mmu-miR-672-5p调控大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞凋亡的机制 被引量：2

1

作者 陈琳 周知 +1 位作者 马宁 周璟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期70-76,共7页

目的探讨mmu-miR-672-5p调控大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞凋亡的分子机制。方法过表达或敲低mmu-miR-672-5p后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。过表达或敲低mmu-miR-672-5p后,通过RNA-seq检测mmu-miR-672-5p调控的基因。设定阈值... 目的探讨mmu-miR-672-5p调控大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞凋亡的分子机制。方法过表达或敲低mmu-miR-672-5p后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。过表达或敲低mmu-miR-672-5p后,通过RNA-seq检测mmu-miR-672-5p调控的基因。设定阈值后,通过siRNA敲低相关基因后,检测大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。通过荧光素酶报告实验验证mmu-miR-672-5p是否靶向此基因。过表达此基因后,通过免疫印迹检测CLEAVED-CAS3的表达水平,以及大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平。结果过表达mmu-miR-672-5p后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0.05);敲低mmu-miR-672-5p后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平上升(P<0.05)。分别敲低和过表达mmu-miR-672-5p后,高通量测序发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞中多种基因的表达被调节,包括Zfp229、Zfp503、Slc4a5、Stk24、Tmem106b、Bax、Adgrb3、Tmem63b、Pmp22、Mroh2a、Dsn1、Pramef25、Naaladl2、Clk2、Stx16、Usp28、Clint1、Jph4、Msl2、Krtap8-1、Pkp2、Mllt3、Rai14。敲低上述基因后,发现仅敲低Bax时,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平下降(P<0.05)。过表达Bax后,CLEAVED-CAS3的表达水平上升,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平上升(P<0.05)。过表达mmu-miR-672-5p后,Bax的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05);敲低mmu-miR-672-5p后,Bax的mRNA和蛋白水平均上升(P<0.05)。此外,mmumiR-672-5p靶向Bax的3端非编码区(P<0.05)。同时过表达mmu-miR-672-5p和Bax后,大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平无显著变化(P>0.05);同时敲低mmu-miR-672-5p和Bax后,发现大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡水平无显著变化(P>0.05)。结论mmu-miR-672-5p通过靶向Bax的3端非编码区,降低了Bax的表达水平,随后抑制了大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞的凋亡。 展开更多

关键词 mmu-miR-672-5p BAX 大鼠 胎盘绒毛膜滋养层细胞 凋亡

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丹寿汤调控mTOR/S6K通路对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo自噬及增殖、凋亡的影响

2

作者 于喜乐 卫爱武 +2 位作者 石少琦 崔天薇 宋红艳 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期45-51,共7页

目的探讨丹寿汤调控mTOR/S6K通路对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo自噬及增殖、凋亡的影响。方法将HTR-8/Svneo分为对照组、丹寿汤低(丹寿汤-L,100μmol/mL)、中(丹寿汤-M,150μmol/mL)、高剂量(丹寿汤-H,200μmol/mL)组、mTOR通路激活... 目的探讨丹寿汤调控mTOR/S6K通路对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo自噬及增殖、凋亡的影响。方法将HTR-8/Svneo分为对照组、丹寿汤低(丹寿汤-L,100μmol/mL)、中(丹寿汤-M,150μmol/mL)、高剂量(丹寿汤-H,200μmol/mL)组、mTOR通路激活剂MHY1485(100 nmol/mL)组、丹寿汤-H+MHY1485组,处理24 h后,检测细胞增殖、凋亡、侵袭与迁移,观察自噬小体变化,检测LC3、p62、Beclin1 mRNA表达及mTOR/S6K通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,不同剂量的丹寿汤组增殖率、侵袭、迁移率、自噬小体/细胞质总面积、LC3、Beclin1 mRNA、p-mTOR/mTOR、S6K蛋白表达显著降低,凋亡率、p62 mRNA表达增加,组间差异有统计学意义,但MHY1485组增殖率、侵袭、迁移率、自噬小体/细胞质总面积、LC3、Beclin1 mRNA、p-mTOR/mTOR、S6K蛋白表达显著增加,凋亡率、p62 mRNA表达降低(均P<0.05);与丹寿汤-H组相比,丹寿汤-H+MHY1485组增殖率、侵袭、迁移率、自噬小体/细胞质总面积、LC3、Beclin1 mRNA、p-mTOR/mTOR、S6K蛋白表达显著增加,凋亡率、p62 mRNA表达降低(均P<0.05)。结论丹寿汤调控mTOR/S6K通路抑制人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo自噬、增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 丹寿汤 mTOR/S6K通路 人绒毛膜滋养层细胞 自噬

