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腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
1
作者
刘本德
吴红军
曾秋棠
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期75-77,81,共4页
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大...
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠埃希菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序证实后,转染腺病毒,制造病毒包涵体,经3轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF)。以此感染VEC及VSMC,设为Ad-HGF组;再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组(HGF组);以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照(对照组)。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad-HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组,差异均有极显著性意义(均P<0.01),但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡,但不能有效抑制VSMC凋亡,提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。
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关键词
人重组腺病毒介导
肝细胞生长因子基因
血管内皮
细胞
血管平滑肌
细胞
细胞
凋亡
缺氧
冠状动脉再狭窄
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职称材料
犬经皮插管肾动脉注射人HGF基因的实验研究
被引量：
3
2
作者
黄强
冯耀良
杨俊伟
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期524-526,共3页
目的:运用介入插管技术,经犬肾动脉快速注射含人肝细胞生长因子(HGF)重组基因的质粒(pCMV鄄HGF)。检测不同时间犬肾脏组织中外源性人HGF蛋白的水平,了解外源性HGF基因在犬肾脏组织内的表达情况。方法:健康成年犬6只,在麻醉和无菌条件下...
目的:运用介入插管技术,经犬肾动脉快速注射含人肝细胞生长因子(HGF)重组基因的质粒(pCMV鄄HGF)。检测不同时间犬肾脏组织中外源性人HGF蛋白的水平,了解外源性HGF基因在犬肾脏组织内的表达情况。方法:健康成年犬6只,在麻醉和无菌条件下均经左肾动脉介入插管。其中4只注射pCMV鄄HGF质粒,1只注射空质粒(pcDNA3)对照,1只为注射等渗盐水空白对照。注射后不同时间留取犬静脉血以及部分肾组织,采用ELISA方法,分别检测血清及肾组织中人HGF蛋白的水平。结果:①该实验建立的检测人重组HGF的ELISA敏感性高(15～1000ng/ml),重复性强;②接受3种不同处理的犬静脉血中均未检测到人重组HGF蛋白的存在;③注射pCMV鄄HGF质粒的犬肾组织中能够检测到人重组HGF蛋白的存在。72h肾组织中HGF的水平范围在27～667ng/mg蛋白之间。注射空质粒和等渗盐水的犬(即2号和5号犬)肾组织则无表达。结论:运用介入插管技术,经犬肾动脉快速注射pCMV鄄HGF可以在肾脏内产生基因高转染表达。
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关键词
介入插管技术
肾动脉
肝细胞生长因子基因
质粒
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职称材料
题名
腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
1
作者
刘本德
吴红军
曾秋棠
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊科
华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管疾病研究所
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期75-77,81,共4页
基金
湖北省自然科学基金资助项目(No.2004ABA222)
文摘
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠埃希菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序证实后,转染腺病毒,制造病毒包涵体,经3轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF)。以此感染VEC及VSMC,设为Ad-HGF组;再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组(HGF组);以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照(对照组)。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad-HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组,差异均有极显著性意义(均P<0.01),但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡,但不能有效抑制VSMC凋亡,提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。
关键词
人重组腺病毒介导
肝细胞生长因子基因
血管内皮
细胞
血管平滑肌
细胞
细胞
凋亡
缺氧
冠状动脉再狭窄
Keywords
Ad-HGF gene
vascular endothelial cell
vascular smooth muscle cell
apoptosis
anoxia
coronary artery restenosis
分类号
R541 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
犬经皮插管肾动脉注射人HGF基因的实验研究
被引量：
3
2
作者
黄强
冯耀良
杨俊伟
机构
南京医科大学第一附属医院介入放射科
南京医科大学第一附属医院肾内科
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期524-526,共3页
文摘
目的:运用介入插管技术,经犬肾动脉快速注射含人肝细胞生长因子(HGF)重组基因的质粒(pCMV鄄HGF)。检测不同时间犬肾脏组织中外源性人HGF蛋白的水平,了解外源性HGF基因在犬肾脏组织内的表达情况。方法:健康成年犬6只,在麻醉和无菌条件下均经左肾动脉介入插管。其中4只注射pCMV鄄HGF质粒,1只注射空质粒(pcDNA3)对照,1只为注射等渗盐水空白对照。注射后不同时间留取犬静脉血以及部分肾组织,采用ELISA方法,分别检测血清及肾组织中人HGF蛋白的水平。结果:①该实验建立的检测人重组HGF的ELISA敏感性高(15～1000ng/ml),重复性强;②接受3种不同处理的犬静脉血中均未检测到人重组HGF蛋白的存在;③注射pCMV鄄HGF质粒的犬肾组织中能够检测到人重组HGF蛋白的存在。72h肾组织中HGF的水平范围在27～667ng/mg蛋白之间。注射空质粒和等渗盐水的犬(即2号和5号犬)肾组织则无表达。结论:运用介入插管技术,经犬肾动脉快速注射pCMV鄄HGF可以在肾脏内产生基因高转染表达。
关键词
介入插管技术
肾动脉
肝细胞生长因子基因
质粒
Keywords
interventional procedure
renal artery hepatocyte growth factor (HG F)
gene
plasmid
分类号
R815 [医药卫生—放射医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
刘本德
吴红军
曾秋棠
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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职称材料
2
犬经皮插管肾动脉注射人HGF基因的实验研究
黄强
冯耀良
杨俊伟
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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