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甲状腺乳头状癌中VCAN、THBS2蛋白的表达与肿瘤相关成纤维细胞的关系
1
作者 武胤彤 方艳 +5 位作者 彭薇 汪树静 黄山 王弦 虞红珍 吴强 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第1期60-69,共10页
目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中多功能蛋白聚糖(versican, VCAN)、血小板反应蛋白2(thrombospondin 2, THBS2)的表达及与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)的关系和临床病理意义... 目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中多功能蛋白聚糖(versican, VCAN)、血小板反应蛋白2(thrombospondin 2, THBS2)的表达及与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)的关系和临床病理意义。方法 采用生物信息学技术分析,从基因表达综合数据库(gene expression omnibus, GEO)及癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库提取PTC单细胞测序数据,利用加权基因共表达网络分析识别CAFs相关基因,并对与CAFs相关的枢纽基因进行富集分析;采用免疫组化EnVision法检测130例PTC组织中VCAN、THBS2和α-SMA的表达,采用Masson染色法评估肿瘤间质纤维化程度。分析它们之间的关系,探讨其临床病理意义。结果 生物信息学分析显示VCAN、THBS2位于GEO数据库和TCGA数据库与CAFs相关性最强模块的交集核心基因中,与CAFs显著相关,富集分析显示VCAN、THBS2主要参与细胞外基质相关通路。PTC中CAFs的增生率为83.1%(108/130),VCAN、THBS2阳性率分别为96.9%(126/130)、75.4%(98/130)。PTC的间质纤维化指数中位数为32.4,四分位距为22.7~50.0。CAFs的高度增生与淋巴结转移(P<0.001)、高TNM分期(P<0.05)呈正相关,并且与PTC的组织学亚型相关。VCAN表达、THBS2表达及PTC间质纤维化程度与淋巴结转移均呈正相关(P<0.001,P<0.05,P<0.001),并且THBS2表达及PTC间质纤维化程度与PTC的组织学亚型相关。肿瘤间质α-SMA阳性细胞百分比与VCAN及THBS2的免疫反应评分(IRS)均呈正相关(r_(s)=0.713,P<0.001;r_(s)=0.646,P<0.001)。PTC中Masson染色面积百分比与肿瘤间质α-SMA阳性细胞百分比、VCAN及THBS2的IRS均呈正相关(r_(s)=0.892,P<0.001;r_(s)=0.729,P<0.001;r_(s)=0.616,P<0.001)。结论 VCAN与THBS2可作为评估PTC侵袭性与淋巴结转移的潜在标志物;VCAN、THBS2与CAFs的密切关系为进一步探究PTC的恶性生物学行为提供了依据。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺乳头状癌 肿瘤相关成纤维细胞 VCAN THBS2
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肿瘤相关成纤维细胞中FAP的表达水平对食管鳞癌恶性进展的影响
2
作者 李佳怡 张理 +7 位作者 刘书培 陈攀 张小漫 牛浩瑾 杨平娟 高震东 石林林 高社干 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期13-21,共9页
目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达... 目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。方法首先,通过TCGA数据库评估FAP在31种肿瘤的癌和癌旁组织中表达水平的差异,并分析其对ESCC患者预后的影响;进一步收集高发区ESCC患者癌和癌旁新鲜组织用于原代CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)的提取和分离,利用qRT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光进行表型鉴定和功能分析;收集NFs、CAFs和经FAP抑制剂(FAPi)处理后的CAFs细胞上清,与KYSE150细胞构建体外共培养模型,通过EdU法、CCK-8法、平板克隆、Transwell和划痕实验探究FAP表达水平对KYSE150细胞增殖、侵袭和迁移等恶性行为的影响;最后,通过构建食管癌小鼠皮下荷瘤模型,在体内探究CAFs中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。结果在包含ESCC在内的10种恶性肿瘤中,癌组织中FAP的表达均显著高于癌旁组织,且ESCC中FAP的高表达提示患者的不良预后,并且FAP可作为ESCC患者预后的独立危险因素;从ESCC及其癌旁组织中成功提取、分离出原代CAFs和NFs,经鉴定表型正确;体外共培养结果显示,与NFs相比,CAFs高表达FAP并显著促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力,而FAPi处理可显著抑制上述恶性行为;体内实验证实FAPi和CAFs去激活处理,对荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著抑制作用。结论在ESCC中,FAP的高表达与CAFs的活化和患者的不良预后呈正相关,促进肿瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 食管鳞癌 成纤维细胞活化蛋白 肿瘤相关成纤维细胞
