微小核糖核酸-31对大肿瘤抑制因子2及心肌细胞肥大的调控作用 被引量：1

1

作者 曾俊义 张婉 +4 位作者 丁露 魏云峰 郑泽琪 文通 付勇南 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期177-182,共6页

目的:通过下调肥大心肌细胞中微小核糖核酸(miR)-31的表达,观察miR-31对大肿瘤抑制因子2(LATS2)及心肌细胞肥大的调控作用。方法:体外分离大鼠心肌细胞并连续培养10天,按干预条件不同将心肌细胞分为4组:空白对照组、单纯血管紧张素Ⅱ(An... 目的:通过下调肥大心肌细胞中微小核糖核酸(miR)-31的表达,观察miR-31对大肿瘤抑制因子2(LATS2)及心肌细胞肥大的调控作用。方法:体外分离大鼠心肌细胞并连续培养10天,按干预条件不同将心肌细胞分为4组:空白对照组、单纯血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)干预组、miR-31抑制物慢病毒感染组、阴性病毒感染组。培养第8天实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组心肌细胞miR-31、LATS2及肥大基因心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)表达。培养第10天心肌细胞荧光探针染色观察心肌细胞形态变化。蛋白免疫印迹(Western blot)检测LATS2蛋白表达变化。双荧光素酶报告基因质粒转染293T细胞并检测荧光素酶活性,鉴定miR-3l对LATS2的靶向作用。结果:与空白对照组相比,单纯AngⅡ干预组miR-31、心肌肥大基因ANP、β-MHC表达水平均显著上升(P<0.05),心肌细胞相对表面积明显增大(P<0.05),而LATS2基因及蛋白表达明显下调(P<0.05);与单纯AngⅡ干预组比较,miR-31抑制物慢病毒感染组miR-31、心肌肥大基因ANP、β-MHC表达明显下调(P<0.05),心肌细胞相对表面积减小(P<0.05),而LATS2在基因水平略有上升,蛋白水平则显著上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示TRAF6-3'UTR+miR-146b相对荧光素酶活性较TRAF6-3'UTR+miR-NC显著性下降(P<0.01),LATS2-3'UTR+miR-31相对荧光素酶活性较LATS2-3'UTR-NC+miR-31显著性降低(P<0.01),差异均有统计学意义。结论:下调肥大心肌细胞miR-31表达水平可一定程度逆转心肌细胞肥大,miR-31靶向作用LATS2参与调控心肌细胞的肥大。 展开更多

关键词 核糖核酸类 肿瘤抑制蛋白质类 肌细胞 心脏

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重组人抑癌相关蛋白核苷二磷酸激酶A的原核表达 被引量：2

2

作者 冉延超 王一飞 +4 位作者 熊盛 张美英 黄文韬 罗林波 刘秋英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期954-959,共6页

目的 :为提高表达量 ,简化纯化工艺 ,获得可用于临床研究的重组人NDPK -A蛋白 ,构建带有 6×His纯化标签的原核表达载体 ,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法 :将抑癌基因nm2 3-H1从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标... 目的 :为提高表达量 ,简化纯化工艺 ,获得可用于临床研究的重组人NDPK -A蛋白 ,构建带有 6×His纯化标签的原核表达载体 ,优化表达条件获得产物高表达并鉴定产物活性。方法 :将抑癌基因nm2 3-H1从质粒pBVNMH1中亚克隆于带有纯化标签的表达载体pQE4 0中 ;梯度变化表达条件获得产物高表达 ;镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白 ;Westernblot鉴定产物的免疫原性 ;HPLC测定产物的激酶活性 ;鸡胚尿囊膜试验鉴定产物抑制血管新生的生物活性。结果 :pQE - 4 0中亚克隆的nm2 3-H1序列无误 ;目的蛋白最高表达量可达 4 9 6 % ;纯化的表达产物能与天然NDPK -A的多克隆抗体特异结合 ;酶比活为 4 72U/mg ;具有抑制鸡胚尿囊膜血管新生的活性。结论 :表达质粒pQE -nm2 3H1能高效表达重组人NDPK -A ,纯化工艺简便 ,产物活性与天然NDPK -A无异。 展开更多

