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利用噬菌体表面展示技术构建人肝癌细胞的cDNA表达文库被引量：3: 1; 作者张林刘杞孙航《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,397,共5页; 目的:筛选对人肝再生增强因子(hALR)高反应性的肝癌细胞株,以此作为细胞来源,利用噬菌体展示技术构建出含有其cDNA表达文库,为进一步从文库中筛选hALR相互作用蛋白奠定基础。方法:hALR刺激不同肝癌细胞株,从中筛选出对hALR刺激有高反应... 展开更多; 关键词肝再生增强因子肝癌细胞 cdna 噬菌体展示文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定被引量：2: 2; 作者张改平张红 +4 位作者郭军庆王选年乔松林郝慧芳王丽《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1186-1188,共3页; 目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重... 展开更多; 关键词鸡B细胞 17噬菌体 cdna表达文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡胚成纤维细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建和鉴定被引量：3: 3; 作者赵绪永张改平 +1 位作者朱礼倩李清州《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第7期100-103,共4页; 构建鸡胚成纤维细胞(CEF)T7噬菌体表达型cDNA文库,为筛选和研究CEF上病毒受体分子奠定基础。提取纯化CEF的mRNA,反转录合成双链cDNA,补平末端,连接EcoRⅠ/HindⅢ接头,双酶切,凝胶过滤层析除去小于400bp的cDNA片段,合成双链cDNA定向与T7... 展开更多; 关键词鸡胚成纤维细胞(CEF) T7噬菌体 cdna表达文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定: 4; 作者陈航方瑾《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期6-8,共3页; 目的:为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。方法:从2株人大肠癌细胞CCL-187和CX-1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cD-NA。双链cDNA经末端削平、EcoRⅠ接头... 展开更多; 关键词人大肠癌噬菌体 cdna表达文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

斑节对虾肝胰腺全长cDNA表达文库的构建: 5; 作者罗田徐洵《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第S2期116-121,共6页; 采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连接,再经GigapackⅢGold蛋白体外包装和感染E.coli菌株XL1-Blue... 展开更多; 关键词斑节对虾 cdna表达文库肝胰腺; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种新的乙型肝炎病毒表面抗原结合蛋白的筛选、表达及其生物学活性的初步研究被引量：7: 6; 作者陈媛媛朱乃硕《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期53-60,共8页; 为了研究乙肝病毒侵染肝细胞过程中的功能蛋白 ,通过印迹免疫分析技术从人肝cDNA噬菌体表达库中筛选出一株编码乙肝表面抗原结合蛋白 (hepatitisBsurfaceantigenbindingprotein ,HBsAg BP)的cDNA克隆 .基因测序结果表明 ,该cDNA具有独... 展开更多; 关键词肝cdna噬菌体表达文库乙肝表面抗原乙肝表面抗原结合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用噬菌体表面展示技术构建人肝癌细胞的cDNA表达文库被引量：3: 1; 作者张林刘杞孙航; 机构重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,397,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30271178) 科技部重大基础研究前期研究专项(2004CCA01600); 文摘目的:筛选对人肝再生增强因子(hALR)高反应性的肝癌细胞株,以此作为细胞来源,利用噬菌体展示技术构建出含有其cDNA表达文库,为进一步从文库中筛选hALR相互作用蛋白奠定基础。方法:hALR刺激不同肝癌细胞株,从中筛选出对hALR刺激有高反应性的细胞株。以PolyATtractSystem1000提取mRNA,用T7Select10-3OrientExpresscDNACloningSystem和RandomPrimer构建它的cDNA噬菌体表面展示文库;以噬菌体滴度分析和PCR评价文库质量。结果:hALR对不同肝癌细胞株均有不同程度的促增殖作用,且呈明显的剂量依赖关系。对QGY促增殖作用最强,以它作为建库细胞。对所建文库进行噬菌体滴度分析,表明原始cDNA文库含有2×107独立的重组子;随机挑取重组子进行PCR鉴定,发现插入长度在0.2～2kb,平均为0.6kb,能够较好地代表来源细胞中mRNA所表达的几乎所有信息。结论:hALR对所检测的肝癌细胞株均有促增殖作用;QGY细胞对hALR刺激有最高的反应性;以它为基础,构建出库容量为2×107的高质量噬菌体表面展示文库。; 关键词肝再生增强因子肝癌细胞 cdna 噬菌体展示文库; Keywords Augmenter of liver regeneration Hepatocarcinoma cell, cdna Phage-displayed library; 分类号 R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定被引量：2: 2; 作者张改平张红郭军庆王选年乔松林郝慧芳王丽; 机构河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室浙江大学河南科技学院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1186-1188,共3页; 基金国家自然科学基金重点资助项目(30230270); 文摘目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重组子测定。扩增文库并进行PCR鉴定插入序列的长度及分布。结果:文库初始滴度为5×107pfu/mL,扩增后滴度达到1.88×1010pfu/mL。插入片段平均长度1440bp,主要分布在750～2000bp之间。结论:构建的鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库具有很高的质量,为进一步研究鸡B细胞发育以及传染性法氏囊病毒(IBDV)的分子致病机制奠定了实验基础。; 关键词鸡B细胞 17噬菌体 cdna表达文库; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡胚成纤维细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建和鉴定被引量：3: 3; 作者赵绪永张改平朱礼倩李清州; 机构河南农业大学河南省农业科学院; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第7期100-103,共4页; 基金国家自然科学基金(30671561); 文摘构建鸡胚成纤维细胞(CEF)T7噬菌体表达型cDNA文库,为筛选和研究CEF上病毒受体分子奠定基础。