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肿瘤相关成纤维细胞通过SDF-1/CXCR4通路介导胰腺导管腺癌中髓源性抑制细胞的迁移
3
作者 张冰冰 胡豪 +3 位作者 石渝川 刘雪霏 祝峙 张晶 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第7期838-846,共9页
目的探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)调节CD13高表达的中性粒细胞样髓源性抑制细胞(CD13hi-nMDSC)迁移的机制,为PDAC的免疫治疗提供实验依据和潜在分子靶标。方法从5例PDAC患者的胰腺癌组织中分离纯化CAF,用细胞免疫... 目的探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)调节CD13高表达的中性粒细胞样髓源性抑制细胞(CD13hi-nMDSC)迁移的机制,为PDAC的免疫治疗提供实验依据和潜在分子靶标。方法从5例PDAC患者的胰腺癌组织中分离纯化CAF,用细胞免疫荧光、流式细胞术鉴定CAF表型和纯度,用qPCR、ELISA技术检测CAF中相关细胞因子的表达。用Transwell系统构建CAF条件培养基及髓源性抑制细胞(MDSC)迁移系统,观察MDSC的迁移情况,研究上述细胞因子参与调节MDSC迁移的具体作用机制。结果分离的原代CAF表达活化标志物成纤维细胞激活蛋白(FAP)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),对照人包皮成纤维细胞(HFF)不表达FAP和α-SMA。qPCR结果显示CAF中IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA的表达高于HFF;CAF培养上清中IL-6、MCP-1、SDF-1的含量均高于HFF培养上清(均P<0.01),且随培养时间的延长而升高。与HFF条件培养基和普通培养基(RPMI 1640)相比,CAF条件培养基能招募更多的总MDSC和CD13hi-nMDSC(均P<0.01);在培养体系中单独加入SDF-1重组蛋白可以诱导总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移,并且加入SDF-1中和抗体或CXC趋化因子受体4(CXCR4)阻断抗体后能够减少CAF条件培养基诱导的CD13hi-nMDSC迁移(均P<0.01);虽然单独加入MCP-1也可以诱导总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移,但CD13hi-nMDSC迁移的数量明显少于SDF-1实验组;IL-6重组蛋白不能引起总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移。结论CAF可通过SDF-1/CXCR4通路介导PDAC中总MDSC及CD13hi-nMDSC的迁移。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 髓源性抑制细胞 细胞迁移
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^(18)F标记成纤维细胞活化蛋白抑制剂PET/CT对^(18)F-FDG摄取偏低恶性肿瘤的临床诊断价值
4
作者 梁志盈 林培颖 +2 位作者 张汝森 李雯 李伟 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第2期154-161,共8页
目的探讨^(18)F标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(18)F-FAPI)PET/CT对^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)摄取偏低的恶性肿瘤的临床诊断价值。方法前瞻性选取2021年1月-2022年11月在广州医科大学附属肿瘤医院确诊并接受^(18)FFAPI PET... 目的探讨^(18)F标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂(^(18)F-FAPI)PET/CT对^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)摄取偏低的恶性肿瘤的临床诊断价值。方法前瞻性选取2021年1月-2022年11月在广州医科大学附属肿瘤医院确诊并接受^(18)FFAPI PET/CT检查的62例^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤患者。收集所有患者的一般信息、临床和影像资料。参照肿瘤邻近组织对^(18)F-FDG和^(18)F-FAPI的摄取水平,将肿瘤病灶分为高摄取、中摄取与低摄取,其中高摄取病灶设为阳性。记录并比较^(18)F-FDG与^(18)F-FAPI显示的肿瘤原发灶、转移灶数量及其摄取水平。结果62例原发恶性肿瘤对^(18)F-FDG低摄取18例(29.0%)、中摄取44例(71.0%),而对^(18)F-FAPI低摄取1例(1.6%)、中摄取6例(9.7%)、高摄取55例(88.7%)。原发肿瘤^(18)FFAPI的最大标准摄取值(SUV_(max))明显高于^(18)F-FDG(7.5±5.6 vs.3.9±2.1,P<0.001)。^(18)F-FAPI PET检出的阳性淋巴结数明显多于^(18)F-FDG PET(77个vs.38个,P<0.01)。共检出16个远处转移灶,其中^(18)F-FDG PET/CT检出11个(68.8%),^(18)F-FAPI PET/CT检出15个(93.8%),两种示踪剂的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤,^(18)F-FAPI PET/CT可较好地显示肿瘤原发灶和转移灶。^(18)F-FAPI可作为一种较有前景的放射性示踪剂,尤其适用于^(18)F-FDG摄取偏低的恶性肿瘤。 展开更多
