肾综合征出血热病毒对人血管内皮细胞感染性的研究 被引量：8

1

作者 江振友 温筱芸 +1 位作者 林晨 韦静 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期59-62,88,共5页

目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测... 目的　研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒在血管内皮细胞 (HEC)内的增殖 ,及病毒对HEC产生几种细胞因子的影响。方法　采用微量免疫酶斑法检测HFRS病毒A6 9株感染HEC后病毒繁殖动态变化 ,间接免疫荧光法检测HEC内HFRS病毒抗原。ELISA法检测HFRS病毒感染上清液中TNF -α、IL - 6和IFN - β的含量。 结果　病毒感染后 1d即可在培养上清中用微量免疫酶斑法测出病毒 ,病毒滴度 5d达高峰 ,以后下降。在一定范围内病毒产量随病毒感染复数 (multiplicityofinfection ,M0I)的增加而增高。间接免疫荧光法证明感染的HEC胞浆及胞膜上携带肾综合征出血热病毒抗原。电镜和光镜下 ,感染细胞未见明显的形态和结构改变。病毒对HEC产生TNF -α无影响 ;产生IL - 6和IFN - β明显增高。 结论　HFRS病毒可在原始靶细胞HEC内增殖。HFRS病毒感染后所出现的微血管损害可能不是病毒直接损害所致 ,而很可能与间接因素有关。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 人血管内皮细胞感染性 研究 微量免疫酶斑法

在线阅读 下载PDF 职称材料

单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究 被引量：8

2

作者 卫立辛 汪美先 +1 位作者 徐志凯 汪力亚 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期5-10,共6页

HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显... HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100％;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 保护作用 感染乳鼠 单克隆抗体 McAb 抗HFRS病毒 新生乳鼠 保护率 腹腔感染 死亡时间 不同时间 接种时间 免疫血清 保护效果 病毒方法 保护指数 感染后 3D8 多克隆 稀释

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热病毒SEO亚型Gou3株S全基因分析的确证 被引量：2

3

作者 姚智慧 董关木 +1 位作者 俞永新 刘文雪 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期23-25,共3页

目的　为进一步了解Gou3株的分子基础 ,分析S片段全基因序列 ,以确证该株为SEO亚型毒株。方法　从感染的Vero细胞提取总RNA ,RT -PCR产物纯化后克隆于T载体测序。结果　Gou3株S片段的全基因序列共 173 2个核苷酸 ,最大读码框架从其 4 3... 目的　为进一步了解Gou3株的分子基础 ,分析S片段全基因序列 ,以确证该株为SEO亚型毒株。方法　从感染的Vero细胞提取总RNA ,RT -PCR产物纯化后克隆于T载体测序。结果　Gou3株S片段的全基因序列共 173 2个核苷酸 ,最大读码框架从其 4 3到 13 3 2 ,共编码 4 2 9个氨基酸。序列同源比较分析表明 ,Gou3株与HTN型 76- 118株同源性为67 7% ,与SEO型为 88.1%～ 88.3 % ,与 3株SEO型毒株S片段相差高达 11.7%～ 11.9%。其氨基酸序列与 76- 118同源性为 82 .6% ,与SEO型为 97.4 %～ 98.4 %。并绘出了种系发生树。结论　Gou3株S片段全基因的序列分析 ,确证了Gou3株为新发现的SEO型病毒的亚型毒株。GenBank注册号为AF2 8865 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 Gou3株 S片段 序列测定 种系发生树 SEO亚型 流行性出血热

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热病毒对体外培养人血管内皮细胞形态和ATP酶活性的影响 被引量：1

4

作者 姚磊 盛鹏 朱德钟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期21-23,共3页

目的　为研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒致病株和非致病汉坦病毒株 (PHV)对血管内皮细胞 (HEC)形态和ATP酶活性的影响。方法　采用化学酶法测定血管内皮细胞总ATP酶、细胞膜Na+-K+-ATP酶、线粒体Mg2 +-ATP酶的变化 ;光镜和电子显微镜对... 目的　为研究肾综合征出血热 (HFRS)病毒致病株和非致病汉坦病毒株 (PHV)对血管内皮细胞 (HEC)形态和ATP酶活性的影响。方法　采用化学酶法测定血管内皮细胞总ATP酶、细胞膜Na+-K+-ATP酶、线粒体Mg2 +-ATP酶的变化 ;光镜和电子显微镜对细胞的形态改变进行动态观察。结果　HFRS病毒致病株 (A9)感染早期HEC的 3种酶活性下降不甚明显 ,中晚期下降明显 (P <0 .0 5 ) ,相应的细胞超微结构也出现一定程度的改变 ;非致病汉坦病毒株 (PHV)对ATP酶活性及超微结构未见明显改变。结论　HFRS病毒致病株感染后HEC的ATP酶活性下降及超微结构变化可能是HFRS患者血管通透性增加、血浆外渗的原因之一。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 内皮细胞 ATP酶 形态学 酶活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