关键词 核苷二磷酸激酶 肿瘤抑制蛋白质类

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高良姜素对肝癌细胞抑制作用的机制 被引量：4

3

作者 李程 张惠文 容鹏飞 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1862-1865,共4页

肝细胞癌(HCC)病死率较高,尽管已有较多的治疗手段,但迄今为止HCC的临床治疗效果仍然欠佳,患者预后差。因此,临床上有必要寻找一种治疗HCC的新药以提高患者的生存率。介绍了一种新的抗肿瘤药物高良姜素,其可以通过抑制细胞增殖、促进凋... 肝细胞癌(HCC)病死率较高,尽管已有较多的治疗手段,但迄今为止HCC的临床治疗效果仍然欠佳,患者预后差。因此,临床上有必要寻找一种治疗HCC的新药以提高患者的生存率。介绍了一种新的抗肿瘤药物高良姜素,其可以通过抑制细胞增殖、促进凋亡、诱导自噬,以及抑制转移等途径发挥抗癌作用。除此之外,高良姜素还可抑制肝癌新生血管形成、逆转多药耐药以及加强药物的协同作用等。因此,认为高良姜素具有广阔的临床应用前景,期待更多的研究聚焦于高良姜素抗肝癌细胞的作用机制,为其临床转化应用提供充分的科学依据。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 高良姜素 肿瘤抑制蛋白质类

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新型边缘性脑炎的临床思考 被引量：22

4

作者 宋兆慧 刘磊 王佳伟 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2013年第1期5-11,共7页

新型边缘性脑炎近年来日益受到临床医师的关注,相关抗体主要作用于细胞表面抗原,包括N甲基D天冬氨酸受体、α氨基3羟基5甲基4异唑丙酸受体、γ氨基丁酸B型受体、富亮氨酸胶质瘤失活基因1及接触蛋白相关样蛋白2等。该病主要累及儿童和青... 新型边缘性脑炎近年来日益受到临床医师的关注,相关抗体主要作用于细胞表面抗原,包括N甲基D天冬氨酸受体、α氨基3羟基5甲基4异唑丙酸受体、γ氨基丁酸B型受体、富亮氨酸胶质瘤失活基因1及接触蛋白相关样蛋白2等。该病主要累及儿童和青年,临床表现多样,病情严重,可合并或不合并肿瘤,常规血清学、脑脊液和影像学检查无特异性,若血清和(或)脑脊液检测到相关抗体可明确诊断。对糖皮质激素类药物、血浆置换和免疫球蛋白等免疫疗法,以及外科手术切除肿瘤灶反应良好,但存在复发的可能。本文对新型边缘性脑炎的临床特点和治疗原则进行综述,旨在提高临床诊断准确率和改善患者预后。 展开更多

关键词 脑炎 边缘系统 受体 N甲基D天冬氨酸 受体 GABAB 肿瘤抑制蛋白质类 综述

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抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1抗体相关脑炎癫发作和脑电图特征 被引量：5

5

作者 卢强 关鸿志 +4 位作者 柳青 黄颜 金丽日 周祥琴 崔丽英 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期331-335,共5页

目的总结抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1(LGI1)抗体相关脑炎的癫发作和脑电图特征。方法回顾分析35例经实验室检查明确诊断且随访满2年的抗LGI1抗体相关脑炎患者的临床表现、影像学和脑电图特点、治疗及预后。结果 35例抗LGI1抗体相关脑... 目的总结抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1(LGI1)抗体相关脑炎的癫发作和脑电图特征。方法回顾分析35例经实验室检查明确诊断且随访满2年的抗LGI1抗体相关脑炎患者的临床表现、影像学和脑电图特点、治疗及预后。结果 35例抗LGI1抗体相关脑炎患者中31例(88.57%)表现为癫发作,主要呈现复杂部分性发作;13例(37.14%)表现为面-臂肌张力障碍发作。影像学主要表现为双侧(16例)或单侧(12例)内侧颞叶T2WI和FLAIR成像高信号;18F-脱氧葡萄糖(8F-FDG)PET主要呈现颞叶和(或)基底节区高代谢(22/24例)。31例行视频脑电图监测,23例背景活动异常,呈现弥漫性慢波或以额颞区为主的局灶性慢波;18例表现为以颞前区为主的样放电;22例视频脑电图捕获到发作,其中18例记录到癫发作,13例表现有颞叶起源的复杂部分性发作(10例)或单纯部分性发作(7例),7例单纯部分性发作患者中5例为竖毛发作,4例为肌阵挛发作,1例继发全面性强直-阵挛发作;6例面-臂肌张力障碍发作患者中2例可见继发颞叶起源的样放电。27例患者予抗癫药物治疗,25例癫发作患者中4例发作频率减少≥50%,11例面-臂肌张力障碍发作患者均无效;8例(29.63%)出现过敏反应。35例患者均行免疫调节治疗,33例静脉注射免疫球蛋白、33例予激素、4例予吗替麦考酚酯、2例予硫唑嘌呤,发作频率均减少≥50%。逐渐停用抗癫药物,17例随访1年内停药,26例随访2年时停药。随访2年,29例未再出现癫发作,仅2例进展为慢性癫。结论抗LGI1抗体相关脑炎是具有一定临床特征的自身免疫性边缘性脑炎,典型表现为面-臂肌张力障碍发作和起源于颞叶的癫发作(以竖毛发作为最常见先兆),伴记忆力下降、精神行为异常和低钠血症等。早期诊断、及时予免疫调节治疗,预后良好。 展开更多

