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急性脑缺血/再灌注损伤后神经元细胞骨架蛋白的动态变化 被引量:4
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作者 张勇 付雪琴 +3 位作者 邹旭欢 王漫漫 王玮玮 兰瑞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期263-272,共10页
目的探讨急性脑缺血/再灌注大鼠神经元细胞骨架蛋白时空动态变化。方法线栓法阻断大鼠大脑中动脉90 min后实现再灌注,在不同再灌注时间点观察及取材。尼氏染色观察神经细胞损伤,采用神经功能缺损评分和前肢放置实验评估神经功能;免疫组... 目的探讨急性脑缺血/再灌注大鼠神经元细胞骨架蛋白时空动态变化。方法线栓法阻断大鼠大脑中动脉90 min后实现再灌注,在不同再灌注时间点观察及取材。尼氏染色观察神经细胞损伤,采用神经功能缺损评分和前肢放置实验评估神经功能;免疫组化染色、免疫印迹法观察细胞骨架成分微管相关蛋白2(microtubule associated protein 2,MAP2)、神经丝重链(neurofilament heavy chain,NF-H)的变化;透射电镜观察轴突、树突和神经丝亚显微结构。结果随着再灌注时间的延长,脑损伤和神经行为功能损害逐渐加重。纹状体损伤比皮层出现的更早、更严重。缺血区域的MAP2相关免疫反应强度降低,NF-H相关免疫反应强度升高。超微结构观察显示细胞骨架排列受损,密度降低。结论不同脑区对缺血/再灌注损伤的耐受性不同。神经元细胞骨架的主要成分对缺血和再灌注表现出动态反应,这可能进一步促进脑损伤和神经功能缺损。 展开更多
关键词 神经元 细胞骨架成分 脑缺血/再灌注 大脑中动脉闭塞 脑损伤 动态变化
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巴西橡胶树乳管肌动蛋白细胞骨架与采胶的关系 被引量:13
2
作者 高政权 孟春晓 +1 位作者 吴继林 郝秉中 《热带作物学报》 CSCD 2003年第3期22-26,共5页
以成龄巴西橡胶树为材料,用免疫印迹技术研究了胶乳中的肌动蛋白,并用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光探针检查了乳管伤口的肌动蛋白细胞骨架。割胶后收集的胶乳,经超速离心分离的各个组分中,C乳清(胞质溶液)组分含有肌动蛋白... 以成龄巴西橡胶树为材料,用免疫印迹技术研究了胶乳中的肌动蛋白,并用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光探针检查了乳管伤口的肌动蛋白细胞骨架。割胶后收集的胶乳,经超速离心分离的各个组分中,C乳清(胞质溶液)组分含有肌动蛋白。排胶初始期流出的胶乳中肌动蛋白含量多,排胶后期流出的胶乳中肌动蛋白的含量减少。比较了不同割胶强度下收集的胶乳中肌动蛋白的含量,结果表明在强度割胶条件下,胶乳中的肌动蛋白含量较少。用显示肌动蛋白微丝的鬼笔环肽荧光探针检测到,停止排胶时的乳管伤口末端有一团呈现橙红色的荧光物质,表明了肌动蛋白微丝在伤口末端聚积。进行了外施肌动蛋白微丝的解聚剂大环内脂和碘化钾刺激采胶试验,结果表明:施用质量分数1%的碘化钾和饱和浓度的大环内酯水溶液能使胶乳产量增加。这些事实表明,肌动蛋白细胞骨架可能在橡胶树乳管排胶和乳管堵塞中起重要作用。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 乳管 肌动蛋白 细胞骨架 胶乳产量
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细胞松弛素B对山羊颞下颌关节盘细胞及细胞骨架肌动蛋白的影响 被引量:2
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作者 张文霞 康宏 +3 位作者 吕玮 李燕梅 钟妮 包广洁 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期775-779,共5页
目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及... 目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及形态的影响并得出最适浓度;观察最适浓度作用后细胞凋亡、粘附及肌动蛋白形态和mRNA表达的变化。结果:2μmol/L浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖活性具有明显抑制作用,但随培养时间延长抑制率明显降低,无促进凋亡作用;细胞粘附率明显下降;与对照组相比,处理组细胞突起结构逐渐消失,形态变圆,肌动蛋白纤维丝明显的断裂,荧光强度降低;肌动蛋白mRNA表达降低。结论:细胞松弛素B可能是通过破坏肌动蛋白的结构抑制了颞下颌关节盘细胞形态及功能。 展开更多
关键词 颞下颌关节盘 细胞松弛素 肌动蛋白 细胞骨架
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p38激酶-HSP27信号通路在染料木黄酮诱导人乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架解聚中的作用 被引量:1
4
作者 王树树 宋鸣子 +1 位作者 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期9-12,共4页