关键词 ^(18)F标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂 ^(18)F-氟代脱氧葡萄糖 PET/CT 肿瘤 低摄取
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胃癌Lauren分型中癌相关成纤维细胞分泌因子的差异表达
5
作者 琚璐 任国涛 +4 位作者 郑诗祺 孙也淇 蔡磊 王瑞芬 王立峰 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期324-333,共10页
目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异... 目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异。方法选取手术切除的6例胃癌新鲜标本,其中弥漫型胃癌(diffuse-type gastric cancer,DGC)和肠型胃癌(intestinal-type gastric cancer,IGC)各3例,分别提取DGC-CAFs、IGC-CAFs原代细胞以获得条件培养基,采用高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测DGC-CAFs与IGC-CAFs分泌因子的表达;根据HPLC-MS/MS结果,选择3个差异因子进行免疫组化检测,研究两者在DGC和IGC配对标本中的表达差异;收集GEO和TCGA数据库中1174个胃癌转录组数据,通过ESTIMATE获取基质细胞的分布并对DGC和IGC进行基质评分,应用Kaplan-Meier生存分析研究高基质评分和癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)比例与预后的关系,运用GO富集进行基因和生物学功能分析。结果HPLC-MS/MS分析显示,在DGC-CAFs和IGC-CAFs中均检测到的蛋白仅有10种,即SPARC、COL6A1、COL1A2、COL1A1、COL3A1、FN1、DCN、ACTG1、TIMP1和SHROOM3。在DGC-CAFs中10种蛋白表达均高于IGC-CAFs,且比值>2的蛋白为COL3A1(5.28)、COL1A2(3.98)、DCN(3.71)、TIMP1(3.40)、COL6A1(3.35)、ACTG1(3.13)、COL1A1(2.84)和SHROOM3(2.50)。3例DGC-CAFs中均检测到TUBB和BASP1,1例IGC-CAFs中检测到TUBB,3例IGC-CAFs中均未检测到BASP1。免疫表型:DCN、ACTG1和COL3A1在DGC中的表达高于IGC,与HPLC-MS/MS分析一致。生信分析显示,DGC的基质评分高于IGC,与预后差相关。分析细胞组分发现,相关基因富集在ECM、含胶原的ECM和细胞-细胞连接处,其相关分子功能和生物学过程也以该组分为基础,与HPLC-MS/MS分析一致。结论DGC-CAFs和IGC-CAFs的分泌因子在种类、含量上均存在差异,其差异多集中在ECM相关的信号通路上;基质中高CAFs含量可能通过影响ECM的基因表达和受体通路等影响胃癌患者预后。 展开更多
关键词 胃肿瘤 Lauren分型 癌相关成纤维细胞 高效液相色谱-质谱联用 分泌因子
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癌症相关成纤维细胞在转移前生态位形成中的作用
6
作者 王紫婷 杨贯彤 +4 位作者 樊建春 郜思齐 郭睿 蒋丽娜 郭亚雄 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期127-138,共12页
随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞... 随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)因其在肿瘤进展中的多重作用而备受关注。CAFs通过重塑细胞外基质、诱导上皮间质转化、刺激新生血管生成以及调控肿瘤免疫微环境,推动了PMN的建立和肿瘤细胞的侵袭性行为。这些作用不仅加速了肿瘤的转移进程,还为肿瘤的免疫逃逸创造了条件。本文综述了CAFs在肿瘤转移中的核心机制和功能,探讨了其在癌症研究和治疗中的潜在应用,为抗肿瘤转移策略的开发提供了新的视角与方向。 展开更多
关键词 癌症相关成纤维细胞 转移前生态位 细胞外基质 上皮间质转化 肿瘤免疫
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二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达
7
作者 邵珊 白薇超 +3 位作者 邹鹏程 罗敏娜 赵新汉 雷建军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期428-436,共9页
目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(... 目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 缺氧诱导因子-1Α 二甲双胍 磷酸化-AMPK 肿瘤微环境
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去甲肾上腺素通过肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌A549细胞增殖迁移 被引量：1
8
