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miR-27b-3p调控RUNX1对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症反应的影响
1
作者 韩晓静 布海霞 +2 位作者 王焕 徐可 何国斌 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第3期231-237,共7页
目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染... 目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-27b-3p组(转染miR-27b-3p mimics)、miR-27b-3p+pc-NC组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-NC)、miR-27b-3p+pc-RUNX1组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-RUNX1)。采用qR T-PCR检测miR-27b-3p和RUNX1mR NA表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测上清液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平;Western blot检测细胞中RUNX1、凋亡[剪切的多聚ADP核糖多聚酶(CleavedPARP)、剪切的半光天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)]和纤维化[纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))]相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因、Pulldown分析系膜细胞细胞中miR-27b-3p和RUNX1的调控作用。结果与葡萄糖组相比,高糖组细胞中miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP和Cleaved-caspase 3蛋白水平降低,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1 mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27b-3p组miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平降低(P<0.05)。上调RUNX1表达部分削弱了miR-27b-3p过表达对高糖诱导的系膜细胞增殖和炎症反应的抑制作用。双荧光素酶报告基因、Pull-down实验证实RUNX1是miR-27b-3p的靶标。结论过表达miR-27b-3p可能通过靶向下调RUNX1表达,抑制高糖诱导的系膜细胞增殖、炎症和纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 高糖 增殖 miR-27b-3p runt相关转录因子1
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血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
2
作者 佟彤 叶波 +2 位作者 郎睿 徐建龙 王洪霞 《世界中医药》 北大核心 2024年第22期3473-3478,共6页
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组... 目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。 展开更多
关键词 IGA肾病 血尿安片 滋阴益肾 24 h蛋白定量 肌酐清除率 肾脏病理 肾小球系膜细胞增殖核抗原 荧光染色
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肉桂酰雷公藤内酯醇通过抑制核因子κB (NF-κB)通路下调小鼠肾小球系膜细胞IP-10表达并抑制其增殖 被引量：1
3
作者 林婷 宋艳芳 +1 位作者 陈鹤鸣 林青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期60-65,共6页
目的 探讨肉桂酰雷公藤内酯醇(T32)对γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)在SV40MES13小鼠肾小球系膜细胞表达及促增殖作用的影响。方法 采用(2~30)ng/mL T32和(1~500)ng/mL IP-10与SV40MES13细胞共培养24 h,利用CCK-8法检测细胞生存率确定T32和I... 目的 探讨肉桂酰雷公藤内酯醇(T32)对γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)在SV40MES13小鼠肾小球系膜细胞表达及促增殖作用的影响。方法 采用(2~30)ng/mL T32和(1~500)ng/mL IP-10与SV40MES13细胞共培养24 h,利用CCK-8法检测细胞生存率确定T32和IP-10最佳处理剂量;将对数生长期的SV40MES13细胞随机分为空白组、 1000 U/mLγ干扰素(IFN-γ)刺激组、 IFN-γ联合10μmol/L吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)干预组和IFN-γ联合(2~20)ng/mL T32干预组。IFN-γ刺激24 h后,通过实时荧光定量PCR检测SV40MES13细胞IP-10 mRNA水平,ELISA检测SV40MES13细胞培养上清液IP-10分泌量;IFN-γ刺激20 min后,应用Western blot法检测SV40MES13细胞核因子κB (NF-κB)信号通路相关蛋白核因子κB p65(NF-κB p65)、核因子κB抑制物α(IκBα)及其磷酸化蛋白p-NF-κB p65、 p-IκBα的表达。