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hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗抗胃癌免疫的初步研究
1
作者 郭红 郝嘉 +2 位作者 吴超 石云 房殿春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-171,共3页
目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免... 目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免疫原性和观察其体内激发特异性CTL反应的有效性。结果确定制备疫苗的参数为浓度为150mmol/LNaCl,电荷比为4。证实该疫苗可激发特异性CTL反应,并对胃癌细胞具有特异性杀伤活性,Elispot实验显示能够有效诱导的IFN-γ分泌。结论成功构建了具有特异性CTL杀伤活性的hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗,为进一步探索其体内抗胃癌免疫作用奠定了基础。 展开更多
关键词 人端粒酶逆转录酶 胃癌 隐性表位 肽-核酸病毒样颗粒疫苗 细胞毒T淋巴细胞
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杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)表达的动物病毒样颗粒及疫苗研究进展 被引量：1
2
作者 王炎 高婉宁 +3 位作者 范益阳 玉妹 张德荣 柏家林 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第1期203-208,共6页
杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自... 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自组装形成的纳米颗粒,由于缺乏病毒遗传物质,其安全性较高。VLP表面抗原排列高度有序,可有效诱导免疫反应,是一种新型的亚单位疫苗。本文综述了IBEVS在动物VLP疫苗中的应用现状,分析了当前IBEVS存在的问题及其解决策略,为动物VLP疫苗的进一步开发提供参考。 展开更多
关键词 病毒样颗粒 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS) 动物病毒样颗粒疫苗
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携带抑胃多肽序列的HBc病毒样颗粒蛋白疫苗的制备及其免疫效果
3
作者 田建卿 王越 +2 位作者 林宁 邹大进 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1230-1235,共6页
目的：设计及制备携带抑胃多肽（GIP）抗原序列的HBc病毒样颗粒（VLP）蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法：克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP（1-144aa）cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP... 目的：设计及制备携带抑胃多肽（GIP）抗原序列的HBc病毒样颗粒（VLP）蛋白疫苗,并研究其免疫效果,为肥胖免疫干预治疗提供新的策略。方法：克隆GIP cDNA序列,并与HBc VLP（1-144aa）cDNA序列进行融合,通过原核表达及纯化,制备携带GIP序列的HBc VLP疫苗（HBc-GIP）;同时将该融合基因的cDNA序列克隆入pVAX1真核表达载体,制备GIP核酸疫苗。用2种疫苗免疫大鼠并进行免疫学指标评价。结果：成功制备了携带GIP抗原序列的HBc-GIP,并同时制备了编码该融合蛋白序列的核酸疫苗pVAX1-HBc-GIP。经过两种疫苗的联合免疫,可以获得高滴度的GIP特异性抗体IgG,显示了良好的免疫效果。结论：采用HBc（1-144aa）作为GIP的载体,制备VLP蛋白疫苗,联合核酸疫苗免疫可以有效地诱导靶向大鼠GIP的特异性体液免疫反应,打破大鼠自身抗原耐受。该疫苗可以作为一种新的控制肥胖的免疫干预药物来进一步深入研究。 展开更多
关键词 抑胃多肽 病毒样颗粒 肥胖症 免疫疗法 蛋白疫苗
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含APPβ裂解位点肽及Aβ_(1-15)的嵌合型HBcAg颗粒抗原的制备及其免疫原性分析
4
