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α-平滑肌肌动蛋白对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响 被引量：3
1
作者 索艳 谷优优 王肃 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第30期14-17,共4页
目的探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法培养人肾小管上皮细胞,分为低糖组、高糖组和干扰组。干扰组将α-SMA siRNA转染至肾小管上皮细胞中,高糖组、低糖组细胞均不进行α-SMA转染... 目的探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法培养人肾小管上皮细胞,分为低糖组、高糖组和干扰组。干扰组将α-SMA siRNA转染至肾小管上皮细胞中,高糖组、低糖组细胞均不进行α-SMA转染。转染完成后,高糖组、干扰组细胞用高糖DMEM细胞培养液培养,低糖组细胞用低糖DMEM细胞培养液培养,均培养48 h。采用MTT法检测细胞增殖情况。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率。采用Western blotting法检测细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达,采用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞中ROS水平,采用ELISA法检测上清液TNF-α、IL-8水平。结果高糖组、干扰组细胞增殖能力均低于低糖组(P均<0.01),干扰组细胞增殖能力高于高糖组(P<0.01)。高糖组、干扰组细胞凋亡率均高于低糖组(P均<0.01),干扰组细胞凋亡率低于高糖组(P<0.01)。高糖组、干扰组细胞Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB蛋白表达均高于低糖组(P均<0.01),干扰组细胞Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB蛋白表达均低于高糖组(P均<0.01)。高糖组、干扰组细胞中ROS水平及上清液TNF-α、IL-8水平均高于低糖组(P均<0.01),干扰组细胞中ROS水平及上清液TNF-α、IL-8水平均低于高糖组(P均<0.01)。结论干扰α-SMA后能够逆转高糖对肾小管上皮细胞的增殖抑制和凋亡促进作用,其机制可能与降低细胞内ROS水平及抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 α-平滑肌肌动蛋白 细胞增殖 细胞凋亡 炎症因子
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宫颈微小浸润癌上皮及间质细胞基质金属蛋白酶-2、α-平滑肌肌动蛋白的表达及意义 被引量：2
2
作者 郭业兵 张廷国 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第1期76-78,共3页
目的观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在宫颈高级别上皮内瘤变(CINⅢ)、宫颈微小浸润癌(MIC)上皮及间质细胞的表达情况,探讨二者对MIC鉴别诊断的临床意义。方法选取正常宫颈组织20例(对照组)、CINⅢ50例、MIC 3... 目的观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在宫颈高级别上皮内瘤变(CINⅢ)、宫颈微小浸润癌(MIC)上皮及间质细胞的表达情况,探讨二者对MIC鉴别诊断的临床意义。方法选取正常宫颈组织20例(对照组)、CINⅢ50例、MIC 30例的石蜡标本,采用免疫组化通用二步法检测三种组织上皮及间质细胞中的MMP-2、α-SMA表达,并分析MMP-2与α-SMA表达的关系。结果对照组、CINⅢ组、MIC组上皮、间质细胞MMP-2表达差异有统计学意义(P均<0.01)。三组上皮细胞均无α-SMA表达,三组间质细胞α-SMA表达差异有统计学意义(P<0.01)。三组上皮及间质细胞中MMP-2与α-SMA表达呈正相关(P均<0.05)。结论联合检测宫颈上皮、间质细胞MMP-2、α-SMA表达能有效鉴别CINⅢ与MIC,对指导MIC的临床治疗有重要意义。 展开更多
关键词 宫颈微小浸润癌 宫颈上皮细胞内瘤变 基质金属蛋白酶-2 α-平滑肌肌动蛋白
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转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究 被引量：11
3
作者 张兰兰 刘琼 +2 位作者 于健 唐晓娟 徐静 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第11期1011-1015,共5页
目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT... 目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20 ng·m L-1TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12 h、24 h、48 h、72 h,Real-time PCR检测α-SMA mRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β α-平滑肌肌动蛋白 细胞增殖 近视
