目的基质硬度参与调控中性粒细胞黏附、迁移和极化状态等多个生物学过程。本项目旨在研究基质硬度影响中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成的具体机制。方法构建生理病理条件下不同硬度(5~128 k Pa)的聚丙烯酰胺(PAA)凝胶。在PAA凝胶和玻璃...目的基质硬度参与调控中性粒细胞黏附、迁移和极化状态等多个生物学过程。本项目旨在研究基质硬度影响中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成的具体机制。方法构建生理病理条件下不同硬度(5~128 k Pa)的聚丙烯酰胺(PAA)凝胶。在PAA凝胶和玻璃底板上铺纤维蛋白原,黏附并培养人中性粒细胞4 h,对照组用GSK484抑制肽精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)的酶活性,观察并量化形成的NETs。结果纤维蛋白原结合的人中性粒细胞产生的NETs含量与基底硬度有关。随着PAA凝胶硬度的增加,中性粒细胞产生的胞外DNA先增加后减少。其中,34 k Pa硬度的PAA凝胶上,中性粒细胞产生的胞外DNA显著高于其他组。同样地,在不同硬度的PAA凝胶上,瓜氨酸化组蛋白的含量也呈现相同趋势。而抑制PAD4能有效消除硬度依赖的NETs形成。重要的是,这一硬度依赖的NETs形成与水凝胶的种类和边缘效应无关。此外,不同水凝胶上纤维蛋白原的密度无显著差异。结论纤维蛋白原介导的NETs形成是硬度依赖的。随着PAA凝胶硬度的增加,中性粒细胞产生的NETs先增加后减少,且PAD4参与这一过程。展开更多
文摘目的基质硬度参与调控中性粒细胞黏附、迁移和极化状态等多个生物学过程。本项目旨在研究基质硬度影响中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)形成的具体机制。方法构建生理病理条件下不同硬度(5~128 k Pa)的聚丙烯酰胺(PAA)凝胶。在PAA凝胶和玻璃底板上铺纤维蛋白原,黏附并培养人中性粒细胞4 h,对照组用GSK484抑制肽精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)的酶活性,观察并量化形成的NETs。结果纤维蛋白原结合的人中性粒细胞产生的NETs含量与基底硬度有关。随着PAA凝胶硬度的增加,中性粒细胞产生的胞外DNA先增加后减少。其中,34 k Pa硬度的PAA凝胶上,中性粒细胞产生的胞外DNA显著高于其他组。同样地,在不同硬度的PAA凝胶上,瓜氨酸化组蛋白的含量也呈现相同趋势。而抑制PAD4能有效消除硬度依赖的NETs形成。重要的是,这一硬度依赖的NETs形成与水凝胶的种类和边缘效应无关。此外,不同水凝胶上纤维蛋白原的密度无显著差异。结论纤维蛋白原介导的NETs形成是硬度依赖的。随着PAA凝胶硬度的增加,中性粒细胞产生的NETs先增加后减少,且PAD4参与这一过程。
