对象,设置新鲜组(未经任何体外操作的原始胚胎)、活检组(经滋养外胚层活检的胚胎)、活检后玻璃化冷冻组(活检后的胚胎经玻璃化冷冻保存),每组选取3枚形态良好的囊胚,利用Smart-seq2单细胞全长转录组测序技术进行转录组分析,并在基因本体(gene ontology, GO)数据库及京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)中进行富集分析。结果表明:与新鲜组相比,在活检组中共鉴定到1 083个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),GO和KEGG富集分析显示,这些DEGs与细胞脂质代谢过程、葡萄糖稳态、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等相关;相较于新鲜组,在活检后玻璃化冷冻组中共鉴定到1 391个DEGs,主要富集于糖异生、全局代谢通路及氨基酸合成等生物学过程;与活检组相比,在活检后玻璃化冷冻组中共鉴定到824个DEGs,主要与丙酮酸代谢、N-聚糖生物合成、细胞衰老等相关。综上所述,本研究基于Smart-seq2单细胞全长转录组测序技术揭示了玻璃化冷冻对活检后牛体外囊胚脂质代谢、能量代谢、MAPK信号通路等相关基因表达的影响,为优化牛胚胎冷冻保存技术、提升良种胚胎利用率提供了分子靶点与理论依据。 展开更多
关键词 Smart-seq2技术 牛囊胚 玻璃化冷冻 胚胎活检 转录组测序
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淀山湖翘嘴鲌胚胎冷冻保存技术研究
5
作者 朱晶晶 蔡心清 +3 位作者 郭冰玉 韩兵社 张全根 张俊芳 《水产科技情报》 2025年第5期273-280,共8页
为实现翘嘴鲌胚胎冷冻保存技术的突破,保护淀山湖水域经济鱼类种质资源,对冷冻保护剂的毒性、玻璃化性能、升降温程序进行了筛选与优化。结果表明:以二甲基亚砜、甲醇、丙二醇(体积分数分别为15%、10%、15%)和褪黑素(1 mmol/L)、Fe_(3)O... 为实现翘嘴鲌胚胎冷冻保存技术的突破,保护淀山湖水域经济鱼类种质资源,对冷冻保护剂的毒性、玻璃化性能、升降温程序进行了筛选与优化。结果表明:以二甲基亚砜、甲醇、丙二醇(体积分数分别为15%、10%、15%)和褪黑素(1 mmol/L)、Fe_(3)O_(4)纳米颗粒(1 mg/L)作为抗冻剂配方的V11抗冻剂具有较低的毒性和最优的玻璃化性能;通过梯度升温法可以使样品在易发生失透的-100~0℃区间内的升温速率达到最高,降低重结晶发生的概率;采用固体表面玻璃化法可使保存体积减小,升降温更加均匀,显著改善保存效果,并实现翘嘴鲌胚胎在液氮中短期冷冻保存,解冻后孵化率可达到(12.20±3.20)%。该研究首次实现了翘嘴鲌胚胎的玻璃化冷冻,为研究鱼类胚胎的长期冷冻保存技术提供了基础。 展开更多
关键词 翘嘴鲌 胚胎 冷冻保存 玻璃化
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玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎中的应用 被引量：9
6
作者 丁颖 邓成艳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期348-353,共6页
玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和... 玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎方面的应用。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 卵细胞 胚胎 辅助生育技术
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不同品系小鼠胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究 被引量：14
7
作者 刘丽均 顾建忠 +4 位作者 朱东琴 符杰 施美莲 张瑞忠 徐平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期77-80,F003,共5页
目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及... 目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及移植受孕率。结果和结论　CBA、NOD、C57BL 6J,ICR及CD1的复苏率分别为 5 7 6 %、4 8%、31 3%、86 5 %及 88% ,移植受孕率为 2 1%、2 3 5 %、11%、38%和 35 5 % ,封闭群小鼠的胚胎复苏率、移植受孕率均显著高于近交系小鼠。这提示胚胎的复苏率及移植受孕率可能与小鼠的不同基因型有关。五个品系中 ,桑椹胚及早期囊胚的体外复苏率均显著高于扩张囊胚。 展开更多
关键词 品系 小鼠 胚胎玻璃化冷冻保存 比较研究 复苏率 移植受孕率
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牙鲆胚胎玻璃化冷冻技术研究 被引量：12
8
作者 田永胜 陈松林 严安生 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期105-110,共6页