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α-平滑肌肌动蛋白在PVR增生膜中的表达以及PDGF对其在人RPE细胞中表达的影响 被引量：5
4
作者 司艳芳 王君 +2 位作者 关娟 韩泉洪 惠延年 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第11期1010-1013,共4页
目的探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)增生膜中的表达以及血小板源性生长因子(PDGF)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达α-SMA的影响。方法通过免疫荧光实验和免疫组化法对14... 目的探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)增生膜中的表达以及血小板源性生长因子(PDGF)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达α-SMA的影响。方法通过免疫荧光实验和免疫组化法对14例PVR患者视网膜表面增生膜(PRM)中α-SMA的表达进行定性及定量分析;用外源性PDGF-BB处理体外培养的人RPE细胞,并通过免疫荧光实验检测PDGF-BB对RPE细胞表达α-SMA的影响。结果免疫组织化学结果显示:α-SMA在14例不同级别的PRM中均有表达,主要分布在胞浆中,但其表达的程度有差异。α-SMA阳性细胞在PVR/C级PRM膜中比率为35/80,在PVR/D级PRM膜中的比率为50/60。免疫荧光定量分析结果显示:α-SMA在C级PRM膜和D级PRM膜中的平均荧光强度分别为12.31和23.09,二者差异有统计学意义(P<0.01)。外源性的PDGF-BB(50μg.L-1)能显著促进人RPE细胞中α-SMA的表达(50μg.L-1PDGF-BB处理前后平均荧光强度分别为10.08和17.23),差异有统计学意义(P<0.05),这种促进作用在培养基中有血清存在时明显增强。结论α-SMA在PVR增生膜中广泛表达,其表达量与PVR病变程度有关,提示α-SMA可作为检测PVR病变程度的一个潜在因子;PDGF促进α-SMA的表达,这提示PDGF在PVR发病中有重要作用,为临床上PVR的预防和治疗提出新的思路。 展开更多
关键词 α-平滑肌肌动蛋白 增生性玻璃体视网膜病变 血小板源性生长因子 人视网膜色素上皮细胞
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下肢静脉曲张患者血管平滑肌细胞结构及α-肌动蛋白表达变化 被引量：2
5
作者 孔滨 张春光 +1 位作者 沈若武 夏玉军 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第23期24-25,共2页
目的进一步探讨下肢静脉曲张的发生机制。方法选用17份曲张大隐静脉和3份正常静脉,应用间苯二酚品红法染色观察血管平滑肌细胞(VSMC)结构,免疫组织化学染色观察其α-肌动蛋白表达情况。结果代偿期曲张静脉中膜内VSMC大量聚集成团,失代... 目的进一步探讨下肢静脉曲张的发生机制。方法选用17份曲张大隐静脉和3份正常静脉,应用间苯二酚品红法染色观察血管平滑肌细胞(VSMC)结构,免疫组织化学染色观察其α-肌动蛋白表达情况。结果代偿期曲张静脉中膜内VSMC大量聚集成团,失代偿期静脉管壁中膜内大VSMC极少见,呈"空泡"样改变;与正常静脉相比,代偿期曲张静脉VSMC内α-肌动蛋白表达明显增高(P<0.05),而失代偿期曲张静脉VSMC内α-肌动蛋白表达则明显降低(P<0.05)。结论曲张静脉VSMC有明显向内膜增殖"迁移"现象,失代偿期α-肌动蛋白数量明显减少;此可能为静脉曲张发生、发展的机制之一。 展开更多
关键词 静脉曲张 平滑肌细胞 α-肌动蛋白
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人脑桥静脉平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达 被引量：2
6
作者 焦轶 庞刚 邓雪飞 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期598-601,共4页
目的：探明人脑桥静脉管壁中平滑肌细胞（SMC）的存在及其分布规律。方法：人脑标本12例，共计62支桥静脉。应用H—E染色、丽春红-维多利亚蓝组合染色观察桥静脉SMC的组织学特点，运用免疫组织化学显色、免疫荧光化学显色和免疫印迹法... 目的：探明人脑桥静脉管壁中平滑肌细胞（SMC）的存在及其分布规律。方法：人脑标本12例，共计62支桥静脉。应用H—E染色、丽春红-维多利亚蓝组合染色观察桥静脉SMC的组织学特点，运用免疫组织化学显色、免疫荧光化学显色和免疫印迹法检测平滑肌特异标记物旷平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果：桥静脉管壁中膜可见散在、孤立的SMC，大多呈纵切面，α-SMA在桥静脉中免疫反应阳性；桥静脉流出端硬脑膜侧α-SMA表达高于蛛网膜侧。结论：桥静脉管壁中有SMC的存在，且分布不对称。 展开更多
关键词 桥静脉 平滑肌细胞 α-平滑肌肌动蛋白 免疫组织化学 人
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5-羟色胺对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响 被引量：1
