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槐杞黄颗粒含药血清对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响及机制研究
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作者 刘红 姜南 +1 位作者 邱文慧 薛雪 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第3期815-822,共8页
目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中... 目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中、高浓度HQH含药血清组(HQH含药血清浓度分别为5%、10%、15%),CCK-8法检测各组细胞增殖率,筛选出有效浓度HQH含药血清用于后续实验;倒置光学显微镜下观察各组HBZY-1细胞形态并拍照;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)活性;Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB/NLRP3炎症通路相关蛋白的表达。结果 与高糖组相比,5%含药血清组细胞增殖率变化不明显,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖率明显下降(P<0.05或P<0.01),因此,选择10%和15%浓度HQH含药血清作为后续实验用药处理组。对高糖环境下的HBZY-1细胞予以10%含药血清和15%含药血清干预后,与高糖组相比,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖度降低,细胞凋亡比例逐渐增加,细胞SOD、CAT、GSH-Px活性升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平降低(P<0.01),TLR4、NLRP3、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论 槐杞黄颗粒含药血清能够抑制高糖环境下HBZY-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制细胞氧化应激及TLR4/NF-κB/NLRP3介导的炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 槐杞黄颗粒 肾小细胞 高糖 氧化应激 TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路
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miR-27b-3p调控RUNX1对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症反应的影响
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作者 韩晓静 布海霞 +2 位作者 王焕 徐可 何国斌 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第3期231-237,共7页
目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染... 目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-27b-3p组(转染miR-27b-3p mimics)、miR-27b-3p+pc-NC组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-NC)、miR-27b-3p+pc-RUNX1组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-RUNX1)。采用qR T-PCR检测miR-27b-3p和RUNX1mR NA表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测上清液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平;Western blot检测细胞中RUNX1、凋亡[剪切的多聚ADP核糖多聚酶(CleavedPARP)、剪切的半光天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)]和纤维化[纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))]相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因、Pulldown分析系膜细胞细胞中miR-27b-3p和RUNX1的调控作用。结果与葡萄糖组相比,高糖组细胞中miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP和Cleaved-caspase 3蛋白水平降低,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1 mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27b-3p组miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平降低(P<0.05)。上调RUNX1表达部分削弱了miR-27b-3p过表达对高糖诱导的系膜细胞增殖和炎症反应的抑制作用。双荧光素酶报告基因、Pull-down实验证实RUNX1是miR-27b-3p的靶标。结论过表达miR-27b-3p可能通过靶向下调RUNX1表达,抑制高糖诱导的系膜细胞增殖、炎症和纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病 肾小细胞 高糖 增殖 miR-27b-3p runt相关转录因子1
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甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎性因子及纤维化因子的影响 被引量:1
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作者 李媛 王珍 +1 位作者 曹雪 侯绍章 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期214-219,共6页
