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镉胁迫对合浦珠母贝C型凝集素基因表达及部分生理指标的影响
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作者 刘忠华 陈洁 +2 位作者 黄晓玲 涂淏天 梁海鹰 《南方农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期3414-3425,共12页
【目的】明确合浦珠母贝对镉胁迫的免疫响应机制,为丰富贝类的免疫生物学研究提供理论基础。【方法】以2龄合浦珠母贝为研究材料,通过RACE克隆合浦珠母贝的2个C型凝集素(CTL)基因(PmCTL1和PmCTL4),并采用实时荧光定量PCR检测这2个基因... 【目的】明确合浦珠母贝对镉胁迫的免疫响应机制,为丰富贝类的免疫生物学研究提供理论基础。【方法】以2龄合浦珠母贝为研究材料,通过RACE克隆合浦珠母贝的2个C型凝集素(CTL)基因(PmCTL1和PmCTL4),并采用实时荧光定量PCR检测这2个基因在合浦珠母贝各组织中的表达情况。以4.0 mg/L氯化镉(CdCl2)溶液对合浦珠母贝进行胁迫,分别于胁迫0、3、6、12、24和48 h后采集肝胰腺及血淋巴组织,检测肝胰腺中的PmCTL1和PmCTL4基因表达情况及血清酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性变化;同时以0.5 mg/L氯化镉溶液胁迫21 d,观察统计合浦珠母贝肝体指数(HSI)的变化趋势。【结果】克隆获得的PmCTL1、PmCTL4基因c DNA序列全长分别为853和1113 bp,对应的编码蛋白各含有1个典型的CRD结构域,且CRD结构域中均含有6个保守的半胱氨酸,与其他软体动物的相似性较高。PmCTL1和PmCTL4基因在合浦珠母贝的肝胰腺、性腺、闭壳肌、鳃和外套膜等组织中均有表达,但二者具有不同的组织表达分布特征;肝胰腺中PmCTL1和PmCTL4基因相对表达量随镉胁迫时间的推移呈明显的波动变化趋势,在镉胁迫6 h时二者的相对表达量均最低,PmCTL1基因在镉胁迫3 h时达最高值[约是镉胁迫前(0 h)的3.23倍],PmCTL4基因在镉胁迫12 h时达最高值[约是镉胁迫前(0 h)的2.03倍]。合浦珠母贝血清ACP活性在镉胁迫24 h时达最高值,CAT活性在镉胁迫6 h时达最高值,SOD活性在镉胁迫3 h时达最高值;合浦珠母贝HSI随镉胁迫时间的推移而逐渐下降。【结论】在镉胁迫下合浦珠母贝发生明显的免疫应激,Pm CTL1、PmCTL4基因及血清ACP、CAT和SOD均能响应镉胁迫,即CTL和血清酶类在贝类的镉解毒过程中发挥重要作用,且主要发生在肝胰腺组织中。 展开更多
关键词 合浦珠母贝 镉胁迫 C型凝集素(CTL) 胰腺 酶活性 指数(hsi)
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