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槐杞黄颗粒含药血清对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响及机制研究 被引量：1
1
作者 刘红 姜南 +1 位作者 邱文慧 薛雪 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第3期815-822,共8页
目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中... 目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中、高浓度HQH含药血清组(HQH含药血清浓度分别为5%、10%、15%),CCK-8法检测各组细胞增殖率,筛选出有效浓度HQH含药血清用于后续实验;倒置光学显微镜下观察各组HBZY-1细胞形态并拍照;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)活性;Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB/NLRP3炎症通路相关蛋白的表达。结果 与高糖组相比,5%含药血清组细胞增殖率变化不明显,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖率明显下降(P<0.05或P<0.01),因此,选择10%和15%浓度HQH含药血清作为后续实验用药处理组。对高糖环境下的HBZY-1细胞予以10%含药血清和15%含药血清干预后,与高糖组相比,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖度降低,细胞凋亡比例逐渐增加,细胞SOD、CAT、GSH-Px活性升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平降低(P<0.01),TLR4、NLRP3、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论 槐杞黄颗粒含药血清能够抑制高糖环境下HBZY-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制细胞氧化应激及TLR4/NF-κB/NLRP3介导的炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 槐杞黄颗粒 肾小球系膜细胞 高糖 氧化应激 TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路
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miR-27b-3p调控RUNX1对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症反应的影响
2
作者 韩晓静 布海霞 +2 位作者 王焕 徐可 何国斌 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第3期231-237,共7页
目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染... 目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-27b-3p组(转染miR-27b-3p mimics)、miR-27b-3p+pc-NC组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-NC)、miR-27b-3p+pc-RUNX1组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-RUNX1)。采用qR T-PCR检测miR-27b-3p和RUNX1mR NA表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测上清液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平;Western blot检测细胞中RUNX1、凋亡[剪切的多聚ADP核糖多聚酶(CleavedPARP)、剪切的半光天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)]和纤维化[纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))]相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因、Pulldown分析系膜细胞细胞中miR-27b-3p和RUNX1的调控作用。结果与葡萄糖组相比,高糖组细胞中miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP和Cleaved-caspase 3蛋白水平降低,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1 mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27b-3p组miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平降低(P<0.05)。上调RUNX1表达部分削弱了miR-27b-3p过表达对高糖诱导的系膜细胞增殖和炎症反应的抑制作用。双荧光素酶报告基因、Pull-down实验证实RUNX1是miR-27b-3p的靶标。结论过表达miR-27b-3p可能通过靶向下调RUNX1表达,抑制高糖诱导的系膜细胞增殖、炎症和纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 高糖 增殖 miR-27b-3p runt相关转录因子1
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甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎性因子及纤维化因子的影响 被引量：1
3
作者 李媛 王珍 +1 位作者 曹雪 侯绍章 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期214-219,共6页
