朗德鹅肌生成抑制素基因组织分布研究 被引量：10

1

作者 潘英树 张永宏 +4 位作者 郭丽君 邢沈阳 高妍 廉传江 牛淑玲 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第5期45-47,共3页

采用PCR和测序的方法检测肌生成抑制素基因在朗德鹅组织中的分布情况,研究结果表明,肌生成抑制素基因在大脑、小脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、腹脂、皮下脂肪、骨骼肌中均有表达。肌生成抑制素基因在组织中广泛分布说明了... 采用PCR和测序的方法检测肌生成抑制素基因在朗德鹅组织中的分布情况,研究结果表明,肌生成抑制素基因在大脑、小脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、腹脂、皮下脂肪、骨骼肌中均有表达。肌生成抑制素基因在组织中广泛分布说明了其功能的重要性。 展开更多

关键词 朗德鹅 肌生成抑制素 组织分布

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猪肌生成抑制素(MSTN)基因cDNA克隆及序列分析 被引量：5

2

作者 乔宪凤 刘西梅 +7 位作者 华文君 周荆荣 刘中华 张立萍 肖红卫 华再东 李莉 郑新民 《江西农业学报》 CAS 2010年第10期130-132,共3页

利用GenBank中猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以湖北白猪背最长肌肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出MSTN基因cDNA片段。该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pUCm-T载体连接,转化到DH5α大肠杆... 利用GenBank中猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以湖北白猪背最长肌肌细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出MSTN基因cDNA片段。该片段全长1277bp,包含猪MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与pUCm-T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道的一致。 展开更多

关键词 猪肌生成抑制素 MSTN基因 cDNA克隆 序列分析 MYOSTATIN Gene 编码序列 CDNA片段 RT-PCR技术 载体连接 阳性克隆 设计引物 大肠杆菌 测序结果 背最长肌 GENBANK 肌细胞 质粒 文献 筛选 模板

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猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究 被引量：12

3

作者 张锐 孙美榕 +5 位作者 张红莲 杨捷 黄燕 陈绍红 杜慧 欧阳红生 《中国兽药杂志》 2004年第3期16-18,共3页

　用Trizol试剂法提取军牧一号猪的骨骼肌、心肌、肝、肾、肺、脾、胰、脂肪的总RNA做RT-PCR和嵌套PCR,结果在军牧一号猪骨骼肌、心肌和脂肪组织内检测到了肌生成抑制素mRNA的表达,而在其他组织中未检测到。

关键词 猪 组织器官 肌生成抑制素 基因表达 MRNA 表达谱 肌肉生成 负调控因子

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猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化 被引量：2

4

作者 张锐 孙美榕 +5 位作者 张红莲 杨捷 黄燕 陈绍红 杜慧 欧阳红生 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第9期53-56,共4页

　猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA在去除信号肽后,对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆,并测序分析,结果表明其与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用... 　猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA在去除信号肽后,对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆,并测序分析,结果表明其与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamH 和Sal 内切酶识别序列的另1对引物进行PCR扩增,将回收的1.2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建的表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27.9%,表达的MSTN分子质量为41.4513ku。因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92.5%。 展开更多

关键词 猪肌生成抑制素基因 成熟蛋白编码序列 表达 纯化

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猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列在COS-7细胞中的表达 被引量：2

5

作者 李树伟 欧阳红生 +3 位作者 吕文发 李莉 张永亮 李莲军 《动物医学进展》 CSCD 2005年第9期59-61,共3页

将猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列真核表达质粒,采用脂质体法转染COS-7细胞,经RT-PCR检测,转染重组质粒的COS-7细胞MSTN mRNA呈阳性,表明该重组体能够在真核细胞中完成转录过程。SDS-PAGE电泳结果有43 ku目的蛋白表达带,并用Western bl... 将猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列真核表达质粒,采用脂质体法转染COS-7细胞,经RT-PCR检测,转染重组质粒的COS-7细胞MSTN mRNA呈阳性,表明该重组体能够在真核细胞中完成转录过程。SDS-PAGE电泳结果有43 ku目的蛋白表达带,并用Western blotting证实了其表达的特异性,表明猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列可以在真核细胞中表达。 展开更多

