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植物天然产物抗肠出血性大肠埃希菌的研究进展
1
作者 钟樱 方芳 +2 位作者 朱靓 薛云新 王岱 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1271-1280,共10页
肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)作为人畜共患致病菌,暴发性感染可诱发严重的全身性溶血性尿毒症综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)。然而传统的抗生素治疗不仅导致耐药性的产生,还会促进志贺毒素(Sh... 肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)作为人畜共患致病菌,暴发性感染可诱发严重的全身性溶血性尿毒症综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)。然而传统的抗生素治疗不仅导致耐药性的产生,还会促进志贺毒素(Shiga toxin,Stx)的释放,从而加重病情。因此亟需开发新型抗EHEC感染药物。植物天然产物因其结构和功能的多样性,在抑制细菌生长和抗毒力方面显示出巨大的潜力,成为研发新型抗EHEC感染药物的重要资源库。本文通过介绍植物天然产物,在此基础上对抑制EHEC生长和毒力因子的植物天然产物分别进行总结,为寻找预防和治疗EHEC感染提供思路和依据。 展开更多
关键词 植物天然产物 肠出血性大肠埃希菌 抑制生长 抗毒力
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苦杏仁粕抑制产肠毒素性大肠埃希菌的作用机制
2
作者 朱亚南 吴文婷 +4 位作者 王馨怡 张露 邱雪辉 王虎玄 易建华 《陕西科技大学学报》 北大核心 2025年第2期73-80,共8页
产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.... 产肠毒素性大肠埃希菌(ETEC)是导致人畜腹泻的主要病原菌.本文以苦杏仁粕为原料,将其1%的提取液与ETEC H10407共同培养,研究苦杏仁粕对ETEC生长、形态等的影响,并利用转录组测序技术,探究苦杏仁粕提取液对ETEC中基因的转录表达的作用.结果表明:1%的苦杏仁粕提取液可以显著抑制ETEC的生长,破坏菌体细胞形态,减少了脂肪酸合成、蛋白质翻译通路相关基因的表达,增加了细菌趋化性信号通路相关基因cheB、cheR,ABC转运蛋白途径中铁元素转运相关基因fecB、fecC、fecD等的表达.苦杏仁粕可能引发了ETEC的代谢紊乱,从而抑制了其生长.研究结果将为开发利用苦杏仁,用于ETEC的防治提供参考. 展开更多
关键词 苦杏仁粕 产肠毒素性大肠埃希菌 抑菌 差异基因表达
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新疆某野生动物园草食动物粪源大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定与耐药性分析
3
作者 马超 刘泽鹏 +3 位作者 陈万昭 吴慧敏 夏盼盼 夏利宁 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期44-50,共7页
采集新疆某野生动物园高山区梅花鹿、马鹿、牦牛和荒漠区的马属动物(蒙古野驴和普氏野马)的新鲜粪便共231份,进行大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定;用琼脂稀释法对分离的大肠埃希氏菌和肠球菌进行最小抑菌浓度的测定;PCR检测常见相关耐... 采集新疆某野生动物园高山区梅花鹿、马鹿、牦牛和荒漠区的马属动物(蒙古野驴和普氏野马)的新鲜粪便共231份,进行大肠埃希氏菌和肠球菌的分离鉴定;用琼脂稀释法对分离的大肠埃希氏菌和肠球菌进行最小抑菌浓度的测定;PCR检测常见相关耐药基因。结果显示,野生动物园草食动物粪便中的肠球菌和大肠埃希氏菌分离率分别为93.5%(216/231)和56.7%(131/231);肠球菌中屎肠球菌分离率为64.3%(139/216)。药敏试验结果显示,大肠埃希氏菌对氟苯尼考、氨苄西林、多西环素和四环素的耐药率在12.5%以下,对其余6种药物敏感;肠球菌对四环素(1.9%,4/216)、多西环素(0.9%,2/216)和恩诺沙星(5.1%,11/216)的耐药率较低,对阿米卡星(28.2%,61/216)的耐药率较高,对其余6种药物敏感。耐药基因检测结果显示,大肠埃希氏菌仅检出β-内酰胺类耐药基因bla EC(47.3%)、四环素类耐药基因tet(A)(9.2%)和酰胺醇类耐药基因floR(1.5%);肠球菌仅检出氨基糖苷类耐药基因aac(6′)-Ii(53.7%)和四环素类耐药基因tet(M)(0.5%)。结果表明,该野生动物园草食动物粪源大肠埃希氏菌和肠球菌的耐药率低,且耐药基因检出率不高,除了β-内酰胺类药物的耐药表型和耐药基因检出率不符外,其余药物的耐药表型与基因型呈正相关。说明动物在封闭管理情况下,可避免携带的细菌产生和传播耐药性。 展开更多
关键词 动物园 野生草食动物 大肠埃希氏菌 肠球菌 耐药性分析
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广西肠出血性大肠埃希菌O157监测研究 被引量：6
4
作者 李永红 林玫 +2 位作者 王鸣柳 周凌云 叶洁梅 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1027-1029,共3页