目的:研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架的影响,探讨p38激酶-HSP27信号通路对染料木黄酮诱导的细胞骨架肌动蛋白重组调控的可能机制。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0μmol/L)体... 目的:研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架的影响,探讨p38激酶-HSP27信号通路对染料木黄酮诱导的细胞骨架肌动蛋白重组调控的可能机制。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0μmol/L)体外孵育MDA-MB-435细胞24h后,用免疫印迹法研究细胞内p38激酶和HSP27表达及磷酸化水平的改变,同时分析肌动蛋白,HSP27其在细胞内定位的改变。结果:染料木黄酮处理24h,胞浆中的G-肌动蛋白含量明显增多,而细胞骨架中的F-肌动蛋白含量明显减少;p38激酶和HSP27的蛋白总量无明显改变,但二者磷酸化水平随着染料木黄酮处理浓度的增加逐渐降低;与此相应的是HSP27在胞浆中含量明显减少,在细胞骨架中含量明显增多。结论:p38激酶途径以及HSP27磷酸化/脱磷酸化过程可能介导染料木黄酮所致MDA-MB-435细胞肌动蛋白细胞骨架的重组。 展开更多
关键词 染料木黄酮 乳腺癌细胞(MDA-MB-435细胞) 肌动蛋白细胞骨架 P38激酶 热休克蛋白27(HSP27)
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RhoA-ROCK信号通路介导缺氧所致乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架重构
5
作者 姬红平 戈应滨 +3 位作者 李迎春 范玲玲 宋鸣子 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期19-22,F0002,共5页
目的:探讨缺氧对乳腺癌细胞(MDA-MB-435细胞)肌动蛋白细胞骨架重构和细胞形态改变与RhoA-ROCK信号通路的关系。方法:对体外培养的MDA-MB-435细胞进行缺氧16h处理,或在缺氧前用ROCK的特异性抑制剂Y-2763(210μmol/L)预处理细胞1h,再进行... 目的:探讨缺氧对乳腺癌细胞(MDA-MB-435细胞)肌动蛋白细胞骨架重构和细胞形态改变与RhoA-ROCK信号通路的关系。方法:对体外培养的MDA-MB-435细胞进行缺氧16h处理,或在缺氧前用ROCK的特异性抑制剂Y-2763(210μmol/L)预处理细胞1h,再进行缺氧处理。用共聚焦激光扫描显微镜研究缺氧或使用Y-27632对MDA-MB-435细胞肌动蛋白细胞骨架重构的影响和细胞形态的改变。结果:乳腺癌细胞经16h缺氧处理,肌动蛋白细胞骨架发生解聚,应力纤维的排列和分布以及细胞形态明显改变;事先使用Y-27632再进行缺氧处理,可防止缺氧所致乳腺癌细胞内肌动蛋白细胞骨架解聚,同时应力纤维在细胞内排列和分布恢复正常。结论:RhoA-ROCK信号通路可能参与缺氧所致乳腺癌细胞内肌动蛋白细胞骨架的重构和细胞形态的改变。 展开更多
关键词 缺氧 RhoA—ROCK信号通路 肌动蛋白 乳腺癌细胞 细胞骨架
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OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架
6
作者 张城 杨倩 +1 位作者 姚俊 曹新 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期648-654,共7页
目的:探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法:采用OSBPL2基因敲除(Osbpl2-KO)HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形... 目的:探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法:采用OSBPL2基因敲除(Osbpl2-KO)HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形态和功能的影响;扫描电镜观察Osbpl2-KO小鼠毛细胞静纤毛形态;Western blot实验检测HEI-OC1细胞和耳蜗内Rho/ROCK信号通路关键效应因子Rho激酶2(Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase 2,ROCK2)、Lim激酶1(LIM domain kinase 1,LIMK1)、肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白1(actin depolymerizing factor/cofilin 1,ADF/CFL-1)的表达水平。结果:Osbpl2-KO HEI-OC1细胞微丝骨架中纤维肌动蛋白(F-actin)的分布明显减少,细胞外周微刺突和丝状伪足明显减少,细胞迁移能力明显减弱;扫描电镜下观察发现Osbpl2敲除导致小鼠耳蜗内毛细胞静纤毛变短且排列紊乱;Western blot检测结果表明,在HEI-OC1细胞和小鼠耳蜗中OSBPL2-KO均导致RhoA/ROCK2信号通路的抑制。结论:在听觉细胞中OSBPL2介导的RhoA/ROCK2信号通路在维持肌动蛋白细胞骨架形态和功能的过程中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 氧化固醇结合蛋白蛋白2 肌动蛋白细胞骨架 RhoA/ROCK2信号通路 肌动蛋白解聚因子 丝切蛋白1