目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200... 目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200μmol/L GA)。采用Western blotting检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8及纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,免疫荧光检测各组IL-1β、TNF-α、α-SMA在细胞内的荧光表达强度,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的表达水平。结果Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及α-SMA蛋白的表达水平明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和α-SMA蛋白表达量降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与NG组比较,HG组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子的荧光强度明显增强(P<0.05);与HG组相比,HG+GA组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子荧光强度明显降低(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与NG组比较,HG组细胞培养上清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8蛋白表达水平升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8表达水平明显降低(P<0.05)。结论甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞的炎性因子及纤维化因子的表达均具有不同程度的抑制作用,可能在糖尿病肾病的预防方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 糖尿病 高糖 甘草酸 肾小细胞 炎性因子 纤维化
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血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
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作者 佟彤 叶波 +2 位作者 郎睿 徐建龙 王洪霞 《世界中医药》 北大核心 2024年第22期3473-3478,共6页
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组... 目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。 展开更多
关键词 IGA 血尿安片 滋阴益 24 h蛋白定量 肌酐清除率 脏病理 肾小细胞增殖核抗原 荧光染色
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外源性硫化氢对肾小球系膜细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制
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作者 林真亭 田华 李鸿珠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期133-138,共6页
目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细... 目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力,荧光探针技术分别检测H_(2)S和活性氧(ROS)含量,生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率;Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase,CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果与对照(Control)组相比,缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_(2)S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低;细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高;同时,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较,H/R+NaHS(外源性H_(2)S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外,PD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_(2)S系统下调有关;外源性H_(2)S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡,减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 缺氧/复氧 肾小细胞 ERK1/2通路 细胞凋亡 CSE/H_(2)S
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Sublytic C5b-9上调KLF5促进Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞生成IL-23的作用
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作者 刘玉 应帅 +4 位作者 罗灿 李玉 荣灿 王迎伟 邱文 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第9期1198-1206,共9页
目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interl... 目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-23的作用。方法:(1)建立大鼠Thy-1N模型和体外培养大鼠GMC,用Western blot(WB)检查Thy-1N大鼠肾组织和受sublytic C5b-9刺激的GMC中KLF5和IL-23的表达。(2)分别将KLF5过表达质粒(pIRES2-KLF5)或KLF5小干扰质粒(shKLF5)转染GMC,通过实时荧光定量PCR和WB检测KLF5和IL-23的mRNA和蛋白水平。(3)将IL-23全长启动子荧光素酶报告基因质粒(p GL3-IL-23-FL)转染GMC,再给予sublytic C5b-9刺激,或将p GL3-IL-23-FL与pIRES2-KLF5或shKLF5共转染GMC,用荧光素酶报告基因实验检测IL-23启动子活性的变化。(4)将慢病毒(lentivirus,LV)包装的LV-shKLF5和LV-shCTR行肾动脉灌注术导入大鼠肾组织,经小动物脏器可见光三维成像和冰冻切片观察GFP表达,证实LV-shCTR在肾组织中富集效率。之后再复制大鼠Thy-1N,用WB检查肾组织中KLF5和IL-23的蛋白表达。结果:(1)Thy-1N大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中,KLF5和IL-23的表达均显著升高,且KLF5的表达高峰稍早于IL-23。(2)在GMC中过表达或敲低KLF5能分别引起IL-23表达的升高或降低。(3)Sublytic C5b-9刺激或KLF5过表达均可增加GMC中IL-23启动子的活性,但敲低KLF5后可明显下调由sublytic C5b-9刺激GMC诱导的IL-23启动子活性。(4)敲低Thy-1N大鼠肾组织中KLF5的表达后,其肾组织中IL-23的表达水平明显降低。结论:大鼠Thy-1N发病早期,sublytic C5b-9刺激GMC后可通过上调KLF5促进IL-23基因的转录与表达。 展开更多
