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栓皮栎胚性组织低温保存技术研究 被引量：3
1
作者 冀智清 张存旭 +2 位作者 张昌胜 李慧 张文辉 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期88-92,共5页
采用玻璃化法超低温保存栓皮栎胚性组织,不同因子对细胞存活的影响。研究结果表明,冻前保护剂浓度、预冷天数对解冻后材料的存活有很大影响,冷冻防护剂的处理时间及解冻方式对材料冻存后能否成活起到关键作用。材料在继代培养10d时转至... 采用玻璃化法超低温保存栓皮栎胚性组织,不同因子对细胞存活的影响。研究结果表明,冻前保护剂浓度、预冷天数对解冻后材料的存活有很大影响,冷冻防护剂的处理时间及解冻方式对材料冻存后能否成活起到关键作用。材料在继代培养10d时转至含6%二甲亚砜(DMSO)的MS增殖培养基上,5℃下预培养3d,用60%PVS2处理20min,100%PVS2于0℃处理30min,换新鲜PVS2溶液,迅速投入液氮保存,于40℃水浴中迅速化冻,冻后再培养时,细胞能恢复生长。 展开更多
关键词 栓皮栎 胚性组织 玻璃化法 超低温保存
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木薯非胚性与胚性组织蛋白质双向电泳差异初步分析 被引量：3
2
作者 段瑞军 符少萍 +4 位作者 王静 郭建春 胡新文 张鹏 李瑞梅 《热带作物学报》 CSCD 2011年第4期673-678,共6页
以木薯体非胚性和胚性组织为材料研究胚发生的蛋白表达机制,利用IEF/SDS-PAGE凝胶电泳技术,对其蛋白质特异性进行了比较分析,分别得到470和344个清晰的蛋白点。结果表明非胚性组织蛋白质谱和胚性组织蛋白质表达量上存在一定的差异。对其... 以木薯体非胚性和胚性组织为材料研究胚发生的蛋白表达机制,利用IEF/SDS-PAGE凝胶电泳技术,对其蛋白质特异性进行了比较分析,分别得到470和344个清晰的蛋白点。结果表明非胚性组织蛋白质谱和胚性组织蛋白质表达量上存在一定的差异。对其中5个区域中的39个差异显著的点进行分析发现,差异表达上调和下调在2倍以下的蛋白点有6个,上调或下调2倍以上的蛋白点有22个,非胚性组织中特异存在的蛋白点有5个,而胚性组织中特异存在的蛋白点有6个。 展开更多
关键词 木薯 蛋白质 双向电泳 胚性组织
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北美兰云杉胚性组织诱导的研究 被引量：1
3
作者 陶晶 陈士刚 +2 位作者 李青梅 秦彩云 董晓刚 《吉林林业科技》 2010年第5期5-7,15,共4页
以1/2LM为基本培养基,加入不同种类和质量浓度的植物生长调节剂,对5个种源的北美兰云杉成熟合子胚进行诱导培养,结果表明:成熟合子胚在一定激素质量浓度范围内的1/2LM培养基上均能诱导出胚性组织,5个种源的兰云杉成熟胚的胚性组织诱导... 以1/2LM为基本培养基,加入不同种类和质量浓度的植物生长调节剂,对5个种源的北美兰云杉成熟合子胚进行诱导培养,结果表明:成熟合子胚在一定激素质量浓度范围内的1/2LM培养基上均能诱导出胚性组织,5个种源的兰云杉成熟胚的胚性组织诱导率分别为26.76%、24.17%、25.04%、24.63%和69.57%。而在不同激素组合中,以BA7.5 mg.L-1+2,4-D15.0 mg.L-1的激素组合对北美兰云杉胚性组织的诱导率最高。 展开更多
关键词 北美兰云杉 成熟合子胚 胚性组织 诱导
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云杉属胚性组织超低温保存技术研究进展 被引量：4
4
作者 胡继文 凌娟娟 +3 位作者 朱天擎 张一凡 欧阳芳群 王军辉 《温带林业研究》 2019年第1期7-12,共6页
云杉属树种是重要经济和用材树种。随体细胞胚胎发生技术的不断发展,多个云杉属树种胚性愈伤组织(ETs)已经可以大量诱导生产,为维持其胚性、防止遗传变异、避免长期增殖,云杉属多数种实现了ETs超低温保存技术。超低温保存细胞时,细胞停... 云杉属树种是重要经济和用材树种。随体细胞胚胎发生技术的不断发展,多个云杉属树种胚性愈伤组织(ETs)已经可以大量诱导生产,为维持其胚性、防止遗传变异、避免长期增殖,云杉属多数种实现了ETs超低温保存技术。超低温保存细胞时,细胞停止代谢和生长,不会发生遗传变异,其遗传特性可以长期保存下来。本文首先,简述了超低温保存植物细胞的基本原理;介绍了超低温保存植物材料的一般程序,包括材料选取、预处理、超低温冷冻、解冻复性培养的方法,重点介绍了两种常用超低温冷冻方法——程序降温冻存法和玻璃化法的操作步骤。其次,阐述了影响云杉属超低温保存的主要因素,包括:基因型、细胞年龄及生长状态,冷冻保护剂和各种预处理方法,不同超低温冷冻方法及降温速率。得出:推荐使用年轻、体积小、胞质密度大、含水量低的分生组织或细胞进行低温保存;不同类型保护剂配合使用,效果更佳;较低的降温速率有利于超低温保存,且玻璃化法逐渐成为超低温保存的首选方法。本文还简述了外源添加物(酶促和非酶促抗氧化反应物、新型碳纳米材料)在植物超低温保存中的应用,以期为改良云杉属ETs超低温保存提供参考。最后,总结了云杉属ETs超低温保存技术存在的问题,并提出思考。 展开更多