作者 冯改丰 王军阳 +5 位作者 靳辉 王唯析 钱亦华 杨维娜 王全颖 杨广笑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1169-1172,共4页
目的:构建含APPβ位点裂解肽ABCSP、β-淀粉样肽氨基段15肽(Aβ1-15)及删除了c/e1表位的截短型HBcAg基因的原核表达质粒pET/c-ABCSP-Aβ15-c,并在大肠杆菌中表达,观察融合蛋白C-ABCSP-Aβ15-C形成的病毒样颗粒,检测其免疫原性,为多表位A... 目的:构建含APPβ位点裂解肽ABCSP、β-淀粉样肽氨基段15肽(Aβ1-15)及删除了c/e1表位的截短型HBcAg基因的原核表达质粒pET/c-ABCSP-Aβ15-c,并在大肠杆菌中表达,观察融合蛋白C-ABCSP-Aβ15-C形成的病毒样颗粒,检测其免疫原性,为多表位AD基因工程疫苗的研究奠定基础。方法:PCR扩增含APPβ位点裂解肽ABCSP、β-淀粉样肽氨基段15肽(Aβ1-15)的基因,连接于HBcAg的1～71的3'端,再将HBcAg的88～144位氨基酸的基因片断连接于Aβ1-15的基因的3'端,构建重组质粒pUC/c-ABCSP-Aβ15-c,将重组基因亚克隆于原核表达载体pET-28a(+)中,构建表达质粒pET/c-ABCSP-Aβ15-c,IPTG诱导表达。用SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色,观察重组基因的表达。透射电镜观察融合蛋白形成的病毒样颗粒。融合蛋白经腹腔注射免疫昆明小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗-ABCSP、抗-Aβ抗体的滴度。结果:经酶切鉴定、DNA序列测定证实,重组基因位于表达质粒之中,其大小、序列与理论设计相符。诱导表达后,SDS-PAGE显示,在细菌裂解液的上清和沉淀中均可见到表达蛋白条带,且以沉淀中为多,约占沉淀总蛋白的40%。纯化后的融合蛋白形成电镜下可观察到的病毒样颗粒。昆明小鼠经融合蛋白免疫5次后,其血清中抗-ABCSP抗体的滴度可达1∶5 000,抗-Aβ抗体的滴度可达1∶10 000,检测不到抗-HBc抗体。结论:c-ABCSP-Aβ15-c融合基因在大肠杆菌中可高效表达,表达的融合蛋白具有较强的免疫原性。 展开更多
关键词 β-淀粉样肽(Aβ) HBCAG 融合蛋白 病毒样颗粒 基因工程疫苗
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含Aβ_(1-15)的嵌合型HBcAg颗粒抗原的制备及其免疫原性分析
5
作者 冯改丰 靳辉 +3 位作者 王唯析 钱亦华 王全颖 杨广笑 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期290-295,共6页
目的：原核表达并纯化含β-淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）氨基段15肽（Aβ1-15）和删除c／el表位的截断型HBcAg的融合蛋白，观察其形成的病毒样颗粒，检测其免疫原性，为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）基因工程疫苗... 目的：原核表达并纯化含β-淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）氨基段15肽（Aβ1-15）和删除c／el表位的截断型HBcAg的融合蛋白，观察其形成的病毒样颗粒，检测其免疫原性，为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）基因工程疫苗的研究提供基础。方法：将合成的Aβ1-15基因连接于HBcAg的1-71的3’端，再将HBcAg的88～144位氨基酸的基因片断连接于Aβ1-15；的基因的3’端，构建重组质粒pUC／c—Aβ1-15将重组基因亚克隆于原核表达载体pET-28a（＋）中，构建表达质粒pET／c．Aβ1-15异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl β—D-1-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导、SDS—PAGE和考马斯亮蓝染色检测重组基因的表达。表达的融合蛋白（命名为CAl5C）纯化后，透射电镜观察病毒样颗粒的形成。以病毒颗粒抗原CA15C腹腔注射免疫昆明小鼠，间接ELISA法检测小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度。结果：经酶切鉴定、DNA序列测定证实，目的基因重组于表达质粒之中，与理论设计相符。诱导表达后，在细菌裂解液的上清和沉淀中均可见表达蛋白CA15C，以沉淀中为多，约占细菌沉淀总蛋白的40％。电镜下可见纯化后的CA15C形成直径约30nm的病毒样颗粒。昆明小鼠经CA15C免疫5次后，其血清中抗-AB抗体的滴度可达1：10000，且检测不到抗-HBc抗体。结论：原核表达制备的含Aβ1。和HBcAg的融合蛋白CA15C，可形成病毒样颗粒，有较强的免疫原性。 展开更多