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单增李斯特菌感染人绒毛膜滋养层细胞比较蛋白质组学研究

3

作者 张云怡 张政 +3 位作者 张俊彦 陈鸿鹄 占利 陈建才 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期628-635,共8页

目的分析单核细胞增生李斯特氏菌(简称单增李斯特菌)感染人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo过程中引起的细胞蛋白质组变化。从宿主细胞分子水平对单增李斯特菌感染胎盘的机制进行研究。方法运用TMT(Tandem Mass Tags)蛋白质组学技术对HTR-8... 目的分析单核细胞增生李斯特氏菌(简称单增李斯特菌)感染人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo过程中引起的细胞蛋白质组变化。从宿主细胞分子水平对单增李斯特菌感染胎盘的机制进行研究。方法运用TMT(Tandem Mass Tags)蛋白质组学技术对HTR-8/Svneo感染组和非感染组蛋白质组进行定量分析,运用GO(Gene Ontology)、KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库对差异表达蛋白进行分子功能、生物过程及代谢途径富集分析。结果共鉴定肽段76285个,可定量蛋白6979个。HTR-8/Svneo感染过程中356个蛋白发生了显著性差异表达。153个表达量上调,203个表达量下调。差异表达量倍数最高的蛋白为微管马达蛋白(B4DYE2),最低为翻译起始因子1(Q6IAV3)。GO功能富集和KEGG代谢途径富集结果表明,上调蛋白参与的生物过程和代谢途径集中在微管、微丝运动,细胞自噬等方面,下调蛋白集中在碳代谢、氮代谢、氨基酸生物合成、核酸代谢等初级代谢途径和泛素介导的蛋白质水解等方面。结论单增李斯特菌侵袭HTR-8/Svneo过程中,宿主细胞的基础代谢可能发生了显著降低,并处于较高的自噬水平。细胞迁移诱导透明质酸酶CEMIP(Q8WUJ3)的显著上调说明该蛋白可能在调节滋养层细胞迁移、侵袭能力进而造成不良妊娠方面具有重要作用,为单增李斯特菌感染胎盘分子机制研究提供新的思路。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo 蛋白质组 TMT蛋白质组学技术

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PGRN在植入性胎盘组织中的表达及其对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭的影响 被引量：1

4

作者 温彦静 彭青 +2 位作者 王静娜 李曼 常美英 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期140-145,共6页