关键词 云杉属 胚性组织 超低温保存
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TDZ对柑橘胚性组织生长与遗传转化的影响 被引量：1
5
作者 段艳欣 郭文武 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2014年第3期187-190,共4页
噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)是一类人工合成的苯基脲衍生物,广泛用于多种植物的组织培养。本文以椪柑胚性愈伤组织和球形胚状体为试材,研究了不同浓度TDZ对柑橘胚性愈伤组织增殖与胚状体发育的影响;在此基础上,研究了TDZ对12种柑橘胚性愈... 噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)是一类人工合成的苯基脲衍生物,广泛用于多种植物的组织培养。本文以椪柑胚性愈伤组织和球形胚状体为试材,研究了不同浓度TDZ对柑橘胚性愈伤组织增殖与胚状体发育的影响;在此基础上,研究了TDZ对12种柑橘胚性愈伤组织转化的影响。结果表明,培养基中添加较低浓度的TDZ可促进椪柑胚性愈伤组织的增殖,以0.4mg/L为最佳,超过该浓度则起抑制作用。单独使用TDZ不能促进该品种体胚的发生与再分化,但可促进胚状体体积的增大。在筛选培养基和共培养培养基中附加0.4mg/L TDZ,可明显促进椪柑抗性愈伤组织的增加和提高多种柑橘胚性愈伤组织的GFP瞬时荧光表达率,从而提高转化率。 展开更多
关键词 柑橘胚性愈伤组织 Thidiazuron(TDZ) 增殖 转化
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华北落叶松胚性组织超低温保存技术研究 被引量：4
6
作者 陈晓艺 江帅菲 +4 位作者 代剑峰 袁德水 Lisheng Kong 张金凤 赵健 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期47-53,共7页
【目的】超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法。本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响,以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能。【方法】本研究以华北落叶松胚性组织为材料,对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处... 【目的】超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法。本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响,以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能。【方法】本研究以华北落叶松胚性组织为材料,对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处理方式、解冻方式和恢复培养等关键环节开展研究。预培养和冷冻保护共设计成4种处理,以不经过预培养和冷冻保护直接冷冻保存为对照,每个处理重复3次。【结果】结果表明:处理组合1、2、3之间虽无显著差异,但结合冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)对细胞具有一定毒害作用,高浓度的DMSO会影响后续胚性组织的恢复甚至造成细胞死亡,因此选出效果较好的超低温保存方法为:0.2、0.4 mol/L山梨醇液体梯度预处理与0.4 mol/L山梨醇+5%DMSO为冷冻保护剂进行冷冻保护,最佳解冻方式为37℃水浴,解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达78%;超低温保存后的胚性组织与正常增殖的胚性组织在外观及显微结构上无明显差异,且低温保存后的愈伤组织仍保持分化形成体细胞胚的能力。【结论】研究结果为华北落叶松乃至其他针叶树胚性组织的超低温保存提供了参考。 展开更多
