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EP3受体各亚型对肝癌Huh-7细胞生长和侵袭的作用
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作者 施凤 夏树开 +7 位作者 马娟 张丽 白小明 张海 杜明占 汪亦品 程珊玉 冷静 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期503-509,共7页
目的 :探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用。方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R、EP3-5R、EP3-6R、EP3-7R,应用RT-PCR实验检测转染细胞EP3受体各亚型... 目的 :探讨在肝细胞肝癌Huh-7细胞中前列腺素E2EP3各受体亚型对肿瘤细胞生长与侵袭的作用。方法:对常规培养的人肝细胞肝癌Huh-7细胞,瞬时转染EP3受体的4个亚型EP3-4R、EP3-5R、EP3-6R、EP3-7R,应用RT-PCR实验检测转染细胞EP3受体各亚型的m RNA表达水平;应用Western blot实验检测相关蛋白水平。对转染后的Huh-7细胞,分别给予不同浓度的EP3受体激动剂sulprostone作用24 h,用WST-8细胞增殖测定试剂检测细胞的增殖情况;应用划痕实验检测细胞的侵袭性;应用Western blot实验检测细胞内ERK蛋白磷酸化水平的变化。结果:RT-PCR及Western blot实验结果显示Huh-7细胞EP3受体表达水平明显增高。WST-8实验显示,经10μmol/L sulprostone处理24 h后,过表达EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R亚型的细胞增殖率分别达到126.7%、124.0%、123.8%。划痕实验结果显示,过表达细胞的侵袭性分别增加到135.8%、123.5%、128.7%。Western blot显示,EP3-4R、EP3-5R和EP3-7R转染细胞内ERK磷酸化水平分别上调了54.8%、33.4%、44.3%。而过表达EP3-6受体亚型细胞的增殖率、侵袭率和胞内ERK磷酸化水平改变不明显。结论 :Huh-7肝癌细胞中,EP3-4R、EP3-5R及EP3-7R这3种受体亚型对细胞的生长及侵袭有显著促进作用,而EP3-6R亚型则无明显的促进作用。EP3受体促进肝癌细胞生长和侵袭的作用与ERK激活的现象一致。 展开更多
关键词 细胞肝癌 EP3受体亚型 肿瘤细胞生长与侵袭 ERK
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