对名优经济鱼类牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎的玻璃化冷冻技术方法进行了研究.筛选出了适合于牙鲆胚胎平衡和培养的基础液BS2,对牙鲆不同时期胚胎在玻璃化液VS2中的耐受能力进行了研究,随着平衡时间的延长,胚胎成活率逐渐降低,4-5... 对名优经济鱼类牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎的玻璃化冷冻技术方法进行了研究.筛选出了适合于牙鲆胚胎平衡和培养的基础液BS2,对牙鲆不同时期胚胎在玻璃化液VS2中的耐受能力进行了研究,随着平衡时间的延长,胚胎成活率逐渐降低,4-5对肌节期、16-20对肌节期、尾芽期表现出对玻璃化液较强的适应能力.对洗脱液的种类和浓度进行了筛选,结果显示0.125mol/L蔗糖洗脱成活率最高.在室温(21～22℃)和6℃下分别对牙鲆不同时期胚胎在VS1中的成活率进行了比较研究,结果显示出15-20对肌节期在室温下的成活率高于低温,其它时期胚胎低温下的成活率高于室温.利用VS4、VS2、VS3分别对牙鲆尾芽期、肌效应期、出膜前期胚胎进行玻璃化冷冻保存,取得了5粒成活胚,4粒孵化出膜,成活时间为14～67h. 展开更多
关键词 牙鲆 成活率 芽期 胚胎玻璃化冷冻技术 经济鱼类 玻璃化冷冻技术 不同时期 VS 筛选 洗脱液
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胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用(附成功分娩1例报道) 被引量：8
9
作者 王俊霞 朱桂金 魏玉兰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期62-64,共3页
目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎,复苏13例69个胚胎,并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中,丢失3个,存活26个,存活率为39.4%。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植... 目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎,复苏13例69个胚胎,并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中,丢失3个,存活26个,存活率为39.4%。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植,另外5例患者共移植了14个胚胎,其中1例获得单胎妊娠,分娩1名健康女婴。结论 玻璃化冷冻技术简便、经济,并能够有效地冻存人类早期胚胎,可成为胚胎冷冻方法的另一个选择。 展开更多
关键词 胚胎玻璃化冷冻技术 临床应用 分娩 胚胎移植
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平皿-微滴法玻璃化冷冻保存小鼠胚胎 被引量：6
10
作者 王果 马燕琳 +3 位作者 吕祁峰 郑多 戴和平 夏昆① 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期299-301,共3页
目的 :使用平皿 微滴法玻璃化冷冻小鼠 8～ 12细胞胚胎 ,检验该方法对胚胎的冻存效果。方法 :胚胎在EG2 0 中平衡 3min ,EFS4 0 中平衡 1min ,将含有胚胎的小于 0 .5 μl的EFS4 0 微滴吹于 35mm平皿上并立即直接浸入液氮保存。结果 :解... 目的 :使用平皿 微滴法玻璃化冷冻小鼠 8～ 12细胞胚胎 ,检验该方法对胚胎的冻存效果。方法 :胚胎在EG2 0 中平衡 3min ,EFS4 0 中平衡 1min ,将含有胚胎的小于 0 .5 μl的EFS4 0 微滴吹于 35mm平皿上并立即直接浸入液氮保存。结果 :解冻后胚胎回收率达到 98.1% ,透明带无破损 ,冷冻后存活率为 95 .2 %。冻融胚胎体外发育和体内发育能力与对照组胚胎比较差异无显著性 (84 .3%对 90 .1% ,12 .1%对 13.5 % ,P >0 .0 5 )。结论 :小鼠 8～ 12细胞胚胎可以用平皿 微滴法有效地进行玻璃化冻存。 展开更多
关键词 平皿-微滴法 玻璃化 冷冻保存 小鼠 胚胎
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小鼠早期胚胎的EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25玻璃化法冷冻保存 被引量：3
11
作者 梁洋 杜文敬 +2 位作者 王春生 朴善花 安铁洙 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1248-1252,共5页