关键词 华北落叶松 超低温保存 胚性愈伤组织 梯度预处理
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外源黄酮对红松胚性愈伤组织增殖和体胚发生的影响
7
作者 郭文慧 王越 +5 位作者 吴琳 杨剑飞 杨玲 张鹏 吴海波 沈海龙 《植物研究》 北大核心 2025年第1期130-138,共9页
黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2... 黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2-膦酸盐酸盐,测定处理后胚性愈伤组织增殖率、体胚数量及氧化胁迫相关指标变化。结果表明:胚性愈伤组织的增殖率随着外源黄酮浓度的升高逐渐降低,而体胚诱导数量先升高后降低,体胚产生数量在20μmol⋅L^(-1)的外源黄酮处理下达到最高。黄酮能够降低胚性愈伤组织中总活性氧水平(ROS)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽过氧化物酶活性(GPX)。综上所述,外源黄酮主要通过影响胚性愈伤组织氧化胁迫水平,调控细胞增殖及胚性愈伤组织分化进程,促进红松体胚形成。 展开更多
关键词 红松 胚性愈伤组织 黄酮 体胚发生 氧化胁迫指标
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长期继代培养的楸树胚性愈伤组织难以分化的成因
8
作者 赵珊 董静 +3 位作者 郑帅 陈发菊 刘文 梁宏伟 《林业科学》 北大核心 2025年第6期130-138,共9页
【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍... 【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍性、差异表达基因及内源激素水平分析。【结果】1)通过染色体计数发现,初代胚性愈伤组织染色体保持二倍体状态(2n=40),而连续培养7年的胚性愈伤组织染色体数目发生了加倍现象,染色体数目为80~162;流式细胞仪鉴定发现连续培养7年的胚性愈伤DNA含量相比楸树实生苗增加3倍,其细胞倍性为六倍体。2)通过对转录组数据的GO和KEGG富集分析,发现差异表达基因显著富集在植物激素激活信号通路、转录调控、MAPK信号通路、发育过程的调控等通路,其中响应生长素信号的SAUR、ARF、AUX/IAA、GH3,脱落酸受体PYR/PYL,胞外蛋白AGP,转录因子ABI3等促进体胚分化发生的基因表达均下调,而乙烯合成抑制因子ETO1则表达上调。3)内源激素水平分析表明,连续继代7年的胚性愈伤组织中IAA和ABA的含量显著低于新诱导的胚性愈伤组织,这与其参与植物激素信号转导基因的下调表达相对应,而高水平的IAA和ABA可能是调控体细胞胚胎发生的关键。【结论】楸树胚性愈伤组织在长期继代过程中发生的染色体加倍、促进体胚发生相关基因的异常表达以及内源激素水平的显著下降,可能是造成其难以分化再生的根本原因。 展开更多
关键词 楸树 胚性愈伤组织 染色体加倍 转录组测序 内源激素
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香榧胚性愈伤组织的悬浮培养动力学及对赤霉素的响应
9
作者 杨正宇 周佳君 +1 位作者 胡恒康 张启香 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第1期103-111,共9页
【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细... 【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细胞鲜质量进行悬浮培养动力学的研究,优化培养条件,并对施加外源赤霉素A3 (GA3)的愈伤组织进行转录组分析。【结果】(1)在培养周期内,悬浮细胞的鲜质量增长呈“S”型曲线,细胞活力在3 d时达最高值后平稳下降。(2)香榧悬浮细胞培养最佳继代周期为9~12 d,最佳接种量为30 g·L^(-1),培养基最佳初始pH为5.7,最佳摇床转速为110r·min^(-1)。(3)对外源GA3处理后的香榧胚性愈伤组织进行转录组分析,共获得差异表达基因428个,其中上调基因236个,下调基因192个。在差异基因的GO富集分析中,GA3处理后上调表达基因主要参与催化活性、氧化还原过程、氧化还原酶活性等,在KEGG代谢通路中,差异表达基因主要富集在苯丙烷类生物合成、木栓质生物合成等途径中。【结论】香榧胚性愈伤组织培养动力学分析能获得最佳接种时期,优化培养条件能提高其细胞增长率及抗逆性,外源GA3处理下的香榧胚性愈伤组织细胞中,苯丙烷生物合成、木栓质生物合成等代谢通路为差异基因主要参与部分,且部分关键基因表达量变化可能在香榧愈伤组织生长发育、适应环境及应对胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 香榧 胚性愈伤组织 悬浮培养 赤霉素