关键词 猪 肌生成抑制素 真核表达 COS-7细胞

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军曹鱼肌生成抑制素基因的克隆与序列分析 被引量：1

6

作者 张锐 孙美榕 +4 位作者 邓思平 刘楚吾 黄燕 杜慧 绍陈红 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第S1期144-148,共5页

肌生成抑制素(Myostation,MSTN)是一种骨骼肌生长的负调控因子,其生物功能主要是抑制骨骼肌的生长。肌生成抑制素的活性降低或丧失,可使肌肉与其他组织的比例大大提高,因此在动物育种和医疗上有很大的潜在应用价值。目前包括鱼类在内的2... 肌生成抑制素(Myostation,MSTN)是一种骨骼肌生长的负调控因子,其生物功能主要是抑制骨骼肌的生长。肌生成抑制素的活性降低或丧失,可使肌肉与其他组织的比例大大提高,因此在动物育种和医疗上有很大的潜在应用价值。目前包括鱼类在内的20多种脊椎动物的MSTN cDNA已经得到克隆和测序。本实验依据已知的鱼MSTN cDNA的保守区域设计一对特异引物,利用PCR技术分别从军曹鱼基因组中扩增出一个约1000bp的特异片段和300bp片段,所得目的片段回收纯化,将其酶切产物连接到pMDl8-T克隆载体上,转化入JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆进行转化子鉴定,其质粒测序结果与文献报道的一致,证明成功地克隆了军曹鱼肌生成抑制素基因。 展开更多

关键词 肌生成抑制素基因(MSTN) 聚合酶链式反应 军曹鱼 克隆

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肌生成抑制素基因研究进展 被引量：1

7

作者 李树伟 欧阳红生 王小霞 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期29-31,共3页

肌生成抑制素是 1 997年发现的骨骼肌生长发育负调控因子 ,肌生成抑制素不仅在骨骼肌中表达 ,还可在心肌和浦肯野纤维等多种组织中表达。研究表明 ,大鼠骨骼肌在体内的再生 ,对 MSTN m RNA的表达表现出明显的时间依赖性 ,并且 m RNA的... 肌生成抑制素是 1 997年发现的骨骼肌生长发育负调控因子 ,肌生成抑制素不仅在骨骼肌中表达 ,还可在心肌和浦肯野纤维等多种组织中表达。研究表明 ,大鼠骨骼肌在体内的再生 ,对 MSTN m RNA的表达表现出明显的时间依赖性 ,并且 m RNA的表达不必由功能性神经支配。通过对不同品种双肌表型牛 MSTN基因的研究 ,发现其骨胳肌增大的共同特点是肌生成抑制素基因发生了突变 ,如布鲁牛 MSTN基因在编码区外显子 3发生 1 1 bp的缺失 ,导致MSTN此位点后的阅读框架改变 ,并在此点后的 1 4个密码子处终止了阅读框架 ,从而使MSTN被截短 ,MSTN蛋白活性区域消失 ,活性丧失 ,结果肌肉大量增加。目前 ,已分别对人、牛和猪的 MSTN基因进行了定位研究 ,猪肌生成抑制素基因定位研究表明 ,猪 MSTN基因位于1 5号染色体上。 展开更多

关键词 肌生成抑制素 基因表达 骨骼肌 生长发育 负调控因子 双肌表型

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肌生成抑制素(MSTN)的研究进展 被引量：3

8

作者 吕文发 赵静 +1 位作者 欧阳红生 梁冠生 《家畜生态》 2004年第2期44-46,共3页

　本文较全面地介绍了肌生成抑制素的发现历程、基因特点、表达与调控、作用机理以及与脂肪积累、肌肉消长等研究的进展情况,并对肌生成抑制素在畜牧业、医学上的应用作了介绍。