东北三省6株肾综合征出血热病毒生物学性状的研究

5

作者 杨国平 刘延秋 +10 位作者 谢怀江 王忠辉 任清明 刘国平 王峰 赵越 王银屏 于宁 周青阳 杨青 刘江秋 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期69-72,共4页

肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是我国重点防治的急性传染病,对于流行于不同地区的汉坦病毒(hanatavirus)进行分离和系统地鉴定,可以为HFRS的防治提供科学依据,特别是对流行株血清型及基因型的确定,是研... 肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是我国重点防治的急性传染病,对于流行于不同地区的汉坦病毒(hanatavirus)进行分离和系统地鉴定,可以为HFRS的防治提供科学依据,特别是对流行株血清型及基因型的确定,是研制疫苗和确定防治重点及对策的重要前提,也为研究我国汉坦病毒的遗传和进化特征奠定了基础。研究对6株流行于东北三省的汉坦病毒进行了全面鉴定,其中H8205、H8207株为人源性汉坦病毒,其余均为鼠源性汉坦病毒。研究表明,6株病毒具有病毒型别明确,抗原性较为广谱,免疫原性好,在Vero细胞上适应能力强及病毒滴度高,以及来源及传代历史清楚等特点,适合作为双价HFRS纯化灭活疫苗候选毒株,并且可建立起完善和合格的生产用毒种库,为我国生产以Vero细胞为基质的双价肾综合征出血热纯化灭活疫苗奠定了坚实的基础。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 VERO细胞 生物学性状

在线阅读 下载PDF 职称材料

分泌肾综合征出血热病毒单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的初步建立

6

作者 许辉 汪美先 +1 位作者 薛采芳 安献禄 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期40-40,共1页

本文在己制备了HFRSV多克隆抗独特型抗体的基础上，又制备了HFRSV的单克隆抗独特型抗体，为HFR马的研究开辟了新的途径。

关键词 单克隆抗独特型抗体 肾综合征出血热病毒 杂交瘤细胞系 HFRSV 初步 分泌 多克隆 制备

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用噬菌体肽文库筛选肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽

7

作者 王倩 俞守义 王长军 《医学研究生学报》 CAS 2008年第5期475-479,共5页

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选鉴定肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽。方法：以Prote in-A纯化的肾综合征出血热患者恢复期血清为筛选配基,对经正常人血清预吸附的噬菌体展示随机12肽文库（或次级肽文库）进行生物亲和淘选;夹心... 目的：应用噬菌体展示肽文库筛选鉴定肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽。方法：以Prote in-A纯化的肾综合征出血热患者恢复期血清为筛选配基,对经正常人血清预吸附的噬菌体展示随机12肽文库（或次级肽文库）进行生物亲和淘选;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定所获得克隆的结合特性,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：ELISA测定显示,通过5轮淘选得到的噬菌体克隆半数以上可与筛选血清发生特异性结合;对45个阳性克隆进行序列测定分析,根据其推导的氨基酸序列可大致分为8组,同源性分析显示,Ⅰ-Ⅶ组序列基序可能为LVXKR、LTXR、IXKP、LXPA、VGA、KX IR、EKXP,其中4组基序在病毒结构蛋白氨基酸序列中发现同源区。结论：获得了一组肾综合征出血热病毒（HFRSV）优势B细胞表位肽,HFRSV核蛋白可能是诱导高水平抗体的主要免疫原,研究结果为基于表位的基因工程诊断试剂的研制和多肽疫苗的设计提供依据。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 噬菌体展示肽文库 抗体 表位

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热病毒抗原性的单克隆抗体分析(I)