目的:探讨颗粒蛋白前体(PGRN)在植入性胎盘组织中的表达以及PGRN对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭的影响及潜在的作用机制。方法:收集河北省中医院收治的植入性胎盘组织和正常胎盘组织各25例,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白... 目的:探讨颗粒蛋白前体(PGRN)在植入性胎盘组织中的表达以及PGRN对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭的影响及潜在的作用机制。方法:收集河北省中医院收治的植入性胎盘组织和正常胎盘组织各25例,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western Blot)检测胎盘组织(绒毛膜层)中PGRN mRNA和蛋白水平;体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo,采用重组腺病毒载体和小干扰RNA(siRNA)技术过表达和干扰HTR-8/SVneo细胞中的PGRN,通过qRT-PCR和Western Blot检测细胞中PGRN表达确定过表达和干扰有效后,划痕实验和Transwell实验分别检测HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭能力;Western Blot检测HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭相关蛋白的表达。结果:植入性胎盘组织中PGRN mRNA和蛋白表达水平均显著高于正常胎盘组织(P<0.05);过表达PGRN后,HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭能力显著增加(P<0.05),N-钙黏蛋白(N-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平显著升高,E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达水平显著降低(P<0.05),而PGRN沉默后,HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05),同时N-cadherin、FN、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:PGRN在植入性胎盘组织中过表达,PGRN的过表达可能促进人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移和侵袭;而下调PGRN的表达能抑制人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移和侵袭;其作用机制可能与促进上皮-间质转化(EMT)过程有关。 展开更多

关键词 植入性胎盘 颗粒蛋白前体 人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo 迁移 侵袭

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组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞 被引量：13

5

作者 王雪萍 徐德忠 +2 位作者 李远贵 闫永平 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期57-59,共3页

目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免 疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细 胞纯度达９... 目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免 疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细 胞纯度达９５％以上。结论组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞简便易行，可获得符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。 展开更多

关键词 滋养层细胞 绒毛膜 细胞培养 组织块法

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enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究 被引量：7

6

作者 张宇飞 石晶 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1924-1933,共10页

旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒... 旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒毛膜滋养层细胞电转染条件和测定电转效率。将构建好的真核表达质粒分别电转染到绒毛膜滋养层细胞中,在荧光显微镜下观察enJSRV囊膜蛋白及其受体Hyal2的瞬时表达情况。并研究高表达enJSRV-env基因及通过RNA干扰沉默enJSRV-env基因对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合活性的影响。结果显示,真核表达质粒构建成功,分别命名为pEGFP-C1/enJSRV-env及pEGFP-C1/Hyal2。研究表明,绵羊绒毛膜滋养层细胞最佳电转染条件为脉冲电压150 V,脉冲时间5.0 ms,电击2次,间隔50 ms。转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒及pEGFP-C1/enJSRV-env与pEGFP-C1/Hyal2共转染的绵羊绒毛膜滋养层细胞中多核细胞数目明显增加,平均每个视野分别可以观察到1.8和2.3个多核细胞。说明enJSRV-env对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合有一定的促进作用。本研究为进一步探究enJSRV囊膜蛋白的结构和功能及绒毛膜滋养层细胞融合机理提供试验基础。 展开更多

关键词 内源性绵羊肺腺瘤病毒 内源性逆转录病毒 囊膜蛋白 绒毛膜滋养层细胞 细胞融合

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人绒毛膜促性腺激素通过上调胶质细胞缺失因子-1介导人滋养细胞胎盘生长因子分泌 被引量：8

7

作者 赵洪波 李瑞霞 张炜 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期522-526,共5页

目的研究人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)对人滋养细胞胶质细胞缺失因子-1(glial cell missing 1,Gcm-1)表达及胎盘生长因子(placental growth factor,PIGF)分泌的调控。方法人绒毛膜癌细胞株Bewo经不同剂量HCG... 目的研究人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)对人滋养细胞胶质细胞缺失因子-1(glial cell missing 1,Gcm-1)表达及胎盘生长因子(placental growth factor,PIGF)分泌的调控。方法人绒毛膜癌细胞株Bewo经不同剂量HCG处理后,以实时定量PCR及Western blot法分析检测Gcm-1的表达,以ELISA方法测定PIGF分泌。通过干扰小RNA下调人滋养细胞Gcm-1表达,观察其对HCG调控PIGF分泌的影响。结果 HCG以剂量依赖的方式促进人滋养细胞Gcm-1表达及PIGF分泌,而HCG诱导PIGF分泌则由Gcm-1介导。结论 HCG通过上调Gcm-1表达促进人滋养细胞PIGF分泌,提示HCG可能是一种对妊高征具有保护作用的因子。 展开更多