关键词 THY-1 亚溶解型C5b-9 肾小细胞 krüppel样因子5 细胞介素-23
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糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病肾纤维化的作用机制
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作者 卢聪 单晓萌 +3 位作者 王翠婷 朱智耀 邹大威 高彦彬 《世界中医药》 北大核心 2025年第10期1699-1704,1712,共7页
目的:基于Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)探究糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病(DKD)肾纤维化的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养KK-Ay小鼠建立DKD模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组和缬沙坦组,C5... 目的:基于Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)探究糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病(DKD)肾纤维化的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养KK-Ay小鼠建立DKD模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组和缬沙坦组,C57BL/6J小鼠作为空白组。连续给药10周后,检测小鼠体质量、血糖、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿微量白蛋白/肌酐(UAER);采用苏木精-伊红(HE)、过碘酸-雪夫(PAS)、马松(MASSON)染色观察肾脏组织病理情况;电镜观察肾小球超微结构。蛋白质印迹法(WB)检测肾组织中YAP、TAZ、转录增强关联域转录因子1(TEAD1)、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)蛋白表达水平。免疫组化检测肾组织中纤连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)表达。结果:与模型组比较,糖肾宁组体质量、血糖无明显变化,BUN、Scr明显下降;UAER在治疗后明显下降(P<0.05);肾组织中YAP、TAZ、TEAD1、CTGF、Col-Ⅳ蛋白表达水平显著降低(P<0.05);肾组织中FN、LN表达减少;肾小球系膜基质、系膜增殖、糖原沉积和胶原沉积减少;肾小球基底膜增厚、足突融合、系膜区细胞外基质增生减轻。结论:糖肾宁可能通过抑制YAP/TAZ通路抑制系膜增殖和细胞外基质增生,改善糖尿病肾病肾纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病 细胞外基质增生 纤维化 增殖 Yes相关蛋白/PDZ结合基序转录共激活因子 KK-AY小鼠
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洛伐他汀对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期时相的影响 被引量:27
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作者 李航 李学旺 +1 位作者 段琳 李晨红 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-66,共4页
目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用3H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平,以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖,从细胞周期水平,洛伐他汀可使HMC由G1期向... 目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用3H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平,以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖,从细胞周期水平,洛伐他汀可使HMC由G1期向S期的进展受阻,这些抑制作用可被外源甲羟戊酸和法呢醇恢复。结论洛伐他汀是HMC增殖的抑制剂,本研究为重新认识和评价他汀类药物在治疗肾脏疾病中的作用提供了一定的理论及实验依据。 展开更多
关键词 洛伐他汀 细胞增殖 细胞周期 肾小细胞 时相 肾小
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凝血酶上调人肾小球系膜细胞PAI-1表达的细胞内信号转导研究 被引量:9
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作者 何庆南 陈香美 +2 位作者 叶一舟 傅博 于志恒 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期168-172,共5页