目的了解广西人和动物中EHECO157的流行强度与规律,为卫生决策提供依据。方法采集腹泻病人和家禽家畜粪便、苍蝇及生熟肉类食品标本,经mEC肉汤增菌、O157快诊金卡筛选和免疫磁珠富集后,接种CHROMagarO157显色培养基,最后进行生化和血清... 目的了解广西人和动物中EHECO157的流行强度与规律,为卫生决策提供依据。方法采集腹泻病人和家禽家畜粪便、苍蝇及生熟肉类食品标本,经mEC肉汤增菌、O157快诊金卡筛选和免疫磁珠富集后,接种CHROMagarO157显色培养基,最后进行生化和血清学鉴定。结果2007-2008年,广西共采集各类标本3964份,从牛粪、猪粪、鸡粪和苍蝇标本中检出O157菌株22株,检出率分别为4.35%、1.27%、0.70%和1.84%,其它标本均未检出。22株O157菌株中有18株O157∶H7、4株O157:H-,分布于4-11月。结论广西家禽家畜和苍蝇均有较高的EHECO157带菌率,存在人感染甚至发生人间暴发流行的危险,应继续加强监测并采取适当措施以降低家禽家畜带菌率。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157 监测 人群 动物 食品
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检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的环介导等温扩增和PCR法比较 被引量：7
5
作者 姜容 龙北国 +3 位作者 曾桂芬 王丹 范宏英 吴娴波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1026-1030,共5页
目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的... 目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果。结果成功建立了LAMP和PCR检测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfu/ml,PCR检测限为102cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高。对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性。结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 环介导等温扩增技术 PCR技术 rfbE基因
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量：5
6
作者 李丹丹 徐义刚 +2 位作者 王绥家 高慎阳 李一经 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期81-84,共4页
本试验针对肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7高度保守的rfbE基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测EHEC O157∶H7实时荧光定量PCR方法。结果显示,该法灵敏度约为7.3CFU/mL... 本试验针对肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7高度保守的rfbE基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测EHEC O157∶H7实时荧光定量PCR方法。结果显示,该法灵敏度约为7.3CFU/mL,对310份肉类、蛋、奶及其制品和动物腹泻物、人工污染样品等进行检测,共检出阳性样本20份,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。表明建立的实时荧光定量PCR方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌0157 H7 rfbE基因 荧光定量PCR 快速检测
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7黏附HeLa细胞模型的建立 被引量：4
7
作者 余抒 顾江 +6 位作者 曾浩 杨琴 刘艳青 张卫军 罗萍 王庆旭 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1933-1935,共3页
目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)... 目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)试验鉴定模型。结果加入细菌为1×105CFU,细菌与细胞孵育4h时,黏附细胞的数量最佳,FAS检测发现该条件下细菌能够引起细胞特异性黏附、擦拭(attaching&effacing,A/E)损伤,模型建立成功。结论成功建立O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制提供了条件。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 细胞模型 HELA细胞
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TaqMan探针荧光PCR检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7方法的建立 被引量：5
8
作者 刘生峰 肖进文 +5 位作者 刘利成 杨俊 王昱 聂福平 周庆 李应国 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期6-10,共5页
肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157:H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157:H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157:H7核酸的荧光定量PCR检测方法。实验结果表明荧光定... 肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagie Escherichia coli,EHEC)O157:H7是一种重要的传染病病原菌,以EHEC O157:H7标准菌株rfbE保守区设计一对特异引物和一条探针,建立了检测EHEC O157:H7核酸的荧光定量PCR检测方法。实验结果表明荧光定量PCR检测方法特异性好,最低检测限为20 cfu/mL,线性范围是102～108cfu/mL。稳定性试验表明批内变异系数和批间变异系数分别为2.06%和2.45%。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 荧光PCR 检测