关键词 人绒毛膜促性腺激素 滋养细胞 胶质细胞缺失因子-1 胎盘生长因子

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人绒毛膜滋养层细胞的培养 被引量：4

8

作者 孔令红 刘忠 +2 位作者 陈士岭 彭彩娥 徐静萍 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第1期10-11,共2页

取妊娠 ６～１０周的人妊娠早期绒毛膜，用胰酶／ＤＮＡ酶消化，换瓶纯化处理，经光镜和电镜检测证实，我们建立了稳定的人绒毛膜滋养层细胞培养体系。

关键词 绒毛膜 滋养层细胞 胰酶 DNA酶 细胞培养

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TNF-α与IFN-γ诱导人绒毛膜滋养层细胞凋亡 被引量：2

9

作者 孔令红 刘忠 +1 位作者 高云飞 邢福祺 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第1期12-14,共3页

探讨ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡的作用。方法　建立人妊娠早期滋养层细胞体外培养体系：利用台盼蓝染色记数、光镜、透射电镜、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳观察和检测ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ处理后的细胞凋亡... 探讨ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡的作用。方法　建立人妊娠早期滋养层细胞体外培养体系：利用台盼蓝染色记数、光镜、透射电镜、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳观察和检测ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ处理后的细胞凋亡情况。结果ＴＮＦ－α与ＩＦＮ－γ可引起活细胞数减少；透射电镜观察到染色体边集、核固缩、凋亡小体：ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳有“梯形条带”。结论ＴＮＦ－α能够诱导人妊娠早期绒毛滋养层细胞凋亡，ＩＦＮ－γ对ＴＮＦ－α有协同作用。 展开更多

关键词 滋养层细胞 绒毛膜 TNF-Α IFN-Γ 细胞调亡

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miR-130b-5p下调胰岛素样生长因子-1抑制人绒毛膜滋养层细胞迁移及侵袭的作用及机制 被引量：1

10

作者 相萌 张旭东 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期539-547,共9页

【目的】探究微小RNA 130b-5p(miR-130b-5p)靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)迁移及侵袭的影响。【方法】将HTR8/SVneo细胞分为对照组、miR-NC组、miR-130b-5pmimics组、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组和m... 【目的】探究微小RNA 130b-5p(miR-130b-5p)靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)迁移及侵袭的影响。【方法】将HTR8/SVneo细胞分为对照组、miR-NC组、miR-130b-5pmimics组、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组和miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组,双荧光素酶报告基因检测miR-130b-5p和IGF-1的靶向关系;采用实时荧光定量PCR检测HTR8/SVneo细胞样本中miR-130b-5p及IGF-1表达水平;采用CCK-8法检测HTR8/SVneo细胞增殖情况;采用全息细胞仪及Transwell法分析HTR8/SVneo细胞迁移、侵袭能力;Western blot法检测HTR8/SVneo细胞样本中IGF-1及侵袭、上皮间充质转化(EMT)蛋白表达情况。【结果】双荧光素酶报告基因结果显示,IGF-1是miR-130b-5p的潜在靶基因;相较于miR-NC组,miR-130b-5pmimics组中miR-130b-5p表达水平、细胞增殖抑制率、钙粘附蛋白E(E-cadherin)表达水平显著增加,IGF-1、c-Myc、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、基质金属蛋白酶9(MMP9)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平显著降低(P<0.05);相较于miR-130b-5pmimics+pcD⁃NA3.1组,miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组中细胞增殖抑制率、E-cadherin表达水平显著降低,c-Myc、Cy⁃clinD1表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、MMP9、MMP2、Vimentin和N-cadherin表达水平显著增加(P<0.05)。【结论】miR-130b-5p过表达可能通过抑制IGF-1表达来抑制HTR8/SVneo细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 人绒毛膜滋养层细胞 胰岛素样生长因子-1 微小RNA 130b-5p 迁移 侵袭