结果 IFN-γ刺激可促进SV40MES13细胞IP-10 mRNA和蛋白表达增加,与空白组相比,NF-κB p65、 IκBα蛋白的磷酸化水平明显增加。采用特异性通路抑制剂PDTC阻断NF-κB信号通路后,与IFN-γ刺激组相比,SV40MES13细胞IP-10 mRNA和蛋白表达明显降低,NF-κB p65、 IκBα蛋白磷酸化水平下降。与IFN-γ刺激组相比,经(2~20)ng/mL T32干预后,SV40MES13细胞IP-10 mRNA和蛋白表达明显降低,NF-κB p65、 IκBα蛋白磷酸化水平分别下降44.22%和48.59%。(1~500)ng/mL IP-10与SV40MES13细胞共同孵育24 h后,细胞生存率提高,IP-10剂量为10 ng/mL时细胞生存率为119.83%,随后进入平台期;经(4~20)ng/mL T32干预后,细胞生存率与10 ng/mL IP-10刺激组相比明显降低。结论 IFN-γ诱导SV40MES13细胞表达IP-10的作用可被肉桂酰雷公藤内酯醇通过阻断NF-κB信号通路而下调,并抑制IP-10的促增殖作用。 展开更多
关键词 肉桂酰雷公藤内酯醇 γ干扰素诱导蛋白10(IP-10) 核因子κB(NF-κB) 细胞增殖 SV40MES13小鼠肾小球系膜细胞
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洛伐他汀对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期时相的影响 被引量：27
4
作者 李航 李学旺 +1 位作者 段琳 李晨红 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-66,共4页
目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞（HMC）增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用３H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平，以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖，从细胞周期水平，洛伐他汀可使HMC由G１期向... 目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞（HMC）增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用３H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平，以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖，从细胞周期水平，洛伐他汀可使HMC由G１期向S期的进展受阻，这些抑制作用可被外源甲羟戊酸和法呢醇恢复。结论洛伐他汀是HMC增殖的抑制剂，本研究为重新认识和评价他汀类药物在治疗肾脏疾病中的作用提供了一定的理论及实验依据。 展开更多
关键词 洛伐他汀 细胞增殖 细胞周期 肾小球系膜细胞 时相 肾小球肾炎
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内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖
5
作者 李美花 谌贻璞 张志文 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期532-535,共4页
目的 :应用反义寡核苷酸技术 ,对培养的人肾小球系膜细胞 (glomerularmesangialcells,GMC)进行内皮素 1(endothelin ,ET 1)基因表达的抑制试验 ,探讨ET 1基因表达与GMC增殖效应的关系。方法 :以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方... 目的 :应用反义寡核苷酸技术 ,对培养的人肾小球系膜细胞 (glomerularmesangialcells,GMC)进行内皮素 1(endothelin ,ET 1)基因表达的抑制试验 ,探讨ET 1基因表达与GMC增殖效应的关系。方法 :以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方法 ,将前内皮素原 ppET 1的反义寡聚脱氧核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotide ,As ODN)及其对照序列正义寡聚脱氧核苷酸 (senseoligodeoxynucleotide ,Se ODN)、错配寡聚脱氧核苷酸 (mismatcholigodeoxynucleotide ,Mis ODN)分别导入GMC。通过生物素标记的As ODN显色反应 ,观察寡聚脱氧核苷酸的转移效果 ;用半定量反转录聚合酶链反应 (reversetranscription polymerasechainreaction ,RT PCR)检测寡核苷酸链对GMC的 ppET 1mRNA表达的影响 ;用放射免疫分析 (radioimmunoassay ,RIA)观察寡核苷酸链对GMC的ET 1蛋白分泌的作用 ;用氮蓝四唑盐 (MTT)试验分析寡核苷酸链对GMC增殖的效应。结果 :寡核苷酸链被转移入GMC。10nmol·L-1As ODN抑制了GMC的 ppET 1mRNA表达、ET 1蛋白合成和细胞增殖 (各组P <0 .0 5 )。 结论 :特异抑制GMC的 ppET 1基因表达能够抑制其增殖 ,证实GMC产生的ET 1能刺激GMC自身的增殖 ,ET 1是GMC自分泌炎症介质之一。 展开更多
关键词 寡聚脱氧核苷酸 反义 药理学 内皮缩血管肽类 肾小球系膜 药物作用 肾小球肾炎 系膜细胞增殖