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MSTN基因对牛肌动蛋白细胞骨架调节通路的影响 被引量:2
7
作者 盛辉 郭益文 +5 位作者 张林林 谭皓云 胡德宝 李新 丁向彬 郭宏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3554-3564,共11页
为探究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)对牛骨骼肌生长发育的作用机制,本研究前期利用定量蛋白质组学与磷酸化蛋白质组学分析野生型蒙古牛(MG.WT)和MSTN+/-蒙古牛(MG.MSTN+/-)腿臀肌肌肉组织中蛋白质水平和磷酸化修饰水平的差异变化,使... 为探究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)对牛骨骼肌生长发育的作用机制,本研究前期利用定量蛋白质组学与磷酸化蛋白质组学分析野生型蒙古牛(MG.WT)和MSTN+/-蒙古牛(MG.MSTN+/-)腿臀肌肌肉组织中蛋白质水平和磷酸化修饰水平的差异变化,使用已建立的牛骨骼肌卫星细胞体外诱导成肌分化模型,检测设计合成的MSTN siRNA(si-MSTN)干扰效果;采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法检测转染si-MSTN的增殖期(GM)和分化第3天(DM3)牛骨骼肌卫星细胞中肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的mRNA和蛋白水平的表达变化,研究敲低MSTN表达对肌动蛋白细胞骨架调节通路的影响。结果显示,在MSTN+/-蒙古牛肌肉组织中共鉴定到16个肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因表达丰度上调;转染si-MSTN细胞中的MSTN表达水平极显著降低(P<0.01);在转染si-MSTN的GM期牛骨骼肌卫星细胞中,肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因ENAH、ACTN4和Cdc42的mRNA水平均显著升高(P<0.05),PFN1、RhoA和ACTN4的蛋白水平均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);在转染si-MSTN的DM3牛骨骼肌卫星细胞中,ENAH、CFL1、SCIN和Cdc42基因mRNA水平均显著升高(P<0.05),RhoA基因mRNA水平极显著升高(P<0.01),PFN1和ACTN4的蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结果表明,干扰MSTN可以促进肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的表达,探明了MSTN可能通过介导肌动蛋白细胞骨架调节通路影响牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的分子机制,为进一步研究MSTN对牛成肌分化的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素 骨骼肌卫星细胞 肌动蛋白细胞骨架调控通路 增殖 成肌分化
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PF4对造血干/祖细胞系KG1a总粘附性、粘附分子表达及细胞骨架蛋白聚合的作用 被引量:4
8
作者 卢士红 刘拥军 +4 位作者 陆敏 冯义 李文影 蔡英林 韩忠朝 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期25-29,共5页
目的研究PF4单用及与IL-3联合应用对造血干/祖细胞系KG1a总粘附性、粘附分子表达及细胞骨架蛋白聚合的影响。方法采用结晶紫染色、免疫标记流式细胞仪测定、MTT、荧光分光光度等方法。结果1.单用100ng/ml  ... 目的研究PF4单用及与IL-3联合应用对造血干/祖细胞系KG1a总粘附性、粘附分子表达及细胞骨架蛋白聚合的影响。方法采用结晶紫染色、免疫标记流式细胞仪测定、MTT、荧光分光光度等方法。结果1.单用100ng/ml  PF4作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长80%,单用20ng/ml  IL-3作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长96%,PF4与IL-3联合作用于KG1a细胞时,KG1a细胞总粘附性增长97%。2.PF4作用于KG1a后,CD31、CD44、CD11a、CD11b表达分别增加了21%、22%、17%、18%,较前均有显著性(P<0.05=,而PF4对KG1a细胞的CD62P、CD62E表达无影响;PF4与IL-3联合作用于KG1a时,CD31、CD44、CD11a、CD11b表达并没出现互相促进作用。3.分别用抗CD31、CD44、CD11a、CD11b等单克隆抗体阻断KG1a粘附分子时,对PF4引起的KG1a粘附性分别下调了39%、43%、34%、38%。4.PF4、IL-3作用KG1a细胞时,能够引起KG1a细胞肌动蛋白的聚合。结论PF4可刺激早期的白血病性造血干/祖? 展开更多