7
作者 韩新源 陈春燕 +3 位作者 范粉灵 解翠 李秀红 田红燕 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第24期46-48,共3页
目的探讨5-羟色胺(5-HT)对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法分离并培养大鼠肺动脉外膜成纤维细胞。将体外培养的大鼠肺动脉外膜成纤维细胞分为1~6组,2~6组分别加入10^(-9)、10^(-8)、10^... 目的探讨5-羟色胺(5-HT)对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法分离并培养大鼠肺动脉外膜成纤维细胞。将体外培养的大鼠肺动脉外膜成纤维细胞分为1~6组,2~6组分别加入10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5) mol/L 5-HT,1组加等量DMEM培养基,继续培养24 h。采用MTT法观察各组细胞增殖情况(OD490值),采用Transwell小室实验观察各组细胞迁移能力(穿膜细胞数),采用Western blotting法检测各组细胞α-SMA表达。结果 1~6组细胞OD490值分别为0.72±0.04、0.79±0.04、0.84±0.05、0.87±0.04、0.93±0.03、0.94±0.03,穿膜细胞数分别为(9.2±1.6)、(17.2±1.7)、(26.0±2.9)、(34.4±2.5)、(63.6±6.0)、(50.4±6.0)个。OD490值、穿膜细胞数:5组>4组>3组>2组>1组,P均<0.05;5、6组OD490值、穿膜细胞数比较,P均>0.05。1~6组细胞α-SMA相对表达量分别为1.01±0.21、1.18±0.35、1.91±0.28、2.37±0.42、2.78±0.33、2.13±0.40。细胞α-SMA相对表达量:5组>4组>3组>2组>1组,P均<0.05;6组低于5组,P<0.05。结论 10-9~10-6mol/L 5-HT可呈剂量依赖性促进大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移和α-SMA表达。 展开更多
关键词 血管重构 5-羟色胺 肺动脉外模 成纤维细胞 细胞增殖 细胞侵袭 α-平滑肌肌动蛋白 大鼠
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槲皮素对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响 被引量：3
8
作者 张晓暄 那宇 +5 位作者 苗里宁 胡秀丽 张小东 袁洪萍 郑伟 李根 《中国中西医结合肾病杂志》 2006年第10期567-569,F0002,共4页
目的:观察槲皮素(Que)对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏病理和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨槲皮素对肾间质纤维化的保护作用及作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型。将36只大鼠随机分为3组(n=12):假手... 目的:观察槲皮素(Que)对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏病理和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨槲皮素对肾间质纤维化的保护作用及作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型。将36只大鼠随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、槲皮素(剂量100mg·kg-1·d-1)治疗组(Que组)。术后10d以化学比色法测定梗阻侧肾组织匀浆中羟脯氨酸(Hyp)的含量;HE和Masson染色观察大鼠肾脏病理变化;采用免疫组织化学法、Western blot法检测各组大鼠梗阻侧肾脏α-SMA的表达部位及蛋白表达水平。结果:HE和Masson染色联合图像分析显示大鼠UUO术后10d梗阻侧肾脏呈现肾间质纤维化,经Que治疗梗阻侧肾脏病理改变减轻(P<0.05)。免疫组织化学和免疫蛋白印记分析显示经Que治疗梗阻侧肾脏α-SMA染色阳性表达范围和相对表达丰度明显减少(P<0.01)。同时经Que治疗后肾组织匀浆中的Hyp含量降低(P<0.05)。结论:槲皮素可以减轻UUO大鼠肾间质纤维化,其作用机制与抑制肾小管上皮细胞转化成肌成纤维细胞有关。 展开更多
关键词 α-平滑肌肌动蛋白 槲皮素单侧输尿管梗阻 肾间质纤维化
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碱性成纤维细胞生长因子和α-平滑肌肌动蛋白与慢性乙型肝炎病理分期的相关性 被引量：1
9
作者 刘燕超 王翀奎 +3 位作者 叶立红 康海燕 刘莲 梅志勤 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2008年第13期930-932,F0002,共4页