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牛源肠出血性大肠埃希菌的分离鉴定及进化分析 被引量：3
9
作者 郭锐 谭臣 +3 位作者 彭忠 华琳 曾东柱 吴斌 《动物医学进展》 北大核心 2015年第8期11-17,共7页
在牛群中分离肠出血性大肠埃希菌(EHEC),并将分离菌株与国际上流行的EHEC株之间的亲缘关系进行比较。应用PCR方法结合头孢克肟-亚碲酸钾山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC)平板分离法对采集的565份样本(牛粪便397份,牛奶99份,奶牛场环境中的水... 在牛群中分离肠出血性大肠埃希菌(EHEC),并将分离菌株与国际上流行的EHEC株之间的亲缘关系进行比较。应用PCR方法结合头孢克肟-亚碲酸钾山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC)平板分离法对采集的565份样本(牛粪便397份,牛奶99份,奶牛场环境中的水样69份)进行EHEC分离和鉴定,在此基础上,对分离的菌株进行EHEC相关毒力基因的检测及致Vero细胞毒性研究。根据大肠埃希菌MLST数据库(http://mlst.ucc.ie/mlst/mlst/dbs/E.coli)提供的多位点序列分型(MLST)方案,利用MEGA 5.0软件分别对分离菌株进行分子分型及遗传进化分析。结果从565份样本中共分离到EHEC 40株,占分离样本总数的7.1%(40/565)。40株EHEC涵盖了17种血清型,以O157(4/40)、O26(4/40)、O91(7/40)、O100(4/40)、O97(6/40)、O92(2/40)为优势血清型。对40株EHEC进行相关毒力基因的检测发现,stx1、stx2、ehxA、saa基因检出率分别为82.5%(33/40)、75%(30/40)、90%(36/40)和27.5%(11/40),远高于eae(5%,2/40)、wzxO157(10%,4/40)基因检出率。38株携带stx1/stx2基因的EHEC均能产生志贺毒素,且能致Vero细胞产生病变。MLST分析表明,40株EHEC共有7个序列型(ST),其中ST297为优势序列型,占57.5%(23/40)。遗传进化分析表明,ST297型与国际上流行的EHEC具有较近的亲缘关系。本次分离的40株EHEC之间具有一定的分子多态性,与国际上流行的EHEC具有较近的亲缘关系。除了O157EHEC外,非O157EHEC对人类公共卫生安全也可构成一定威胁,因此,我国应加强对这一类菌株的监测与检测。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌 分离与鉴定 多位点序列分型 序列型 进化分析
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肠出血性大肠埃希氏菌O157∶H7的快速检测 被引量：3
10
作者 陈晓蔚 杜雪飞 +1 位作者 丁洁 贾力敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期113-113,共1页
关键词 肠出血性大肠埃希氏菌 O157:H7 检测 腹泻
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肠出血性大肠埃希菌O157：H7多重PCR检测方法的建立 被引量：2
11
作者 纪雪 张雪 +8 位作者 孙洋 孙诗雯 祝令伟 刘军 姜海艳 周伟 梁冰 郭学军 刘彦晶 《动物医学进展》 北大核心 2017年第7期1-6,共6页
为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等... 为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×10~3CFU。从检测阳性样本中均分离到目的菌。应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定。成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 多重PCR 检测 rfbE基因
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液相芯片鉴别检测7种出血性大肠埃希菌血清型 被引量：2
12
作者 陶虹 陈兵 +7 位作者 孙洁 唐金明 林庆燕 曹琛福 吕建强 杨俊兴 花群义 秦智锋 《动物医学进展》 北大核心 2015年第9期46-50,共5页
为了建立一种同时检测O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7种血清型的出血性大肠埃希菌的高通量检测方法,通过筛选比对大肠埃希菌O157血清型的fbE基因,O26、O103和O111血清型的WZX基因,O45、O121和O145血清型的WZY基因,设计了针... 为了建立一种同时检测O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7种血清型的出血性大肠埃希菌的高通量检测方法,通过筛选比对大肠埃希菌O157血清型的fbE基因,O26、O103和O111血清型的WZX基因,O45、O121和O145血清型的WZY基因,设计了针对各个血清型的特异性引物和探针。通过在所有的特异性引物5′端加入超级引物的策略,达到了通过一次PCR反应,同时多重扩增7个血清型的7个目标片段的效果。将加尾多重扩增与液相芯片高通量检测相结合,建立了同时检测7种血清型的出血性大肠埃希菌的液相芯片检测方法,并对方法检测体系及反应条件进行了优化。所建立的7种出血性大肠埃希菌液相芯片检测方法灵敏,其灵敏度与荧光PCR的灵敏度相差100倍。所建立的方法特异,单个血清型的探针与相应的PCR扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于17~63之间。7种血清型的混合探针与各个血清型菌株的PCR与扩增的阳性产物之间均有特异性的杂交,LQRR值介于11~23之间,与其他血清型出血性大肠埃希菌和非出血性大肠埃希菌均无交叉反应。试验结果表明,所建立的液相芯片检测大肠埃希菌O157、O26、O45、O103、O111、O121和O145等7个血清型的检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可用于主要出血性大肠埃希菌的快速鉴别检测。 展开更多