关键词 血小板第四因子 CD31 CD44 总粘附性 肌动蛋白聚合 细胞骨架蛋白聚合 造血干/祖细胞 KG1a
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肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸致乳腺癌细胞迁移中的作用 被引量:2
9
作者 杜军 杨郁 +1 位作者 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期609-612,共4页
目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组... 目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布改变;用二维电泳法分离并比较细胞内骨架组分及胞浆组分中磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量。结果:10μmol/L浓度的LPA可明显增加MDA-MB-231细胞迁移速度。LPA处理后细胞内F-肌动蛋白含量明显增加,而肌动蛋白总量并未出现明显变化。此外,LPA处理还可明显升高细胞内胞浆组分中磷酸化的肌动蛋白量;在骨架组分中,肌动蛋白仅以磷酸化的形式存在,且含量在LPA刺激前后无明显差异。结论:LPA可促进乳腺癌细胞的迁移能力及细胞骨架发生聚合,其作用可能与其改变细胞胞浆中肌动蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 LPA 细胞骨架 迁移 肌动蛋白 乳腺癌细胞(MDA-MB-231细胞)
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肺炎链球菌触发肺Ⅱ型上皮细胞微丝肌动蛋白重排的钙信号转导机制 被引量:1
10
作者 徐邦牢 尹一兵 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期168-171,176,共5页
目的通过体外实验研究肺炎链球菌(S.pn)是否可通过肺型上皮细胞(A549)钙信号转导途径触发微丝肌动蛋白(F-actin)细胞骨架重排,进而导致S.pn对A549细胞的侵袭。方法采用F-actin特异性FITC-phalloidin荧光染料,观察S.pn作用A549细胞前后F-... 目的通过体外实验研究肺炎链球菌(S.pn)是否可通过肺型上皮细胞(A549)钙信号转导途径触发微丝肌动蛋白(F-actin)细胞骨架重排,进而导致S.pn对A549细胞的侵袭。方法采用F-actin特异性FITC-phalloidin荧光染料,观察S.pn作用A549细胞前后F-actin细胞骨架重排情况,以重排百分率表示;用F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D预处理A549细胞,观察S.pn对A549细胞的侵袭;使用Ca2+信号转导抑制剂dantrolene预处理A549细胞,观察其与F-actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系;用Fura-2/AM荧光探针负载A549细胞后测定S.pn粘附A549细胞30、60、90 min的胞内[Ca2+]i。结果S.pn作用A549细胞后,经FITC-phalloidin荧光染色,F-actin细胞骨架呈黄绿色块状聚集;F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低S.pn对A549细胞的侵袭,在其浓度为0.25 μg/ml时,未得到可测的细菌数;Ca2+信号转导抑制剂可部分抑制A549细胞F-actin细胞骨架重排,且与F-actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系;S.pn粘附A549细胞30、60、90 min后的胞内[Ca2+]i高于对照[(187.4±17.3 nmol/L)],并达到饱和,分别为(487.5±38.1)、(548.2±35.6)和(557.2±47.5)nmol/L。结论S.pn可通过Ca2+细胞信号转导途径触发A549细胞F-actin细胞骨架重排,进? 展开更多
关键词 肺炎链球菌 肺Ⅱ型上皮细胞 微丝肌动蛋白 钙信号转导 细胞骨架重排
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ATP缺失对大鼠近端肾小管上皮细胞中肌动蛋白磷酸化水平的影响
11
作者 李卫星 张利佳 +2 位作者 杨郁 胡圳圳 杜军 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1069-1073,共5页