作者 陈曦 汤涛 +1 位作者 俞鹏翼 王辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2093-2098,共6页
目的研究去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)在调控肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)促进肺癌细胞增殖迁移中的作用。方法培养原代CAFs和肺癌A549细胞,RT-PCR和蛋白质印迹检测NE干预后肿瘤相关成纤维细胞VEGF、IL-... 目的研究去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)在调控肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)促进肺癌细胞增殖迁移中的作用。方法培养原代CAFs和肺癌A549细胞,RT-PCR和蛋白质印迹检测NE干预后肿瘤相关成纤维细胞VEGF、IL-6和IL-8表达,并检测NE对共培养的CAFs和肺癌A549细胞中E-cadherin和Vimentin表达的影响,细胞划痕实验验证NE促进肺癌A549细胞的迁移能力。结果NE可诱导CAFs VEGF、IL-8和IL-6的高表达,并呈浓度依赖性。β肾上腺素受体抑制剂普萘诺尔PROP可抑制CAFs表达VEGF、IL-8和IL-6;NE可抑制与CAFs共培养的肺癌A549细胞E-cadherin表达,并促进Vimentin上调,增强A549细胞的迁移能力。结论NE通过CAFs协同促进肺癌A549细胞增殖迁移能力。 展开更多
关键词 肺癌 肿瘤相关成纤维细胞 去甲肾上腺素 增殖 迁移 肿瘤微环境
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肿瘤相关成纤维细胞在乳腺癌中的作用研究进展 被引量：2
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作者 陈薏竹 朱荔 +1 位作者 韦禹帆 李席如 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期482-488,共7页
乳腺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一。近年来肿瘤的各类研究均取得了诸多进展。随着对肿瘤认识的不断深入,肿瘤细胞生长的微环境对癌症发生发展的影响受到越来越多的关注。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境的重要成分,受肿瘤... 乳腺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一。近年来肿瘤的各类研究均取得了诸多进展。随着对肿瘤认识的不断深入,肿瘤细胞生长的微环境对癌症发生发展的影响受到越来越多的关注。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境的重要成分,受肿瘤调控的同时还可通过多种途径释放细胞因子、外泌体等参与调节免疫微环境、重塑细胞外基质,以及促进肿瘤发生、迁移、侵袭和耐药等过程。本文对CAFs在乳腺癌中作用的最新研究进展进行综述,阐述免疫微环境中CAFs与乳腺癌细胞的相互作用模式,以及CAFs促进乳腺癌细胞增殖、侵袭、转移、耐药等恶性生物学行为的多种途径,探讨以CAFs为靶点进行乳腺肿瘤早期筛查及治疗的潜在效能。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞
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癌相关成纤维细胞与M2型巨噬细胞相互作用促进肿瘤发生发展的研究进展
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作者 吴江为 张巧玲 +4 位作者 杨泽羊 张瑞 张舰 曾柱 吴介恒 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期168-173,共6页
癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境(TME)中主要成分之一。在TME中,肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间或非肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间的相互作用能促进肿瘤发生发展。CAF可与多种免疫细胞之间产生相互作用,通过抑制适应性免疫细胞功能,重塑TME中... 癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境(TME)中主要成分之一。在TME中,肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间或非肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间的相互作用能促进肿瘤发生发展。CAF可与多种免疫细胞之间产生相互作用,通过抑制适应性免疫细胞功能,重塑TME中免疫微环境促进肿瘤的发生发展。其中CAF与巨噬细胞相互作用,并诱导巨噬细胞向M2型极化在促进肿瘤发生发展中起到重要作用。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞(CAF) M2型巨噬细胞 肿瘤微环境(TME) 细胞相互作用 综述
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肿瘤相关成纤维细胞上调hsa-miR-18b-5p靶向FBXL3促进前列腺癌的增殖及转移 被引量：2
11
作者 骆金光 陶怀祥 +3 位作者 闻志远 陈龙 胡昊 关翰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1284-1296,共13页