目的观察碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在慢性乙型肝炎患者不同肝纤维化分期(S)的免疫组化表达和定位情况,并探讨二者在肝纤维化进展过程中的作用和二者之间的相关性。方法选取进行肝组织活检的慢性乙型肝... 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在慢性乙型肝炎患者不同肝纤维化分期(S)的免疫组化表达和定位情况,并探讨二者在肝纤维化进展过程中的作用和二者之间的相关性。方法选取进行肝组织活检的慢性乙型肝炎患者111例,对肝组织进行苏木素-伊红染色、Masson三色、网状纤维染色,并进行病理肝纤维化分期;免疫组织化学法测定肝组织中b-FGF和α-SMA在不同时期的表达及定位特点,各组间进行统计分析。结果不同肝纤维化分期b-FGF免疫组化表达强度比较差异有统计学意义(P<0.01);不同肝纤维化分期α-SMA免疫组化表达强度比较差异有统计学意义(P<0.01);b-FGF、α-SMA表达与病理分期均呈正相关(rs=0.953,0.935,均P<0.01),b-FGF及α-SMA之间的表达呈正相关(rs=0.965,P<0.01)。结论肝组织中b-FGF、α-SMA的表达在慢性乙型肝炎肝纤维化发生发展过程中发挥重要作用,b-FGF、α-SMA可能存在协同致纤维化作用,可作为评价肝纤维化严重程度的重要指标之一。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 肝硬化 成纤维细胞生长因子2 α-平滑肌肌动蛋白
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百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义 被引量：9
10
作者 李暖 杨达胜 《中国实用医药》 2008年第34期24-26,共3页
目的观察百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscleactin,α-SMA)表达的影响,探讨百令胶囊肾脏保护作用的可能机制。方法雄性3个月龄SD大鼠90只,随机分为:对照组(30只),模型组(30只),预防组(30只),以腺嘌... 目的观察百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscleactin,α-SMA)表达的影响,探讨百令胶囊肾脏保护作用的可能机制。方法雄性3个月龄SD大鼠90只,随机分为:对照组(30只),模型组(30只),预防组(30只),以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,预防组加以1.5 g/(kg.d)百令胶囊溶于生理盐水灌胃以预防肾小管间质纤维化;对照组以等体积的2%淀粉溶液和生理盐水灌胃。分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen BUN),24 h尿蛋白定量和尿N乙-酰-β-D氨-基葡萄糖苷(N-a-cetylβ--D-glucosam inidase,NAG)酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1(transform ing growth factor-beta1,TGFβ-1)、α-SMA的表达情况。结果①功能学变化:与对照组比较,各时相点模型组、预防组大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高(P<0.01),但预防组低于模型组(P<0.01);模型组、预防组自身对照各指标均较前一时相点升高(P<0.01)。②病理学变化:7周时模型组、预防组即有肾小管间质损害;模型组、预防组自身对照肾小管间质损害均较前一时相点加重(P<0.01),但7、12周时预防组肾小管间质损害均较模型组为轻(P<0.01),17周时两组间差异无统计学意义(P=0.670)。③免疫组化:各时相点模型组、预防组大鼠肾脏TGFβ-1、α-SMA的表达均高于对照组(P<0.01),但预防组均低于模型组(P<0.01),模型组、预防组自身对照均较前一时相点升高(P<0.01),17周时表达量最高。结论百令胶囊可能通过抑制α-SMA,在肾小管间质纤维化早期应用时起到保护作用。 展开更多
关键词 百令胶囊 肾小管间质纤维化 转化生长因子-β1 α-平滑肌肌动蛋白
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活化型肝星状细胞中miRNA-193下调α-平滑肌肌动蛋白的表达 被引量：2
11
作者 王洁 曾宪一 +4 位作者 王晓丹 王慧 柳长柏 吴江锋 张艳琼 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期152-155,共4页
目的：研究活化型肝星状细胞（HSC）中miRNA-193（miR-193）下调肝纤维化相关基因的表达。方法：将大鼠miR-193的前体序列（pre-miR-193）克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，经酶切和DNA测序鉴定，获得质粒pcDNA3．1-miR-193；通过... 目的：研究活化型肝星状细胞（HSC）中miRNA-193（miR-193）下调肝纤维化相关基因的表达。方法：将大鼠miR-193的前体序列（pre-miR-193）克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，经酶切和DNA测序鉴定，获得质粒pcDNA3．1-miR-193；通过脂质体转染法将质粒转染到大鼠的活化型肝星状细胞（HSC-T6）中，采用荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测肝纤维相关基因的表达。结果：构建的真核表达载体pcDNA3．1-miR-193经酶切鉴定及DNA测序显示，目的片段的大小与预期结果一致；荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测显示，重组质粒转染到活化型HSC-T6中后，肝纤维化相关基因的α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的表达呈明显下降趋势，而胶原蛋白IαI和Iα2的下调作用不明显。结论：miR-193能抑制活化型肝星状细胞中肝纤维化相关基因α-SMA的表达。 展开更多
