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人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响
被引量：
4
1
作者
冯旭
罗俊生
+2 位作者
关宁
霍晓川
王瑞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1609-1613,共5页
目的:以RAW264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法:利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW264.7小...
目的:以RAW264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法:利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW264.7小鼠单核巨噬细胞。24 h后将巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,oX-LDL)(100 mg/L),共同孵育48 h。荧光显微镜观察及Western blot检测细胞内CEH的表达,油红O染色观察细胞内脂滴堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇(Free cholesterol,FC)和胆固醇酯(Cholesterol esters,CE)含量。结果:转染72 h后,荧光细胞数最多,转染率接近40%。Western blot检测显示,hCEH蛋白在鼠巨噬细胞内大量表达并部分抑制鼠胆固醇酯水解酶(Cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达。转染hCEH组与ox-LDL诱导组相比,油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量明显下降。结论:hCEH基因在RAW264.7小鼠单核巨噬细胞内成功表达,减少细胞内胆固醇水平,抑制泡沫细胞的形成。
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关键词
胆固醇酯水解酶
氧化低密度脂蛋白
泡沫细胞
胆固醇
代谢
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职称材料
人胆固醇酯水解酶对泡沫细胞的影响及相关机制的研究
2
作者
关宁
王超
+2 位作者
霍晓川
顾立学
罗俊生
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期773-776,共4页
目的探讨人胆固醇酯水解酶（hCEH）表达对泡沫细胞的影响及相关机制。方法利用含hCEH的慢病毒转染RAW264．7小鼠单核巨噬细胞，转染成功后巨噬细胞泡沫化。油红O染色和高效液相色谱分析hCEH对细胞内脂滴堆积情况及游离胆固醇含量变化的...
目的探讨人胆固醇酯水解酶（hCEH）表达对泡沫细胞的影响及相关机制。方法利用含hCEH的慢病毒转染RAW264．7小鼠单核巨噬细胞，转染成功后巨噬细胞泡沫化。油红O染色和高效液相色谱分析hCEH对细胞内脂滴堆积情况及游离胆固醇含量变化的影响；Western blot检测ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）、ATP结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达情况。结果转染72h后，荧光细胞数量最多，接近50％，hCEH在细胞内大量表达；随着时间的延长，油红O染色阳性细胞数逐渐减少，细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量逐渐下降；Western blot显示在0～8h，ABCA1和ABCG1表达逐渐增加，8h达高峰，以后逐渐减少。结论hCEH表达可以促进巨噬细胞表面ABCA1、ABCG1的表达，并且ABCA1、ABCG1之间存在一定的协同性，从而有效增加了游离胆固醇外流、减少胆固醇酯在细胞内聚积，抑制泡沫细胞形成。
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关键词
人
胆固醇酯水解酶
ATP结合盒转运蛋白A1
ATP结合盒转运蛋白G1
游离
胆固醇
泡沫细胞
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职称材料
NCEH1基因在肝癌组织与细胞系中的表达及生物学作用
被引量：
1
3
作者
曾裕文
张芳雍
+1 位作者
谭国钳
吴帆
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021年第8期1867-1872,共6页
目的了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1,NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平,观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。方法选取2013年1月-2019年6月在暨...