8

作者 邢峥 宋干 +4 位作者 杭长寿 Sugiyama K 陈伯权 廖化新 傅建林 《中国医学科学院学报》 CAS 1987年第4期277-281,共5页

将我国HFRS各疫区不同宿主(包括家兔、家猫)分离的病毒,苏联棕背(鼠平)分离株,北美草原田鼠分离株和日本HFRS病毒代表株,经HFRS病毒Hantaan-76-118株、SR-11株和A_9株、R_22株多种McAb分析,可分为五型:姬鼠型、大鼠型、棕背(鼠平)型、... 将我国HFRS各疫区不同宿主(包括家兔、家猫)分离的病毒,苏联棕背(鼠平)分离株,北美草原田鼠分离株和日本HFRS病毒代表株,经HFRS病毒Hantaan-76-118株、SR-11株和A_9株、R_22株多种McAb分析,可分为五型:姬鼠型、大鼠型、棕背(鼠平)型、田鼠型和未定型,后者以从湖南疫区病人分离的H_79。株为代表。根据型特异性McAb的比较分析,姬鼠属和大鼠属来源的极少数毒株的抗原性与宿主来源不相一致。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 单克隆抗体 抗原性分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

McAb对肾综合征出血热病毒感染乳鼠的保护作用

9

作者 黄其全 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期18-23,共6页

本文用肾综合征出血热(HFRS)病毒陈株腹腔感染乳鼠,测定单克隆抗体(McAb)对感染乳鼠的保护作用。结果表明,被动使用McAb对感染乳鼠有明显的保护作用。保护力大小与病毒感染剂量、抗体使用剂量及抗体使用时间均有关。本实验测定了25份抗H... 本文用肾综合征出血热(HFRS)病毒陈株腹腔感染乳鼠,测定单克隆抗体(McAb)对感染乳鼠的保护作用。结果表明,被动使用McAb对感染乳鼠有明显的保护作用。保护力大小与病毒感染剂量、抗体使用剂量及抗体使用时间均有关。本实验测定了25份抗HFRS病毒血凝素单克隆抗体(McAb)的保护作用,其中3株有明显的保护作用,并分析了McAb的活体保护作用与其体外血凝抑制活性及中和活性的关系。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒感染 保护作用 抗肾综合征出血热单克隆抗体 抗HFRS病毒血凝素

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用免疫粘连血凝试验进行肾综合征出血热病毒抗原测定和抗原性分析

10

作者 邢峥 宋干 +4 位作者 K.Sugiyama 苏涛 廖化新 傅建林 陈伯权 《中国医学科学院学报》 1986年第6期425-429,共5页

应用免疫粘连血凝试验(IAHA)检测肾综合征出血热病毒抗原。其敏感性比双抗体夹心法ELISA低2~4倍。但方法简单、快速,非特异性弱。实验发现HFRS病毒单克隆抗体不能用于免疫粘连血凝。结果证实了大鼠属和姬鼠属来源的病毒,在IAHA交互滴定... 应用免疫粘连血凝试验(IAHA)检测肾综合征出血热病毒抗原。其敏感性比双抗体夹心法ELISA低2~4倍。但方法简单、快速,非特异性弱。实验发现HFRS病毒单克隆抗体不能用于免疫粘连血凝。结果证实了大鼠属和姬鼠属来源的病毒,在IAHA交互滴定中表现出程度不等的单向交叉反应;它们与从北美草原田鼠分离的病毒PHV株几乎没有交叉反应。IAHA为国内深入进行流行性出血热病毒的抗原分析提供了一新方法。 展开更多

关键词 免疫粘连血凝试验 肾综合征出血热病毒 抗原性分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

地方株肾综合征出血热病毒生物学特性研究

11

作者 孙茂倬 杨光宏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期122-123,共2页

关键词 地方株 肾综合征出血热病毒 生物学特性 肾综合征出血热

在线阅读 下载PDF 职称材料

采用ROC曲线和判别分析对肾综合征出血热的预后研究 被引量：4

12

作者 罗瑞虹 陈幼明 +2 位作者 张宇锋 赵志新 杨绍基 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期481-482,472,共3页

关键词 肾综合征出血热病毒 ROC曲线 预后研究 判别分析 急性病毒性传染病 自然疫源性疾病 syndrome 病毒性出血热 肾脏损害 fever

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热的4周龄长爪沙鼠模型 被引量：6

13

作者 姚苹苹 徐芳 +3 位作者 朱函坪 陆群英 翁景清 朱智勇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期60-61,共2页