关键词 活化型肝星状细胞 miRNA-193 α-平滑肌肌动蛋白 I型胶原蛋白
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系膜细胞缺氧损伤后抗增殖蛋白、转化生长因子-β_1、α-平滑肌肌动蛋白表达变化 被引量：3
12
作者 宋坤岭 覃远汉 +3 位作者 蒋玲 龚玲 江星伯 余雪云 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第47期28-30,共3页
目的观察系膜细胞(MCs)缺氧损伤后抗增殖蛋白(PHB)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化。方法将体外培养的大鼠MCs随机分为模型组和正常组。正常组在常规条件下培养,不做任何处理;模型组置于缺氧小室中(... 目的观察系膜细胞(MCs)缺氧损伤后抗增殖蛋白(PHB)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化。方法将体外培养的大鼠MCs随机分为模型组和正常组。正常组在常规条件下培养,不做任何处理;模型组置于缺氧小室中(充缺氧气体950 m L/L N2和50 m L/L CO2)密封48 h建立MCs缺氧损伤模型。RT-PCR法检测两组PHB1、PHB2、TGF-β_1、α-SMA mRNA,Western blotting法检测PHB1、PHB2、TGF-β_1、α-SMA、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)蛋白。结果模型组PHB1、PHB2、TGF-β_1、α-SMA mRNA相对表达量分别为0.56±0.04、0.51±0.06、1.45±0.11、7.39±1.72,正常组分别为1.0±0.00、1.0±0.00、1.0±0.00、1.0±0.00,两组比较,P均<0.05。模型组PHB1、PHB2、TGF-β_1、α-SMA、COL-Ⅳ蛋白相对表达量分别为0.47±0.04、0.25±0.02、1.12±0.06、1.35±0.12、0.89±0.07,正常组分别为0.91±0.04、0.56±0.07、0.75±0.05、0.79±0.09、0.52±0.03,两组比较,P均<0.05。模型组PHB1蛋白与TGF-β_1、α-SMA、COL-Ⅳ蛋白表达均呈负相关(r=-0.924、-0.871、-0.840,P均<0.05),PHB2蛋白与TGF-β_1、α-SMA、COL-Ⅳ蛋白表达均呈负相关(r=-0.928、-0.901、-0.821,P均<0.05)。结论系膜细胞缺氧损伤后PHB表达降低,TGF-β_1、α-SMA表达升高,PHB1表达与TGF-β_1、α-SMA表达均呈负相关。 展开更多
关键词 系膜细胞损伤 抗增殖蛋白1 抗增殖蛋白2 转化生长因子-β1 α-平滑肌肌动蛋白 Ⅳ型胶原
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bFGF与ERK1／2阻断剂对人晶状体上皮细胞α平滑肌肌动蛋白mRNA表达的影响 被引量：3
13
作者 杨楠 康刚劲 董敏欁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第4期326-329,共4页
目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)α-平滑肌肌... 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)mRNA表达的影响。方法体外传代及培养HLEC,加入10μg·L-1bFGF及PD98059作用一定时间并根据作用时间进行分组。MTT法检测HLEC数量及存活率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定HLEC中α-SMA mRNA的表达。结果 HLEC的存活率在bFGF作用组中随时间增长而增强,作用6 h时达126.34%,作用1 h组与作用6 h组比较差异有统计学意义(P<0.05);只加PD98059组细胞存活率仅30.03%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。bFGF作用剂量不变的情况下,随着作用时间延长,α-SMA mRNA表达明显增加,作用1 h组与作用6 h组差异有统计学意义(P<0.05);bFGF作用6 h后,α-SMA mRNA值达最高;加阻断剂PD98059作用后,α-SMA mRNA表达减少且随阻断剂作用时间延长表达进一步减少,作用1 h组与作用6 h组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 bFGF对HLEC具有促增殖作用,在低浓度剂量不变的前提下,呈现时间相关性。bFGF可促进HLEC分泌α-SMA,促进HLEC分化,并呈现时间及剂量相关性。 展开更多
关键词 后发性白内障 碱性成纤维细胞生长因子 人晶状体上皮细胞 α-平滑肌肌动蛋白 胞外调节激酶ERK ERK信号 通路阻断剂