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lncRNA-Gm4419对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响 被引量：10
6
作者 易红 彭睿 +4 位作者 孙艳 罗勇军 彭惠民 李爱玲 张政 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期216-222,共7页
目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒... 目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒,并将Gm4419 siRNA和pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒分别转染至高低糖培养的肾小球系膜细胞,Ed U法检测转染后细胞的增殖能力;Western blot检测肾脏纤维标记蛋白的表达水平情况。结果 Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平较正常组及低糖组显著增高(P<0.01)。荧光定量PCR筛选出一条最佳干扰Gm4419的siRNA,转染高糖组后,与高糖mock组或对照组比较,高糖Gm4419 knockdown组细胞增殖能力减弱、纤维化标记蛋白表达减少(P<0.05)。此外,将酶切和测序结果证实构建成功的pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒转染至低糖组细胞,与低糖mock组或对照组相比,低糖Gm4419过表达组细胞增殖能力增强、纤维化标记蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论lnc RNA-Gm4419参与糖尿病肾小球系膜增生和纤维化的调节。 展开更多
关键词 长链非编码RNA Gm4419 肾小球系膜细胞 增殖 纤维化
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氯通道阻滞剂抑制人肾小球系膜细胞增殖 被引量：6
7
作者 焦军东 岳朋 +3 位作者 杜智敏 董德利 艾静 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期86-90,共5页
目的研究氯通道阻滞剂对肾小球系膜细胞增殖的作用。方法细胞计数和3H-TdR参入量测定确定细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果同对照组相比,氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-(3-phenylpropylamino)-benzoicaci... 目的研究氯通道阻滞剂对肾小球系膜细胞增殖的作用。方法细胞计数和3H-TdR参入量测定确定细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果同对照组相比,氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-(3-phenylpropylamino)-benzoicacid,NPPB、尼氟灭酸使人肾小球系膜细胞数和3H-TdR参入量明显减少(P<0·01,n=8),并呈剂量依赖关系,但不增加系膜细胞乳酸脱氢酶释放量(P>0·05,n=8)。NPPB和尼氟灭酸均使细胞周期停滞在G0/G1期(n=3)。结论氯通道阻滞剂NPPB、尼氟灭酸对人肾小球系膜细胞增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 系膜细胞 氯通道 细胞增殖 细胞周期 肾小球肾炎
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鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响 被引量：11
8
作者 范焕芳 陈志强 +3 位作者 张雪娟 张秀君 徐华洲 黄茂 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期183-186,共4页
目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组... 目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组系膜细胞的增殖情况,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ECM中层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量。结果:LPS刺激后MC增殖和系膜基质中LN及Col-Ⅳ的分泌增多,与空白组比较有明显差异(P<0.01)。鳖甲煎丸能抑制正常条件及LPS刺激条件下MC增殖,并对ECM中LN、Col-Ⅳ的表达有抑制作用。结论:鳖甲煎丸能够抑制系膜细胞的增殖,抑制肾小球系膜基质中LN及Col-Ⅳ的表达,减少ECM的积聚,这可能是其防治肾小球疾病,延缓肾小球硬化的部分作用机制。 展开更多
关键词 鳖甲煎丸 增殖 层黏连蛋白 Ⅳ型胶原 人肾小球系膜细胞
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红参发酵产物对高糖下大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质降解的影响 被引量：8
9
作者 曲萌 董佳婧 +4 位作者 姜锐 崔继春 孙坤洋 董志恒 孙立伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期245-249,共5页