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人绒毛外细胞滋养层细胞与蜕膜基质细胞共培养模型的建立 被引量：2

11

作者 秦立赟 陈士岭 +1 位作者 张曦倩 王炎秋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期914-917,共4页

目的模拟体内环境,建立可保持绒毛外细胞滋养层细胞(EVCT)与蜕膜基质细胞(DSC)生物学特性的共培养细胞模型,应用于研究滋养细胞的侵袭行为。方法利用胰酶消化和BSA、Percoll梯度沉降,收集纯化人早孕绒毛组织的EVCT和DSC,分别放入Transw... 目的模拟体内环境,建立可保持绒毛外细胞滋养层细胞(EVCT)与蜕膜基质细胞(DSC)生物学特性的共培养细胞模型,应用于研究滋养细胞的侵袭行为。方法利用胰酶消化和BSA、Percoll梯度沉降,收集纯化人早孕绒毛组织的EVCT和DSC,分别放入Transwell的上下小室,观察该模型下细胞形态变化及侵袭特性,免疫组化、免疫荧光染色检测细胞的纯度。结果免疫组化显示EVCT的细胞角蛋白7阳性表达的细胞数占95%以上,阳性表达转化生长因子β2的细胞数占95%以上,DSC泌乳素阳性表达的细胞数也超过95%,证实共培养系统中EVCT和DSC纯度均在95%以上,且生物学特性得以维持。上室中的EVCT保持了其侵袭能力,在Matrigel包被的滤膜上EVCT的侵袭指数为3.22±0.04。结论适当的培养方法可获得高纯度的EVCT和DSC,并使其维持特有的生物学活性,成功地建立了共培养系统模型,便于研究滋养细胞侵袭和胚胎着床的机制。 展开更多

关键词 绒毛外细胞滋养层细胞 蜕膜基质细胞 共培养 侵袭 TRANSWELL

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绵羊绒毛膜滋养层细胞与子宫内膜腔上皮细胞共培养体系的建立 被引量：1

12

作者 张洁 陈大勇 +3 位作者 赵娟 王晓娟 杨惠 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期562-569,共8页

本研究旨在探索绵羊绒毛膜滋养层细胞(sheep trophoblast cells, STCs)和子宫内膜腔上皮细胞(endometrial luminal epithelial cells, ELECs)的共培养条件,为绵羊胎盘绒毛膜滋养层多核细胞的形成提供试验依据。在屠宰场采集妊娠45～60 ... 本研究旨在探索绵羊绒毛膜滋养层细胞(sheep trophoblast cells, STCs)和子宫内膜腔上皮细胞(endometrial luminal epithelial cells, ELECs)的共培养条件,为绵羊胎盘绒毛膜滋养层多核细胞的形成提供试验依据。在屠宰场采集妊娠45～60 d的健康绵羊子宫及胎盘组织,用酶消化法体外分离培养STCs和ELECs,并进行细胞免疫荧光鉴定,同时利用姬姆萨氏染色法确定STCs和ELECs最佳的共培养条件;然后转染空质粒pEGFP-C1到ELECs 48 h后,与STCs共培养,并利用激光共聚焦显微镜观察滋养层多核细胞的形态。结果显示:STCs CK-7与ELECs CK-18均呈阳性;当STCs与ELECs细胞数量比值为2∶1,共培养48 h,多核细胞数量最多,且与对照组相比差异显著(P<0.05);CK-7在STCs中表达呈红色荧光,且细胞中有pEGFP-C1标记的绿色荧光,胞核蓝染,3种荧光共表达呈现出了白光。综上表明,本研究建立了STCs和ELECs共培养条件,ELECs参与绵羊滋养层多核细胞的形成。 展开更多

关键词 绵羊 滋养层细胞 子宫内膜腔上皮细胞 共培养 绒毛膜滋养层多核细胞

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Luminex液相芯片技术测定人早孕滋养层细胞及蜕膜细胞中基质金属蛋白酶的表达 被引量：5