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α-平滑肌肌动蛋白在臀肌挛缩症中的表达及意义 被引量：2
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作者 陈根强 潘志军 +1 位作者 周燕 陈丽荣 《中国骨伤》 CAS 2005年第4期219-221,共3页
目的:观察α-平滑肌肌动蛋白(alphasmoothmuscleactin,α-SMA)在臀肌挛缩症的表达、分布。方法:利用免疫组化染色辅以计算机图像定量分析技术,对26例臀肌挛缩症及12例正常臀肌标本α-平滑肌肌动蛋白的表达进行检测。结果:α-SMA在对照... 目的:观察α-平滑肌肌动蛋白(alphasmoothmuscleactin,α-SMA)在臀肌挛缩症的表达、分布。方法:利用免疫组化染色辅以计算机图像定量分析技术,对26例臀肌挛缩症及12例正常臀肌标本α-平滑肌肌动蛋白的表达进行检测。结果:α-SMA在对照组中未见明显表达。12例臀肌挛缩症组织中α-SMA染色阳性,14例臀肌挛缩组织中染色阴性,病变组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);7岁以上组臀肌挛缩症组织α-SMA表达明显减弱,与7岁以下组臀肌挛缩症组织(包括7岁)比较差异有显著性(t=2.364,P=0.028)。结论:①肌纤维母细胞是臀肌挛缩症发病的关键病理因素;②臀肌挛缩症中肌纤维母细胞的表达强度与病程有关,7岁以上组病程较长,表达明显减弱,这给临床治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 α-平滑肌肌动蛋白 臀肌挛缩症 表达及 肌纤维母细胞 α-SMA表达 定量分析技术 免疫组化染色 ACTIN 计算机图像 挛缩组织 7岁以下 病理因素 临床治疗 对照组 显著性 新思路 减弱 病程
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晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PCR反应条件的研究 被引量：1
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作者 熊新春 苗娟 +3 位作者 席祖莲 张海江 胡义珍 魏厚仁 《临床眼科杂志》 2005年第5期469-471,共3页
目的 探讨晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PC反应条件。方法 从培养的人晶状体上皮细胞中提取mRNA，应用设计的引物RT-PCR检测β-肌动蛋白，电泳分析53.2℃、53.9℃、55℃、56.2℃、57.4℃、58.6℃、59.8℃、6... 目的 探讨晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PC反应条件。方法 从培养的人晶状体上皮细胞中提取mRNA，应用设计的引物RT-PCR检测β-肌动蛋白，电泳分析53.2℃、53.9℃、55℃、56.2℃、57.4℃、58.6℃、59.8℃、60℃、62℃、62.7℃不同的退火温度的扩增产物。结果 各退火温度条件下，β-actin扩增产物均形成长度为302bp片段，且未见非特异性扩增产物条带。退火温度为58.6℃时，β-actin扩增产物的条带最清晰。结论 采用本实验中所设计的引物联合58.6℃退火温度等实验条件所扩增的长度为302bp片段，清晰稳定，是晶状体上皮细胞mRNA定量分析中良好的内部参照标准。 展开更多
关键词 晶状体上皮 MRNA Β-肌动蛋白 逆转录-聚合酶链反应 人晶状体上皮细胞 PCR检测 参照标准 定量分析 反应条件 RT
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蝉花菌丝对TGF-β_1作用下的肾小管上皮细胞α-SMA等蛋白及mRNA表达的影响 被引量：15
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作者 刘玉宁 陈以平 +5 位作者 王立红 赵宗江 刘伟敬 王珍 邓跃毅 马雷 《中国中西医结合肾病杂志》 2012年第12期1046-1049,共4页
目的:探讨蝉花菌丝对TGF-β1作用下肾小管上皮细胞α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mRNA表达的影响。方法:以TGF-β1剌激下的肾小管上皮细胞为研究对象,采用血清药理学研究方法和免疫组化、RT-PCR检测技术,观察空白对照组、TGF-β1对照组、... 目的:探讨蝉花菌丝对TGF-β1作用下肾小管上皮细胞α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mRNA表达的影响。方法:以TGF-β1剌激下的肾小管上皮细胞为研究对象,采用血清药理学研究方法和免疫组化、RT-PCR检测技术,观察空白对照组、TGF-β1对照组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组的α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mR-NA表达,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果:TGF-β1剌激下的肾小管上皮细胞α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mRNA的表达与正常组比较明显增加(P<0.01);蝉花大、中、小剂量组均能下调肾小管上皮细胞对α-SMA、LN、FN、ColⅢ蛋白及mRNA的表达,与TGF-β1对照组比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01),并且大剂量的蝉花菌丝组优于虫草菌丝组(P<0.05);不同剂量的蝉花菌丝组存在量效依赖关系。结论:本研究表明蝉花菌丝通过下调TGF-β1刺激下的肾小管上皮细胞对α-SMA、LN、FN、ColⅢ蛋白及mRNA的异常表达而发挥抗肾间质纤维化的药理作用。 展开更多
