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阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939增殖的影响 被引量:1
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作者 刘勇刚 陈汝福 +2 位作者 于新发 周成宇 李志花 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1065-1068,共4页
目的:研究阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939生长增殖的影响。方法:常规培养QBC939细胞,采用PDTC(100μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内P65蛋白水平的表达,CCK-8检测细胞生长增殖抑制率,流式细胞仪观察细胞... 目的:研究阻断NF-κB信号通路对人肝门部胆管癌细胞QBC939生长增殖的影响。方法:常规培养QBC939细胞,采用PDTC(100μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内P65蛋白水平的表达,CCK-8检测细胞生长增殖抑制率,流式细胞仪观察细胞周期与凋亡的变化情况。结果:经PDTC阻断NF-κB信号通路后,与对照组相比,细胞核内P65蛋白水平明显下降(P<0.05)。CCK-8检测显示细胞增殖活性明显受到抑制,并随时间的延长而愈渐明显,12、24、36h后细胞增殖抑制率分别为(22.53±0.03)%、(46.54±0.03)%、(58.02±0.03)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测发现实验组G0/G1期细胞比例高于对照组,分别为(68.53±1.72)%、(38.3±1.35)%,差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率在实验组为(27.68±2.77)%,对照组仅为(9.27±2.36)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阻断NF-κB信号通路诱导人肝门部胆管癌细胞G_0/G_1期阻滞及细胞凋亡,从而抑制细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与人肝门部胆管癌的发生发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给人肝门部胆管癌带来新的治疗选择。 展开更多
关键词 胆管癌细胞qbc939 NF-ΚB 细胞增殖 细胞周期 凋亡
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内脂素对人胆管癌细胞QBC939侵袭及增殖影响的体外研究
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作者 张俊华 傅赞 +3 位作者 吴新权 石毅 白剑峰 孙跃明 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期809-812,共4页
目的:研究人内脂素(visfatin)对胆管癌细胞QBC939体外增殖和侵袭能力的影响,并初步探讨可能存在的机制。方法:培养胆管癌细胞QBC939,在不同浓度的内脂素作用不同时间后,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,用Tran-swell小室检测... 目的:研究人内脂素(visfatin)对胆管癌细胞QBC939体外增殖和侵袭能力的影响,并初步探讨可能存在的机制。方法:培养胆管癌细胞QBC939,在不同浓度的内脂素作用不同时间后,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,用Tran-swell小室检测内脂素(200 ng/ml)24 h后对胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响,Western blot检测内脂素对QBC939细胞内基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2蛋白的表达。结果:内脂素可以促进QBC939细胞的增殖(P<0.01),且存在剂量依赖性;内脂素(200 ng/ml)处理24 h后,QBC939细胞穿透聚碳酸酯膜的能力与对照组相比显著增强(P<0.01);Westernblot显示内脂素(200 ng/m1)处理24 h后,QBC939细胞MMP-2蛋白的表达明显增高。结论:内脂素可以明显提高人胆管癌细胞QBC939的增殖和侵袭能力,其作用机制可能与MMP-2水平的增高有关。 展开更多
关键词 内脂素:人胆管癌细胞qbc939 基质金属蛋白酶-2
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三氧化二砷诱导人胆管癌细胞系QBC939凋亡的实验研究 被引量:3
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作者 吴志鹏 滕安宝 +1 位作者 黄强 吴立胜 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第5期339-342,共4页
目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对体外培养的QBC939细胞的生物学效应和作用机制。方法 MTT法检测As2 O3对QBC939细胞的增殖抑制作用 ,电子显微镜观察细胞超微结构改变 ,琼脂糖凝胶电泳测定DNAladder,流式细胞术检测细胞DNA含量 ,半定... 目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对体外培养的QBC939细胞的生物学效应和作用机制。方法 MTT法检测As2 O3对QBC939细胞的增殖抑制作用 ,电子显微镜观察细胞超微结构改变 ,琼脂糖凝胶电泳测定DNAladder,流式细胞术检测细胞DNA含量 ,半定量RT PCR检测p5 3/bax/bcl 2mRNA的表达水平。结果 As2 O3 对QBC939细胞的增殖抑制作用随浓度升高和作用时间的延长而明显增强 ,并以 4 μmol/LAs2 O3 作用 96h抑制率达最高 (90 2 % ) ,流式细胞术显示正常生长的QBC939细胞自发性凋亡率为 2 94 % ,各实验组均出现程度不等的亚二倍体峰 ,并以 4 μmol/LAs2 O3 作用 96h凋亡率达最高 (87 7% ) ,透射电镜显示 1μmol/LAs2 O3 作用72h出现早期凋亡特征 ,4 μmol/L作用 4 8h出现典型凋亡特征 ;DNAladder测定显示随着浓度和时间的增加 ,ladder条带越来越明显 ;半定量RT PCR显示 4 μmol/LAs2 O3 作用 2 4、4 8、72h后显示bax上调和bcl 2的下调 ,p5 3则未检测到表达。结论 在体外As2 O3 能有效地抑制QBC939细胞增殖 ,诱导其凋亡 ,其机制可能与bax上调、bcl 2下调有关。 展开更多