目的探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制。方法利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养... 目的探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制。方法利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养,验证CAFs对PCa细胞增殖和迁移的影响及对hsa-miR-18b-5p的调控作用;RT-qPCR验证20例患者癌组织及癌旁正常组织、前列腺正常上皮增生细胞及PCa各细胞系中hsa-miR-18b-5p的表达水平;通过脂质体法将阴性对照及hsamiR-18b-5p抑制物分别转染入PCa细胞C4-2、LNCAP中,分为NC inhibitor组和hsa-miR-18b-5p inhibitor组;采用细胞集落形成、CCK-8实验、划痕愈合、Transwell、IC_(50)实验、流式细胞术分别检测C4-2、LNCAP细胞增殖、迁移、侵袭、耐药能力、凋亡和周期;建立PCa裸鼠移植瘤模型,定期测量移植瘤的质量和体积,Kaplan-Meier生存曲线分析裸鼠生存情况;利用靶基因预测分析网站(Targetscan、Mirtarbase、miRDB、miRDIP)预测has-miR-18b-5p的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证hsa-miR-18b-5p与靶基因的靶向关系,RT-qPCR、Western blotting检测各组细胞靶基因的表达水平。结果生物信息学分析结果显示,在PCa中高表达的miRNA有17个,结合差异表达程度以及相关文献筛选出拟研究的基因:miR-148a、miR-17、miR-18b-5p、miR-770、miR-297-3p。CAFs与PCa细胞系共培养后hsa-miR-18b-5p的表达水平升高(P<0.01),且促进PCa细胞的增殖与迁移(P<0.01),敲除has-miR-18b-5p可抵消CAFs对PCa细胞增殖及迁移的影响,确定has-miR-18b-5p为研究基因。与正常前列腺上皮细胞或肿瘤旁组织相比,PCa细胞或肿瘤组织中hsa-miR-18b-5p的表达升高(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制C4-2、LNCAP细胞的增殖、迁移、侵袭以及耐药(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制裸鼠移植瘤质量和体积的增长,增加裸鼠的生存时间(P<0.05)。靶基因预测分析网站显示,FBXL3是hsa-miR-18b-5p的一个潜在作用靶点,双荧光素酶报告基因证实has-miR-18b-5p与FBXL3基因间存在结合位点,且敲除hsa-miR-18b-5p可增加C4-2、LNCAP细胞中FBXL3的蛋白表达(P<0.05)。结论CAFs上调前列腺癌细胞hsa-miR-18b-5p的表达水平,后者可能通过靶向调控FBXL3基因的表达促进PCa细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 hsa-miR-18b-5p 肿瘤相关成纤维细胞 FBXL3 前列腺癌 促癌
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ARL14 在结直肠癌中的表达及其与肿瘤相关成纤维细胞浸润的关系
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作者 卢成陆 孙燕 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期163-169,共7页
目的:探究二磷酸腺苷核糖基化因子样蛋白14(adenosine diphosphate-ribosylation factor-like protein 14,ARL14)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达水平及其与肿瘤微环境中浸润细胞的关系。方法:分析TCGA-CRC数据集中607例CRC... 目的:探究二磷酸腺苷核糖基化因子样蛋白14(adenosine diphosphate-ribosylation factor-like protein 14,ARL14)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达水平及其与肿瘤微环境中浸润细胞的关系。方法:分析TCGA-CRC数据集中607例CRC组织与51例正常组织中ARL14的表达差异及其与预后之间的关系,并预测参与上游表达调控的转录因子和miRNA。应用生物信息学方法分析ARL14表达与肿瘤微环境中各细胞浸润的关系。收集2020年1月至2021年1月于天津医科大学肿瘤医院院行手术治疗的45例CRC患者的肿瘤及配对正常组织,使用免疫组织化学染色检测ARL14、平滑肌肌动蛋白-α(smooth muscle actin-α,α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)的表达情况,验证ARL14表达与成纤维细胞活化的关系。结果:差异分析显示CRC中ARL14的表达量显著低于正常组织(P<0.001)。与ARL14高表达患者相比,低表达患者的预后更差(P=0.025)。MCPcounter分析显示ARL14表达与成纤维细胞的浸润呈负相关(P<0.0001)。免疫组织化学染色结果显示ARL14在肿瘤中的表达显著低于正常组织(P<0.01),ARL14与间质中α-SMA、FAP的表达均为负相关。结论:ARL14可能在CRC中发挥肿瘤抑制基因的作用,并可能抑制成纤维细胞的活化。 展开更多
关键词 ARL14 结直肠癌 肿瘤相关成纤维细胞 肿瘤微环境