关键词 肌生成抑制素 MSTN 基因特点 作用机理

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牛肌生成抑制素基因全序列的克隆及原核表达

9

作者 倪宏波 宋丽 +3 位作者 崔玉东 邵红 李冬野 王喆 《黑龙江八一农垦大学学报》 2007年第6期46-49,共4页

根据GenBank上发表的牛肌生成抑制素(MSTN)基因编码序列设计引物,利用RT-PCR技术,以牛肌细胞总RNA为模板,对牛的肌生成抑制素(MSTN)基因编码序列进行扩增。经酶切鉴定、DNA测序和氨基酸序列分析证实MSTN基因克隆成功。从pMD18T-MSTN克... 根据GenBank上发表的牛肌生成抑制素(MSTN)基因编码序列设计引物,利用RT-PCR技术,以牛肌细胞总RNA为模板,对牛的肌生成抑制素(MSTN)基因编码序列进行扩增。经酶切鉴定、DNA测序和氨基酸序列分析证实MSTN基因克隆成功。从pMD18T-MSTN克隆中获得MSTN编码序列,将其与pET32a(+)质粒连接,构建pET32a(+)-MSTN重组质粒,重组菌经IPTG诱导在大肠杆菌中表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的,SDS-PAGE特异区带分子量为60ku。 展开更多

关键词 牛肌生成抑制素基因 克隆 原核表达

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家畜肌生成抑制素基因的研究进展

10

作者 金鑫燕 《青海畜牧兽医杂志》 2009年第6期40-41,共2页

肌生成抑制素基因(myostatin,MSTN)活性的降低或丧失所出现的"双肌"动物,给畜牧业生产带来了显著的经济效益,因此,许多畜牧学者探讨如何利用MSTN来提高动物的生产力。本文对肉用大型家畜牛、猪、绵羊、山羊MSTN基因国内外研... 肌生成抑制素基因(myostatin,MSTN)活性的降低或丧失所出现的"双肌"动物,给畜牧业生产带来了显著的经济效益,因此,许多畜牧学者探讨如何利用MSTN来提高动物的生产力。本文对肉用大型家畜牛、猪、绵羊、山羊MSTN基因国内外研究进展及应用前景进行了综述,为家畜MSTN基因的进一步研究提供一定的理论参考。 展开更多

关键词 肌生成抑制素基因 家畜

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肉牛肌生成抑制素成熟蛋白编码序列的克隆与原核表达

11

作者 左明坤 沈冰蕾 倪洪波 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第29期17920-17922,共3页

[目的]原核表达肉牛肌生成抑制素成熟蛋白编码序列基因并进行功能验证,为后期的小鼠接种实验打下基础。[方法]采用RT-PCR方法扩增肉牛MSTN成熟蛋白编码序列基因,该扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21,经I... [目的]原核表达肉牛肌生成抑制素成熟蛋白编码序列基因并进行功能验证,为后期的小鼠接种实验打下基础。[方法]采用RT-PCR方法扩增肉牛MSTN成熟蛋白编码序列基因,该扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组目的蛋白的表达结果。[结果]经Anti-His-Tag鉴定正确。[结论]肉牛MSTN成熟蛋白编码序列基因在原核表达系统中得到正确表达。 展开更多

关键词 肉牛 肌生成抑制素 克隆 原核表达 生物活性

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肌生成抑制素(MSTN)抗体对肩袖撕裂后肌肉退变的治疗效果 被引量：1

12

作者 林金榕 田家齐 +4 位作者 孙亚英 罗家宇 陈闻波 刘少华 陈疾忤 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期870-877,共8页