13

作者 贺晓恒 陈士岭 +1 位作者 孙玲 邢福祺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1136-1139,共4页

目的研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯... 目的研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯度在98%以上后,收集培养上清液,利用Luminex(LumAvidinBeads)测定培养上清液中MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-12、MMP-13)蛋白表达的变化,分析MMPs在不同培养条件下的表达差异及表达之间的相关性。结果①在不同培养条件下,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9均有表达,MMP-12及MMP-13分别在ESC及DSC中无表达,且MMP-8、MMP-12、MMP-13表达均低。②与子宫内膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在DSC,EVCT中表达均降低,降低有显著性差异(P<0.05),而MMP-2、MMP-8、MMP-9在DSC,EVCT中则显著升高,升高有显著性差异(P<0.05)。且在蜕膜细胞中,MMP-1、MMP-3、MMP-2、MMP-7高表达尤为显著。③与蜕膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在EVCT中表达显著降低(P<0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-13在EVCT中升高有显著性(P<0.05)。且在滋养层细胞中,MMP-2、-9高表达尤为显著。④MMPs之间的相关性:MMP-2与MMP-9相关关系显著(P<0.05),且关系较密切(r=0.6645)。MMP-1,MMP-3,MMP-7两两间相关关系显著(P<0.05),且关系密切(r>0.7340)。其他MMP之间相关关系不显著。结论首次利用LuminexxMAP方法多通量的检测到子宫内膜间质细胞、早孕蜕膜细胞与滋养层细胞的多种MMPs的表达,它们均可分泌多种MMP,但是不同种类组织细胞的表达量不同;MMPs可能通过调控子宫内膜蜕膜化及母胎界面间MMPs的变化而影响胚胎着床,为成功妊娠创造条件。 展开更多

关键词 绒毛外细胞滋养层细胞 蜕膜细胞 子宫内膜 基质金属蛋白酶 液相蛋白芯片

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患先兆子痫的妇女血液中的合体细胞滋养层微绒毛膜刺激中性白细胞产生氧化物

14

作者 左万兴 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期i005-i006,共2页

关键词 先兆子痫 妇女 血液 听合体 细胞滋养层 微绒毛膜刺激 中性白细胞 过氧化物 妊高征

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枸杞多糖对BaP诱导人绒毛外滋养层细胞凋亡和侵袭的影响 被引量：1

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作者 张翠翠 李永川 孙文萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1318-1321,共4页

目的 研究枸杞多糖对苯并芘(BaP)诱导人绒毛外滋养层细胞凋亡和侵袭的影响和机制。方法 用BaP诱导人绒毛膜滋养层细胞,以枸杞多糖干预,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测细胞中MMP-9、Bax、Bcl-... 目的 研究枸杞多糖对苯并芘(BaP)诱导人绒毛外滋养层细胞凋亡和侵袭的影响和机制。方法 用BaP诱导人绒毛膜滋养层细胞,以枸杞多糖干预,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测细胞中MMP-9、Bax、Bcl-2、p65蛋白表达。用p65激活剂处理人绒毛膜滋养层细胞,探讨p65激活剂对枸杞多糖影响人绒毛膜滋养层细胞凋亡和侵袭的作用。结果 与对照组比较,模型组细胞凋亡率升高,细胞侵袭能力下降,细胞中Bax、p65蛋白表达升高(P<0.05),MMP-9、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,枸杞多糖各剂量组细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞侵袭能力增强(P<0.05),Bax、p65蛋白表达降低(P<0.05),MMP-9、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),并呈剂量依赖性。p65激活剂可以逆转枸杞多糖对BaP诱导人绒毛膜滋养层细胞凋亡和侵袭的影响。结论 枸杞多糖具有拮抗BaP诱导的人绒毛膜滋养层细胞凋亡,促进细胞侵袭的作用,其机制可能与p65有关。 展开更多