关键词 边缘叶脑炎 肿瘤抑制蛋白质类 癫痫 免疫疗法 脑电描记术

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支气管灌洗液抑癌基因过甲基化对肺癌诊断价值的研究 被引量：5

6

作者 段鸿飞 傅瑜 +6 位作者 李琦 赖百塘 汪慧 岳文涛 张洪涛 王小珏 马玙 《中国防痨杂志》 CAS 2009年第5期277-283,共7页

目的探讨支气管灌洗液抑癌基因过甲基化对肺癌诊断的应用价值。方法选取北京市结核病胸部肿瘤研究所收治怀疑肺癌患者78例,包括肺癌51例和良性病变患者27例,从支气管灌洗液上清和细胞提取DNA,对上清游离DNA进行定量分析,并采用NMSP完成... 目的探讨支气管灌洗液抑癌基因过甲基化对肺癌诊断的应用价值。方法选取北京市结核病胸部肿瘤研究所收治怀疑肺癌患者78例,包括肺癌51例和良性病变患者27例,从支气管灌洗液上清和细胞提取DNA,对上清游离DNA进行定量分析,并采用NMSP完成对支气管灌洗液上清和细胞的过甲基化分析,所选择的靶基因包括p16,MGMT以及RASSF1A基因。将NMSP结果与临床诊断比较,计算敏感性和特异性。结果中心型肺癌、周围型肺癌和肺部良性病变支气管灌洗液上清游离DNA含量没有显著差异。支气管灌洗液细胞抑癌基因过甲基化诊断中心型肺癌的敏感性和特异性分别为85.2%和81.5%,诊断周围型肺癌的敏感性和特异性分别为54.2%和81.5%。支气管灌洗液上清和细胞抑癌基因过甲基化诊断中心型肺癌的敏感性和特异性为88.9%和70.4%,诊断周围型肺癌的敏感性和特异性为75.0%和70.4%。结论支气管灌洗液抑癌基因的过甲基化可为肺癌诊断提供帮助。 展开更多

关键词 肺肿瘤 支气管肺泡灌洗液 O(6)-甲基乌嘌呤DNA甲基转移酶 肿瘤抑制蛋白质类 甲基化

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两种ErbB2/Neu阳性-PTEN缺失乳腺癌基因工程小鼠模型的建立及其生物学特征比较 被引量：1

7

作者 王庆飞 丁慧 +1 位作者 刘宝瑞 张葵 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期427-433,共7页

目的：建立两种ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu基因和重组酶Cre表达的FVB／N—MMTV—NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配... 目的：建立两种ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu基因和重组酶Cre表达的FVB／N—MMTV—NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配；或将由内源性启动子驱动活化型ErbB2／Neu基因表达的FVB／N-ErbB2^KI、FVB／N—MMTV—Cre及Flox—PTEN三种基因工程小鼠交配；PCR分别扩增Neu、Cre和PTEN基因，对其子代小鼠进行基因型鉴定；免疫组织化学法检测乳腺组织ErbB2／Neu和PTEN蛋白表达。对两种模型的成瘤时间、肿瘤数目、肺转移等生物学特征进行比较，观察肿瘤组织病理学形态，免疫组织化学法检测肿瘤细胞Ki-67表达，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡水平。结果：经基因型鉴定和组织蛋白表达分析，获得了两种ErbB2／Neu阳性-PTEN纯合型缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型；一是由MMTV外源性启动子同时驱动活化型ErbB2／Neu和Cre表达，抑癌基因PTEN条件性敲除的NIC／PTEN^-/-模型；二是由MMTV-Cre使内源性启动子驱动ErbB2／Neu基因表达，PTEN条件性敲除的ErhB2^KI／PTEN^-/-模型。NIC／PTEN^-/-模型的平均成瘤时间低于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（30d与368d，P〈0．01）；肿瘤数目、肺转移率均高于ErbB2^KI／PTEN^-/-模型（分别为10个与1～2个，75．0％与37．5％，均P〈0．01）；两种模型肿瘤呈现不同的组织病理形态，肿瘤细胞凋亡水平相当（P〉0．05）；NIC／PTEN^-/-模型Ki-67阳性细胞百分率高于ErhB2^KI／PTEN^-/-模型（86．9％±2．8％与37．4％±7．2％，P〈0．01）。结论：两种不同表型的ErbB2／Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠为探索ErbB2／HER2阳性乳腺癌的发生、发展规律及更有效的防治方案提供了理想的动物模型。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 基因 ERBB-2 磷酸单酯水解酶类/生物合成 免疫组织化学 染色体缺失 肿瘤抑制蛋白质类/遗传学 疾病模型 动物 遗传工程