关键词 砷剂/药理学 胆管肿瘤/药物疗法 细胞 细胞凋亡 qbc939
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c-Met siRNA对肝细胞生长因子诱导的人胆管癌QBC939细胞增殖的影响 被引量:10
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作者 张秀华 缪林 +2 位作者 季国忠 范志宁 刘政 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1154-1158,共5页
目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干... 目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的人CCA QBC939细胞,应用MTT法检测细胞增殖,Western blot检测c-Met、细胞周期素(Cyclin)D1和A表达以及磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化。结果:c-Met siRNA显著抑制c-Met蛋白表达,且随着其浓度的增加,c-Met蛋白表达逐渐下降,500 nmol/L c-Met siRNA对c-Met蛋白表达的抑制率达65%。HGF刺激24 h,细胞增殖是对照组的4.54倍,100 nmol/L c-Met siRNA预处理即显著抑制HGF诱导的细胞增殖,其抑制率达26%,且随浓度增加,其抑制作用逐渐增强,500 nmol/L c-Met siRNA对HGF诱导的细胞增殖的抑制率达85%。HGF刺激4h,PI3K和Akt的活性即显著增强,分别是对照组的4.09和4.54倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化,500 nmol/L c-Met siRNA几乎完全抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化。HGF显著诱导人CCAQBC939细胞ERK1/2活化,50 ng/ml HGF刺激4 h,磷酸化ERK1/2表达是对照组的3.63倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的ERK1/2活化。HGF显著诱导人CCA QBC939细胞细胞周期素D1和A表达,分别是对照组的2.83和3.16倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的细胞周期素D1和A表达。结论:针对人c-Met基因的RNA干扰可有效阻断人CCA QBC939细胞c-Met表达,并通过阻断PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化而抑制HGF诱导的细胞增殖。 展开更多
关键词 胆管qbc939细胞 细胞生长因子 c—Met 小干扰RNA
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平消胶囊对胆管癌细胞生长及CD44v6蛋白表达的影响 被引量:9
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作者 周大祥 吴云鹏 徐世荣 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1014-1018,共5页
目的通过观察平消胶囊(郁金、马钱子粉、仙鹤草、五灵脂、白矾、硝石、干漆、枳壳)血清作用于人肝外胆管癌细胞QBC939后,对癌细胞的生长和转移的影响,探讨其抗癌及转移机制。方法将平消胶囊灌喂大鼠,制备含药血清,血清培养胆管癌细胞,MT... 目的通过观察平消胶囊(郁金、马钱子粉、仙鹤草、五灵脂、白矾、硝石、干漆、枳壳)血清作用于人肝外胆管癌细胞QBC939后,对癌细胞的生长和转移的影响,探讨其抗癌及转移机制。方法将平消胶囊灌喂大鼠,制备含药血清,血清培养胆管癌细胞,MTT法检测不同剂量含药血清对人胆管癌细胞QBC939的生长抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期、细胞膜上黏附分子CD44v6表达的变化。结果平消胶囊血清能明显抑制人肝外胆管癌细胞QBC939的增殖,具有时间、剂量依赖关系。药物作用后,QBC939细胞生长受阻于G0/G1期,并且黏附分子CD44v6在细胞膜上表达下调,剂量越大,CD44v6下调越明显。结论平消胶囊能有效地抑制QBC939细胞增殖,通过影响细胞生长、诱导细胞膜上黏附分子CD44v6表达下调,导致细胞凋亡,防止癌细胞转移。 展开更多
关键词 平消胶囊 胆管癌细胞qbc939 生长抑制 CD44V6
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circAGFG1靶向miR-4429对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其可能的机制 被引量:2
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作者 王全晖 袁守信 张元浩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期128-134,共7页