关键词 蝉花菌丝 肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白 纤维连接蛋白 层黏连蛋白 Ⅲ型胶原
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TGF-β_(1)通过miR-21d-5p调控BMP7表达诱导肾小管上皮细胞增殖及迁移
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作者 陈香文 李惠 +14 位作者 廖湘平 刘黄华 张坚 黄教文 刘志超 张帆 龙圣海 龙英杰 邓华 张嘉 谢先达 许志敏 蒋伟 罗慧敏 陈喆 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第4期330-333,共4页
目的:探讨转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))可能通过微小RNA-21d-5p(miR-21d-5p)对骨形态发生蛋白7(BMP7)的调控,从而对肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的影响及可能机制。方法:观察TGF-β_(1)处理的肾小管上皮细胞HK-2并检测miR-21d-5p... 目的:探讨转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))可能通过微小RNA-21d-5p(miR-21d-5p)对骨形态发生蛋白7(BMP7)的调控,从而对肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的影响及可能机制。方法:观察TGF-β_(1)处理的肾小管上皮细胞HK-2并检测miR-21d-5p的表达,在HK-2细胞中分组转染miR-21d-5p或anti-miR-21d-5p,再使用TGF-β_(1)处理,观察过度表达或抑制表达miR-21d-5p对TGF-β_(1)诱导肾小管上皮细胞的细胞活性及迁移的影响。分析TGF-β_(1)、miR-21d-5p与BMP7的靶向关系。共转染miR-21d-5p和pcDNA3.1-BMP7,或anti-miR-21d-5p和si-BMP7,使用TGF-β_(1)处理,评估TGF-β_(1)、miR-21d-5p与BMP7的在肾小管上皮细胞的增殖以及迁移的相互关系。结果:TGF-β_(1)处理HK-2细胞后,miR-21d-5p表达和迁移细胞数量升高(P<0.05),P21和E-钙黏蛋白(E-cadherin)水平降低(P<0.05)。过度表达miR-21d-5p增加TGF-β_(1)诱导HK-2细胞增殖和迁移上调(P<0.05),降低P21和E-cadherin蛋白表达(P<0.05),过度表达BMP7可以逆转此过程。抑制miR-21d-5p降低TGF-β_(1)诱导HK-2细胞增殖和迁移细胞水平(P<0.05),显著升高P21和E-cadherin蛋白水平(P<0.05),被抑制表达的BMP7可以逆转此过程。结论:TGF-β_(1)可能通过miR-21d-5p靶向调控BMP7表达,从而诱导肾小管上皮细胞增殖及迁移,进一步影响肾脏纤维化进展。 展开更多
关键词 转化生长因子-β_(1) 微小RNA-21d-5p 骨形态发生蛋白7 肾小管上皮细胞 增殖 迁移
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益肾活血胶囊对高同型半胱氨酸血症兔平滑肌细胞增殖及MMP-9基因表达的影响 被引量：7
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作者 刘粉叶 张继东 +1 位作者 胡连海 来丽萍 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期35-37,45,82,共5页
目的探讨益肾活血胶囊对高同型半胱氨酸(Hcy)血症兔平滑肌细胞增殖及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达的影响。方法40只新西兰兔,随机平分为正常组、模型组、益肾活血胶囊小剂量组、益肾活血胶囊大剂量组及西药(叶酸、维生素B6、维生素B... 目的探讨益肾活血胶囊对高同型半胱氨酸(Hcy)血症兔平滑肌细胞增殖及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达的影响。方法40只新西兰兔,随机平分为正常组、模型组、益肾活血胶囊小剂量组、益肾活血胶囊大剂量组及西药(叶酸、维生素B6、维生素B12)组,除正常组外,其他组建立高Hcy血症及动脉粥样硬化(AS)动物模型,然后分别给予相应的药物治疗。高效液相色谱技术检测血浆Hcy浓度,HE染色观察血管形态学变化,透射电镜观察血管中膜平滑肌细胞超微结构,实时定量PCR检测动脉壁MMP-9基因表达。结果益肾活血胶囊和叶酸等维生素均可明显降低血浆Hcy水平,减轻血管内膜增度,抑制平滑肌细胞增生,下调腹主动脉MMP-9基因表达。益肾活血胶囊大剂量组疗效明显优于小剂量组和西药组。结论益肾活血胶囊可明显降低血浆Hcy水平,抑制Hcy诱导的动脉粥样硬化形成,其机制可能与抑制平滑肌细胞增殖,下调MMP-9基因表达有关。 展开更多