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食管癌中肿瘤相关成纤维细胞的异质性及靶向治疗
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作者 徐欣瑶 赵丽娜 +5 位作者 卢佳煜 张旭旭 郑春龙 李家贺 李玮 卢强 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1550-1555,共6页
食管癌(esophageal cancer,EC)是一种高侵袭性的恶性肿瘤,具有发现晚、复发率高及预后较差等特点。食管癌的进展与其肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)作为TME... 食管癌(esophageal cancer,EC)是一种高侵袭性的恶性肿瘤,具有发现晚、复发率高及预后较差等特点。食管癌的进展与其肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)作为TME的关键部分,在癌细胞分泌物、细胞接触信号、机械应力和生理应力等作用下,被募集并重编程,从而表现出异质性。目前,CAFs的异质性提示需要开发针对性的靶向治疗方法,以克服肿瘤微环境中的复杂性和治疗抵抗。未来的研究将更加注重对CAFs异质性的深入理解,以及如何将这些知识转化为临床上的治疗优势。通过识别和功能性地操纵特定的CAF亚群,可以设计出新的治疗策略。为了阐明食管癌中CAFs的复杂性及其作为治疗靶点的潜力,本文综述了近年来关于CAFs的起源、异质性以及其作为靶向治疗的研究进展。 展开更多
关键词 食管癌 肿瘤相关成纤维细胞 异质性 化疗
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肿瘤相关成纤维细胞作为预测非肌层浸润性膀胱癌复发的生物标志物的评估 被引量：1
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作者 印胡滨 李庭浩 +3 位作者 陈俊睿 冯真维 苟欣 何卫阳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期869-874,共6页
目的:探究肿瘤相关成纤维细胞作为生物学标志物预测非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)患者术后复发的临床意义。方法:从基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库下载转录组数据以及对应的临床信息... 目的:探究肿瘤相关成纤维细胞作为生物学标志物预测非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)患者术后复发的临床意义。方法:从基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库下载转录组数据以及对应的临床信息,分析原发性和复发性膀胱癌样本中ACTA2的表达差异。免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测56例膀胱癌样本中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。绘制无复发生存曲线(recurrence-free survival,RFS)和时间依赖性受试者工作特征曲线(time-dependent receiver operating characteristic curves,tdROC)。采用单变量和多变量Cox比例风险回归模型分析α-SMA作为膀胱癌患者术后复发的预测因素的可行性。结果:GSE13507、GSE120739和GSE128959数据集复发组中ACTA2的表达均高于原发组(P<0.05)。IHC结果显示,α-SMA蛋白定位在肿瘤间质,复发组中α-SMA阳性/强阳性占比56.52%,而在原发组中占比16.13%,差异有统计学意义(P<0.001)。α-SMA蛋白表达与年龄、性别、病理分期、分级、肿瘤数量和大小等指标无明显相关性。α-SMA高表达组患者术后RFS较低表达组患者明显缩短[风险比(hazard ratio,HR)=2.76,95%可信区间(confidence interval,CI)=1.21~6.30,P=0.016]。多变量Cox分析显示,α-SMA蛋白表达水平是影响患者术后RFS的独立危险因素(HR=2.47,95%CI=1.02~5.97,P=0.045)。tdROC曲线提示α-SMA对复发的预测能力优于其他临床因素。结论:肿瘤间质的α-SMA蛋白表达水平与膀胱癌复发密切相关,可作为临床预测NMIBC患者术后复发的标志物。 展开更多
关键词 非肌层浸润性膀胱癌 肿瘤相关成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 复发
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肿瘤相关成纤维细胞的生物学特征及Transwell共培养对胃癌细胞生长和转移的影响
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作者 邵久针 王颖钰 +2 位作者 印鑫 许尤琪 沈明勤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1582-1589,共8页