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米槁胚性愈伤组织玻璃化法超低温保存体系的建立
10
作者 陈宇凡 吴媛 +4 位作者 林亮 杨湘云 帅甜 丁宁 吴之坤 《种子》 北大核心 2025年第5期16-25,35,共11页
为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了... 为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了恢复生长的愈伤组织体胚发生能力。结果表明,适宜米槁胚性愈伤组织的冷冻保护剂为PVS_(2),PVS_(2)处理70 min细胞存活率最高,为80.21%;适合米槁胚性愈伤组织超低温保存方法为Loading(WPM+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)25℃处理20 min, PVS_(2)(WPM+30%甘油+0.4 mol/L蔗糖+15%乙二醇+15%二甲基亚砜)0℃处理10 min, 40℃水浴解冻2 min, Unloading(WPM+1.2 mol/L蔗糖)25℃处理20 min。除PVS_(2)脱水处理0 min外,其余处理下均可以获得100%再生率。冻存后的子叶胚和成熟胚分化比例均高于未冻存的胚性愈伤组织,经冻存后的胚性愈伤组织与未冻存的胚性愈伤组织分化出的体胚形态上并没有差异,说明胚性愈伤组织可以作为米槁种质资源的超低温冻存材料进行超低温长期冻存。 展开更多
关键词 米槁 胚性愈伤组织 超低温保存 玻璃化法
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槟榔芋胚性愈伤组织诱导及植株再生体系的建立
11
作者 罗燕羽 黄绍力 +1 位作者 魏利国 刘伟光 《蔬菜》 2025年第5期43-49,共7页
为诱导槟榔芋胚性愈伤组织,建立植株再生体系,以广东炭步文冈槟榔芋试管芋植株的叶片、叶柄、球茎薄片、茎尖和根为材料,探究不同植物生长调节剂浓度配比对槟榔芋胚性愈伤组织诱导、增殖及植株再生的影响。结果表明:槟榔芋试管芋球茎上... 为诱导槟榔芋胚性愈伤组织,建立植株再生体系,以广东炭步文冈槟榔芋试管芋植株的叶片、叶柄、球茎薄片、茎尖和根为材料,探究不同植物生长调节剂浓度配比对槟榔芋胚性愈伤组织诱导、增殖及植株再生的影响。结果表明:槟榔芋试管芋球茎上部薄片为胚性愈伤组织诱导的最适外植体,诱导率为83.95%;胚性愈伤组织最佳增殖培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA,培养20 d后可增殖3.68倍;无生长调节剂的MS培养基的不定芽诱导效果最好,分化率达94.8%,添加0.05 mg/L NAA的1/2MS培养基的生根效果最好,生根率为100.00%。该研究建立了槟榔芋胚性愈伤组织发生途径的植株再生体系,为槟榔芋的种苗快速繁殖提供了技术支撑,也为后续的多倍体育种、体细胞杂交及遗传转化等试验提供了优良的受体材料。 展开更多
关键词 槟榔芋 胚性愈伤组织 植株再生 试管芋球茎薄片 外植体 再生体系 组织培养 快速繁殖
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低温处理对红松胚性愈伤组织诱导生理机制的影响 被引量：2
12
作者 王越 郭文慧 +5 位作者 沈海龙 杨剑飞 杨玲 张鹏 吴海波 吴琳 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期13-18,共6页