关键词 益肾活血胶囊 同型半胱氨酸 动脉粥样硬化 平滑肌细胞 基质金属蛋白酶-9
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Wnt-7a蛋白通过wnt/β-catenin通路抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾脏上皮细胞-间充质细胞转分化 被引量：3
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作者 王国勤 包佩玲 +3 位作者 芮宏亮 杨敏 程虹 谌贻璞 《中国中西医结合肾病杂志》 2015年第7期579-582,I0002,共5页
目的:观察Wnt-7a蛋白对单侧输尿管梗阻模型小鼠肾脏纤维化的拮抗作用及其可能机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Wnt-7a蛋白治疗组,术后7 d行Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化染色检测肾组织E-钙黏素、α... 目的:观察Wnt-7a蛋白对单侧输尿管梗阻模型小鼠肾脏纤维化的拮抗作用及其可能机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Wnt-7a蛋白治疗组,术后7 d行Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化染色检测肾组织E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白的表达,免疫印迹法测定肾皮质中E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白及β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白质表达。结果:与模型组相比,治疗组肾组织间质纤维化相对面积显著减少,α-平滑肌肌动蛋白及波形蛋白的表达显著减少,E-钙黏素表达显著增多(P<0.05)。同时,治疗组肾组织中β-catenin表达较模型组显著减少(P<0.05)。结论:Wnt-7a蛋白可以抑制肾脏上皮细胞-间充质细胞转分化的发生而减轻肾脏纤维化,其可能是通过抑制经典的wnt/β-catenin通路。 展开更多
关键词 Wnt-7a 单侧输尿管梗阻模型 上皮细胞-间充质细胞转分化 肾间质纤维化
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止消通脉宁对转化生长因子-β_1诱导的人肾小管上皮细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及纤连蛋白mRNA表达的影响 被引量：1
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作者 张邦能 杨丽霞 +3 位作者 程涛 刘铜华 吴丽丽 Margetts Peter Joseph 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2012年第11期33-35,共3页
目的探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)mRNA表达的影响。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,分为空白对照组、T... 目的探讨止消通脉宁含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)mRNA表达的影响。方法将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养,分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+10%低剂量止消通脉宁含药血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%中剂量止消通脉宁含药血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+10%高剂量止消通脉宁含药血清)。药物干预24 h后,荧光定量PCR检测ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达。结果 HK-2细胞经TGF-β1诱导后,ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达显著上升,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经止消通脉宁含药血清干预后,其表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白血清无此作用。结论止消通脉宁在一定程度上能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞ColⅠ、ColⅢ和FN的mRNA表达,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化作用。 展开更多
关键词 止消通脉宁 转化生长因子-Β1 人肾小管上皮细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 纤连蛋白
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