目的:研究ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)肌动蛋白磷酸化水平的改变。方法:建立细胞的体外ATP缺失模型,用免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布变化;用二维电泳法分离并比较细胞内磷酸化和非磷酸化的肌... 目的:研究ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)肌动蛋白磷酸化水平的改变。方法:建立细胞的体外ATP缺失模型,用免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布变化;用二维电泳法分离并比较细胞内磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量的改变;用免疫共沉淀法及免疫印迹技术检测ATP缺失后细胞内肌动蛋白酪氨酸、苏氨酸及丝氨酸磷酸化水平变化。结果:ATP缺失处理后细胞内F-肌动蛋白含量逐渐增加,G-肌动蛋白含量逐渐减少;ATP缺失细胞内磷酸化肌动蛋白量明显增加,肌动蛋白的磷酸化程度随ATP缺失时间延长而增加;ATP缺失处理后肌动蛋白酪氨酸磷酸化水平逐渐升高,且与ATP缺失程度呈相一致;肌动蛋白苏氨酸磷酸化水平无明显变化。结论:ATP缺失后近端肾小管上皮细胞肌动蛋白出现聚合过程,可能与细胞中肌动蛋白磷酸化酪氨酸水平增加有关。 展开更多
关键词 ATP缺失 肾小管上皮细胞(NRK52E) 肌动蛋白 细胞骨架 磷酸化
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RNA干扰人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体表达对内皮细胞骨架损伤的影响
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作者 刘洪光 屈宝泽 +1 位作者 陶贵周 黄建华 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第1期79-82,共4页
目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-... 目的构建针对人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因的RNA干扰慢病毒载体,并转染人脐静脉内皮细胞后,采取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导观察对内皮细胞骨架损伤的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞分为对照组、ox-LDL组(ox-LDL处理)、阴性转染组(ox-LDL处理+阴性慢病毒转染)和慢病毒转染组(ox-LDL处理+最佳干扰序列慢病毒转染)。荧光显微镜观察转染效率,Western blot检测磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、Rho激酶(ROCK)、LOX-1蛋白的表达;免疫荧光法观察细胞骨架肌动蛋白(F-actin)的变化。结果与对照组比较,ox-LDL组和阴性转染组p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达增高;细胞F-actin发生损伤并伴含量减少(P<0.05)。与阴性转染组比较,慢病毒转染组抑制p-MLC、ROCK、LOX-1蛋白表达,减轻F-actin损伤及伴含量增加(P<0.05)。结论干扰LOX-1表达对ox-LDL诱导引起的内皮细胞ROCK、p-MLC表达增加及细胞骨架损伤均有抑制作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 蛋白 LDL 内皮细胞 细胞骨架 肌动蛋白 RHO相关激酶类
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ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞骨架重组与ERM蛋白的重分布相关
13
作者 张利佳 李卫星 +3 位作者 戈应滨 宋鸣子 杜军 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期5-8,共4页
目的:探讨ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)肌动蛋白细胞骨架重组情况及其可能机制。方法:用含0.1 μmol/L antimycin A的ATP缺失缓冲液处理培养的NRK52E细胞,建立细胞的体外ATP缺失模型;采用FITC标记的鬼笔环肽标记纤维型... 目的:探讨ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)肌动蛋白细胞骨架重组情况及其可能机制。方法:用含0.1 μmol/L antimycin A的ATP缺失缓冲液处理培养的NRK52E细胞,建立细胞的体外ATP缺失模型;采用FITC标记的鬼笔环肽标记纤维型肌动蛋白(F-actin),用流式细胞仪检测技术分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况;用Westernblot及免疫印迹技术检测ATP缺失后NRK52E细胞内骨架组分(Triton不溶组分)及上清组分(Triton可溶组分)中ERM(Ezrin/Radixin/Moesin)蛋白的分布改变。结果:体外ATP缺失模型建立,各实验组细胞内ATP浓度呈时间依赖性的下降(P<0.05);ATP缺失后,NRK52E细胞内纤维型肌动蛋白的量渐增,且肌动蛋白的聚合程度随ATP缺失时间延长而增加(P<0.05);ATP缺失后,ERM蛋白从细胞骨架解离进入胞浆,且ERM蛋白从细胞骨架的解离程度随ATP缺失的程度的增加而增加(P<0.05)。结论:ATP缺失后NRK52E细胞骨架重组可能与ERM蛋白的重分布相关。 展开更多