为探究低温预处理对红松胚性愈伤组织诱导及生理机制的影响,采用红松(Pinus koraiensis)未成熟种子为外植体,探究低温预处理时间对胚性愈伤组织诱导率、未成熟种子中抗氧化酶活性、贮藏物质及植物激素质量分数的影响。结果表明:经4℃低... 为探究低温预处理对红松胚性愈伤组织诱导及生理机制的影响,采用红松(Pinus koraiensis)未成熟种子为外植体,探究低温预处理时间对胚性愈伤组织诱导率、未成熟种子中抗氧化酶活性、贮藏物质及植物激素质量分数的影响。结果表明:经4℃低温预处理21~28 d,对提高红松未成熟种子的胚性愈伤组织诱导率效果最佳,其中,2号家系经4℃低温预处理28 d,胚性愈伤组织诱导率可达25.00%,5号家系经4℃低温预处理21 d,胚性愈伤组织诱导率可达14.00%。经低温预处理后,未成熟种子中的淀粉、可溶性糖和可溶性蛋白质量分数和过氧化氢酶(CAT)活性随预处理时间的延长呈下降趋势,而超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性则显著上升(P<0.05)。同时,4℃低温预处理21~28 d显著提高了红松未成熟种子中玉米素核苷(ZR)质量分数和生长素(IAA)质量摩尔浓度,降低脱落酸(ABA)质量分数。相关性分析结果表明,胚性愈伤组织诱导率与超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性、玉米素核苷质量分数和生长素质量摩尔浓度呈极显著正相关,与脱落酸质量分数呈极显著负相关(P<0.01)。因此,低温处理主要通过调控红松未成熟种子中抗氧化酶活性及植物激素水平,促进胚性愈伤组织诱导能力。 展开更多
关键词 红松 低温预处理 胚性愈伤组织 抗氧化酶 激素
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柑橘不同倍性种质胚性愈伤组织诱导及无病毒植株再生 被引量：2
13
作者 任家勤 黄雪冰 +6 位作者 杨雯惠 陈昊 邓家锐 敖义俊 解凯东 郭文武 伍小萌 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1332-1341,共10页
【目的】通过离体培养败育胚珠诱导柑橘二倍体和四倍体种质的胚性愈伤组织,为柑橘多倍体研究提供成对离体材料;继续诱导胚性愈伤组织再生无毒种苗实现柑橘无核品种提纯复壮。【方法】从柑橘成熟果实中挑取败育胚珠,接种于3种愈伤诱导培... 【目的】通过离体培养败育胚珠诱导柑橘二倍体和四倍体种质的胚性愈伤组织,为柑橘多倍体研究提供成对离体材料;继续诱导胚性愈伤组织再生无毒种苗实现柑橘无核品种提纯复壮。【方法】从柑橘成熟果实中挑取败育胚珠,接种于3种愈伤诱导培养基中,在离体培养过程中诱导并驯化胚性愈伤组织;再诱导愈伤组织分化为胚状体和不定芽,将不定芽嫁接到枳橙砧木形成完整植株;通过InDel标记和病毒检测鉴定再生植株的遗传来源和脱毒效果。【结果】离体培养诱导出13个柑橘种质的胚性愈伤组织,其中8个愈伤组织完成驯化,分别为红橘二倍体/四倍体(2x/4x)、W.默科特橘橙2x/4x、鄂柑1号椪柑2x/4x、日辉橘2x和早红脐橙。基因型影响柑橘胚性愈伤组织诱导效率,早红脐橙诱导率高达74.73%,而红橘诱导率仅6.85%;柑橘四倍体愈伤组织诱导率(0.56%~22.61%)低于对应二倍体(6.85%~37.75%)。3种不同培养基的胚性愈伤组织诱导效率不同,其中MGS培养基对温州蜜柑在内的5个品种的诱导率较高(14.13%~63.01%),MK培养基对温州蜜柑在内的4个品种的诱导率较低(21.62%~69.51%),但MK培养基对椪柑2x和红橘2x的诱导率分别为70.21%和17.31%。分别获得早红脐橙、伦晚脐橙、国庆1号温州蜜柑、大分4号温州蜜柑和兴津温州蜜柑5个无核品种的愈伤组织再生苗23、22、20、10和15株;嫁接嵌合体早红脐橙的愈伤组织再生苗经InDel标记鉴定实为罗伯逊脐橙;国庆1号温州蜜柑、伦晚脐橙和早红脐橙再生苗经PCR检测证明未感染黄脉病和衰退病病毒。【结论】柑橘胚性愈伤组织诱导率受品种基因型和培养基影响;同一品种的不同倍性种质,二倍体愈伤组织诱导率和胚状体发生率均较高;胚性愈伤组织再生植株实现了病毒完全脱除,是柑橘无核品种提纯复壮的有效手段。 展开更多
关键词 柑橘 胚性愈伤组织 倍性种质 无核品种 离体再生
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生长素和细胞分裂素诱导植物胚性愈伤组织研究进展 被引量：5
14
作者 许莹楠 刘艳军 +4 位作者 黄俊轩 韩启厚 高逸卓 鲁铭颖 古瑜 《长江蔬菜》 2024年第4期33-37,共5页
植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组... 植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的作用,讨论了其在植物胚性愈伤组织诱导中的作用、使用方法与原则,为愈伤组织诱导、愈伤组织胚性化诱导等研究中植物生长调节剂的使用提供依据。 展开更多
关键词 生长素 细胞分裂素 胚性愈伤组织 植物激素 植物生长调节剂
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黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生
