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基于单细胞转录组和类器官模型探讨沙蟾毒精通过Notch通路干预结直肠癌增殖的研究
1
作者
商志浩
钱景阳
+1 位作者
赖岳阳
程海波
《中华中医药学刊》
北大核心
2025年第2期112-116,I0015-I0019,共10页
目的基于单细胞转录组测序和类器官模型探讨沙蟾毒精(Are)抑制结直肠癌的效果和机制。方法通过对沙蟾毒精和PBS干预的结直肠癌移植瘤进行单细胞测序,基于测序结果分析占比减少的肿瘤细胞亚群及其生物学功能;5-Ethynyl-2'-deoxyuridi...
目的基于单细胞转录组测序和类器官模型探讨沙蟾毒精(Are)抑制结直肠癌的效果和机制。方法通过对沙蟾毒精和PBS干预的结直肠癌移植瘤进行单细胞测序,基于测序结果分析占比减少的肿瘤细胞亚群及其生物学功能;5-Ethynyl-2'-deoxyuridine(EDU)实验用于观察沙蟾毒精对于HCT 116细胞增殖的抑制能力;蛋白免疫印迹(Western Blotting)实验用于验证凋亡相关蛋白和Notch通路中相关蛋白在沙蟾毒精干预后的表达改变;最后对类器官进行了苏木精-伊红染色(HE)及免疫组织化学染色(IHC)来评估沙蟾毒精对于类器官的抑制效果。结果单细胞转录组测序结果显示第二群肿瘤细胞亚群在干预后比例显著降低,PBS组中占比21.57%,Are组中占比14.16%,富集分析显示这群肿瘤细胞与蛋白质运输、由RNA聚合酶Ⅱ调控的转录、囊泡介导的运输、基于DNA模板的转录负向调控、从内质网到高尔基体的囊泡介导运输、细胞凋亡过程、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、癌症中的蛋白多糖、泛素介导的蛋白质降解、癌症途径、Notch信号通路、Wnt信号通路等生物学进程相关,EDU实验显示,与PBS组相比,沙蟾毒精在100~300 nmol/L间浓度依赖性地抑制HCT 116细胞增殖;Western blot结果显示,与PBS组相比,沙蟾毒精显著提高了BAX的表达,并抑制BCL-2的蛋白表达。与Notch通路相关的Notch1、Jagged1、HES1、Cyclin D1和DLL4蛋白都出现了不同程度的表达抑制。结论沙蟾毒精能够抑制结直肠癌增殖,其机制可能与抑制Notch通路激活有关。
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关键词
单细胞转录组
肠癌类器官
NOTCH通路
沙蟾毒精
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题名
基于单细胞转录组和类器官模型探讨沙蟾毒精通过Notch通路干预结直肠癌增殖的研究
1
作者
商志浩
钱景阳
赖岳阳
程海波
机构
南京中医药大学第一临床医学院
江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心
出处
《中华中医药学刊》
北大核心
2025年第2期112-116,I0015-I0019,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2022YFC3500200,2022YFC3500201)
国家自然科学基金项目(81902330)
+1 种基金
国家中医药管理局中医药创新团队及人才支持计划项目(ZYYCXTD-C-202208)
江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)。
文摘
目的基于单细胞转录组测序和类器官模型探讨沙蟾毒精(Are)抑制结直肠癌的效果和机制。方法通过对沙蟾毒精和PBS干预的结直肠癌移植瘤进行单细胞测序,基于测序结果分析占比减少的肿瘤细胞亚群及其生物学功能;5-Ethynyl-2'-deoxyuridine(EDU)实验用于观察沙蟾毒精对于HCT 116细胞增殖的抑制能力;蛋白免疫印迹(Western Blotting)实验用于验证凋亡相关蛋白和Notch通路中相关蛋白在沙蟾毒精干预后的表达改变;最后对类器官进行了苏木精-伊红染色(HE)及免疫组织化学染色(IHC)来评估沙蟾毒精对于类器官的抑制效果。结果单细胞转录组测序结果显示第二群肿瘤细胞亚群在干预后比例显著降低,PBS组中占比21.57%,Are组中占比14.16%,富集分析显示这群肿瘤细胞与蛋白质运输、由RNA聚合酶Ⅱ调控的转录、囊泡介导的运输、基于DNA模板的转录负向调控、从内质网到高尔基体的囊泡介导运输、细胞凋亡过程、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、癌症中的蛋白多糖、泛素介导的蛋白质降解、癌症途径、Notch信号通路、Wnt信号通路等生物学进程相关,EDU实验显示,与PBS组相比,沙蟾毒精在100~300 nmol/L间浓度依赖性地抑制HCT 116细胞增殖;Western blot结果显示,与PBS组相比,沙蟾毒精显著提高了BAX的表达,并抑制BCL-2的蛋白表达。与Notch通路相关的Notch1、Jagged1、HES1、Cyclin D1和DLL4蛋白都出现了不同程度的表达抑制。结论沙蟾毒精能够抑制结直肠癌增殖,其机制可能与抑制Notch通路激活有关。
关键词
单细胞转录组
肠癌类器官
NOTCH通路
沙蟾毒精
Keywords
single-cell transcriptomics
colorectal cancer organoids
NOTCH pathway
arenobufagin
分类号
R277.7 [医药卫生—中医学]
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作者
出处
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1
基于单细胞转录组和类器官模型探讨沙蟾毒精通过Notch通路干预结直肠癌增殖的研究
商志浩
钱景阳
赖岳阳
程海波
《中华中医药学刊》
北大核心
2025
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