目的:探讨circAGFG1对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:收集2017年4月至2019年10月于联勤保障部队第九八八医院接受手术的33例胆管癌患者的癌组织及对应癌旁组织,qPCR法检测组织中circAGFG1和miR-4429表达水平... 目的:探讨circAGFG1对胆管癌QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:收集2017年4月至2019年10月于联勤保障部队第九八八医院接受手术的33例胆管癌患者的癌组织及对应癌旁组织,qPCR法检测组织中circAGFG1和miR-4429表达水平。体外培养胆管癌QBC939细胞,分别转染si-circAGFG1、miR-4429 mimic、共转染si-circAGFG1与anti-miR-4429后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测对细胞增殖的影响,划痕实验和Transwell法分别检测对细胞迁移和侵袭的影响,WB法检测对细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证circAGFG1和miR-4429之间的靶向调控关系。结果:胆管癌组织中circAGFG1的表达量高于癌旁组织(3.89±0.26 vs 1.00±0.08,P<0.05),而miR-4429的表达量低于癌旁组织(0.28±0.03 vs 1.00±0.05,P<0.05)。干扰circAGFG1或过表达miR-4429后,QBC939细胞增殖水平、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及细胞中N-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05),而E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circAGFG1可靶向结合miR-4429,且干扰circAGFG1会促进QBC939细胞中miR-4429表达(均P<0.05)。下调miR-4429表达能够逆转干扰circAGFG1对QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的影响(均P<0.05)。结论:circAGFG1在胆管癌组织中表达升高,其可能通过靶向抑制miR-4429促进胆管癌QBC939细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胆管 qbc939细胞 circAGFG1 miR-4429 增殖 迁移 侵袭
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NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肝门部胆管癌细胞增殖及SMYD3表达的影响 被引量:3
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作者 刘勇刚 李志花 +3 位作者 陈汝福 郭宁 程帝 廖巧芳 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期22-25,共4页
【目的】研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖及组蛋白甲基转移酶表达的影响。【方法】不同浓度的PDTC作用于QBC939细胞不同时间后,CCK-8测定其对QBC939细胞增殖的抑制率,流式... 【目的】研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖及组蛋白甲基转移酶表达的影响。【方法】不同浓度的PDTC作用于QBC939细胞不同时间后,CCK-8测定其对QBC939细胞增殖的抑制率,流式细胞仪观察QBC939细胞的周期变化情况,RT-PCR检测PDTC作用下QBC939细胞中SMYD3 mRNA的表达情况,Western blot法检测QBC939细胞内SMYD3蛋白的表达。【结果】经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05),呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,PDTC作用后QBC939细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),并同时伴有癌细胞内SMYD3 mRNA和蛋白表达的降低(P<0.01),且呈明显的剂量依赖关系。【结论】PDTC具有显著抑制肝门部胆管癌QBC939细胞生长的作用,其机制可能与细胞增殖抑制、周期阻滞、以及NF-κB、SMYD3表达抑制有关。 展开更多
关键词 胆管癌细胞qbc939 PDTC 核转录因子-KB 增殖 组蛋白甲基转移酶
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热化疗对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:11
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作者 曹智刚 郭启勇 +2 位作者 马力 何东风 金罡 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2006年第6期804-807,共4页
目的探讨表阿霉素(EADM)热化疗对人胆管癌细胞(QBC939)的增殖和凋亡的作用。方法以体外培养的人胆管癌细胞株为研究对象,采用水浴加热法进行体外细胞毒实验(MTT)、透射电镜观察及流式细胞仪检测,观察热疗、化疗、热化疗对人胆管癌细胞... 目的探讨表阿霉素(EADM)热化疗对人胆管癌细胞(QBC939)的增殖和凋亡的作用。方法以体外培养的人胆管癌细胞株为研究对象,采用水浴加热法进行体外细胞毒实验(MTT)、透射电镜观察及流式细胞仪检测,观察热疗、化疗、热化疗对人胆管癌细胞的生长抑制和凋亡的影响。结果42℃以上单纯热疗对QBC939细胞有明显杀伤作用(P<0.01),42℃以上热化疗对QBC939细胞有明显的协同或相加作用(P<0.01)。透射电镜和流式细胞术均观察到热疗、化疗、热化疗诱导细胞凋亡的作用(P<0.01);热化疗有协同作用(P<0.01)。结论热疗、化疗、热化疗均抑制QBC939细胞增殖;热疗、化疗、热化疗诱导细胞凋亡为其抗癌机制之一;热疗提高化疗药物的细胞毒作用。 展开更多
关键词 胆管 qbc939细胞 热化疗 增殖 凋亡
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羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤PS2、COX-2的影响 被引量:3