关键词 枸杞多糖 人绒毛膜滋养层细胞 凋亡 侵袭 苯并芘(BaP) P65

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长期体外扩增降低胎盘绒毛膜间充质干细胞的免疫调节功能 被引量：1

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作者 杨舟鑫 及月茹 +3 位作者 韩之波 王有为 孟磊 韩忠朝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1552-1556,共5页

本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方... 本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方法检测其IFN-γ的分泌水平。实时定量PCR的方法检测CV-MSC细胞中COX-2,HGF和HLA-G的表达。结果显示:经过长期传代后,虽然CV-MSC的基本细胞形态和大部分表面标记如CD31,CD34,CD44,CD45,CD62L,CD73,CD90,CD105,CD117,CD151,CD235a,CD271和HLA-DR等都没有明显的变化,但其表面CD49d表达明显上调,长期传代后其免疫调节功能明显下降,免疫调节相关的分子COX-2和HGF的表达也略有下调,而HLA-G表达并未明显的变化。结论:长期体外扩增改变CV-MSC的CD49d的表达,并降低CV-MSC的免疫调节功能。 展开更多

关键词 长期培养 胎盘绒毛膜间充质干细胞 免疫调节

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胎盘部位滋养细胞肿瘤免疫组织化学分析 被引量：5

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作者 惠京 韩英杰 +2 位作者 徐东坡 赵凤云 刘增辉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期279-281,共3页

目的 :探讨免疫组织化学在胎盘部位滋养细胞肿瘤 (PSTT)病理诊断中的意义。方法 :应用免疫组织化学检测 8例PSTT中HPL、HCG及PCNA表达 ,并与胎盘部位过度反应及绒毛膜癌比较。结果 :HPL染色 8例PSTT均为阳性 ,阳性细胞指数为 6 2 2 5 %... 目的 :探讨免疫组织化学在胎盘部位滋养细胞肿瘤 (PSTT)病理诊断中的意义。方法 :应用免疫组织化学检测 8例PSTT中HPL、HCG及PCNA表达 ,并与胎盘部位过度反应及绒毛膜癌比较。结果 :HPL染色 8例PSTT均为阳性 ,阳性细胞指数为 6 2 2 5 %± 10 95 % ,高于绒毛膜癌的 11 13%± 9 2 6 %和EPS的 40 30 %± 2 3 90 % (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ;6例PSTT细胞HCG染色阳性 (75 % ) ,阳性细胞指数为 10 87%± 8 31% ,EPS为 2 5 0 %± 4 40 % ,绒毛膜癌为 5 3 0 0 %± 2 2 10 % ;PSTT增殖细胞指数为 31 2 5 %± 8 86 % ,EPS为 10 37%± 5 2 8% ,绒毛膜癌为 71 10 %± 5 12 %。PSTT的HCG和增殖细胞指数与EPS和绒毛膜癌相比差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论 :免疫组织化学检测HPL、HCG及PCNA对PSTT的诊断和鉴别诊断具有重要意义 。 展开更多

关键词 滋养层肿瘤 胎盘部位 免疫组织化学 胎盘催乳激素 促性腺素 绒毛膜 增殖细胞抗原 PCNA PSTT 罕见肿瘤

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SDF-1/CXCR4在滋养层细胞中的表达及其在母胎免疫耐受中的作用 被引量：4

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作者 杨昀 邹丽 王轶英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期603-605,共3页