关键词 超级引物 液相芯片 出血性大肠埃希菌
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 espF基因缺陷突变株的构建及其特性初步研究 被引量：1
13
作者 杨瑜 王春晖 +1 位作者 周莹 万成松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期654-658,共5页
目的为研究肠出血性大肠埃希菌O157∶H7效应分子EspF功能,构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,并对其生物学特性进行初步研究。方法采用OL-PCR和自杀性质粒pCVD442介导的同源重组方法构建中间缺失162bp的espF基因缺陷突变株,并比较突... 目的为研究肠出血性大肠埃希菌O157∶H7效应分子EspF功能,构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,并对其生物学特性进行初步研究。方法采用OL-PCR和自杀性质粒pCVD442介导的同源重组方法构建中间缺失162bp的espF基因缺陷突变株,并比较突变株与野生株对结肠癌细胞Lovo的黏附性。结果 PCR及序列分析证实,缺陷突变株的espF基因缺失了162bp碱基,野生株对Lovo细胞的黏附率明显高于突变株(P<0.001)。结论成功构建EHECO157∶H7espF基因缺陷突变株,突变株黏附Lovo细胞能力减弱,表明EspF促进细菌的粘附,为进一步研究其在EHECO157∶H7的A/E损伤中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 出血性大肠埃希菌 espF 自杀性质粒 同源重组
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肠出血性大肠埃希菌0157:H7型检测方法的建立 被引量：1
14
作者 汪力亚 黄上媛 +5 位作者 王丽 李景云 周志江 苏维萍 宋华宾 张让堂 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期64-65,共2页
关键词 肠出血性 大肠埃希菌 EHEC 检测方法
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肠出血性大肠埃希菌EIS基因的克隆与植物表达载体的构建
15
作者 吴仙花 李贺 +5 位作者 施利利 罗峰 夏卜贤 陈晓木 孙守钧 裴忠有 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2014年第5期12-15,共4页
为给利用转基因植物生产出血性大肠杆菌疫苗的研究奠定基础,应用PCR扩增技术从原核表达载体pET-28a(+)-EIS上克隆对出血性大肠杆菌具有保护性免疫的EIS基因序列,并采用T-A克隆方法克隆到pUC18上,通过酶切、连接、转化等技术构建植物表... 为给利用转基因植物生产出血性大肠杆菌疫苗的研究奠定基础,应用PCR扩增技术从原核表达载体pET-28a(+)-EIS上克隆对出血性大肠杆菌具有保护性免疫的EIS基因序列,并采用T-A克隆方法克隆到pUC18上,通过酶切、连接、转化等技术构建植物表达载体,经酶切、测序验证后将构建植物表达载体导入农杆菌中。结果:扩增到约为1 800bp的EIS基因,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1300-EIS,并导入到农杆菌EHA105中。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌 EIS基因 植物表达载体 PCR 克隆 疫苗
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肠出血性大肠埃希菌生物危害评估报告 被引量：1
16
作者 姚静 冯伟业 《当代畜禽养殖业》 2016年第2期46-47,共2页
大肠埃希菌是人和动物肠道的正常菌群,其中有些菌株可引起轻微腹泻或严重腹泻,有的菌株能引起致死性并发症,如溶血性尿毒综合征。依据血清型、毒力和临床症状的不同,将大肠埃希菌分为5类,即肠致病性大肠埃希菌、肠产毒性大肠埃希菌、肠... 大肠埃希菌是人和动物肠道的正常菌群,其中有些菌株可引起轻微腹泻或严重腹泻,有的菌株能引起致死性并发症,如溶血性尿毒综合征。依据血清型、毒力和临床症状的不同,将大肠埃希菌分为5类,即肠致病性大肠埃希菌、肠产毒性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠集聚性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌。引起肠道感染的大肠埃希菌与正常菌群中的大肠埃希菌在普通平板上的表现相似,分离培养后可通过血清分型和毒力检测等加以鉴别。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 肠出血性 评估报告 生物危害 正常菌群 毒力检测 动物肠道 临床症状
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用 被引量：8
17
作者 徐义刚 崔丽春 +4 位作者 李苏龙 于恒纯 李丹丹 谢晓峰 姜艳春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期618-623,共6页