为探讨转录因子活化子蛋白1(AP-1)和相关的信号转导分子在凝血酶诱导人肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)表达中的作用,采用纤维蛋白平板法、Northern杂交、凝胶电泳阻滞实验(EMSA)和West... 为探讨转录因子活化子蛋白1(AP-1)和相关的信号转导分子在凝血酶诱导人肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)表达中的作用,采用纤维蛋白平板法、Northern杂交、凝胶电泳阻滞实验(EMSA)和Western杂交方法,分别检测凝血酶刺激培养的人肾小球系膜细胞PAI-1蛋白质活性和mRNA表达情况,以及AP-1DNA连接活性和AP-1组成蛋白质c-Jun、c-Fos量的变化。结果发现:①凝血酶呈浓度依赖性的方式促进肾小球系膜细胞PAI-1蛋白质活性和mRNA表达,其效应能被凝血酶的特异性拮抗剂水蛭素阻断;②凝血酶能明显促进转录因子AP-1的DNA连接活性;③curcumin、staurosporine和genistein均能在不同程度上抑制AP-1的DNA连接活性,并进而部分逆转凝血酶上调系膜细胞PAI-1mRNA表达的效应。研究表明,转录因子AP-1在凝血酶上调人肾小球系膜细胞PAI-1表达的信号转导过程中起着重要的作用,蛋白激酶C和蛋白酪氨酸激酶可能是凝血酶介导系膜细胞AP-1活化及PAI-1表达的上游信号。 展开更多
关键词 信号转递 肾小 细胞 凝血酶 PAI-1
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参地颗粒调节系膜增生性肾小球肾炎大鼠T细胞亚群平衡并下调足细胞足萼糖蛋白水平 被引量:17
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作者 王亿平 张磊 +4 位作者 王东 魏玲 金华 章雪莲 胡岚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1014-1019,共6页
目的观察参地颗粒对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠T细胞亚群及足细胞标志蛋白的影响,探讨参地颗粒的作用机制。方法建立Ms PGN模型,将40只SD大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、参地颗粒组和正常组。参地颗粒组按4 g/(kg·d)灌胃,... 目的观察参地颗粒对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠T细胞亚群及足细胞标志蛋白的影响,探讨参地颗粒的作用机制。方法建立Ms PGN模型,将40只SD大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、参地颗粒组和正常组。参地颗粒组按4 g/(kg·d)灌胃,缬沙坦组按10.3 mg/(kg·d)灌胃,模型组及正常组每日给予等量温水灌胃,连续灌胃12周。常规生化法检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、流式细胞术检测全血CD4+T细胞、CD8+T细胞数量,ELISA检测血清白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-17和尿足萼糖蛋白(PCX)、B7-1水平及肾脏组织中钙调磷酸酶(Ca N)含量。结果模型组24 h尿蛋白定量、CD8+T细胞水平,血清IL-2、IL-17和尿PCX、B7-1水平及肾脏组织中Ca N含量均高于正常组;缬沙坦组和参地颗粒组以上指标均低于模型组,参地颗粒组优于缬沙坦组。模型组全血CD4+T细胞及血清IL-4水平均低于正常组,缬沙坦组和参地颗粒组以上指标均高于模型组,参地颗粒组优于缬沙坦组。结论参地颗粒可有效降低Ms PGN大鼠24 h尿蛋白定量,可能与增加CD4+T细胞数量,降低血清IL-2、IL-17及尿PCX、B7-1水平和肾脏组织中Ca N的表达,增加血清IL-4水平有关。 展开更多
关键词 增生性肾小 参地颗粒 T细胞亚群 细胞
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TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及人肾小球肾炎中表达的影响 被引量:13
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作者 蒋涛 刘国元 +2 位作者 赵仲华 张秀荣 张农 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期565-569,F005,共6页
目的 探讨转化生长因子 β1(tranforminggrowthfactor betal,TGF β1)对其反应性基因产物醛糖还原酶(aldosereductase ,AR)在大鼠系膜细胞中表达的影响及两者在人肾小球肾炎中的表达及其相互关系。方法 采用RT PCR、Westernblot法观... 目的 探讨转化生长因子 β1(tranforminggrowthfactor betal,TGF β1)对其反应性基因产物醛糖还原酶(aldosereductase ,AR)在大鼠系膜细胞中表达的影响及两者在人肾小球肾炎中的表达及其相互关系。方法 采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠系膜细胞中AR表达的影响 ;以 12例肾小球轻微病变作为对照 ,对各种不同组织学类型的IgA肾病 (15例 ) ,膜性肾炎 (14例 ) ,局灶节段增生性肾炎 (12例 ) ,狼疮性肾炎 (14例 ) ,新月体性肾炎 (9例 )的人肾穿刺活检标本 ,应用免疫组织化学ABC方法分别观察TGF β1和AR在肾炎组织中的表达 ,并对其染色强度作图像定量分析。结果 外源性TGF β1作用后 ,大鼠系膜细胞中AR的mRNA表达与蛋白水平升高 ,并显示出一定的时间与浓度依赖性。各型肾炎中TGF β1的表达均显著高于对照组 ;除IgA肾病之外的各型肾炎中AR的表达均显著高于对照组 ,AR的表达与TGF β1表达之间具有显著的相关性。结论 TGF β1相关反应性基因产物AR的表达与TGF β1的作用密切相关 。 展开更多
关键词 TGF-Β1 表达 AR 细胞 大鼠 肾小 醛糖还原酶 产物 标本 RT-PCR
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山茱萸环烯醚萜总苷对AGEs培养肾小球系膜细胞的影响 被引量:20
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作者 许惠琴 刘洪 +1 位作者 沈健 时艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期432-436,共5页
目的观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法用含AGEs的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另... 目的观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法用含AGEs的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另用流式细胞仪分析GMC的周期。试剂盒测定细胞上清液MDA含量与SOD和GSH-Px活性,流式细胞仪检测细胞内ROS含量。结果形态学显示,正常GMC形态结构正常。而GMC在AGEs的刺激下,细胞数量明显增多,细胞结构不甚清晰,细胞S期延长,G0/G1缩短,细胞内SOD、GSH-Px下调,ROS、MDA上调。在系统中加入ICO后细胞异常增殖明显减少,细胞形态趋于正常,使S期细胞减少,SOD、GSH-Px活力提高,ROS、MDA含量降低。结论ICO能对抗AGEs对GMC的损伤作用。其可能是通过抑制氧化应激来保护GMC免受AGEs的损害,从而达到防治糖尿病肾病的目的。 展开更多