目的　肾综合征出血热长爪沙鼠模型的建立。方法　 4周龄左右的长爪沙鼠 ,脑内接种肾综合征出血热 (HFRS)病毒 ,在 - 1、+1、+2、+4天注射环磷酰胺 30mg/kg体重 (第 0天感染病毒 )。结果　沙鼠由隐性感染变为急性致死性感染 ,病死率为 ... 目的　肾综合征出血热长爪沙鼠模型的建立。方法　 4周龄左右的长爪沙鼠 ,脑内接种肾综合征出血热 (HFRS)病毒 ,在 - 1、+1、+2、+4天注射环磷酰胺 30mg/kg体重 (第 0天感染病毒 )。结果　沙鼠由隐性感染变为急性致死性感染 ,病死率为 93%。在病死动物的脑、肺、肝、脾和肾等器官中 ,均检查到HFRS病毒抗原。结论　 4周龄长爪沙鼠模型可用于本病的研究。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 长爪沙鼠 动物模型 环磷酰胺

在线阅读 下载PDF 职称材料

肾综合征出血热患者合并糖代谢紊乱的临床探讨 被引量：2

14

作者 许芳 刘艳 高鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期306-306,共1页

关键词 肾综合征出血热病毒 糖代谢紊乱 临床 胰腺损伤 汉坦病毒感染 糖尿病并发症 汉坦病毒属 布尼亚病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

汉坦病毒核衣壳蛋白mAb B11模拟结合肽的筛选和鉴定

15

作者 王长军 王登高 +4 位作者 唐家琪 余争平 陶开华 郭恒彬 潘秀珍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1442-1442,共1页

目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与肾综合征出血热病毒mAbB11特异性结合的短肽。方法　采用Protein A亲和纯化的单抗为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行生物亲和淘选 ;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ,并进一... 目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与肾综合征出血热病毒mAbB11特异性结合的短肽。方法　采用Protein A亲和纯化的单抗为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行生物亲和淘选 ;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果　通过 4轮淘选 ,ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽多数能与B11单抗特异性地结合 (12 15 ) ;序列分析表明 8个阳性克隆氨基酸序列分为 4组 ;同源性分析显示核心序列可能为 (M F)HR(H T)X(H W )或 (R F)HX(H T)P(W M) (L Y)。 展开更多

关键词 筛选 鉴定 肾综合征出血热病毒 噬菌体展示肽文库 抗原表位 多肽疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因在Sp2/0细胞中的初步表达

16

作者 吴兴安 徐志凯 +6 位作者 阎岩 张芳琳 罗雯 刘勇 白文涛 王海涛 赵茜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期475-476,共2页

目的在前期工作的基础上进一步将人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因转染到鼠骨髓瘤细胞Sp2/0并进行初步表达。方法将含人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因的真核表达载体VκEpSV-neo,用脂质体法转染鼠骨髓瘤细胞Sp2/0用RT-PCR法和免疫组化染色法... 目的在前期工作的基础上进一步将人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因转染到鼠骨髓瘤细胞Sp2/0并进行初步表达。方法将含人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因的真核表达载体VκEpSV-neo,用脂质体法转染鼠骨髓瘤细胞Sp2/0用RT-PCR法和免疫组化染色法检测转染及表达结果。结果RT-PCR和免疫组化染色结果表明人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因不仅已成功地转染进Sp2/0细胞,并得到了良好的表达。结论在鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中成功表达人源性抗HFRS病毒抗体轻链基因,对抗HFRS病毒抗体人源化的研究具有重要意义。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 人源性抗体 轻链 转染 真核表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

单克隆抗体亲和层析法纯化HFRS病毒血凝素抗原的研究

17

作者 汪力亚 汪美先 +1 位作者 王海涛 姜绍谆 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期8-13,共6页

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Weste... 用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Western-blot技术分析该纯化的血凝素抗原，并与同法纯他的正常鼠脑抗原比较，证明谊特异性血凝素抗原分子量为5×10^4道尔顿。用2株抗HFRS病毒以及10株抗HFRS病毒血凝素McAb，以ELISA阻断试验分析纯化50K血凝素，结果育10株McAb可阻断McAb3G1与其结合，其抗碌决定簇之间有部分相同或重叠，提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一蛋白上。以上结果表明，该SOK血疑素蛋白特性及结构均较复杂，尚待进一步研究。 展开更多

关键词 单克隆抗体 亲和层析法 血凝素抗原 肾综合征出血热病毒血凝素

在线阅读 下载PDF 职称材料

HFRS病毒特异性抗体与淋巴细胞亚群检测的意义 被引量：10

18

作者 黄云彤 王晓燕 +2 位作者 马培林 范业宏 张凤民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期26-27,32,共3页