目的:探讨肌生成抑制素(MSTN)抗体对肩袖撕裂后肌肉萎缩、纤维化、脂肪浸润等肌肉退变的作用。方法:本研究共使用18只小鼠。其中,通过横切左肩冈上肌腱和肩胛上神经,建立12只小鼠巨大肩袖撕裂伴肌肉退变模型,术后3周,将12只小鼠随机分... 目的:探讨肌生成抑制素(MSTN)抗体对肩袖撕裂后肌肉萎缩、纤维化、脂肪浸润等肌肉退变的作用。方法:本研究共使用18只小鼠。其中,通过横切左肩冈上肌腱和肩胛上神经,建立12只小鼠巨大肩袖撕裂伴肌肉退变模型,术后3周,将12只小鼠随机分为注射MSTN抗体组(抗MSTN组,n=6)和注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)组(PBS组,n=6),于左冈上肌撕裂部位分别注射MSTN抗体和PBS溶液,每周1次,共注射3周;另外6只仅切开皮肤和肌肉,未切断肌腱和神经的小鼠作为假手术组,不做任何注射。术后6周,取3组样本进行磁共振成像(MRI)检查,测量冈上肌肌肉重量、体积等指标,并进行HE染色、Masson染色,肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)和肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin1)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt)免疫组化染色等组织学分析。结果:抗MSTN组MRI上测量的冈上肌横截面积显著高于PBS组,但仍低于假手术组(P<0.001)。相较于PBS组,抗MSTN组的冈上肌肌肉重量、体积和肌纤维横截面积均更高(P<0.05),但仍低于假手术组;胶原沉积程度(P<0.001)和脂肪浸润面积(P<0.01)相较于PBS组更低,但仍高于假手术组。此外,抗MSTN组的MuRF1和Atrogin1表达显著低于PBS组,而p-Akt显著高于PBS组(P<0.001)。且抗MSTN组α-SMA表达阳性的肌成纤维细胞显著少于PBS组,但仍比假手术组高(P<0.001)。结论:使用MSTN抗体对肩袖撕裂后的肌萎缩、纤维化、脂肪浸润等肌肉退变有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 肩袖撕裂 肌肉 退变 肌生成抑制素

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MSTN抑制剂及其应用研究进展

13

作者 贺实伟 吕文发 《吉林畜牧兽医》 2009年第11期15-17,共3页

肌生成抑制素(MSTN)是肌肉生长的一种负调控因子,隶属于TGF-超家族,具有TGF-超家族所有特点。MSTN突变产生的双肌现象给畜牧生产和医药业带来巨大影响。作者综述了近些年来用分子技术研究MSTN抑制剂的成果以及MSTN主要抑制剂的特点,并对... 肌生成抑制素(MSTN)是肌肉生长的一种负调控因子,隶属于TGF-超家族,具有TGF-超家族所有特点。MSTN突变产生的双肌现象给畜牧生产和医药业带来巨大影响。作者综述了近些年来用分子技术研究MSTN抑制剂的成果以及MSTN主要抑制剂的特点,并对MSTN在农业生产和医学领域的发展趋势和应用前景等进行了展望。 展开更多

关键词 肌生成抑制素 抑制剂 应用

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蒙古马MSTN基因第三外显子的克隆及其SSCP研究 被引量：10

14

作者 王全喜 红海 +2 位作者 张焱如 乌尼尔夫 芒来 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期14-16,共3页

依据马肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以蒙古马基因组DNA为模板,利用PCR技术,扩增出MSTN基因第三外显子序列。将所得片段与PGEM—Teasy载体连接,转化感受态DH5a大肠杆菌。筛选出阳性克隆,酶切、PCR鉴定后,经DNA测序结果表明,所克... 依据马肌生成抑制素(MSTN)编码序列设计引物,以蒙古马基因组DNA为模板,利用PCR技术,扩增出MSTN基因第三外显子序列。将所得片段与PGEM—Teasy载体连接,转化感受态DH5a大肠杆菌。筛选出阳性克隆,酶切、PCR鉴定后,经DNA测序结果表明,所克隆到的MSTN基因第三外显子与文献报道基本一致,有一处单核苷酸有变异。 展开更多

关键词 蒙古马 肌生成抑制素 第三外显子

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南疆不同品种绵羊MSTN基因克隆及其组织表达谱分析 被引量：6