目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 m... 目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 mg·L^(-1))FRGE组。四甲基偶氮唑盐(MTT)光吸收法观察各组GMCs的增殖率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养细胞上清中Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)的水平,蛋白免疫印迹技术(Western blotting)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)蛋白表达水平。结果:与NG组比较,HG组GMCs增殖率升高(P<0.01),ColⅣ水平升高(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01);与HG组比较,高糖+不同浓度FRGE组GMCs增殖率均降低(P<0.01),ColⅣ水平降低(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01)。结论:FRGE可通过抑制高糖诱导的大鼠GMCs增殖,促进ECM的降解,延缓DN的发生发展。 展开更多
关键词 红参发酵产物 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 细胞增殖 基质金属蛋白酶
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大鼠Thy-1肾炎增殖病变及sublytic C5b-9致其肾小球系膜细胞增生的实验研究 被引量：6
10
作者 赵聃 李妍 +3 位作者 周建博 张婧 邱文 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1343-1350,共8页
目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用。方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7 d时,取... 目的:检查大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)的增生病变及亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物在GMC增殖中的作用。方法:复制大鼠Thy-1N模型,分别于注射Thy-1抗体后18 h、3 d和7 d时,取肾组织,用real-time PCR和Western blot方法检查其肾组织中细胞增殖指标,即细胞周期蛋白D2(cyclin D2)和增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen,PCNA)的mRNA丰度及蛋白表达水平。用免疫荧光观察肾小球中C5b-9复合物的沉积。同时,使用BrdU掺入法、光镜及电镜观察大鼠肾小球细胞的增殖情况。此外,体外培养大鼠GMC,进行不同分组处理后再给予sublytic C5b-9刺激,用3H-胸腺嘧啶核苷酸掺入法(3H-thymidine incorporation,3H-TdR)检查GMC的增殖情况。结果 :大鼠Thy-1N病变18 h,肾组织中cyclin D2、PCNA表达和肾内BrdU阳性细胞数均开始升高,实验3 d和7 d,其表达进一步提高。同时肾小球内可见C5b-9复合物沉积,部分C5b-9包绕的肾细胞形态完好。另形态学观察还发现,实验18 h,部分GMC溶解坏死,而实验3 d,GMC数量明显增多,7 d增加更为显著。体外实验中,大鼠GMC在sublytic C5b-9刺激后18 h,其细胞增殖水平显著增高,而用sublytic C5b-9刺激GMC产生的培养上清处理正常的GMC后,亦能轻度刺激GMC增殖。结论:大鼠Thy-1N肾小球病变存在早期增殖和继发增生的病理改变,而GMC的早期增殖可能与sublytic C5b-9作用有关。 展开更多
关键词 THY-1肾炎 肾小球系膜细胞 增殖 亚溶解型C5b-9复合物
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IL-1对肾小球系膜细胞增殖和周期素依赖激酶2表达的影响 被引量：4
11
作者 赵景宏 王军平 +1 位作者 曾毅 杨惠标 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期676-678,共3页
目的　探讨白细胞介素 1(IL 1)对肾小球系膜细胞增殖及周期素依赖激酶 2 (CDK2 )表达的影响。方法　利用体外培养的大鼠肾小球系膜细胞 ,分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞仪检测、免疫细胞化学等方法观察IL 1作用前后系膜细胞增殖情况以... 目的　探讨白细胞介素 1(IL 1)对肾小球系膜细胞增殖及周期素依赖激酶 2 (CDK2 )表达的影响。方法　利用体外培养的大鼠肾小球系膜细胞 ,分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞仪检测、免疫细胞化学等方法观察IL 1作用前后系膜细胞增殖情况以及CDK2 的表达变化。结果　IL 1可以明显促进系膜细胞增殖 ,同时伴有CDK2 的表达增高。结论　IL 1对系膜细胞有明显的促增殖作用 ,其机制可能与影响CDK2 的表达有关。 展开更多
关键词 白细胞介素1 CDK2 肾小球系膜细胞 细胞增殖
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氧化苦参碱对脂多糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖p-STAT1/PIAS1信号分子的影响 被引量：5
12
作者 党红星 金玉 +2 位作者 李宇宁 凌继祖 苏婕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1645-1648,共4页