研究了肾综合征出血热病毒的特异抗体与淋巴细胞亚群检测对临床诊断的意义。用ELISA法对 30例临床诊断肾综合征出血热患者进行特异性IgM抗体检测 ,进而用流式细胞仪对IgM抗体阳性患者进行淋巴细胞亚群测定。正常对照 30例 ,均为健康人... 研究了肾综合征出血热病毒的特异抗体与淋巴细胞亚群检测对临床诊断的意义。用ELISA法对 30例临床诊断肾综合征出血热患者进行特异性IgM抗体检测 ,进而用流式细胞仪对IgM抗体阳性患者进行淋巴细胞亚群测定。正常对照 30例 ,均为健康人。肾综合征出血热患者特异性IgM抗体阳性 2 2例 ,检出率为 73 .33 % ,正常对照标本均未检出病毒特异性IgM抗体。肾综合征出血热患者CD4 +细胞百分比较正常对照组降低 ,CD8+细胞百分比较正常对照组增高 ,CD4 +/CD8+比值下降或倒置。肾综合征出血热病毒的特异性IgM抗体特异性强 ,可作为该病早期临床诊断的重要依据。肾综合征出血热患者的免疫功能明显下降 ,对于判定疗效和疾病预后等具有参考价值。 展开更多

关键词 肾综合征出血热 特异性抗体IGM 淋巴细胞亚群 肾综合征出血热病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

用原位RT-PCR分子杂交定位检测螨(革螨、恙螨)原代培养细胞内HV-RNA的研究(Ⅱ) 被引量：3

19

作者 邓小昭 岳莉莉 +2 位作者 张云 朱进 刁振宇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期11-14,共4页

目的　研究革螨、恙螨在传播肾综合征出血热病毒 (Hemorrhagicfeverwithrenalsyndromevirus,HFRSV)中的媒介作用。方法　采用革螨、恙螨饲养繁殖的子代幼虫、若虫和成虫 ,消化后作螨细胞原代培养制螨细胞片 ,用原位RT -PCR分子杂交法检... 目的　研究革螨、恙螨在传播肾综合征出血热病毒 (Hemorrhagicfeverwithrenalsyndromevirus,HFRSV)中的媒介作用。方法　采用革螨、恙螨饲养繁殖的子代幼虫、若虫和成虫 ,消化后作螨细胞原代培养制螨细胞片 ,用原位RT -PCR分子杂交法检测HV -RNA在螨组织细胞内分布和定位。结果　HV -RNA多分布于螨消化系统的上皮细胞 ,卵巢组织细胞内 ;革螨子 4代、子 3代和恙螨若虫组织细胞内HV阳性颗粒较革螨子 2代、子 1代和恙螨幼虫多且密集。结论　革螨、恙螨作为HFRS的生物学媒介有细胞分子水平的直接证据。 展开更多

关键词 革螨 恙螨 肾综合征出血热病毒 细胞 HFRSV 媒介 肾病综合征出血热 原位RT-PCR分子杂交

在线阅读 下载PDF 职称材料

革螨、恙螨体内HFRSV-RNA定位检测方法研究

20

作者 张云 朱进 +2 位作者 吴光华 张家驹 周燕萍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期18-20,共3页

用地高辛素标记肾综合征出血热病毒cDNA分子探针 ,检测肾综合征出血热病毒在革螨、恙螨体内的分布定位 ,并对原位分子杂交的步骤进行研究。结果表明 :病毒核酸信号呈弥散分布 ,主要位于卵巢细胞 ,中肠及支囊细胞。在铺片时 ,明胶 -硫酸... 用地高辛素标记肾综合征出血热病毒cDNA分子探针 ,检测肾综合征出血热病毒在革螨、恙螨体内的分布定位 ,并对原位分子杂交的步骤进行研究。结果表明 :病毒核酸信号呈弥散分布 ,主要位于卵巢细胞 ,中肠及支囊细胞。在铺片时 ,明胶 -硫酸铬钾与多聚赖氨酸的效果相似 ,4%多聚甲醛的固定效果较好 ,可有效防止脱片。预杂交中加入SpermDNA和yeasttRNA ,可有效地减少背景染色 ;42℃杂交 16h ,显色 7h 。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 革螨 恙螨 HFRSV-RNA CDNA

在线阅读 下载PDF 职称材料