目的 培养原代人胃癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),探究生物学特性及对胃癌细胞影响。方法 CAFs和NFs分离培养后,MTT法绘制生长曲线,免疫荧光法、Western blot、qRT-PC... 目的 培养原代人胃癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),探究生物学特性及对胃癌细胞影响。方法 CAFs和NFs分离培养后,MTT法绘制生长曲线,免疫荧光法、Western blot、qRT-PCR检测α-SMA和Vimentin表达。MGC-803与CAFs、NFs进行Transwell共培养,Transwell法检测胃癌迁移和侵袭,MTT法比较细胞活力及AMD3100影响,pH计、乳酸酶法、DCFH-DA法测定共培养体系酸化、乳酸及活性氧(ROS)含量。结果 CAFs、NFs呈长梭形、多角形等,CAFs增殖和重叠生长现象均高于NFs。CAFs细胞α-SMA和Vimentin为阳性表达,而NFs为低表达或阴性。胃癌细胞活力低密度共培养组>中密度组>高密度组,CAFs共培养体系出现pH值降低,乳酸、ROS含量高现象,且只有CAFs-低密度共培养组促癌效果明显。结论 胃癌细胞与CAFs、NFs共培养受比例影响较大,低密度共培养更能明显提高胃癌细胞的增殖和迁移能力,而高密度共培养可能会反过来抑制肿瘤细胞的增长和转移,可能与乳酸、ROS含量有关。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤相关成纤维细胞 原代培养 Transwell共培养 异质性 反Warburg效应
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人胃癌肿瘤相关成纤维细胞的原代培养和鉴定 被引量：5
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作者 王正彩 翟丽丽 +7 位作者 杨迷玲 韩伟 王瑞芬 单丽辉 齐蕾 柴翠翠 刘明 王立峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期860-862,868,共4页
目的探讨人胃癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)的培养和鉴定方法,并分析其与胃正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)在生物学特性和蛋白表达方面的差异,为其功能研究奠定基础。方法采用组织块法和酶消... 目的探讨人胃癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)的培养和鉴定方法,并分析其与胃正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)在生物学特性和蛋白表达方面的差异,为其功能研究奠定基础。方法采用组织块法和酶消化法进行人胃癌CAFs和NFs的原代培养,通过酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察和多种蛋白的免疫细胞化学染色对其进行鉴定。结果获得纯化的人胃癌CAFs和NFs。胃癌CAFs呈长梭形,大小不等,生长密集,排列紊乱。除表达vimen-tin这一成纤维细胞的标记物外,还表达FAP、SMA,但不表达CK、desmin。结论只要给细胞创造良好的生长条件并规范操作,组织块法和消化法均可成功的培养出人胃癌CAFs和人胃NFs。胃癌CAFs与NFs在形态结构、生长方式和蛋白表达等方面均存在明显差异。 展开更多
关键词 胃肿瘤 原代培养 成纤维细胞 肿瘤相关成纤维细胞
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肿瘤相关成纤维细胞对胆囊癌细胞生长和侵袭的影响 被引量：4
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作者 陈晨 慎浩鑫 +4 位作者 陶杰 宋虎伟 马丽 王林 耿智敏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1149-1154,共6页
目的研究人胆囊癌相关成纤维细胞(CAFs)的培养方法及其对胆囊癌细胞生物学行为的影响,探讨CAFs在胆囊癌发生发展中的作用。方法采用酶消化法及组织块法进行人胆囊癌CAFs的原代培养,采用差速贴壁法进行纯化,免疫细胞化学及细胞免疫荧光... 目的研究人胆囊癌相关成纤维细胞(CAFs)的培养方法及其对胆囊癌细胞生物学行为的影响,探讨CAFs在胆囊癌发生发展中的作用。方法采用酶消化法及组织块法进行人胆囊癌CAFs的原代培养,采用差速贴壁法进行纯化,免疫细胞化学及细胞免疫荧光进行鉴定;噻唑蓝(MTT)法检测CAFs对胆囊癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测CAFs对癌细胞侵袭能力的影响。结果酶消化法及组织块法均可获得人胆囊癌CAFs,以酶消化法更为简便、高效;MTT及Transwell侵袭实验证实CAFs可促进胆囊癌细胞的增殖、侵袭能力(P<0.05),差距具有统计学意义。结论通过酶消化法可较为简便地获得人胆囊癌CAFs,CAFs可显著增强胆囊癌细胞增殖、侵袭能力,表明其在胆囊癌发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 胆囊癌 原代培养 肿瘤相关成纤维细胞 增殖 侵袭
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肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1 被引量：6
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作者 何海洋 齐陆玉 +1 位作者 肖永生 侯伊玲 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期293-297,共5页