目的观察氧化苦参碱对LPS诱导下HMC增殖时p-STAT1、PIAS1蛋白和mRNA表达情况,探讨其相互关系。方法体外培养HMC,分为空白对照组和LPS模型组及氧化苦参碱干预组,培养12、24、48 h时以MTT法检测HMC的增殖情况,ELISA检测细胞上清Col-Ⅳ含量... 目的观察氧化苦参碱对LPS诱导下HMC增殖时p-STAT1、PIAS1蛋白和mRNA表达情况,探讨其相互关系。方法体外培养HMC,分为空白对照组和LPS模型组及氧化苦参碱干预组,培养12、24、48 h时以MTT法检测HMC的增殖情况,ELISA检测细胞上清Col-Ⅳ含量,收集同时段细胞,提取细胞裂解蛋白和mRNA,采用Western blot检测p-STAT1和PIAS1的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测STAT1和PIAS1 mRNA表达。结果LPS组细胞增殖较对照组显著加快(P<0.01),Col-Ⅳ的表达显著高于对照组(P<0.01);氧化苦参碱干预后细胞增殖和Col-Ⅳ的表达显著较模型组降低(P<0.01)。蛋白和mRNA表达情况:LPS诱导下各时间段p-STAT1表达升高,表达量显著高于对照组(P<0.01),经OM干预后表达显著下降(P<0.01);LPS诱导下PIAS1表达量显著降低(P<0.01),经OM干预,与LPS组相比各时间段均显著上升(P<0.01)。结论氧化苦参碱对LPS诱导的人系膜细胞增殖过程中p-STAT1/PIAS1蛋白及mRNA表达有调节作用,氧化苦参碱可能影响JAK/STAT信号转导通路。 展开更多
关键词 人肾小球系膜细胞 增殖 氧化苦参碱 JAK/STAT信号通路 p—STAT1 PIAS1分子
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生脉注射液对高糖和糖化终末产物诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响 被引量：11
13
作者 陈立军 汪宁 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期445-446,共2页
目的观察生脉注射液对高糖和糖化终末产物(AGEs)诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响。方法用高糖和AGEs作为刺激因子,诱导体外培养的牛肾小球系膜细胞增殖,并用MTT比色法测定生脉注射液对系膜细胞增殖的影响。结果生脉注射液能拮抗高糖和A... 目的观察生脉注射液对高糖和糖化终末产物(AGEs)诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响。方法用高糖和AGEs作为刺激因子,诱导体外培养的牛肾小球系膜细胞增殖,并用MTT比色法测定生脉注射液对系膜细胞增殖的影响。结果生脉注射液能拮抗高糖和AGEs诱导的肾小球系膜细胞的增殖(P<0.01)。结论生脉注射液治疗糖尿病肾病的主要靶细胞之一是肾小球系膜细胞,其对肾小球系膜细胞增殖的抑制可能是其治疗作用的重要机制。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 高糖 AGES 肾小球系膜细胞 增殖 生脉注射液
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肾小球上皮细胞分泌肾上腺髓质素抑制系膜细胞增殖 被引量：2
14
作者 刘学光 陈广平 +1 位作者 张志刚 郭慕依 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第5期375-377,共3页
目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)及其受体CRLR在培养的大鼠肾小球上皮细胞 (GEC)和系膜细胞(MsC)的表达 ,以及AM对MsC生长的影响。方法　采用RT PCR法分别制备AM及CRLR探针 ,Northernblot法检测其在GEC和MsC的表达 ,[3H]胸腺嘧啶掺入法测定... 目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)及其受体CRLR在培养的大鼠肾小球上皮细胞 (GEC)和系膜细胞(MsC)的表达 ,以及AM对MsC生长的影响。方法　采用RT PCR法分别制备AM及CRLR探针 ,Northernblot法检测其在GEC和MsC的表达 ,[3H]胸腺嘧啶掺入法测定MsC增殖情况。结果　AM仅表达于GEC ,不表达于MsC ,而其受体CRLR的表达则相反。含有AM的GEC培养上清可抑制MsC生长 ,而CRLR阻断剂CGRP8-37可部分消除此抑制作用。结论　GEC可通过合成和分泌AM抑制MsC增殖 ,提示AM作为一种重要的旁分泌因子 ,以保持肾小球微环境稳定 。 展开更多
关键词 肾小球上皮细胞 肾小球系膜细胞 肾上腺髓质素 聚合酶链反应 Northern BLOT法 肾小球肾炎 炎症 细胞增殖
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芪蓟肾康汤对AngⅡ诱导的人肾小球系膜细胞增殖及ERK1/2、p-ERK1/2的影响 被引量：4
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作者 丁晓欢 吕静 +1 位作者 栾佳 张君 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1741-1743,共3页