目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200... 目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200μmol/L GA)。采用Western blotting检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8及纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,免疫荧光检测各组IL-1β、TNF-α、α-SMA在细胞内的荧光表达强度,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的表达水平。结果Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及α-SMA蛋白的表达水平明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和α-SMA蛋白表达量降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与NG组比较,HG组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子的荧光强度明显增强(P<0.05);与HG组相比,HG+GA组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子荧光强度明显降低(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与NG组比较,HG组细胞培养上清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8蛋白表达水平升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8表达水平明显降低(P<0.05)。结论甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞的炎性因子及纤维化因子的表达均具有不同程度的抑制作用,可能在糖尿病肾病的预防方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 高糖 甘草酸 肾小球系膜细胞 炎性因子 纤维化
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血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
4
作者 佟彤 叶波 +2 位作者 郎睿 徐建龙 王洪霞 《世界中医药》 北大核心 2024年第22期3473-3478,共6页
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组... 目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。 展开更多
关键词 IGA肾病 血尿安片 滋阴益肾 24 h蛋白定量 肌酐清除率 肾脏病理 肾小球系膜细胞增殖核抗原 荧光染色
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外源性硫化氢对肾小球系膜细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制
5
作者 林真亭 田华 李鸿珠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期133-138,共6页
目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细... 目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力,荧光探针技术分别检测H_(2)S和活性氧(ROS)含量,生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率;Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase,CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果与对照(Control)组相比,缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_(2)S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低;细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高;同时,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较,H/R+NaHS(外源性H_(2)S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外,PD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_(2)S系统下调有关;外源性H_(2)S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡,减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 缺氧/复氧 肾小球系膜细胞 ERK1/2通路 细胞凋亡 CSE/H_(2)S系统
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Sublytic C5b-9上调KLF5促进Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞生成IL-23的作用
6
作者 刘玉 应帅 +4 位作者 罗灿 李玉 荣灿 王迎伟 邱文 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第9期1198-1206,共9页
目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interl... 目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-23的作用。方法:(1)建立大鼠Thy-1N模型和体外培养大鼠GMC,用Western blot(WB)检查Thy-1N大鼠肾组织和受sublytic C5b-9刺激的GMC中KLF5和IL-23的表达。(2)分别将KLF5过表达质粒(pIRES2-KLF5)或KLF5小干扰质粒(shKLF5)转染GMC,通过实时荧光定量PCR和WB检测KLF5和IL-23的mRNA和蛋白水平。(3)将IL-23全长启动子荧光素酶报告基因质粒(p GL3-IL-23-FL)转染GMC,再给予sublytic C5b-9刺激,或将p GL3-IL-23-FL与pIRES2-KLF5或shKLF5共转染GMC,用荧光素酶报告基因实验检测IL-23启动子活性的变化。(4)将慢病毒(lentivirus,LV)包装的LV-shKLF5和LV-shCTR行肾动脉灌注术导入大鼠肾组织,经小动物脏器可见光三维成像和冰冻切片观察GFP表达,证实LV-shCTR在肾组织中富集效率。之后再复制大鼠Thy-1N,用WB检查肾组织中KLF5和IL-23的蛋白表达。结果:(1)Thy-1N大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中,KLF5和IL-23的表达均显著升高,且KLF5的表达高峰稍早于IL-23。(2)在GMC中过表达或敲低KLF5能分别引起IL-23表达的升高或降低。(3)Sublytic C5b-9刺激或KLF5过表达均可增加GMC中IL-23启动子的活性,但敲低KLF5后可明显下调由sublytic C5b-9刺激GMC诱导的IL-23启动子活性。(4)敲低Thy-1N大鼠肾组织中KLF5的表达后,其肾组织中IL-23的表达水平明显降低。结论:大鼠Thy-1N发病早期,sublytic C5b-9刺激GMC后可通过上调KLF5促进IL-23基因的转录与表达。 展开更多
关键词 THY-1肾炎 亚溶解型C5b-9 肾小球系膜细胞 krüppel样因子5 白细胞介素-23