目的:研究趋化因子SDF1及其配体CXCR4在滋养层细胞中的表达及其在母胎免疫耐受中的作用。方法:取早孕期的绒毛,分离纯化培养绒毛外滋层养细胞(extravilloustrophoblast,EVT),用免疫细胞化学染色法检测SDF1与CXCR4在绒毛中的表达。用流... 目的:研究趋化因子SDF1及其配体CXCR4在滋养层细胞中的表达及其在母胎免疫耐受中的作用。方法:取早孕期的绒毛,分离纯化培养绒毛外滋层养细胞(extravilloustrophoblast,EVT),用免疫细胞化学染色法检测SDF1与CXCR4在绒毛中的表达。用流式细胞术筛选源于滋养层细胞高表达CXCR4的绒癌细胞株用于体外微孔隔离室迁移实验,以分析SDF1的趋化活性。用免疫组织化学染色法检测早孕期绒毛及足月妊娠胎盘中SDF1及CXCR4的表达。结果:在EVT中可检出SDF1和CXCR4的表达,在一定范围内,SDF1的趋化活性与其浓度呈正相关(r=0.68,P<0.01)。10μg/L的SDF1趋化作用最强,最大趋化指数CI为1.62±0.12。在早孕期的绒毛及足月胎盘中,滋养层细胞的胞膜和细胞质中均检出SDF1和CXCR4的表达,但在足月胎盘中的表达强度明显低于早孕期的绒毛组织(P<0.01)。结论:SDF1/CXCR4在妊娠中发挥着重要作用,对维系母胎免疫耐受具有重要意义。 展开更多

关键词 SDF-1 CXCR4 绒毛 胎盘 绒毛外滋养层细胞

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妊娠滋养细胞肿瘤免疫治疗

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作者 李源 向阳 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期773-776,共4页

妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasm,GTN)是一组罕见的由胎盘滋养细胞异常增殖引起的恶性肿瘤,包括侵蚀性葡萄胎(invasive mole,IM)、绒毛膜癌(choriocarcinoma,CC)、胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblas... 妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasm,GTN)是一组罕见的由胎盘滋养细胞异常增殖引起的恶性肿瘤,包括侵蚀性葡萄胎(invasive mole,IM)、绒毛膜癌(choriocarcinoma,CC)、胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor,PSTT)。 展开更多

关键词 妊娠滋养细胞肿瘤 侵蚀性葡萄胎 胎盘部位滋养细胞肿瘤 绒毛膜癌 异常增殖 胎盘滋养细胞 免疫治疗 neoplasm

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乙型肝炎病毒体外感染人绒毛膜癌JEG3细胞的实验研究 被引量：1

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作者 马力 穆桂玲 +3 位作者 王心竹 张健 赵桂珍 王兆荃 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期679-682,共4页

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)体外感染人绒毛膜癌滋养层细胞(JEG3)模型,探讨HBV宫内感染机制。方法应用HBV阳性且高载量的血清,感染JEG3细胞。应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测感染后细胞上清液和细胞内的HBV载量;应用ELISA方法检测... 目的建立乙型肝炎病毒(HBV)体外感染人绒毛膜癌滋养层细胞(JEG3)模型,探讨HBV宫内感染机制。方法应用HBV阳性且高载量的血清,感染JEG3细胞。应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测感染后细胞上清液和细胞内的HBV载量;应用ELISA方法检测感染后不同时间、不同代次上清液的HBsAg、HBeAg浓度;应用SP免疫组化检测感染细胞内HBsAg、HBeAg的表达。结果感染初代的JEG3细胞,随着时间增加病毒载量亦增加。传代后细胞及上清中的HBV载量随传代次数增加逐渐降低,5代后检测均为阴性;感染初代上清液HBsAg含量随时间增加,120h含量最高。传代细胞的上清液HBsAg检测1～4代为阳性,但浓度逐渐降低,5代后均为阴性。上清液的HBeAg检测,各时间点、各代均为阴性;1、2、3、4代细胞HBsAg、HBcAg染色可见阳性细胞。结论HBV可以在体外感染滋养层细胞,且能在传代细胞中有持续的表达。感染过程中参与调控的相关细胞因子及HBV复制的持续与否有待进一步探讨。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 绒毛膜癌滋养层细胞 胎盘滋养层 感染 实时定量PCR

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