目的了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1,NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平,观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。方法选取2013年1月-2019年6月在暨南大学附属广州红十字会医院手术治疗的32例肝癌患者标本及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因的相对表达量。从ICGC数据库下载截至2020年9月份的肝癌样本基因表达数据,应用R软件整理数据,筛选出每个样本中NCEH1基因表达量,分别采用配对Wilcoxon符号秩检验和Wilcoxon秩和检验分析肝癌与癌旁组织间的差异。采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因在SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B人肝癌细胞系和HL7702正常人肝细胞系中的表达水平。通过慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建NCEH1基因敲减的SMMC-7721人肝癌细胞系,分为NCEH1敲减组(KD组)和阴性对照组(NC组),以实时荧光定量PCR法检测NCEH1基因的敲减效率,再以MTT检测实验、Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测、划痕愈合实验、Transwell实验和Transwell侵袭小室实验检测2组SMMC-7721肝癌细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭能力,采用t检验对两组间数据进行统计学分析。结果NCEH1基因在肝癌组织中的平均表达量高于癌旁组织(本院标本Z=2.263,P=0.024,ICGC数据库U=18768,P<0.001)。NCEH1基因在中等侵袭转移潜能的SMMC-7721细胞系中的表达量最高;在低侵袭转移潜能的Bel-7402和HepG2细胞系中的表达水平次之,在无侵袭转移潜能的Hep3B细胞系中的表达水平最低。KD组SMMC-7721细胞中NCEH1基因的表达水平明显低于NC组(t=11.578,P=0.0003),NCEH1基因的敲减效率高达74.0%。较之NC组,KD组细胞生长速度明显减缓(t=32.10,P<0.001);细胞凋亡率明显升高(t=27.303,P<0.001);迁移率、转移和侵袭细胞数均明显降低(t值分别为9.51、38.123、22.331,P值均<0.001)。结论NCEH1基因在肝癌组织及细胞系中的表达明显升高,且可促进肝癌细胞的生长增殖及侵袭转移并抑制凋亡,提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。
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关键词
癌
肝细胞
中性
胆固醇酯水解酶
1
RNA
小分子干扰
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职称材料
题名
人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响
被引量：
4
1
作者
冯旭
罗俊生
关宁
霍晓川
王瑞
机构
辽宁医学院附属第一医院神经外科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1609-1613,共5页
基金
国家自然科学基金(编号:30971023)
辽宁省自然科学基金(编号:20092190)
文摘
目的:以RAW264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法:利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW264.7小鼠单核巨噬细胞。24 h后将巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,oX-LDL)(100 mg/L),共同孵育48 h。荧光显微镜观察及Western blot检测细胞内CEH的表达,油红O染色观察细胞内脂滴堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇(Free cholesterol,FC)和胆固醇酯(Cholesterol esters,CE)含量。结果:转染72 h后,荧光细胞数最多,转染率接近40%。Western blot检测显示,hCEH蛋白在鼠巨噬细胞内大量表达并部分抑制鼠胆固醇酯水解酶(Cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达。转染hCEH组与ox-LDL诱导组相比,油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量明显下降。结论:hCEH基因在RAW264.7小鼠单核巨噬细胞内成功表达,减少细胞内胆固醇水平,抑制泡沫细胞的形成。
关键词
胆固醇酯水解酶
氧化低密度脂蛋白
泡沫细胞
胆固醇
代谢
Keywords
Cholesteryl ester hydrolase
Oxidized low density lipoprotein
Foam cell
Cholesterol metabolism
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R543.5 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
人胆固醇酯水解酶对泡沫细胞的影响及相关机制的研究
2
作者
关宁
王超
霍晓川
顾立学
罗俊生
机构
辽宁医学院附属第一医院神经外科
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期773-776,共4页
基金
国家自然科学基金(81171111)
辽宁省科学事业公益研究基金(2013001009)
文摘