关键词 肾小细胞 形态学 细胞周期 环烯醚萜总苷 氧化应激
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肾小球系膜细胞培养及鉴定 被引量:85
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作者 潘晓勤 王晓燕 姜新猷 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1995年第1期222-223,共2页
肾小球系膜细胞(GMC)具有多种功能,如分泌细胞基质,产生细胞因子,并具有吞噬清除大分子物质以及类似平滑肌纫胞的收缩功能,是肾小球中功能最活跃的一类细胞。因此GMC的体外培养是研究肾功能、肾小球疾病的发生发展必不可少的手段... 肾小球系膜细胞(GMC)具有多种功能,如分泌细胞基质,产生细胞因子,并具有吞噬清除大分子物质以及类似平滑肌纫胞的收缩功能,是肾小球中功能最活跃的一类细胞。因此GMC的体外培养是研究肾功能、肾小球疾病的发生发展必不可少的手段之一。本中心近年来成功地进行了大鼠、成人以及胎儿肾系膜细胞的培养,现总结如下。 展开更多
关键词 肾小细胞 细胞培养 鉴定
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肾小球系膜细胞培养 被引量:131
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作者 谌贻璞 高进 +5 位作者 邢宝才 付玲 谌霞 邹万忠 王书和 王海燕 《北京医科大学学报》 CSCD 1989年第4期335-336,357,共2页
1969年Bernik首次将肾小球在体外培养存活,1970年Quadrucci等首次用光学和电子显微镜证实体外培养的肾小球可生长出三种细胞,1975年Fish等首次在体外培养中分离获得纯系膜细胞(M_sC)。现在大鼠、小鼠、仓鼠、豚鼠、兔、人、猴、狗、猫... 1969年Bernik首次将肾小球在体外培养存活,1970年Quadrucci等首次用光学和电子显微镜证实体外培养的肾小球可生长出三种细胞,1975年Fish等首次在体外培养中分离获得纯系膜细胞(M_sC)。现在大鼠、小鼠、仓鼠、豚鼠、兔、人、猴、狗、猫、牛、绵羊、山羊及猪M_sC的培养都已有报道,为体外利用该细胞进行细胞生物学及细胞病理学研究开辟了道路。 展开更多
关键词 肾小 细胞 细胞培养
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白细胞介素13抑制肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素6表达 被引量:15
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作者 郭汉城 江黎明 +4 位作者 陈孝文 吴平 叶锋 梁东 赵家明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期76-79,共4页
目的 :探讨白细胞介素 13(IL - 13)对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素 6 (IL -6 )的影响。方法 :用四甲基偶氮唑 (MTT)法测定系膜细胞增殖 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)及酶联免疫吸附法 (ELISA)测定系膜细胞IL - 6... 目的 :探讨白细胞介素 13(IL - 13)对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素 6 (IL -6 )的影响。方法 :用四甲基偶氮唑 (MTT)法测定系膜细胞增殖 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)及酶联免疫吸附法 (ELISA)测定系膜细胞IL - 6mRNA表达及其蛋白水平。结果 :IL - 13在 1、10、10 0 μg/L浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖 ;5 %FCSRPMI16 40培养条件下系膜细胞IL - 6mRNA表达及IL - 6分泌水平较低 ,脂多糖 (LPS)可刺激系膜细胞IL - 6mRNA的表达及提高IL - 6分泌水平 ,而IL - 13可抑制LPS诱导的系膜细胞IL - 6分泌及其mRNA表达。结论 :IL - 13抑制体外培养的系膜细胞增殖及LPS诱导的系膜细胞IL - 6的产生 ,IL - 13可能对于肾小球肾炎的系膜细胞炎症反应具有拮抗作用。 展开更多
关键词 细胞介素13 细胞介素6 肾小 肾小
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系膜增生性肾小球肾炎患者血清Th1/Th2细胞因子表达的变化 被引量:16
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作者 程悦 张静波 +2 位作者 李芙蓉 王代红 袁发焕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期860-862,共3页
目的观察系膜增生性肾小球肾炎患者血清Th1和Th2类细胞因子(INF-γ、IL-4、IL-10)表达变化。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定10例正常人和25例慢性肾小球疾病患者(轻中度系膜增生性非IgA肾小球肾炎)外周静脉血血清INF-γ、IL-4、IL... 目的观察系膜增生性肾小球肾炎患者血清Th1和Th2类细胞因子(INF-γ、IL-4、IL-10)表达变化。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定10例正常人和25例慢性肾小球疾病患者(轻中度系膜增生性非IgA肾小球肾炎)外周静脉血血清INF-γ、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果系膜增生性肾小球肾炎患者血清INF-γ分泌水平较正常人明显增多(P<0.01),而IL-10分泌水平较正常人明显减少(P<0.05),IL-4分泌水平则与正常人无显著差异(P>0.05),系膜增生性肾小球肾炎患者INF-γ/IL-4、INF-γ/IL-10值均显著高于正常人(P<0.05)。结论系膜增生性肾小球肾炎患者在外周血细胞因子水平存在Th1/Th2免疫失衡,可能参与了系膜增生性肾小球肾炎的免疫发病机制。 展开更多
关键词 增生性肾小 INF-Γ IL-4 IL-10
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lncRNA-Gm4419对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响 被引量:10