目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米... 目的:观察芪蓟肾康汤含药血清对人肾小球系膜细胞的增殖及胞外信号调节激酶(ERK)通路的影响,探讨芪蓟肾康汤延缓肾小球硬化的作用机制。方法:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人肾小球系膜细胞增殖,采用血清药理学方法制备芪蓟肾康汤和替米沙坦含药血清。将人肾小球系膜细胞分为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组六组,培养24、48、72 h后用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;培养48、72 h后用ELISA法检测的ERK1/2、pERK1/2含量。结果:与正常组相比,AngⅡ组能显著促进系膜细胞增殖,替米沙坦组和各浓度中药含药血清组均可不同程度抑制AngⅡ引起的系膜细胞增殖。AngⅡ刺激后系膜细胞中ERK1/2蛋白表达明显降低,pERK1/2蛋白的表达明显增高,替米沙坦和不同浓度中药含药血清干预后,ERK1/2蛋白水平显著升高、pERK1/2蛋白水平显著下降,其中中药高剂量组最为显著。结论:芪蓟肾汤可能通过抑制人肾小球系膜细胞增殖和ERK通路的磷酸化,从而达到延缓肾小球硬化的目的。 展开更多
关键词 IGA肾病 人肾小球系膜细胞 细胞增殖 芪蓟肾康汤 PERK1/2
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环磷酰胺在体外对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响 被引量：8
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作者 谢彤 吴平 +1 位作者 唐德燊 江黎明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期391-393,T008,共4页
目的 :研究环磷酰胺 (CTX)在体外对大鼠肾小球系膜细胞 (GMC)增殖及细胞凋亡的影响。方法 :采用MTT法检测CTX、甲基强的松龙 (MP)、低分子肝素 (LMWH)对GMC细胞增殖的影响 ;采用光镜、荧光镜、流式细胞仪检测GMC细胞凋亡 ;GMC的Fas、Bcl... 目的 :研究环磷酰胺 (CTX)在体外对大鼠肾小球系膜细胞 (GMC)增殖及细胞凋亡的影响。方法 :采用MTT法检测CTX、甲基强的松龙 (MP)、低分子肝素 (LMWH)对GMC细胞增殖的影响 ;采用光镜、荧光镜、流式细胞仪检测GMC细胞凋亡 ;GMC的Fas、Bcl- 2蛋白质水平采用免疫组化法检测。结果 :CTX、MP、LMWH均对GMC生长有抑制作用 ;CTX诱导GMC细胞凋亡 ,使GMC的Fas蛋白水平增加。结论 :CTX在体外可以抑制GMC细胞增殖 。 展开更多
关键词 环磷酰胺 大鼠 肾小球系膜细胞增殖 细胞凋亡 慢性增殖性肾小球肾炎
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肿瘤坏死因子α介导内皮素所致人肾小球系膜细胞增殖 被引量：3
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作者 周安宇 谌贻璞 高进 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期529-531,共3页
目的 :探讨内皮素 1(endothelin 1,ET 1)致人肾小球系膜细胞 (humanmesangialcell,HMC)增殖的介导途径。方法 :用ET 1和抗肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFα)中和抗体孵育HMC ,3 H 胸腺嘧啶参入法测定HMC增殖 ,Northern杂交... 目的 :探讨内皮素 1(endothelin 1,ET 1)致人肾小球系膜细胞 (humanmesangialcell,HMC)增殖的介导途径。方法 :用ET 1和抗肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFα)中和抗体孵育HMC ,3 H 胸腺嘧啶参入法测定HMC增殖 ,Northern杂交方法测定mRNA表达及放射免疫法测定TNFα蛋白质水平。结果 :10 -7mol·L-1ET 1能刺激HMC增殖 ,使TNFαmRNA表达上调及TNFα蛋白质分泌增多 (12、2 4h两组与对照组比较 ,差异有显著性 ) ;抗TNFα中和抗体 (0 .10～ 1.0 0mg·L-1)能部分抑制ET 1所致HMC增殖 ,但对ET 1所致HMCTNFαmRNA表达上调无明显影响。结论 :ET 1能够刺激HMC增殖并使HMC合成和分泌TNFα ;ET 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 药理学 肾小球系膜 药物作用 内皮缩血管肽类 系膜细胞增殖 肾小球肾炎 病理
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全反式维甲酸对环孢素诱导的肾小球系膜细胞增殖与凋亡的影响及其机制 被引量：2
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作者 陈旭 吴建华 +2 位作者 郭乃凤 范亚平 陈晓岚 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第6期465-471,共7页