15
作者 薛婉钰 刘娜 +3 位作者 苑鑫 张婷婷 曹云娥 陈书霞 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2024年第7期99-105,共7页
【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,... 【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60~150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。 展开更多
关键词 黄瓜 遗传转化 胚性愈伤组织 离体保存
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多倍体芦竹松散型胚性愈伤组织的诱导 被引量：1
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作者 任俊涵 刘艳军 +4 位作者 裴毅 王硕 刘广慧 邱晓坤 张卓 《种子》 北大核心 2024年第12期143-148,156,共7页
为了建立高效的芦竹体胚发生体系,本试验以带节间的多倍体芦竹组培苗幼嫩茎段为外植体,采用含有不同激素种类和浓度的培养基,在多次继代选择的条件下进行松散型胚性愈伤组织的诱导试验。结果表明,MS+0.25 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D为诱导... 为了建立高效的芦竹体胚发生体系,本试验以带节间的多倍体芦竹组培苗幼嫩茎段为外植体,采用含有不同激素种类和浓度的培养基,在多次继代选择的条件下进行松散型胚性愈伤组织的诱导试验。结果表明,MS+0.25 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D为诱导芦竹松散型愈伤组织的最佳培养基,具有愈伤组织诱导速度较快,结构松散,质地较软,呈白绿色的特点;芦竹松散型胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为1/2 MS+0.50 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D,通过电镜观察到愈伤组织全部呈胚性状态,结构松散、质地较硬、生长快速。在无激素的MS培养基上,将诱导出的芦竹松散型胚性愈伤组织进行转移,获得发育状态良好的胚状体需要经过5次继代培养。 展开更多
关键词 芦竹 胚性愈伤组织 胚状体
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矾根胚性愈伤组织诱导与植株再生 被引量：1
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作者 任俞新 《寒旱农业科学》 2024年第8期747-751,共5页
为了建立矾根组培快繁体系,以矾根去顶尖幼嫩顶芽为外植体,研究不同培养基对胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖以及植株再生的影响。结果表明,愈伤组织最佳培养基为MS+2.4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,愈伤诱导率达到93.0%,团块较大,结... 为了建立矾根组培快繁体系,以矾根去顶尖幼嫩顶芽为外植体,研究不同培养基对胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖以及植株再生的影响。结果表明,愈伤组织最佳培养基为MS+2.4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,愈伤诱导率达到93.0%,团块较大,结构较松散,有颗粒状态,个别团块呈水浸状;以最优胚性愈伤组织增殖培养基为MS+2.4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L进行扩增,愈伤组织发育较好,结构较松散,颗粒状疣突分明,水分较少,呈淡黄绿色。胚状体分化最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L,胚状体诱导率达91.8%。对幼根发育不良的植株,在1/2MS+IBA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L培养基上进行生根培养效果好,生根率100%,平均根数5.5条,根长2~3 cm,苗高4.1 cm。 展开更多