15

作者 尹阔 任述强 +2 位作者 徐国江 李树伟 刘胜梅 《塔里木大学学报》 2011年第2期1-7,共7页

本研究旨在对山区型和田羊、平原型和田羊、卡拉库尔羊的MSTN基因进行组织表达谱分析。参考GenBank上(登录号:NM_001009428.1)绵羊MSTN基因序列设计引物,采用RT-PCR技术克隆绵羊MSTN基因序列,进行组织表达谱分析。结果表明:MSTN基因在... 本研究旨在对山区型和田羊、平原型和田羊、卡拉库尔羊的MSTN基因进行组织表达谱分析。参考GenBank上(登录号:NM_001009428.1)绵羊MSTN基因序列设计引物,采用RT-PCR技术克隆绵羊MSTN基因序列,进行组织表达谱分析。结果表明:MSTN基因在各品种绵羊不同组织中表达的差异较大,MSTN在各品种绵羊的肌肉、肾脏和脾脏中都有表达,其中肌肉中表达量最高,其次是肾脏和脾脏;MSTN在山区型、平原型和田羊的心脏中表达丰度较低,而在卡拉库尔羊心脏中则几乎无表达;MSTN在山区型、平原型和田羊的肝脏中几乎无表达,而在卡拉库尔羊肝脏中则有一定量表达;MSTN在山区型和田羊、平原型和田羊与卡拉库尔羊的肺脏中则都无表达。 展开更多

关键词 绵羊 肌生成抑制素 组织表达谱

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新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达

16

作者 王海涛 金波 李树伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期82-90,共9页

旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取... 旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取总RNA,逆转录获得c DNA,PCR扩增MSTN后与p MD18-T载体连接构建重组质粒并测序分析,然后将MSTN(HP、HS、DL和KL)基因插入到融合表达载体p EGFP-N1中,构建真核融合表达重组质粒p EGFP-N1-MSTN,在细胞铺满80%时用脂质体法转染到CHO中,观察EGFP与MSTN蛋白在CHO细胞内融合表达的绿色荧光。结果显示,平原型和田羊、山区型和田羊、卡拉库尔羊和多浪羊MSTN的ORF序列都是1 125 bp(不含终止密码子),编码375个氨基酸;与Gen Bank中MSTN序列比较,与田羊(HS、HP)没有差异;卡拉库尔羊有2个碱基差异,造成2个氨基酸变异;多浪羊有6个碱基的差异,造成4个氨基酸变异。成功构建EFGP和MSTN共表达重组质粒并在真核细胞CHO中得以表达。 展开更多

关键词 和田羊 卡拉库尔羊 多浪羊 肌生成抑制素 CHO细胞 绿色荧光蛋白

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IGFs和MSTN基因表达量与种猪生长性状的相关性研究 被引量：6

17

作者 张斌 相德才 +8 位作者 赵智勇 吴国权 刘韶娜 胡清泉 陈吉红 韩敏 常雅洁 杨仁灿 赵彦光 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期263-270,共8页

【目的】探寻简洁、高效的种猪分子育种方法,检测和分析胰岛素样生长因子基因(IGF-1、IGF-2)和肌生成抑制素基因(MSTN)在大约克公猪、杜洛克公猪和长白公猪耳组织中的相对表达量。【方法】采用荧光定量PCR技术对目的基因在种猪耳组织中... 【目的】探寻简洁、高效的种猪分子育种方法,检测和分析胰岛素样生长因子基因(IGF-1、IGF-2)和肌生成抑制素基因(MSTN)在大约克公猪、杜洛克公猪和长白公猪耳组织中的相对表达量。【方法】采用荧光定量PCR技术对目的基因在种猪耳组织中的相对表达量进行检测,并运用SPSS软件进行表达量数据分析及其与种猪生长性状的相关性分析。【结果】大约克公猪中IGF-1基因与MSTN基因表达量均显著高于IGF-2基因表达量(P<0.05),杜洛克公猪中IGF-1基因与IGF-2基因表达量存在显著相关(P<0.05),长白公猪中目的基因表达量两两之间存在显著差异(P<0.05);IGF-1基因和MSTN基因在长白猪中相对表达量显著高于大约克猪(P<0.05);IGF-1基因在长白公猪耳组织表达量与生长性状(饲料利用率、总耗料、日耗料和生长指数)存在显著相关(P<0.05),MSTN基因在耳组织表达量与大约克公猪(体长、胸围、胸深、日增重、总耗料、日耗料和生长指数)、杜洛克公猪(体长、半腿臀围)、长白公猪(生长指数)生长性状呈显著相关(P<0.05),联合分析显示目的基因在不同猪种耳组织中表达量与其生长性状均显著相关(P<0.05)。【结论】IGF-1、IGF-2和MSTN基因可能在猪生长性状的形成过程中具有协同调控作用,为种猪分子育种提供了理论基础。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-2 肌生成抑制素 荧光定量PCR 公猪 生长性状

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