为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和G... 为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和GP25法(分别为70.9%、39.1%和11.1%)(P<0.01);采用EFS20/40法冷冻保存小鼠4～8细胞期胚时,与EFS40相比,解冻后发育至扩张囊胚的比率差异不显著(分别为86.2%和90.0%),但与DAP213(64.5%,P<0.05)和GP25法(47.8%,P<0.01)相比其扩张囊胚率显著增高。此外,虽然EFS40法与EFS20/40法冷冻保存小鼠桑椹胚解冻后的扩张囊胚率差异不显著(分别为68.9%和70.8%),但均显著高于DAP213(38.9%)和GP25法(37.5%)(P<0.01)。结果表明,EFS20/40法适合用于小鼠的2细胞期冷冻保存,而EFS20/40和EFS40法均适合用于4～8细胞期胚和桑椹胚的冷冻。 展开更多
关键词 小鼠 早期胚胎 玻璃化冷冻保存 体外培养
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小鼠胚胎玻璃化冷冻保存影响因素的研究 被引量：3
12
作者 顾熟琴 张文明 +1 位作者 王珑 马跃文 《中国比较医学杂志》 CAS 1993年第Z1期43-46,共4页
胚胎置玻璃化1液(VS-1)(含10%甘油+20%1.2一丙二醇+20%FCS的PBS液)中平衡10或17min后装管置4℃或18℃玻璃化2液(VS-2)(含25%甘油+25%1.2一丙二醇+20%FCS的PBS液)中。随即投入液氮冷冻保存。结果显示:在VS-1液中平衡10min组的胚胎获较高... 胚胎置玻璃化1液(VS-1)(含10%甘油+20%1.2一丙二醇+20%FCS的PBS液)中平衡10或17min后装管置4℃或18℃玻璃化2液(VS-2)(含25%甘油+25%1.2一丙二醇+20%FCS的PBS液)中。随即投入液氮冷冻保存。结果显示:在VS-1液中平衡10min组的胚胎获较高成活率;4℃的VS-2液显著地改善囊胚冷冻后成活率;桑椹胚冷冻效果优于囊胚。将解冻后120枚胚胎移植于12只受体鼠,获36只成活仔鼠。 展开更多
关键词 小鼠 胚胎 玻璃化 冷冻保存
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近交系小鼠胚胎玻璃化冷冻技术研究 被引量：2
13
作者 左琴 岳秉飞 +3 位作者 刘双环 朱士恩 张忠诚 邢瑞昌 《中国实验动物学杂志》 2001年第2期82-84,共3页
目的　对近交系小鼠体内受精的胚胎在三种不同处理温度 (2 0℃、2 5℃、2 8℃ )进行玻璃化冷冻保存。方法　不同温度下 ,胚胎在 10 %EG溶液中预处理 5min ,再投入EFS40玻璃化溶液中 1min ,平衡后冷冻。结果　与2 0℃和 2 8℃相比 ,三个... 目的　对近交系小鼠体内受精的胚胎在三种不同处理温度 (2 0℃、2 5℃、2 8℃ )进行玻璃化冷冻保存。方法　不同温度下 ,胚胎在 10 %EG溶液中预处理 5min ,再投入EFS40玻璃化溶液中 1min ,平衡后冷冻。结果　与2 0℃和 2 8℃相比 ,三个品系小鼠的胚胎都在 2 5℃冷冻时获得最佳效果 ,解冻后培养观察发育率分别是 87.77%、90 0 0 %、87 18%。结论　该结果对近交系小鼠胚胎保存具有重要意义。 展开更多
关键词 近交系小鼠 鼠胚 胚胎玻璃化冷冻技术 体内 观察 受精 效果 胚胎保存 品系 处理温度
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牛胚胎玻璃化冷冻技术的发展和应用概况 被引量：1
14
作者 幸宇云 黄路生 陈从英 《黄牛杂志》 2003年第6期43-45,共3页
胚胎冷冻保存是动物胚胎工程的重要组成部分,它是胚胎移植技术在生产中推广应用的重要基础。和现在通用的常规冷冻法相比,玻璃化冷冻具有用时短,所需设备少和操作简单等优点,成为目前国内外胚胎冷冻保存领域发展新方向。本文就牛胚胎玻... 胚胎冷冻保存是动物胚胎工程的重要组成部分,它是胚胎移植技术在生产中推广应用的重要基础。和现在通用的常规冷冻法相比,玻璃化冷冻具有用时短,所需设备少和操作简单等优点,成为目前国内外胚胎冷冻保存领域发展新方向。本文就牛胚胎玻璃化冷冻的概念、方法和国内外发展状况做一简要综述。 展开更多
关键词 牛 胚胎 玻璃化冷冻技术 胚胎工程 胚胎移植 设备 操作
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渤海黑牛超数排卵与胚胎玻璃化冷冻保存研究
15
作者 游伟 赵书庆 +5 位作者 靳青 姜富贵 成海建 宋恩亮 张冬梅 谭秀文 《山东农业科学》 北大核心 2022年第10期117-121,共5页
渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。... 渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。结果表明:(1)春季头均可用胚数、胚胎可用率显著高于冬季(P<0.05);(2)使用国产FSH渤海黑牛的超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率显著低于进口FSH(P<0.05);(3)含胚芽玉米组超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率均显著高于不含胚芽玉米组(P<0.05);(4)玻璃化冷冻保存85枚胚胎,胚胎冷冻可用率为82.52%,杆均胚胎数为2.30枚。本试验为渤海黑牛体内胚胎生产及种质资源保存提供了一定的参考。 展开更多
关键词 渤海黑牛 超数排卵 体内胚胎 玻璃化冷冻保存