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原发性肝癌组织中PTEN、p27的表达

8

作者 陈伟 孟翔凌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第3期333-335,共3页

目的探讨病理抑癌基因PTEN、p27在原发性肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达与病理学特征、预后的关系及两者的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测5例正常肝组织、10例肝硬化组织、45例原发性肝细胞性肝癌组织中PTEN、p27的表达状况。结果4... 目的探讨病理抑癌基因PTEN、p27在原发性肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达与病理学特征、预后的关系及两者的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测5例正常肝组织、10例肝硬化组织、45例原发性肝细胞性肝癌组织中PTEN、p27的表达状况。结果45例HCC中PTEN、p27蛋白的阳性表达率(51·1%和40·0%)和阳性强度明显低于肝硬化组织(90·0%和100·0%)和正常肝组织(100·0%和100·0%),PTEN、p27蛋白的阳性表达率与组织分化、癌肿直径、有无癌栓密切相关。双变量相关分析,PTEN在肝癌组织中的表达与p27在肝癌组织中的表达呈显著的正相关。结论PTEN、p27在肝癌组织中的表达与其组织分化等病理学特征密切相关。 展开更多

关键词 肝肿瘤/遗传学 基因 肿瘤抑制 肿瘤抑制蛋白质类 基因表达

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Plkl与p21^(WAF1/CIP1)在肝细胞癌中的表达 被引量：3

9

作者 李辉 张婷 +4 位作者 鲁凤民 徐春晖 唐芙爱 陈香梅 马军 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第4期394-396,共3页

目的细胞周期抑制因子p21WAF1/CIP1(p21)可在转录水平抑制Polo-like kinase1(Plk1)基因的表达,本文旨在探讨Plk1和p21蛋白在肝细胞癌中的表达及相关性。方法应用Western Blot方法检测10对原发性肝细胞癌和癌旁组织中Plk1和p21蛋白的表... 目的细胞周期抑制因子p21WAF1/CIP1(p21)可在转录水平抑制Polo-like kinase1(Plk1)基因的表达,本文旨在探讨Plk1和p21蛋白在肝细胞癌中的表达及相关性。方法应用Western Blot方法检测10对原发性肝细胞癌和癌旁组织中Plk1和p21蛋白的表达情况。通过将pFlex-p21表达质粒瞬时转染人肝癌细胞系HepG2细胞,进一步检测p21过表达对Plk1mRNA和蛋白表达的影响。结果 Plk1在10例肝癌组织中的表达均高于配对癌旁组织,p21蛋白在7对肝癌组织中的表达高于配对癌旁组织。HepG2细胞瞬时表达p21质粒后,Plk1的蛋白表达和mRNA水平均无变化(P>0.05)。结论 Plk1和p21在肝细胞癌组织中的表达具有一定的肿瘤特异性。肝癌组织中p21蛋白过表达可能不具有抑制Plk1表达的作用,具体机制还有待于进一步研究。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 基因表达 细胞周期蛋白类 肿瘤抑制蛋白质类 原癌基因蛋白质类

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抗LGI1抗体相关边缘性脑炎临床分析 被引量：4

10

作者 唐佳茜 徐丽 +2 位作者 于之瑶 黄磊 刘芳 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期271-276,共6页

