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肿瘤相关抗原基因HCA520重组蛋白的表达纯化及其肝癌患者血清中相应抗体的分析
被引量：
7
1
作者
韩克军
杨美香
+2 位作者
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期31-35,共5页
HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构...
HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构建了GST融合表达载体并且用亲和层析的方法纯化表达的融合蛋白 .最后用Western印迹检测了重组蛋白的免疫反应性 ,用斑点印迹检测了肝癌病人血清中HCA5 2 0的天然抗体的存在情况 .结果表明 ,HCA5 2 0在各种组织中呈丰度差异分布 ,构建好的pGEX 4T 3重组载体经IPTG诱导后高效表达GST HCA5 2 0融合蛋白 ,其分子量约 4 9kD .经GST Agarose亲和层析 ,重组蛋白得到高度纯化 .Western印迹证实 ,纯化蛋白为目的重组蛋白 ,重组蛋白具有与天然蛋白相同或相似的免疫反应性 .斑点印迹分析表明 ,2 0份肝癌病人血清中有 1份HCA5 2 0抗体阳性 ,而 4份正常人均为阴性 .HCA5 2 0的足量提供 ,可用以研究其在致癌中的作用 ,并可以免疫动物制备抗体 .它作为抗原 ,分析其抗体在不同肿瘤病人中的表达情况 。
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关键词
HCA520
肿瘤相关性抗原
重组融合蛋白
免疫反应性
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职称材料
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
被引量：
4
2
作者
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期50-54,共5页
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重...
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。
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关键词
HCA519
肿瘤相关性抗原
重组蛋白
免疫反应性
昆虫细胞
表达
纯化
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职称材料
题名
肿瘤相关抗原基因HCA520重组蛋白的表达纯化及其肝癌患者血清中相应抗体的分析
被引量：
7
1
作者
韩克军
杨美香
王歈
李燕
陈慰峰
机构
北京大学医学部免疫学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期31-35,共5页
基金
国家"973"基金资助项目 (No .G19990 5 3 90 4)
北京市自然科学基金资助项目 (No .70 0 10 0 2 )~~
文摘
HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构建了GST融合表达载体并且用亲和层析的方法纯化表达的融合蛋白 .最后用Western印迹检测了重组蛋白的免疫反应性 ,用斑点印迹检测了肝癌病人血清中HCA5 2 0的天然抗体的存在情况 .结果表明 ,HCA5 2 0在各种组织中呈丰度差异分布 ,构建好的pGEX 4T 3重组载体经IPTG诱导后高效表达GST HCA5 2 0融合蛋白 ,其分子量约 4 9kD .经GST Agarose亲和层析 ,重组蛋白得到高度纯化 .Western印迹证实 ,纯化蛋白为目的重组蛋白 ,重组蛋白具有与天然蛋白相同或相似的免疫反应性 .斑点印迹分析表明 ,2 0份肝癌病人血清中有 1份HCA5 2 0抗体阳性 ,而 4份正常人均为阴性 .HCA5 2 0的足量提供 ,可用以研究其在致癌中的作用 ,并可以免疫动物制备抗体 .它作为抗原 ,分析其抗体在不同肿瘤病人中的表达情况 。
关键词
HCA520
肿瘤相关性抗原
重组融合蛋白
免疫反应性
Keywords
HCA 520, tumor related antigen, recombinant protein, immunoreactivity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
被引量：
4
2
作者
王歈
李燕
陈慰峰
机构
北京大学医学部免疫学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期50-54,共5页
基金
国家"973"基金资助项目 (No .G19990 5 390 4)
国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 0 0 15 2 )
文摘
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。
关键词
HCA519
肿瘤相关性抗原
重组蛋白
免疫反应性
昆虫细胞
表达
纯化
Keywords
HCA519,tumor related antigen,recombinant protein,immunoreactivity,insect cells
分类号
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肿瘤相关抗原基因HCA520重组蛋白的表达纯化及其肝癌患者血清中相应抗体的分析
韩克军
杨美香
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
4
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职称材料
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