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谈哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的过去，现在与将来 被引量：2
16
作者 朱士恩 《黑龙江动物繁殖》 1996年第2期42-44,共3页
谈哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的过去，现在与将来朱士恩（中国农业大学动物科技学院，北京１０００９４）１９７２年Ｗｈｉｔｉｎｇｈａｍ等人利用鼠的胚胎，首次报道了慢速冷冻法。由于其操作过程复杂，１９７７年Ｗｉｌａｄｓｅｎ对... 谈哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的过去，现在与将来朱士恩（中国农业大学动物科技学院，北京１０００９４）１９７２年Ｗｈｉｔｉｎｇｈａｍ等人利用鼠的胚胎，首次报道了慢速冷冻法。由于其操作过程复杂，１９７７年Ｗｉｌａｄｓｅｎ对其进行了改良，发明了快速冷冻法，但... 展开更多
关键词 冷冻保存法 抗冻保护剂 玻璃化溶液 哺乳动物胚胎 生存率 丙三醇 透过性 聚乙二醇 丙二醇 化学毒性
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哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存概况及其常用方法 被引量：1
17
作者 曹亮 聂旭 《黑龙江动物繁殖》 2009年第4期10-11,共2页
哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术，是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部分。Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎，这种方法不仅大大简化了冷冻过程，而且减少了由于细胞冰... 哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术，是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部分。Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎，这种方法不仅大大简化了冷冻过程，而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤，提高了冷冻效率。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻保存 哺乳动物胚胎 常用方法 冷冻保存技术 卵母细胞 胚胎移植 体外受精 生物技术
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牛胚胎玻璃化冷冻保存研究进展
18
作者 史福艳 李建栋 +1 位作者 董雅娟 柏学进 《黑龙江动物繁殖》 2007年第1期12-14,共3页
所谓的玻璃化冷冻就是在完全的玻璃化状态下冷冻保存细胞、组织或器官。为了在一定冷冻速度下形成玻璃化，需要使用高浓度的可渗透性低温保护剂。
关键词 玻璃化冷冻保存 牛胚胎 低温保护剂 冷冻速度 可渗透性 器官
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哺乳动物胚胎玻璃化冷冻技术进展
19
作者 朱士恩 曾申明 张忠诚 《畜牧兽医科技信息》 1997年第19期2-4,共3页
1972年Whittingham等首先发明了胚胎的慢速冷冻保存法,这项技术一直被广泛应用。直到1985年Rall & Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术,该技术的开发,简化了操作程序,大大缩短了操作时间,逐步代替了传统的慢速冷冻法。1986年Sche... 1972年Whittingham等首先发明了胚胎的慢速冷冻保存法,这项技术一直被广泛应用。直到1985年Rall & Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术,该技术的开发,简化了操作程序,大大缩短了操作时间,逐步代替了传统的慢速冷冻法。1986年Scheffen等使用丙三醇和丙二醇各为25％,配制成的GP25玻璃化溶液,虽然化学毒性有所降低,但冷冻后胚胎,特别是囊胚的发育率仍不稳定。为此,Kasai等(1990)利用化学毒性较低的乙二醇为主体抗冻保护剂。 展开更多
关键词 冷冻保存 玻璃化溶液 哺乳动物胚胎 冷冻技术 体外发育率 抗冻保护剂 移植妊娠率 体外受精 胚胎细胞 产仔率
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哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存方法优化试验 被引量：3
20
作者 M.Kasai 李玉欣 《国外畜牧科技》 1996年第2期23-25,共3页
玻璃化冷冻方法具有操作简单的优点,仅几秒钟即可完成。但是,玻璃化冷冻液中高浓度的抗冻保护剂会对胚胎产生毒性作用。玻璃化冷冻不会导致细胞内形成冰晶,减少了对细胞造成物理性损伤,胚胎成活率较高。
关键词 哺乳动物 胚胎保存 玻璃化冷冻
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