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小鼠肝脏原位持续灌流方法的建立及其在肝脏非实质细胞分离中的应用
被引量：
2
1
作者
姚一楠
卢珊
+1 位作者
李和权
周建英
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1475-1477,共3页
目的建立一种小鼠肝脏原位持续灌流的方法,并将该法应用于肝脏非实质细胞的分离。方法利用三通管和静脉留置针将门静脉、蠕动泵软管以及下腔静脉连接形成封闭回路,自门静脉端注入37℃的胶原酶消化液约60 ml,调节蠕动泵转速为20 ml.min-...
目的建立一种小鼠肝脏原位持续灌流的方法,并将该法应用于肝脏非实质细胞的分离。方法利用三通管和静脉留置针将门静脉、蠕动泵软管以及下腔静脉连接形成封闭回路,自门静脉端注入37℃的胶原酶消化液约60 ml,调节蠕动泵转速为20 ml.min-1行循环灌注约30 min,摘除肝脏剪切成小块组织,加入胶原酶孵育液消化30 min后碾碎制备成细胞悬液,离心后取沉淀先后以50%和35%的Per-coll密度离心即可获得小鼠肝非实质细胞。结果肝脏非实质细胞的得率为0.5×107～1×107个/鼠肝,流式检测CD45+细胞占(27.21±1.47)%。结论胶原酶肝脏原位持续灌流+体外孵育消化结合Percoll密度离心是分离小鼠肝脏非实质细胞的可靠方法。
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关键词
原位肝灌流
肝脏非实质细胞
胶原酶
小鼠
孵育
Percoll液
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职称材料
题名
小鼠肝脏原位持续灌流方法的建立及其在肝脏非实质细胞分离中的应用
被引量：
2
1
作者
姚一楠
卢珊
李和权
周建英
机构
浙江大学医学院附属第一医院呼吸内科
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1475-1477,共3页
基金
国家自然科学基金资助课题(No 81000757
81170038
+1 种基金
81170015)
浙江省自然科学基金资助课题(NoY2100346)
文摘
目的建立一种小鼠肝脏原位持续灌流的方法,并将该法应用于肝脏非实质细胞的分离。方法利用三通管和静脉留置针将门静脉、蠕动泵软管以及下腔静脉连接形成封闭回路,自门静脉端注入37℃的胶原酶消化液约60 ml,调节蠕动泵转速为20 ml.min-1行循环灌注约30 min,摘除肝脏剪切成小块组织,加入胶原酶孵育液消化30 min后碾碎制备成细胞悬液,离心后取沉淀先后以50%和35%的Per-coll密度离心即可获得小鼠肝非实质细胞。结果肝脏非实质细胞的得率为0.5×107～1×107个/鼠肝,流式检测CD45+细胞占(27.21±1.47)%。结论胶原酶肝脏原位持续灌流+体外孵育消化结合Percoll密度离心是分离小鼠肝脏非实质细胞的可靠方法。
关键词
原位肝灌流
肝脏非实质细胞
胶原酶
小鼠
孵育
Percoll液
Keywords
liver perfusion in situ
hepatic non-parenchymal cells
collagenase
mice
incubation
Percoll solution
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.47 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠肝脏原位持续灌流方法的建立及其在肝脏非实质细胞分离中的应用
姚一楠
卢珊
李和权
周建英
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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