目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对环孢素(Cs A)诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响及机制。方法采用不同剂量ATRA作用于不同剂量Cs A诱导下的肾小球系膜细胞。采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡形态,后... 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对环孢素(Cs A)诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响及机制。方法采用不同剂量ATRA作用于不同剂量Cs A诱导下的肾小球系膜细胞。采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡形态,后用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测线粒体促凋亡的Smac蛋白的表达。结果与对照组比较,Cs A剂量为0.5μg/m L及以上可抑制细胞増殖,Cs A剂量为1.0μg/m L及以上可诱导细胞凋亡,且Smac蛋白的表达随Cs A剂量的增加而增加,具有剂量和时间依赖的特征(均为P<0.05)。而与Cs A组比较,Cs A+ATRA处理组对细胞增殖的抑制作用更为明显,而加入ATRA可呈剂量依赖性抑制Cs A诱导的肾小球系膜细胞凋亡及Smac蛋白的表达(均为P<0.05)。结论 Cs A可抑制肾小球系膜细胞增殖,诱导其凋亡并刺激Smac蛋白的表达。ATRA可以抑制Cs A诱导的肾小球系膜细胞凋亡,且可能是通过Smac信号通路介导的。 展开更多
关键词 全反式维甲酸(ATRA) 环孢素(Cs A) 系膜细胞 肾小球 SMAC蛋白 排斥反应 细胞增殖 凋亡 肾毒性
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虫草肾茶胶囊对肾小球系膜细胞增殖及分泌Ⅳ型胶原的影响 被引量：4
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作者 宋立群 金丽霞 宋业旭 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第9期1811-1813,共3页
目的:研究虫草肾茶胶囊对培养在高糖条件下系膜细胞(HMC)增殖及细胞上清液中胶原纤维(Col-IV)的表达影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)防治中的意义。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法动态观察各种处理因素的作用下各组HMC增殖情况;酶联... 目的:研究虫草肾茶胶囊对培养在高糖条件下系膜细胞(HMC)增殖及细胞上清液中胶原纤维(Col-IV)的表达影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)防治中的意义。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法动态观察各种处理因素的作用下各组HMC增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定经体外培养的人肾小球系膜细胞在各种处理因素的作用下上清液中IV型胶原的表达情况,并以福辛普利为对照。结果:高糖能明显刺激体外培养的HMC增殖,同时促进HMC分泌Col-IV(P<0.05或P<0.01)。而虫草肾茶胶囊能抑制HMC增殖及HMC分泌Col-IV,并呈一定量效关系(P<0.05或P<0.01),且某些方面明显优于福辛普利。结论:高糖可促进HMC增殖及Col-IV分泌,虫草肾茶胶囊能明显抑制高糖条件下HMC增殖及其分泌Col-IV,从而发挥预防肾小球纤维化及硬化的发生、发展,进而延缓DN的进展。 展开更多
关键词 虫草肾茶胶囊 人肾小球系膜细胞 增殖 IV型胶原纤维
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尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及表型转化的影响 被引量：3
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作者 李莎莎 郭晓莉 杜燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期392-397,共6页
目的研究不同浓度尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及表型转化的影响。方法通过倒置显微镜下及透射电镜下观察尿酸干预前后HBZY-1细胞形态及超微结构改变;通过MTT法检测不同浓度尿酸对HBZY-1细胞增殖的作用;ELISA法检测... 目的研究不同浓度尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及表型转化的影响。方法通过倒置显微镜下及透射电镜下观察尿酸干预前后HBZY-1细胞形态及超微结构改变;通过MTT法检测不同浓度尿酸对HBZY-1细胞增殖的作用;ELISA法检测不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞后血管紧张素Ⅱ的表达;分别通过RT-PCR、Western blot方法检测不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞不同时间段后α-SMA、TGF-β1及fibronectin基因水平和蛋白水平的变化。结果 0.4 mmol/L尿酸作用HBZY-1细胞24 h可诱导系膜细胞转化为类似纤维细胞样形态。不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞24 h均能促进细胞增殖,且在一定范围内其促增殖作用呈剂量依赖性增强。不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞不同时间后可诱导其分泌血管紧张素Ⅱ,并在一定范围内呈剂量时间依赖性。RT-PCR及Western Blot结果均显示0.1 mmol/L以上的尿酸作用HBZY-1细胞48 h后,系膜细胞表型转化的指标α-SMA、TGF-β1及fibronectin的mRNA及蛋白表达均上调(P <0.05)。结论尿酸可促进体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及发生表型转化。 展开更多
关键词 尿酸 肾小球系膜细胞 增殖 表型转化
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