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大鼠成熟的肺表面活性蛋白B的原核表达及纯化
被引量：
1
1
作者
张潇骏
王万能
+7 位作者
周继红
刘钦
顾仕苓
周代君
邱俊
代维
袁丹凤
刘大维
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期18-23,共6页
为表达和纯化SP-B蛋白,先对SP-B基因进行稀有密码子优化,PCR反应获得SP-B片段,构建重组质粒pGEX4T-1/SP-B,转化到E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用SDS-PAGE与Western blot进行检测;用GSTPrep FF 16/10对融合蛋白进行纯化。经双酶切鉴定证...
为表达和纯化SP-B蛋白,先对SP-B基因进行稀有密码子优化,PCR反应获得SP-B片段,构建重组质粒pGEX4T-1/SP-B,转化到E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用SDS-PAGE与Western blot进行检测;用GSTPrep FF 16/10对融合蛋白进行纯化。经双酶切鉴定证实质粒中插入基因长250bp,测序结果与大鼠SP-B cDNA序列相符;质粒转化后用IPTG进行诱导,在分子质量约34ku处出现1个新条带,与pGEX4T-1/SP-B蛋白预期大小一致,且该融合蛋白能可溶性表达并被纯化。结果表明成功构建了pGEX4T-1/SP-B重组质粒,表达、纯化得到GST/SP-B蛋白,为研究肺表面活性物质替代药物奠定了基础。
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关键词
肺表面活性蛋白b
原核表达
免疫印迹
蛋白
纯化
大鼠
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职称材料
肺表面活性蛋白B在新生儿呼吸窘迫综合征中的作用
被引量：
2
2
作者
谭艳鸣
陈贻骥
《儿科药学杂志》
CAS
2008年第3期53-56,共4页
新生儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome of newborn，NRDS）是引起新生儿呼吸衰竭的主要疾病，也是新生儿特别是早产儿死亡的主要原因。其发病主要机制是由于缺乏肺表面活性物质（pulmonary surfactant，PS），导致肺泡...
新生儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome of newborn，NRDS）是引起新生儿呼吸衰竭的主要疾病，也是新生儿特别是早产儿死亡的主要原因。其发病主要机制是由于缺乏肺表面活性物质（pulmonary surfactant，PS），导致肺泡表面张力增加，肺泡塌陷。临床医学、流行病学及生物化学都充分证明NRDS是一种多因素、多基因疾病。目前认为NRDS与PS中肺表面活性物质蛋白（surfactant protein，SP）合成减少有很大的关系，表面活性蛋白-B（SP—B）是其中最重要的一种，
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关键词
新生儿呼吸衰竭
肺表面活性蛋白b
呼吸窘迫综合征
肺
表面活性
物质
蛋白
PULMONARY
肺
泡
表面
张力
protein
多基因疾病
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职称材料
题名
大鼠成熟的肺表面活性蛋白B的原核表达及纯化
被引量：
1
1
作者
张潇骏
王万能
周继红
刘钦
顾仕苓
周代君
邱俊
代维
袁丹凤
刘大维
机构
重庆理工大学药学与生物工程学院
第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期18-23,共6页
基金
国家自然科学基金项目(81471865)
文摘
为表达和纯化SP-B蛋白,先对SP-B基因进行稀有密码子优化,PCR反应获得SP-B片段,构建重组质粒pGEX4T-1/SP-B,转化到E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用SDS-PAGE与Western blot进行检测;用GSTPrep FF 16/10对融合蛋白进行纯化。经双酶切鉴定证实质粒中插入基因长250bp,测序结果与大鼠SP-B cDNA序列相符;质粒转化后用IPTG进行诱导,在分子质量约34ku处出现1个新条带,与pGEX4T-1/SP-B蛋白预期大小一致,且该融合蛋白能可溶性表达并被纯化。结果表明成功构建了pGEX4T-1/SP-B重组质粒,表达、纯化得到GST/SP-B蛋白,为研究肺表面活性物质替代药物奠定了基础。
关键词
肺表面活性蛋白b
原核表达
免疫印迹
蛋白
纯化
大鼠
Keywords
surfactant protein
b
prokaryotic expression
Western
b
lot
protein purification
rat
分类号
S852.21 [农业科学—基础兽医学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
肺表面活性蛋白B在新生儿呼吸窘迫综合征中的作用
被引量：
2
2
作者
谭艳鸣
陈贻骥
机构
重庆医科大学附属儿童医院
出处
《儿科药学杂志》
CAS
2008年第3期53-56,共4页
文摘
新生儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome of newborn，NRDS）是引起新生儿呼吸衰竭的主要疾病，也是新生儿特别是早产儿死亡的主要原因。其发病主要机制是由于缺乏肺表面活性物质（pulmonary surfactant，PS），导致肺泡表面张力增加，肺泡塌陷。临床医学、流行病学及生物化学都充分证明NRDS是一种多因素、多基因疾病。目前认为NRDS与PS中肺表面活性物质蛋白（surfactant protein，SP）合成减少有很大的关系，表面活性蛋白-B（SP—B）是其中最重要的一种，
关键词
新生儿呼吸衰竭
肺表面活性蛋白b
呼吸窘迫综合征
肺
表面活性
物质
蛋白
PULMONARY
肺
泡
表面
张力
protein
多基因疾病
分类号
R722.12 [医药卫生—儿科]
R563 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠成熟的肺表面活性蛋白B的原核表达及纯化
张潇骏
王万能
周继红
刘钦
顾仕苓
周代君
邱俊
代维
袁丹凤
刘大维
《动物医学进展》
北大核心
2016
1
在线阅读
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职称材料
2
肺表面活性蛋白B在新生儿呼吸窘迫综合征中的作用
谭艳鸣
陈贻骥
《儿科药学杂志》
CAS
2008
2
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职称材料
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