关键词 ATP缺失 肾小管上皮细胞(NRK52E) 肌动蛋白 细胞骨架 ERM蛋白
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伪足伸出过程中的信号转导及细胞骨架重组动态模拟
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作者 冯世亮 朱卫平 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第S1期112-112,共1页
关键词 细胞骨架 肌动蛋白 伪足 胞外 信号转导 伸出 动态模拟 转导机制 细丝 迁移
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腺病毒介导的shRNA下调PTEN表达对活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的影响 被引量:5
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作者 郝礼森 宋小杰 +5 位作者 章广玲 王静 刘博 张朋垒 张明婷 靳丽敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期557-561,566,共6页
目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)纤丝状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:体外培养大鼠活化HSC(HSCT6),将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(shR... 目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)基因表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)纤丝状肌动蛋白(F-actin)的影响。方法:体外培养大鼠活化HSC(HSCT6),将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA(shRNA)]并表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒AdshRNA/PTEN及仅表达GFP的对照空病毒Ad-GFP转染HSC,实时荧光定量PCR及Western blotting实验检测HSC的PTEN mRNA及蛋白表达;利用激光扫描共聚焦显微镜检测HSC的形态、F-actin的分布及荧光强度、伪足以及应力纤维的变化,并采用钙荧光探针Rhod-2/AM负载检测HSC内Ca^(2+)浓度的变化。实验分为对照(control)组(在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液)、Ad-GFP组(转染表达GFP的空病毒Ad-GFP)和Ad-shRNA/PTEN组(转染重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN)。结果:靶向PTEN的shRNA成功转染体外活化HSC,显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达(P<0.05);PTEN表达下调使活化HSC呈星形向四周伸展,F-actin排列紧密规则,数量增多,伪足充分向外伸展,应力纤维丝增长增粗;Ad-shRNA/PTEN组F-actin的荧光强度较control组及Ad-GFP组显著增强(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性;Ad-shRNA/PTEN组HSC内Ca^(2+)浓度较control组及Ad-GFP组明显升高(P<0.05),而control组与Ad-GFP组间差异无统计学显著性。结论:PTEN表达下调使体外活化肝星状细胞骨架蛋白F-actin的形成及细胞骨架的重构增强,并增加了HSC内的Ca^2浓度。 展开更多
关键词 PTEN RNA干扰 肝星状细胞 细胞骨架 纤丝状肌动蛋白
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流动剪切力对血管内皮细胞核周肌动蛋白帽的形成及其对转录因子核质输运影响的研究
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作者 高晨星 苏皓然 +1 位作者 邓小燕 刘肖 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期244-244,共1页
目的核周肌动蛋白帽是一种位于细胞核正上方的穹顶状细胞骨架结构,在调节细胞核形态及力信号转导方面有重要作用,基底硬度变化、拉伸力的作用能诱导成纤维细胞、成肌细胞等产生核周肌动蛋白帽。然而,在流动剪切力作用下血管内皮细胞中... 目的核周肌动蛋白帽是一种位于细胞核正上方的穹顶状细胞骨架结构,在调节细胞核形态及力信号转导方面有重要作用,基底硬度变化、拉伸力的作用能诱导成纤维细胞、成肌细胞等产生核周肌动蛋白帽。然而,在流动剪切力作用下血管内皮细胞中核周肌动蛋白帽的形成,及其对内皮细胞形态的影响及力转导机制并不清楚,为此初步探究由细胞骨架介导的血管内皮细胞对流动剪切力的响应机制。 展开更多