目的探讨抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1 (LGI1)抗体相关边缘性脑炎临床特点。方法与结果2016年6月至2017年10月共诊断与治疗7例抗LGI1抗体相关边缘性脑炎病例,平均发病年龄为(48.29±15.09)岁。呈急性(4例)或亚急性(3例)发病,以癫(?)... 目的探讨抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1 (LGI1)抗体相关边缘性脑炎临床特点。方法与结果2016年6月至2017年10月共诊断与治疗7例抗LGI1抗体相关边缘性脑炎病例,平均发病年龄为(48.29±15.09)岁。呈急性(4例)或亚急性(3例)发病,以癫(?)发作和记忆障碍为主要表现,可伴有面-臂肌张力障碍发作(5例)、精神行为异常或性格改变(4例),或合并难治性低钠血症(2例)、胸腺瘤(1例);脑脊液(6例)或血清(7例)抗LGI1抗体呈阳性;头部MRI检查单侧或双侧颞叶内侧异常信号(6例),脑电图呈连续棘慢复合波和慢波(1例)。大剂量糖皮质激素序贯治疗(6例)有效。7例患者中2例失访,余5例遗留远期记忆障碍(3例)或近期与远期记忆障碍并存(2例),其中1例出院6个月后复发。结论依据特异性临床表现如面-臂肌张力障碍发作、记忆障碍等,结合影像学及脑脊液检查结果可明确诊断;免疫抑制剂可有效改善临床症状与预后。 展开更多

关键词 边缘叶脑炎 肿瘤抑制蛋白质类 抗体 免疫疗法 癫癎 记忆障碍

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人胃癌组织中gp78和KAI1表达水平及其临床意义 被引量：1

11

作者 许福源 李楠 +5 位作者 柴进 张艳梅 唐波 牛嫣阳 彭志红 陈文生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期688-691,共4页

目的检测人正常胃黏膜及胃癌组织中gp78和KAI1表达水平并探讨两者在胃癌发生过程中的临床意义。方法分别应用Westernblot和免疫组织化学方法检测18例正常胃黏膜和65例胃癌组织中gp78和KAI1的表达情况。结果Westernblot结果表明,65例胃... 目的检测人正常胃黏膜及胃癌组织中gp78和KAI1表达水平并探讨两者在胃癌发生过程中的临床意义。方法分别应用Westernblot和免疫组织化学方法检测18例正常胃黏膜和65例胃癌组织中gp78和KAI1的表达情况。结果Westernblot结果表明,65例胃癌组织中有25例(38.5%)gp78水平升高,27例(41.5%)KAI1水平降低,其中13例(20.0%)既出现gp78水平升高又出现KAI1水平降低。与正常胃黏膜组织比较,胃癌组织中gp78的表达水平明显升高(P<0.01),而KAI1的表达水平明显下调(P<0.01)。免疫组织化学提示,65例胃癌组织中21例(32.3%)gp78阳性表达率升高,22例(33.8%)KAI1阳性表达率降低,其中10例(15.4%)既出现gp78阳性表达率升高又出现KAI1阳性表达率降低。Spearman相关性分析表明,胃癌组织中gp78和KAI1表达水平呈现明显的负相关(r=-0.908,P<0.05)。同时,随着淋巴转移、肿瘤浸润以及脉管浸润程度加重,胃癌组织中gp78表达水平明显升高,而KAI1表达水平显著降低。而在年龄、性别等因素上gp78和KAI1表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论gp78和KAI1在胃癌的发生、发展过程中起着重要的作用。gp78的过表达导致抑癌基因KAI1的降解增多可能是胃癌浸润、转移的机制之一。 展开更多

关键词 胃肿瘤 泛素蛋白连接酶类 肿瘤抑制蛋白质类 印迹法 蛋白质 免疫组织化学

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伴单侧基底节区高信号的抗富亮氨酸胶质瘤失活基因1抗体相关脑炎一例

12

作者 陈璇 任鲜卉 邓艳春 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期372-375,共4页

患者男性,51岁,主因抽搐发作伴发意识障碍3月余,于2017年2月17日入院。患者3月余前（2016年11月14日）在工地干活时突然出现四肢抽搐、双眼上翻,伴意识障碍、呼之不应、口吐白沫、喉咙发声,无大小便失禁,持续约10 min后自行缓解,清醒后... 患者男性,51岁,主因抽搐发作伴发意识障碍3月余,于2017年2月17日入院。患者3月余前（2016年11月14日）在工地干活时突然出现四肢抽搐、双眼上翻,伴意识障碍、呼之不应、口吐白沫、喉咙发声,无大小便失禁,持续约10 min后自行缓解,清醒后不能回忆发作,未予特殊处理; 展开更多

关键词 肿瘤抑制蛋白质类 亮氨酸 边缘叶脑炎 病例报告

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