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作者 易红 彭睿 +4 位作者 孙艳 罗勇军 彭惠民 李爱玲 张政 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期216-222,共7页
目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒... 目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒,并将Gm4419 siRNA和pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒分别转染至高低糖培养的肾小球系膜细胞,Ed U法检测转染后细胞的增殖能力;Western blot检测肾脏纤维标记蛋白的表达水平情况。结果 Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平较正常组及低糖组显著增高(P<0.01)。荧光定量PCR筛选出一条最佳干扰Gm4419的siRNA,转染高糖组后,与高糖mock组或对照组比较,高糖Gm4419 knockdown组细胞增殖能力减弱、纤维化标记蛋白表达减少(P<0.05)。此外,将酶切和测序结果证实构建成功的pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒转染至低糖组细胞,与低糖mock组或对照组相比,低糖Gm4419过表达组细胞增殖能力增强、纤维化标记蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论lnc RNA-Gm4419参与糖尿病肾小球系膜增生和纤维化的调节。 展开更多
关键词 长链非编码RNA Gm4419 肾小细胞 增殖 纤维化
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氯通道阻滞剂抑制人肾小球系膜细胞增殖 被引量:6
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作者 焦军东 岳朋 +3 位作者 杜智敏 董德利 艾静 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期86-90,共5页
目的研究氯通道阻滞剂对肾小球系膜细胞增殖的作用。方法细胞计数和3H-TdR参入量测定确定细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果同对照组相比,氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-(3-phenylpropylamino)-benzoicaci... 目的研究氯通道阻滞剂对肾小球系膜细胞增殖的作用。方法细胞计数和3H-TdR参入量测定确定细胞增殖,应用流式细胞术检测细胞周期时相。结果同对照组相比,氯通道阻滞剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-(3-phenylpropylamino)-benzoicacid,NPPB、尼氟灭酸使人肾小球系膜细胞数和3H-TdR参入量明显减少(P<0·01,n=8),并呈剂量依赖关系,但不增加系膜细胞乳酸脱氢酶释放量(P>0·05,n=8)。NPPB和尼氟灭酸均使细胞周期停滞在G0/G1期(n=3)。结论氯通道阻滞剂NPPB、尼氟灭酸对人肾小球系膜细胞增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 细胞 氯通道 细胞增殖 细胞周期 肾小
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稳定表达饰胶蛋白聚糖基因的大鼠肾小球系膜细胞株的建立 被引量:8
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作者 王慧君 张志刚 +3 位作者 陈广平 林文生 陈琦 郭慕依 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-99,102,共4页
目的 研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法 RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。... 目的 研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法 RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。结果 成功构建重组真核表达质粒 pcDNA3 .1A DCN ,转染MsC并筛选出 2个阳性克隆株。结论 构建载有DCN基因的MsC载体 。 展开更多
关键词 肾小细胞 饰胶蛋白聚糖 基因转染 大鼠 DCN
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黄芪注射液对AGEs培养肾小球系膜细胞的影响 被引量:14
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作者 沈健 许惠琴 +1 位作者 刘洪 韦敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1170-1174,共5页
目的:观察黄芪注射液对糖化终产物(AGEs)培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法:用含AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48 h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。... 目的:观察黄芪注射液对糖化终产物(AGEs)培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法:用含AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48 h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另用流式细胞仪分析GMC的周期。试剂盒测定细胞上清液SOD、MDA和GSH-PX,流式细胞仪检测细胞内ROS含量。结果:形态学显示,正常GMC形态结构正常。而GMC在AGEs的刺激下,细胞数量明显增多,细胞结构不甚清晰,细胞S期延长,G0/G1缩短,细胞内SOD、GSH-PX下调,ROS、MDA上调。在系统中加入黄芪注射液后细胞异常增殖明显减少,细胞形态趋于正常,使S期细胞减少,SOD、GSH-PX活力提高,ROS、MDA含量降低。结论:黄芪注射液能对抗AGEs对GMC的损伤作用。其可能是通过抑制氧化应激来保护GMC免受AGEs的损害。 展开更多
关键词 黄芪注射液 肾小细胞 大鼠 形态学 细胞周期 SOD MDA GSH—PX ROS
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