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洛伐他汀对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期时相的影响 被引量：27
7
作者 李航 李学旺 +1 位作者 段琳 李晨红 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-66,共4页
目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞（HMC）增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用３H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平，以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖，从细胞周期水平，洛伐他汀可使HMC由G１期向... 目的探讨洛伐他汀对人肾小球系膜细胞（HMC）增殖和细胞周期时相的影响及机制。方法用３H-TdR掺入量法测定HMC增殖水平，以流式细胞术测定HMC的细胞周期。结果洛伐他汀剂量依赖性抑制HMC增殖，从细胞周期水平，洛伐他汀可使HMC由G１期向S期的进展受阻，这些抑制作用可被外源甲羟戊酸和法呢醇恢复。结论洛伐他汀是HMC增殖的抑制剂，本研究为重新认识和评价他汀类药物在治疗肾脏疾病中的作用提供了一定的理论及实验依据。 展开更多
关键词 洛伐他汀 细胞增殖 细胞周期 肾小球系膜细胞 时相 肾小球肾炎
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高糖通过SGK_1通路促进人肾小球系膜细胞合成结缔组织生长因子 被引量：21
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作者 王全胜 张阿丽 +4 位作者 李仁康 刘建国 谢纪文 冯玉锡 邓安国 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1015-1020,共6页
目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生结缔组织生长因子(CTGF)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制。方法HMC分为低糖组(5·5mmol·L-1D-葡萄糖)、高糖组(2... 目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)在高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)产生结缔组织生长因子(CTGF)中的作用,探讨SGK1在糖尿病肾病(DN)肾小球硬化中的作用机制。方法HMC分为低糖组(5·5mmol·L-1D-葡萄糖)、高糖组(25mmol·L-1D-葡萄糖)和甘露醇对照组(19·5mmol·L-1甘露醇和5·5mmol·L-1D-葡萄糖),刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和West-ernblot方法检测CTGFmRNA及蛋白的表达;将带有SGK1显性激活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-S422DhSGK1,SD)和带有SGK1显性失活型突变体质粒(pIRES2-EGFP-K127NhSGK1,KN)分别瞬时转染HMC;同时,设空质粒(PIRES2-EGFP,FP)转染组和未转染组(NT)为对照。分别用低糖(LG,5·5mmol·L-1D-葡萄糖)和高糖(HG,25mmol·L-1D-葡萄糖)刺激24、72h后,采用RT-PCR方法和Western blot方法检测CT-GF的mRNA及蛋白的表达。结果与低糖组和甘露醇组相比较,在高糖刺激下,HMC中CTGF mRNA及蛋白的表达明显上调;低糖环境下,转染SD的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGFmRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达差异无显著性;高糖环境下转染SD的HMC与转染KN、转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显增加。转染KN的HMC与转染FP、NT组比较,其CTGF mRNA和蛋白的表达明显减少。结论在DN中,高糖能促进HMC的CTGF mRNA及蛋白的表达,并且可以通过SGK1介导的信号通路来诱导人肾小球系膜细胞增加合成CTGF,这种新发现的信号通路,表明SGK1可能通过促进CTGF的合成来参与糖尿病肾病肾小球纤维化的发生。 展开更多
关键词 高糖 血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1 人肾小球系膜细胞 结缔组织生长因子 糖尿病肾病
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地龙成分对高糖刺激下人肾小球系膜细胞转化生长因子β_1和结缔组织生长因子表达的研究 被引量：20
9
作者 马艳春 周波 +4 位作者 宋立群 肖洪彬 马育轩 孙许涛 张立静 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期410-414,共5页
目的:研究地龙成分含药血清对高糖刺激下人肾小球系膜细胞(HMC)增殖、分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响,并探讨其对糖尿病肾脏疾病的可能防治机制。方法:以HMC为研究对象,将培养的HMC分为空白对照组、高糖... 目的:研究地龙成分含药血清对高糖刺激下人肾小球系膜细胞(HMC)增殖、分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响,并探讨其对糖尿病肾脏疾病的可能防治机制。方法:以HMC为研究对象,将培养的HMC分为空白对照组、高糖刺激组、地龙成分低、中、高剂量组和福辛普利组,用家兔的含药血清给药,分别给予相应处理24h、48 h和72 h后,采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,48 h的上清液采用ELISA法检测TGF-β1和CTGF的表达。结果:在同一时间点内,地龙低、中、高剂量组对HMC增殖的抑制作用不断增加,福辛普利组对HMC增殖的抑制作用和地龙中剂量组相当,在24 h、48 h和72 h内,各药物干预组对HMC增殖的抑制作用也不断增大,以地龙高剂量组最佳;与空白对照组比较,高糖刺激组上清液中TGF-β1和CTGF的含量明显增多;与高糖刺激组比较,地龙成分低、中、高剂量组随着药物浓度的增加,TGF-β1和CTGF的含量减少,福辛普利组上清液中TGF-β1和CTGF的含量与地龙成分中剂量组相当,但高于高剂量组,都具有统计学意义。结论:地龙成分对HMC增殖的抑制作用在一定范围内呈浓度、时间依赖关系,能够降低TGF-β1和CTGF的含量,以高剂量组最佳,优于福辛普利组,提示地龙成分可能通过抑制HMC的异常增殖和下调TGF-β1和CTGF的表达而发挥对糖尿病肾病的保护作用。 展开更多
关键词 地龙成分 高糖 人肾小球系膜细胞 增殖 转化生长因子β1 结缔组织生长因子