关键词 细胞核形态 血管内皮细胞 细胞骨架结构 肌动蛋白 成纤维细胞 成肌细胞 拉伸力 转录因子
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紧密粘连蛋白-1和2对极化细胞顶膜区结构及细胞骨架调控的研究
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作者 李静 向若兰 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期297-297,共1页
皮质肌动蛋白细胞骨架调控着细胞间紧密连接(tight junction,TJs)和粘附连接(adherens junction,AJ)的结构与功能,紧密连接蛋白分子紧密粘连蛋白(zonula occludens,ZO)-1和2不仅与紧密连接和粘附连接密切相关,而且还可以与肌动蛋... 皮质肌动蛋白细胞骨架调控着细胞间紧密连接(tight junction,TJs)和粘附连接(adherens junction,AJ)的结构与功能,紧密连接蛋白分子紧密粘连蛋白(zonula occludens,ZO)-1和2不仅与紧密连接和粘附连接密切相关,而且还可以与肌动蛋白F-actin及其它骨架相关蛋白直接结合,ZO-1与ZO-2在细胞连接区可能具有调控细胞骨架活性的功能。为了验证这一假设, 展开更多
关键词 肌动蛋白细胞骨架 调控 结构 粘连 F-ACTIN 极化 紧密连接 粘附连接
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植物肌动蛋白研究进展 被引量:23
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作者 王卓 张少斌 +1 位作者 马镝 马冠宇 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第10期2860-2860,2863,共2页
植物肌动蛋白是植物细胞骨架的重要组成成份之一,它在维持植物细胞正常生长、分化、繁殖等方面都具有重要意义。综述植物肌动蛋白的保守性、组织表达特异性、生物学功能及其研究方法。
关键词 植物肌动蛋白 细胞骨架 生物功能
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细胞凋亡与细胞骨架的改变 被引量:24
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作者 高清 吴波 《医学研究生学报》 CAS 2008年第8期877-880,共4页
细胞凋亡时,细胞形态会发生一系列特征性的改变。近年来,发现细胞骨架也会发生相应的变化,包括细胞骨架网状结构降解、凝聚和分布不均等。通过对细胞骨架蛋白的生物活性、功能及细胞凋亡时细胞骨架结构形态的动态变化、相关调控因素等研... 细胞凋亡时,细胞形态会发生一系列特征性的改变。近年来,发现细胞骨架也会发生相应的变化,包括细胞骨架网状结构降解、凝聚和分布不均等。通过对细胞骨架蛋白的生物活性、功能及细胞凋亡时细胞骨架结构形态的动态变化、相关调控因素等研究,显示凋亡细胞骨架改变是细胞凋亡形态学改变的基础,提示可通过改变细胞骨架结构来诱导细胞凋亡,以达到治疗肿瘤及其他疾病的目的。 展开更多
关键词 细胞凋亡 细胞骨架 肌动蛋白 凋亡调控
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hhLIM的表达及其在F肌动蛋白交联中的作用 被引量:2
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作者 郑斌 温进坤 +1 位作者 史建红 韩梅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期379-383,共5页
为进一步研究hhLIM的功能及其与F肌动蛋白(Factin)之间的相互关系,利用PCR扩增hhlim基因并将其克隆到pGEX3X表达质粒上,重组表达质粒转化宿主菌得到稳定表达的可溶性产物,表达产物经GlutathioneSepharose亲和纯化得到纯度达90%的融合蛋... 为进一步研究hhLIM的功能及其与F肌动蛋白(Factin)之间的相互关系,利用PCR扩增hhlim基因并将其克隆到pGEX3X表达质粒上,重组表达质粒转化宿主菌得到稳定表达的可溶性产物,表达产物经GlutathioneSepharose亲和纯化得到纯度达90%的融合蛋白GSThhLIM.进而研究其在F肌动蛋白交联中的作用,以鬼比环肽和细胞松弛素处理C2C12细胞,诱导细胞骨架聚合和解聚.荧光显微镜下观察,hhLIM的分布变化与细胞骨架的形态学变化具有相关性.Western印迹证实,hhLIM主要作为细胞骨架相关蛋白而分布于F肌动蛋白组分中,肌动蛋白交联实验显示,hhLIM蛋白与F肌动蛋白具有较高的亲和力,具有促进F肌动蛋白纤维的交联并将其捆聚成束的作用.结果表明,hhLIM是一种F肌动蛋白交联蛋白,通过将F肌动蛋白纤维捆聚成束而参与骨架重构. 展开更多
关键词 HHLIM 可溶性表达 F肌动蛋白 细胞骨架
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