目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设... 目的肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义。方法基于EHEC O157∶H7保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157∶H7LAMP快速检测方法 ,60min内即可完成致病菌检测。结果利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157∶H7均为阳性结果 ,说明该方法具有高度特异性。本方法对纯培养的EHEC O157∶H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157∶H7的检测限为18CFU/g。实践应用表明,对1121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。结论该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 rfbE基因 环介导恒温扩增 快速检测
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出血性大肠埃希菌O157∶H7广东分离株对小鼠致病性的研究 被引量：2
18
作者 谢运冰 顿灿 +1 位作者 王玉 郭霄峰 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期120-122,共3页
探索肠出血性大肠埃希菌Escherichia coli O157∶H7广东分离株021210(NalR)[以下简称O157∶H7 021210(NalR)]对小鼠的半数致死量(LD50),揭示其在小鼠体内产生的病理变化.将20日龄的昆明鼠随机分组,饮水中加入萘啶酮酸预处理,消除肠道杂... 探索肠出血性大肠埃希菌Escherichia coli O157∶H7广东分离株021210(NalR)[以下简称O157∶H7 021210(NalR)]对小鼠的半数致死量(LD50),揭示其在小鼠体内产生的病理变化.将20日龄的昆明鼠随机分组,饮水中加入萘啶酮酸预处理,消除肠道杂菌,再分别以不同剂量腹腔注射O157∶H7 021210(NalR),进行临床观察和病理学检查.测定出LD50,试验结果表明一定剂量的O157∶H7 021210(NalR)可引起小鼠主要脏器及肠道发生病变. 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 小鼠 半数致死量 病理变化
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肠出血性大肠埃希菌O157：H7 tccP基因敲除菌株的构建
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作者 肖大平 郭鹰 +4 位作者 张卫军 顾江 王海光 朱凤才 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期875-878,共4页
目的构建肠出血性大肠埃希菌O157∶H7介导和宿主细胞的粘附与擦拭(A/E)损伤相关基因tccP敲除菌株。方法根据GenBank公布的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7基因序列,设计PCR引物,分别扩增克隆tccP基因两端外侧的DNA片段,并与氯霉素耐药基因Ca... 目的构建肠出血性大肠埃希菌O157∶H7介导和宿主细胞的粘附与擦拭(A/E)损伤相关基因tccP敲除菌株。方法根据GenBank公布的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7基因序列,设计PCR引物,分别扩增克隆tccP基因两端外侧的DNA片段,并与氯霉素耐药基因Cam连接后亚克隆于pBluescriptSKⅡ质粒,通过同源重组替换野生型tccP基因,采用PCR、RT-PCR以及Westernblot分别从DNA、RNA及蛋白质水平鉴定tccP基因是否被敲出。结果在DNA、RNA及蛋白质3个水平均证实Cam片段已成功替换tccP基因而整合进入O157∶H7基因组中。结论成功构建肠出血性大肠埃希菌O157∶H7tccP基因敲除菌株。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 tccP 同源重组 基因敲除
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江苏省某监测点家畜来源肠致病性大肠埃希菌分离株分子特征分析 被引量：1
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作者 孔筱筱 韩悦 +2 位作者 周璐 程晓庆 董晨 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期56-61,共6页
目的分析江苏省某监测点家畜来源肠致病性大肠埃希菌分离株分子特征,进而评估其潜在的致病性,为感染性腹泻的监测与防控提供依据。方法采用全基因组测序技术对江苏省某监测点分离的家畜来源的37株肠致病性大肠埃希菌(EPEC)菌株进行特征... 目的分析江苏省某监测点家畜来源肠致病性大肠埃希菌分离株分子特征,进而评估其潜在的致病性,为感染性腹泻的监测与防控提供依据。方法采用全基因组测序技术对江苏省某监测点分离的家畜来源的37株肠致病性大肠埃希菌(EPEC)菌株进行特征性分析。结果本地家畜来源的EPEC均为非典型EPEC(aEPEC),其血清型多样,携带多种与腹泻相关的毒力基因,有9种ST型且具有区域性流行特征,eae基因包含有5种亚型,β1为优势亚型,其在腹泻病人中也最为常见。结论aEPEC对公众健康构成潜在威胁,应在感染性腹泻的监测工作中,加强对家畜粪便及养殖环境的监测。 展开更多
关键词 肠致病性大肠埃希菌 感染性腹泻 分子特征分析
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