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山茱萸环烯醚萜总苷对AGEs培养肾小球系膜细胞的影响 被引量：20
10
作者 许惠琴 刘洪 +1 位作者 沈健 时艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期432-436,共5页
目的观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法用含AGEs的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另... 目的观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法用含AGEs的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另用流式细胞仪分析GMC的周期。试剂盒测定细胞上清液MDA含量与SOD和GSH-Px活性,流式细胞仪检测细胞内ROS含量。结果形态学显示,正常GMC形态结构正常。而GMC在AGEs的刺激下,细胞数量明显增多,细胞结构不甚清晰,细胞S期延长,G0/G1缩短,细胞内SOD、GSH-Px下调,ROS、MDA上调。在系统中加入ICO后细胞异常增殖明显减少,细胞形态趋于正常,使S期细胞减少,SOD、GSH-Px活力提高,ROS、MDA含量降低。结论ICO能对抗AGEs对GMC的损伤作用。其可能是通过抑制氧化应激来保护GMC免受AGEs的损害,从而达到防治糖尿病肾病的目的。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 形态学 细胞周期 环烯醚萜总苷 氧化应激
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绞股蓝皂苷对AGEs诱导下人肾小球系膜细胞中RAGE及转化生长因子-β_1表达的影响 被引量：13
11
作者 张秋艳 唐灵 +2 位作者 王艳 周康 张慧云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1301-1306,共6页
目的观察绞股蓝皂苷(gypenosides,GP)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation endproducts,AGEs)诱导下人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及转化生长因子-β_1(TGF-β1)表达的影响。方法... 目的观察绞股蓝皂苷(gypenosides,GP)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation endproducts,AGEs)诱导下人肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMCs)中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及转化生长因子-β_1(TGF-β1)表达的影响。方法将体外培养的(体积分数为0.15的FBS的DMEM低糖培养液)人肾小球系膜细胞(HMCs)分为4组:正常组、模型组、GP组、阳性对照组。除正常组外,其余组均再给予200 mg·L^(-1)AGEs刺激。此外,GP组中加入不同浓度GP(25、75、175 mg·L^(-1))进行干预,阳性对照组中加入氨基胍盐酸盐(10^(-1)mmol·L^(-1))。应用Western blot技术检测各实验组中RAGE和TGF-β_1蛋白的表达;RT-PCR技术检测各实验组中RAGE和TGF-β_1 mRNA的表达。结果模型组AGEs诱导下HMCs中RAGE、TGF-β1蛋白及mRNA表达水平明显高于正常组(P<0.01);与模型组比较,GP组中GP可明显下调HMCs中RAGE、TGF-β_1蛋白及mRNA的表达,且呈浓度依赖性(P<0.01)。结论 GP可降低AGEs诱导下HMCs中RAGE的表达,阻断AGEs-RAGE信号通路,并下调下游因子TGF-β_1的表达,进而延缓糖尿病肾病纤维化进程。 展开更多
关键词 绞股蓝皂苷 糖尿病肾病 人肾小球系膜细胞 晚期糖基化终末产物 晚期糖基化终末产物受体 转化生长因子-β1 纤维化
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黄芪注射液对AGEs培养肾小球系膜细胞的影响 被引量：14
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作者 沈健 许惠琴 +1 位作者 刘洪 韦敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1170-1174,共5页
目的:观察黄芪注射液对糖化终产物(AGEs)培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法:用含AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48 h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。... 目的:观察黄芪注射液对糖化终产物(AGEs)培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)形态学、细胞周期及氧化应激的影响。方法:用含AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48 h后,加混合荧光染液进行染色,并立即进行荧光显微观察。另用流式细胞仪分析GMC的周期。试剂盒测定细胞上清液SOD、MDA和GSH-PX,流式细胞仪检测细胞内ROS含量。结果:形态学显示,正常GMC形态结构正常。而GMC在AGEs的刺激下,细胞数量明显增多,细胞结构不甚清晰,细胞S期延长,G0/G1缩短,细胞内SOD、GSH-PX下调,ROS、MDA上调。在系统中加入黄芪注射液后细胞异常增殖明显减少,细胞形态趋于正常,使S期细胞减少,SOD、GSH-PX活力提高,ROS、MDA含量降低。结论:黄芪注射液能对抗AGEs对GMC的损伤作用。其可能是通过抑制氧化应激来保护GMC免受AGEs的损害。 展开更多
关键词 黄芪注射液 肾小球系膜细胞 大鼠 形态学 细胞周期 SOD MDA GSH—PX ROS
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lncRNA-Gm4419对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响 被引量：10
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作者 易红 彭睿 +4 位作者 孙艳 罗勇军 彭惠民 李爱玲 张政 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期216-222,共7页