关键词 矾根 去顶尖幼嫩顶芽 胚性愈伤组织 诱导 植株再生
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落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤组织的生理生化差异 被引量：27
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作者 齐力旺 李玲 +2 位作者 韩一凡 韩素英 Dietrich Ewald 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期20-29,共10页
以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,... 以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,经ABA处理后 ,胚性愈伤组织中多糖及邻苯二酚含量急剧升高 ;三糖含量与不同基因型密切相关 ;乙烯释放量在非胚性愈伤组织中高于胚性愈伤组织 ;金属离子CO+ + 的含量 ,胚性愈伤组织是非胚性愈伤组织的 12倍 ,胚性愈伤组织中铵态氮 (NH+4)与硝态氮 (NO-3)的比值是非胚性愈伤组织中的 10倍以上 ;实验结果为进一步探讨针叶树体细胞胚胎发生的生理生化机理提供依据。 展开更多
关键词 华北落叶松 酚酸 激素 氨基酸 游离糖 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 体细胞胚发生
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玉米成熟胚胚性愈伤组织的诱导、高频再生及转化的研究 被引量：24
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作者 王世玉 郑用琏 +2 位作者 刘亚 赵久然 张方东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期423-428,共6页
以玉米自交系CML295、CML304和18-599R的成熟胚为外植体,结合幼胚离体培养方法,探讨并优化了成熟胚来源的胚性愈伤组织诱导及继代培养方法。对其愈伤组织的形态和组织切片的研究结果显示,继代过程可产生良好的Ⅱ型胚性愈伤组织。在分化... 以玉米自交系CML295、CML304和18-599R的成熟胚为外植体,结合幼胚离体培养方法,探讨并优化了成熟胚来源的胚性愈伤组织诱导及继代培养方法。对其愈伤组织的形态和组织切片的研究结果显示,继代过程可产生良好的Ⅱ型胚性愈伤组织。在分化培养中分别获得68.6%、75.4%和84.8%的高频再生率,每愈伤组织块成苗数分别为2.45、2.43和2.75。利用基因枪法转化pCAMBIA1301质粒后的GUS瞬时表达效率分别为57.9%、62.5%和73.1%,转化pCAMBIA1303质粒后检测GFP的瞬时表达效率分别为23.3%、40%和45.5%。以上3种基因型成熟胚来源的愈伤组织转化率与其对应的幼胚来源的胚性愈伤组织转化率相似。这一技术体系为玉米的遗传改良和功能基因组研究提供了重要的技术平台。 展开更多
关键词 玉米 成熟胚 胚性愈伤组织 再生 转化
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陆地棉中棉所24胚性愈伤组织的诱导及植株再生 被引量：20
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作者 于娅 刘传亮 +5 位作者 马峙英 李付广 李凤莲 王玉芬 武芝霞 张朝军 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第2期306-310,共5页
以陆地棉"中棉所24"为材料进行了全固体体细胞培养,获得了愈伤组织和再生植株。愈伤组织诱导阶段采用0.01IAA+0.01KT+0.012,4-D的培养基效果好,继代时间多为30～50d;激素由高到低的继代可明显提高胚性愈伤分化率,IAA和KT含量... 以陆地棉"中棉所24"为材料进行了全固体体细胞培养,获得了愈伤组织和再生植株。愈伤组织诱导阶段采用0.01IAA+0.01KT+0.012,4-D的培养基效果好,继代时间多为30～50d;激素由高到低的继代可明显提高胚性愈伤分化率,IAA和KT含量均较低,IAA/KT比例为1∶1～1∶6,胚性愈伤最高分化率为50.22%。 展开更多
关键词 棉花 组织培养 胚性愈伤组织 植株再生
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