提取纯化CEF的mRNA,反转录合成双链cDNA,补平末端,连接EcoRⅠ/HindⅢ接头,双酶切,凝胶过滤层析除去小于400bp的cDNA片段,合成双链cDNA定向与T7噬菌体左右臂连接,体外包装后建成cDNA表达文库。测定文库大小、重组率,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果表明,构建的cDNA文库滴度为2.2×107pfu/mL、扩增后滴度为3.5×1010pfu/mL,重组效率达98%、插入片段多在0.4～3kb之间,平均插入片段长约1.3kb。表明所建文库具有很高的质量,从而为筛选目的cDNA克隆奠定了基础。; 关键词鸡胚成纤维细胞(CEF) T7噬菌体 cdna表达文库; Keywords CEF T7 phage cdna library; 分类号 S831 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定: 4; 作者陈航方瑾; 机构中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期6-8,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(20375047) 辽宁省教育厅高等学校科研项目(20061014); 文摘目的:为获得大肠癌的特异性抗原基因,构建人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。方法:从2株人大肠癌细胞CCL-187和CX-1中提取总RNA,分离纯化mRNA,并以此为模板合成第1链cDNA,用置换法合成第2链cD-NA。双链cDNA经末端削平、EcoRⅠ接头连接、XhoⅠ酶切、过柱分级分离,除去<400bp片段。收集符合需要的cDNA片段与噬菌体ZAPExpress载体连接,体外包装后获得人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库。结果:构建的人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体文库,原始库容量为2.3×109pfu/L,重组率97%。重组子插入cDNA片段平均大小1kb以上。结论:成功地构建高质量的人大肠癌抗原基因的cDNA噬菌体表达文库,为大肠癌的特异性抗原筛选奠定了基础。; 关键词人大肠癌噬菌体 cdna表达文库; Keywords colorectal carcinoma bacteriophage cdnaexpression library; 分类号 R735.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名斑节对虾肝胰腺全长cDNA表达文库的构建: 5; 作者罗田徐洵; 机构厦门大学生命科学学院国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室; 出处《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第S2期116-121,共6页; 基金国家海洋"863"计划资助项目(2001AA621130) 国家海洋局海洋科技研究资助项目.; 文摘采用PolyATtract1000系统提取完整的斑节对虾肝胰腺mRNA,ZAPExpresscDNA合成试剂盒合成具有EcoRⅠ和XhoⅠ末端的双链cDNA.cDNA与经EcoRⅠ和XhoⅠ预消化的λZAPExpress载体连接,再经GigapackⅢGold蛋白体外包装和感染E.coli菌株XL1-BlueMRF′,成功构建了库容量为7 7×105,重组率高达99 1%的cDNA表达文库.将初级文库进行扩增,并在滴定扩增文库时随机挑取9个噬菌斑,在辅助噬菌体ExAssist的作用下通过体内切除形成phagemid,再用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切获得插入cDNA片段,其长度最长达1 6kb.我们还用PCR法从库中扩增出完整的肌动蛋白编码区cDNA(约1 2kb).以上结果说明此表达文库含有斑节对虾肝胰腺全长cDNA片段,因此本文库为对虾基因的克隆、表达及其结构和功能的研究奠定了基础.; 关键词斑节对虾 cdna表达文库肝胰腺; Keywords Penaeus monodon cdna expression library hepatopancreas; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种新的乙型肝炎病毒表面抗原结合蛋白的筛选、表达及其生物学活性的初步研究被引量：7: 6; 作者陈媛媛朱乃硕; 机构复旦大学生命科学学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期53-60,共8页; 基金国家自然科学基金 (No .3 0 13 1160 73 3 ) 香港RGC资助项目复旦大学Med X基金资助项目~~; 文摘为了研究乙肝病毒侵染肝细胞过程中的功能蛋白 ,通过印迹免疫分析技术从人肝cDNA噬菌体表达库中筛选出一株编码乙肝表面抗原结合蛋白 (hepatitisBsurfaceantigenbindingprotein ,HBsAg BP)的cDNA克隆 .基因测序结果表明 ,该cDNA具有独立的开放阅读框架 ,编码 1个由 344个氨基酸残基构成的可溶性蛋白分子 ,属于免疫球蛋白超家族成员 .将该基因克隆到原核表达载体pTriplEx后 ,在E .coliXL1 Blue菌株中获得 4 4kD的重组蛋白 .重组蛋白经Western印迹和ELISA实验证明具有与乙肝表面抗原特异性结合的能力 .进一步经流式细胞仪实验显示 ,在纯化的重组蛋白存在的情况下 ,天然的HBsAg与肝细胞株HepG2的亲和力显著增高 .结果显示 ,该乙肝表面抗原结合蛋白可能是介导乙肝病毒对肝细胞亲和侵染的可溶性辅助受体 .; 关键词肝cdna噬菌体表达文库乙肝表面抗原乙肝表面抗原结合蛋白; Keywords liver cdna phage expression library , hepatitis B surface antigen(HBsAg), hepatitis B surface antigen binding protein(HBsAg-BP); 分类号 R512.62 [医药卫生—内科学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	利用噬菌体表面展示技术构建人肝癌细胞的cDNA表达文库	张林刘杞孙航	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定	张改平张红郭军庆王选年乔松林郝慧芳王丽	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鸡胚成纤维细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建和鉴定	赵绪永张改平朱礼倩李清州	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库的构建和鉴定	陈航方瑾	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	斑节对虾肝胰腺全长cDNA表达文库的构建	罗田徐洵	《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	一种新的乙型肝炎病毒表面抗原结合蛋白的筛选、表达及其生物学活性的初步研究	陈媛媛朱乃硕	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	7	在线阅读下载PDF 职称材料