背景与目的肿瘤相关成纤维细胞(tumor-associated fibroblasts,TAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,可抑制免疫细胞的功能。在肿瘤免疫中CD8+T细胞发挥重要的作用,T细胞膜表面程序性死亡因子1(programmed death factor 1,PD-1),与其配体PD-... 背景与目的肿瘤相关成纤维细胞(tumor-associated fibroblasts,TAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,可抑制免疫细胞的功能。在肿瘤免疫中CD8+T细胞发挥重要的作用,T细胞膜表面程序性死亡因子1(programmed death factor 1,PD-1),与其配体PD-L1(programmed death factor ligand 1,PD-L1)结合对T细胞的激活起负调节作用。本研究旨在探讨TAF对肺癌细胞PD-L1表达的影响。方法我们以肺癌细胞株H1975、H520和TAF细胞进行Transwell非接触式共培养48 h的H1975、H520细胞为实验组,单独培养的H1975、H520细胞为对照组,两组培养条件一致。倒置显微镜计数实验组和对照组H1975、H520细胞数、流式细胞仪分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1的蛋白表达率、RT-PCR分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1 m RNA的表达。结果每100μm2细胞计数,H1975细胞实验组为(46±21)个,对照组为(16±5)个(P<0.05);H520细胞实验组为(38±10)个,对照组为(12±5)个(P<0.05)。PD-L1蛋白表达率,H1975细胞实验组为(20.93%±3.54%),对照组为(12.58%±2.52%)(P<0.05);H520细胞实验组(19.26%±3.04%),对照组为(11.60%±2.65%)(P<0.05)。m RNA表达水平,H1975细胞实验组为(16.45±1.25)pg/m L,对照组为(7.78±1.27)pg/m L(P<0.05);H520细胞实验组为(15.38±2.02)pg/m L,对照组为(7.20±1.58)pg/m L(P<0.05)。结论 TAF促进肺癌细胞株H1975、H520的生长,增强细胞株PD-L1表达。 展开更多
关键词 肺肿瘤 肿瘤相关成纤维细胞 PD-1/PD-L1 肿瘤免疫逃逸
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癌相关成纤维细胞与肿瘤细胞相互作用对肿瘤发生发展的影响 被引量：7
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作者 武剑 邓红 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第2期212-217,共6页
间质细胞与细胞外基质成分构成的肿瘤微环境对肿瘤细胞的生长、浸润和转移具有重要作用。特征性间质改变通常伴随甚至先于上皮细胞的恶变。这一过程中的关键成分——活化的成纤维细胞,又称为肌成纤维细胞或者癌相关成纤维细胞,是肿瘤间... 间质细胞与细胞外基质成分构成的肿瘤微环境对肿瘤细胞的生长、浸润和转移具有重要作用。特征性间质改变通常伴随甚至先于上皮细胞的恶变。这一过程中的关键成分——活化的成纤维细胞,又称为肌成纤维细胞或者癌相关成纤维细胞,是肿瘤间质中数量最丰富的细胞类型,它们通过细胞与细胞间相互接触,在各种可溶性因子的媒介作用下,促进上皮细胞恶性转化。文中主要介绍癌相关成纤维细胞及其在肿瘤发生发展中的作用。 展开更多
关键词 成纤维细胞 肿瘤 癌相关成纤维细胞 肌成纤维细胞 细胞间相互作用 生长因子 综述
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喉肿瘤相关成纤维细胞促进原代喉鳞状细胞癌细胞体外生长 被引量：1
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作者 王媚 吴春萍 +2 位作者 曹晓娟 郑文伟 范国康 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期177-182,200,共7页
目的验证喉肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)对原代培养的喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞的体外生长是否有促进作用。方法选取20例喉癌临床标本进行原代培养,将生长出的原代喉癌细... 目的验证喉肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)对原代培养的喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞的体外生长是否有促进作用。方法选取20例喉癌临床标本进行原代培养,将生长出的原代喉癌细胞中的CAFs通过差速消化法去除后继续单独培养,相差显微镜观察喉癌细胞在传代培养过程中的形态学变化,流式细胞仪检测喉癌细胞在传代过程中凋亡细胞比例的变化,Western blot检测喉癌细胞在传代过程中凋亡蛋白Caspase 3表达水平的变化,以始终与CAFs共培养传代的喉癌细胞作为对照。结果与CAFs分离后喉癌原代细胞在体外传代培养过程中生长活性很快下降,多数在3代以内停止生长。相差显微镜观察到形态学上凋亡漂浮的喉癌细胞逐代增多,流式细胞仪检测到的凋亡细胞比例逐代增加,Western blot检测到的Caspase 3表达水平逐代增加;而始终与CAFs共培养生长的LSCC细胞在传代过程中生长活性却无明显下降(P<0.05)。结论喉肿瘤相关成纤维细胞对体外原代培养的LSCC细胞的生长具有明显的促进作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 喉鳞状细胞癌 原代培养 凋亡
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