关键词 β-淀粉样肽(Aβ) HBCAG 融合蛋白 病毒样颗粒 基因工程疫苗
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狂犬病新型基因工程疫苗研究进展 被引量：9
6
作者 柴本杰 黄菲 +4 位作者 裴捷 周明 田大勇 傅振芳 赵凌 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期75-84,共10页
狂犬病是由狂犬病病毒感染中枢神经系统引起的一种古老的人兽共患传染病,人和动物感染后一旦出现临床症状,死亡率几乎100%,至今仍无有效的治疗方法。当前,接种疫苗是预防狂犬病最为有效的途径。因此,狂犬病疫苗研发一直是狂犬病研究领... 狂犬病是由狂犬病病毒感染中枢神经系统引起的一种古老的人兽共患传染病,人和动物感染后一旦出现临床症状,死亡率几乎100%,至今仍无有效的治疗方法。当前,接种疫苗是预防狂犬病最为有效的途径。因此,狂犬病疫苗研发一直是狂犬病研究领域的热点之一,进而不断涌现出新型疫苗。本文对近期狂犬病新型灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、口服疫苗等基因工程疫苗研究进展进行系统梳理,以期把握狂犬病疫苗研究现状,为研发更为有效的狂犬病新型疫苗提供新思路。 展开更多
关键词 狂犬病 狂犬病病毒 灭活疫苗 弱毒疫苗 核酸疫苗 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 口服疫苗 基因工程
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小反刍兽疫基因工程疫苗研究进展 被引量：4
7
作者 曹冬伸 赵柏林 +4 位作者 曲萍 胡冬梅 王文超 宋晓晖 潘树德 《动物医学进展》 北大核心 2015年第11期101-105,共5页
2013年世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮食及农业组织(FAO)提出小反刍兽疫可能成为继牛瘟之后,被在全球范围内消灭的第2个动物疫病。近年来,广泛使用弱毒疫苗免疫预防小反刍兽疫,但由于缺乏区分免疫抗体和感染抗体的技术手段等,给小反... 2013年世界动物卫生组织(OIE)和联合国粮食及农业组织(FAO)提出小反刍兽疫可能成为继牛瘟之后,被在全球范围内消灭的第2个动物疫病。近年来,广泛使用弱毒疫苗免疫预防小反刍兽疫,但由于缺乏区分免疫抗体和感染抗体的技术手段等,给小反刍兽疫的消灭和根除计划的实施带来一定的困难。因此,新型疫苗以及特异性诊断技术的研究和开发成为研究热点。论文对小反刍兽疫新型疫苗研究中的亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、基因工程弱毒苗、核酸疫苗的研究进行综述,以期为小反刍兽疫新型疫苗开发和应用提供参考。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 基因工程弱毒苗 核酸疫苗
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H7N9亚型禽流感疫苗研究进展 被引量：2
8
作者 梁少波 张琳 +8 位作者 朱俊峰 刘朔 彭程 尹馨 李金平 侯广宇 刘华雷 格日勒图 蒋文明 《中国动物检疫》 CAS 2021年第12期77-81,共5页
自2013年以来,H7N9亚型流感对我国养禽业和人类公共卫生造成了极大影响。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型流感防控中起到了至关重要的作用。目前我国批准使用的H7N9禽流感全病毒灭活疫苗安全性高、免疫效果好,已在国内广泛应用。随着对... 自2013年以来,H7N9亚型流感对我国养禽业和人类公共卫生造成了极大影响。疫苗作为重要防疫工具,在H7N9亚型流感防控中起到了至关重要的作用。目前我国批准使用的H7N9禽流感全病毒灭活疫苗安全性高、免疫效果好,已在国内广泛应用。随着对H7N9亚型流感病毒研究的不断深入,研究人员对核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗及通用流感疫苗等新型疫苗进行了探索和尝试,并取得了一定的进展,为我国禽流感疫苗的开发与应用夯实了技术基础。本文对各类型H7N9亚型禽流感疫苗的研发情况以及优点和应用情况进行了综述,以期为更好地防控禽H7N9亚型流感提供帮助。 展开更多
关键词 H7N9 全病毒灭活疫苗 核酸疫苗 亚单位疫苗 病毒样颗粒疫苗 通用流感疫苗
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