目的探讨人胆固醇酯水解酶（hCEH）表达对泡沫细胞的影响及相关机制。方法利用含hCEH的慢病毒转染RAW264．7小鼠单核巨噬细胞，转染成功后巨噬细胞泡沫化。油红O染色和高效液相色谱分析hCEH对细胞内脂滴堆积情况及游离胆固醇含量变化的影响；Western blot检测ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）、ATP结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达情况。结果转染72h后，荧光细胞数量最多，接近50％，hCEH在细胞内大量表达；随着时间的延长，油红O染色阳性细胞数逐渐减少，细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量逐渐下降；Western blot显示在0～8h，ABCA1和ABCG1表达逐渐增加，8h达高峰，以后逐渐减少。结论hCEH表达可以促进巨噬细胞表面ABCA1、ABCG1的表达，并且ABCA1、ABCG1之间存在一定的协同性，从而有效增加了游离胆固醇外流、减少胆固醇酯在细胞内聚积，抑制泡沫细胞形成。
关键词
人
胆固醇酯水解酶
ATP结合盒转运蛋白A1
ATP结合盒转运蛋白G1
游离
胆固醇
泡沫细胞
Keywords
human eholesteryl ester hydrolase
ATP-binding cassette transporter A1
ATP-binding cassette transporter G1
free cho- lesterol
foam cell
分类号
R651.1 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
NCEH1基因在肝癌组织与细胞系中的表达及生物学作用
被引量：
1
3
作者
曾裕文
张芳雍
谭国钳
吴帆
机构
暨南大学附属广州红十字会医院肝胆外科
广州市红十字会医院肝胆外科
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021年第8期1867-1872,共6页
基金
国家自然科学基金(81974442)
广东省自然科学基金(2020A1515010799)
+1 种基金
广东省医学科学技术研究基金(A2018028)
广州市卫生计生科技项目(2018A011022)。
文摘
目的了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1,NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平,观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。方法选取2013年1月-2019年6月在暨南大学附属广州红十字会医院手术治疗的32例肝癌患者标本及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因的相对表达量。从ICGC数据库下载截至2020年9月份的肝癌样本基因表达数据,应用R软件整理数据,筛选出每个样本中NCEH1基因表达量,分别采用配对Wilcoxon符号秩检验和Wilcoxon秩和检验分析肝癌与癌旁组织间的差异。采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因在SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B人肝癌细胞系和HL7702正常人肝细胞系中的表达水平。通过慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建NCEH1基因敲减的SMMC-7721人肝癌细胞系,分为NCEH1敲减组(KD组)和阴性对照组(NC组),以实时荧光定量PCR法检测NCEH1基因的敲减效率,再以MTT检测实验、Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测、划痕愈合实验、Transwell实验和Transwell侵袭小室实验检测2组SMMC-7721肝癌细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭能力,采用t检验对两组间数据进行统计学分析。结果NCEH1基因在肝癌组织中的平均表达量高于癌旁组织(本院标本Z=2.263,P=0.024,ICGC数据库U=18768,P<0.001)。NCEH1基因在中等侵袭转移潜能的SMMC-7721细胞系中的表达量最高;在低侵袭转移潜能的Bel-7402和HepG2细胞系中的表达水平次之,在无侵袭转移潜能的Hep3B细胞系中的表达水平最低。KD组SMMC-7721细胞中NCEH1基因的表达水平明显低于NC组(t=11.578,P=0.0003),NCEH1基因的敲减效率高达74.0%。较之NC组,KD组细胞生长速度明显减缓(t=32.10,P<0.001);细胞凋亡率明显升高(t=27.303,P<0.001);迁移率、转移和侵袭细胞数均明显降低(t值分别为9.51、38.123、22.331,P值均<0.001)。结论NCEH1基因在肝癌组织及细胞系中的表达明显升高,且可促进肝癌细胞的生长增殖及侵袭转移并抑制凋亡,提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。
关键词
癌
肝细胞
中性
胆固醇酯水解酶
1
RNA
小分子干扰
Keywords
Carcinoma,Hepatocellular
Neutral Cholesterol Ester Hydrolase 1
RNA,Small Interfering
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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操作
1
人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响
冯旭
罗俊生
关宁
霍晓川
王瑞
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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职称材料
2
人胆固醇酯水解酶对泡沫细胞的影响及相关机制的研究
关宁
王超
霍晓川
顾立学
罗俊生
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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职称材料
3
NCEH1基因在肝癌组织与细胞系中的表达及生物学作用
曾裕文
张芳雍
谭国钳
吴帆
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2021
1
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