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作者 黄国栋 黄媛华 +2 位作者 黄道富 肖美珍 唐丽君 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期308-310,共3页
目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶-2(COX-2)的影响,分析PS2、COX-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组... 目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶-2(COX-2)的影响,分析PS2、COX-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组和羟基喜树碱高剂量组,观察移植瘤体生长情况,RT-PCR法检测瘤体内PS2、COX-2 mRNA表达。结果与对照组比,羟基喜树碱低、高剂量组都可使移植瘤体的PS2 mRNA表达增高;COX-2 mRNA表达降低,且瘤体生长减慢,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论羟基喜树碱可降低移植瘤COX-2 mRNA表达,增高移植瘤体的PS2 mRNA表达,并使人胆管癌裸鼠移植瘤生长减慢。 展开更多
关键词 胆管 裸鼠 移植 qbc939细胞 PS2 COX-2
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p27^(kip1)真核表达载体的构建及其对人胆管癌细胞生长的影响 被引量:2
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作者 罗昆仑 马宽生 +2 位作者 何振平 杨金亮 董家鸿 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期405-410,共6页
目的:构建p27^(kip1)真核表达载体并进行基因转染,研究其对人胆管癌细胞生长特性的影响。方法:将人p^(27kip1) cDNA克隆至真核表达载体pClneo的Not I酶切位点中,然后应用DOTAP脂质体将重组质粒转染人胆管癌QBC939细胞中,用G418筛... 目的:构建p27^(kip1)真核表达载体并进行基因转染,研究其对人胆管癌细胞生长特性的影响。方法:将人p^(27kip1) cDNA克隆至真核表达载体pClneo的Not I酶切位点中,然后应用DOTAP脂质体将重组质粒转染人胆管癌QBC939细胞中,用G418筛选抗性细胞克隆,采用PCR、RT-PCR和Western印迹法检测外源性目的基因在靶细胞基因组中的整合及表达,以及转基因细胞对裸鼠致瘤性能力的改变。结果:成功构建p^(27kip1)基因真核表达载体,并将其导入QBC939细胞中。经G418筛选得到稳定表达p^(27kip1)基因的细胞株,p^(27kip1)基因转染细胞生长速度明显减慢,并出现分化的迹象,其裸鼠致瘤性能力明显降低。结论:p^(27kip1)基因具有抑癌基因的作用,在未来胆管癌的基因治疗中可能具有应用前景。 展开更多
关键词 P27^KIP1 基因转染 基因治疗 qbc939 胆管 其核表达载体
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circ_0000615通过靶向miR-432-5p调控胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 关沧海 王海存 +3 位作者 于少博 高欣 姜兴明 孙东升 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期527-533,共7页
目的:探讨circ_0000615在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响和可能的调控机制。方法:通过qPCR检测circ_0000615在正常胆管上皮HIBEC细胞和胆管癌CCLP-1、QBC939、TFK-1和RBE细胞中的表达水平。双荧光素酶... 目的:探讨circ_0000615在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响和可能的调控机制。方法:通过qPCR检测circ_0000615在正常胆管上皮HIBEC细胞和胆管癌CCLP-1、QBC939、TFK-1和RBE细胞中的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000615与miR-432-5p的靶向关系。将si-NC、si-circ_0000615(si-circ-1、si-circ-2)、inhibitor-NC和inhibitor-miR-432-5p转染至CCLP-1和QBC939细胞,转染细胞分为si-NC组、si-circ-1组、si-circ-2组、si-NC+inh-NC组、si-NC+inh-miR-432-5p组和si-circ-1+inh-miR-432-5p组,通过CCK-8、EdU和Transwell实验检测各转染组胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:在胆管癌细胞中circ_0000615呈高表达而miR-432-5p呈低表达(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证实circ_0000615与miR-432-5p之间存在靶向关系(P<0.01);敲减circ_0000615可明显抑制CCLP-1、QBC939细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.05或P<0.01);下调miR-432-5p可部分逆转敲减circ_0000615对胆管癌CCLP-1和QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论:circ_0000615通过靶向miR-432-5p调控胆管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 胆管 CCLP-1细胞 qbc939细胞 环状RNA_0000615 miR-432-5p 增殖 迁移 侵袭
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