目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒... 目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒,并将Gm4419 siRNA和pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒分别转染至高低糖培养的肾小球系膜细胞,Ed U法检测转染后细胞的增殖能力;Western blot检测肾脏纤维标记蛋白的表达水平情况。结果 Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平较正常组及低糖组显著增高(P<0.01)。荧光定量PCR筛选出一条最佳干扰Gm4419的siRNA,转染高糖组后,与高糖mock组或对照组比较,高糖Gm4419 knockdown组细胞增殖能力减弱、纤维化标记蛋白表达减少(P<0.05)。此外,将酶切和测序结果证实构建成功的pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒转染至低糖组细胞,与低糖mock组或对照组相比,低糖Gm4419过表达组细胞增殖能力增强、纤维化标记蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论lnc RNA-Gm4419参与糖尿病肾小球系膜增生和纤维化的调节。 展开更多
关键词 长链非编码RNA Gm4419 肾小球系膜细胞 增殖 纤维化
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鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响 被引量：11
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作者 范焕芳 陈志强 +3 位作者 张雪娟 张秀君 徐华洲 黄茂 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期183-186,共4页
目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组... 目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组系膜细胞的增殖情况,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ECM中层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量。结果:LPS刺激后MC增殖和系膜基质中LN及Col-Ⅳ的分泌增多,与空白组比较有明显差异(P<0.01)。鳖甲煎丸能抑制正常条件及LPS刺激条件下MC增殖,并对ECM中LN、Col-Ⅳ的表达有抑制作用。结论:鳖甲煎丸能够抑制系膜细胞的增殖,抑制肾小球系膜基质中LN及Col-Ⅳ的表达,减少ECM的积聚,这可能是其防治肾小球疾病,延缓肾小球硬化的部分作用机制。 展开更多
关键词 鳖甲煎丸 增殖 层黏连蛋白 Ⅳ型胶原 人肾小球系膜细胞
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稳定表达饰胶蛋白聚糖基因的大鼠肾小球系膜细胞株的建立 被引量：8
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作者 王慧君 张志刚 +3 位作者 陈广平 林文生 陈琦 郭慕依 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-99,102,共4页
目的　研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法　RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。... 目的　研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法　RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。结果　成功构建重组真核表达质粒 pcDNA3 .1A DCN ,转染MsC并筛选出 2个阳性克隆株。结论　构建载有DCN基因的MsC载体 。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 饰胶蛋白聚糖 基因转染 大鼠 DCN
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肾小球系膜细胞培养及鉴定 被引量：85
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作者 潘晓勤 王晓燕 姜新猷 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1995年第1期222-223,共2页
肾小球系膜细胞（GMC）具有多种功能，如分泌细胞基质，产生细胞因子，并具有吞噬清除大分子物质以及类似平滑肌纫胞的收缩功能，是肾小球中功能最活跃的一类细胞。因此GMC的体外培养是研究肾功能、肾小球疾病的发生发展必不可少的手段... 肾小球系膜细胞（GMC）具有多种功能，如分泌细胞基质，产生细胞因子，并具有吞噬清除大分子物质以及类似平滑肌纫胞的收缩功能，是肾小球中功能最活跃的一类细胞。因此GMC的体外培养是研究肾功能、肾小球疾病的发生发展必不可少的手段之一。本中心近年来成功地进行了大鼠、成人以及胎儿肾系膜细胞的培养，现总结如下。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 细胞培养 鉴定
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黄连素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞FN及p38MAPK信号通路的影响 被引量：17
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作者 覃肇源 刘慰华 黄河清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1201-1205,共5页
目的研究黄连素对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质成分纤维连接蛋白及p38MAPK信号通路的影响,进一步探讨黄连素抗糖尿病肾病的作用机制。方法实验分组:正常对照组、甘露醇组、高糖组、高糖+SB203580组、高糖+黄连素低剂量组、高... 目的研究黄连素对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质成分纤维连接蛋白及p38MAPK信号通路的影响,进一步探讨黄连素抗糖尿病肾病的作用机制。方法实验分组:正常对照组、甘露醇组、高糖组、高糖+SB203580组、高糖+黄连素低剂量组、高糖+黄连素高剂量组共6组,观察黄连素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞纤维连接蛋白以及p38MAPK信号通路蛋白表达的影响。结果与高糖组相比,黄连素降低系膜细胞纤维连接蛋白的蛋白表达水平,抑制p38MAPK及其下游核转录因子CREB的磷酸化。结论黄连素抗糖尿病肾病的作用可能与其减少细胞外基质成分FN的积聚,抑制p38MAPK信号通路激活密切相关。 展开更多
关键词 黄连素 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 细胞外基质 纤维连接蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶
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祛风通络方抑制NF-κB活化对脂多糖诱导的体外培养大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达的影响 被引量：7
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作者 王竹 孙万森 +3 位作者 王娟 马巧亚 张晓强 吴喜利 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1825-1827,1830,共4页
目的研究祛风通络方对脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞表达炎性细胞因子TGF-β1、IL-6的影响及其作用机制。方法采用体外培养大鼠系膜细胞和血清药理学方法,分为空白组,病理组,治疗组和阳性对照组。采用生物素核酸-蛋白结合凝胶迁移电泳... 目的研究祛风通络方对脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞表达炎性细胞因子TGF-β1、IL-6的影响及其作用机制。方法采用体外培养大鼠系膜细胞和血清药理学方法,分为空白组,病理组,治疗组和阳性对照组。采用生物素核酸-蛋白结合凝胶迁移电泳分析法检测NF-κB的表达;RT-PCR检测TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达。结果祛风通络方能够抑制脂多糖刺激肾小球系膜细胞中NF-κB活化,且在祛风通络方的作用下,TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达均呈不同程度减弱。结论提示祛风通络方可能通过抑制NF-κB活化,下调TGF-β1mRNA和IL-6mRNA的表达达到减轻系膜细胞增殖,防止肾小球硬化的作用。这可能是祛风通络方治疗系膜增生性肾炎的机制之一。 展开更多
关键词 祛风通络方 大鼠肾小球系膜细胞 NF-ΚB TGF-Β1 IL-6
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丹参酮ⅡA对人肾小球系膜细胞晚期糖化终产物受体表达及氧化应激水平的影响研究 被引量：12
19
作者 蔡伟 徐积兄 +2 位作者 朱凌燕 肖钧仁 李刚 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第30期3585-3589,共5页
目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对晚期糖化终末产物(AGE)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)的晚期糖化终末产物受体(RAGE)表达和氧化应激水平的影响。方法常规方法培养HMCs,分为:对照组;AGE组〔晚期糖化终末产物牛血清清蛋白(AGE-BSA)1.0、10.0、5... 目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对晚期糖化终末产物(AGE)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)的晚期糖化终末产物受体(RAGE)表达和氧化应激水平的影响。方法常规方法培养HMCs,分为:对照组;AGE组〔晚期糖化终末产物牛血清清蛋白(AGE-BSA)1.0、10.0、50.0、100.0μg/ml〕;AGE+TanⅡA组(AGE-BSA50.0μg/ml,TanⅡA 0、0.1、1.0、5.0、10.0μg/ml),以GAPDH为内参照,分别采用Western blotting和实时定量PCR法检测RAGE和mRNA表达水平,同时检测细胞培养上清液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。结果对照组与不同浓度AGE组HMCs RAGE和mRNA表达比较,差异均有统计学意义(F值分别为4.428和5.031,P<0.05);其中与对照组比较,10.0、50.0、100.0μg/ml AGE组HMCs RAGE和mRNA表达水平升高(P<0.05)。对照组与AGE+不同浓度TanⅡA组HMCs RAGE和mRNA表达比较有差异(F值为5.002和5.312,P<0.05);其中与AGE+0μg/ml TanⅡA组比较,对照组、AGE+0.1μg/ml TanⅡA组、AGE+1.0μg/ml TanⅡA组、AGE+5.0μg/ml TanⅡA组、AGE+10.0μg/ml TanⅡA组HMCs RAGE和mRNA表达降低(P<0.05)。对照组与不同浓度AGE组及AGE+TanⅡA组上清液SOD、GSH-Px和MDA水平比较有差异(P<0.05)。结论 TanⅡA能够明显降低AGE诱导HMCs RAGE和mRNA的表达水平,同时氧化应激水平也得到明显改善。 展开更多
关键词 丹参酮 晚期糖化终产物受体 氧化性应激 肾小球系膜细胞
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红参发酵产物对高糖下大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质降解的影响 被引量：8
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作者 曲萌 董佳婧 +4 位作者 姜锐 崔继春 孙坤洋 董志恒 孙立伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期245-249,共5页
目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 m... 目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 mg·L^(-1))FRGE组。四甲基偶氮唑盐(MTT)光吸收法观察各组GMCs的增殖率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养细胞上清中Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)的水平,蛋白免疫印迹技术(Western blotting)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)蛋白表达水平。结果:与NG组比较,HG组GMCs增殖率升高(P<0.01),ColⅣ水平升高(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01);与HG组比较,高糖+不同浓度FRGE组GMCs增殖率均降低(P<0.01),ColⅣ水平降低(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01)。结论:FRGE可通过抑制高糖诱导的大鼠GMCs增殖,促进ECM的降解,延缓DN的发生发展。 展开更多
关键词 红参发酵产物 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 细胞增殖 基质金属蛋白酶
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