应用PCR扩增牛SRY序列进行奶牛胚胎性别的鉴定及移植 被引量：2

1

作者 曾溢滔 张美兰 +9 位作者 陈美珏 周霞娣 黄英 任兆瑞 黄淑帧 胡明信 吴学清 高建明 张斌 徐慧如 《草食家畜》 1992年第S1期102-106,共5页

本研究是用直接测序技术测定了奶牛SRY的DNA序列,在此基础上设计和合成了牛类SRY特异引物并通过聚合酶链反应(PCR)直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,对胚胎进行性别鉴定并移植成功。 研究方法是:由牛静脉血中的白细胞提取DNA,经扩增后直... 本研究是用直接测序技术测定了奶牛SRY的DNA序列,在此基础上设计和合成了牛类SRY特异引物并通过聚合酶链反应(PCR)直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,对胚胎进行性别鉴定并移植成功。 研究方法是:由牛静脉血中的白细胞提取DNA,经扩增后直接测定DNA的序列,在此基础上,设计并合成了两对特异于牛SRY序列的PCR扩增引物A、B和C、D。对32头奶牛的白细胞DNA及17枚胚胎(全胚、二分胚、三分胚)的SRY序列进行PCR扩增。实验结果表明,32头奶牛的白细胞DNA 样品,其中有12头公牛样品均显示清晰的特异扩增带,20头母牛样品和空白对照样品均无特异扩增带。17枚奶牛胚胎用引物A、B“一次扩增”结果,有10枚胚胎出现清晰的特异扩增带,另7枚胚胎无特异扩增带,其中2枚三分胚共6个样品,其结果完全一致。用引物C、D进行“二次扩增”的10枚显示特异扩增带的胚胎均显示出另一条清晰的特异扩增带,而另外7枚未显带的样品亦均无特异的扩增带。为验证扩增的SRY序列,特设计了特异于牛SRY的ASO探针(寡核苷酸探针)进行点杂交。结果表明,凡有特异扩增带的均出现阳性杂交结果;相反,无特异扩增带的PCR产物均为阴性杂交结果,证明 扩增的为SRY特异DNA片段。经过性别鉴定的牛二分胚,已有4枚胚胎移植成功。其结果均与胚胎性别鉴定结果相符合。 展开更多

关键词 特异扩增带 PCR扩增 SRY 性别鉴定 胚胎数 DNA 寡核苷酸探针 聚合酶链反应 直接测序 特异性扩增带

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二球悬铃木花粉变应原特应性体质与HLA-DRB1等位基因相关性分析 被引量：6

2

作者 齐名 魏花 +2 位作者 朱琴 王艾丽 熊华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期401-403,共3页

目的建立对二球悬铃木花粉过敏的特应性体质者的HLA-DRB1等位基因的PCR-SSP检测方法,探讨江苏汉族人二球悬铃木花粉变应原特应性体质者与HLA-DRB1等位基因的相关性。方法用酚-氯仿法提取全血DNA,合成8对等位基因特异性引物,用PCR-SSP方... 目的建立对二球悬铃木花粉过敏的特应性体质者的HLA-DRB1等位基因的PCR-SSP检测方法,探讨江苏汉族人二球悬铃木花粉变应原特应性体质者与HLA-DRB1等位基因的相关性。方法用酚-氯仿法提取全血DNA,合成8对等位基因特异性引物,用PCR-SSP方法检测20例江苏汉族二球悬铃木花粉过敏体质者和36例健康人HLA-DRB1*0401,*0402,*0403,*0404,*0405,*0406,*0407,*0408等位基因。结果经优化实验条件,建立了HLA-DRB1的8个等位基因的PCR-SSP检测方法,获得了患者组和健康人组上述HLA-DRB1等位基因的分布资料。二球悬铃木花粉变应原特应性体质者DRB1*0405和*0406基因频率高于健康人对照组而DRB1*0402基因频率低于健康人对照组。其他5个等位基因频率二组间无显著性差异。结论HLA-DRB1*0406和*0405可能是对二球悬铃木花粉变应原过敏的I型变态反应特应性体质者的可疑候选易患等位基因,而DRB1*0402基因可能是与之相关的具有抵抗作用的等位基因。 展开更多

关键词 人类白细胞抗原 等位基因 二球悬铃木花粉 变应原 序列特异性引物聚合酶链反应

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山乌桕叶片DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化 被引量：9

3

作者 黄旭萍 黄一航 +3 位作者 黄敏 王建超 陈孝丑 陈发兴 《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期164-171,共8页

为研究南方优良乡土彩叶树种山乌桕的遗传多样性,并为山乌桕种质培育研究提供技术参考。以山乌桕叶片为试验材料,对山乌桕ISSR-PCR反应体系进行优化,比较试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和十二烷基硫酸钠(SDS)法对山乌桕叶... 为研究南方优良乡土彩叶树种山乌桕的遗传多样性,并为山乌桕种质培育研究提供技术参考。以山乌桕叶片为试验材料,对山乌桕ISSR-PCR反应体系进行优化,比较试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和十二烷基硫酸钠(SDS)法对山乌桕叶片DNA的提取效果,并利用单因素试验和L 25(53)正交试验对DNA模板用量、引物浓度、2×Taq Master Mix添加量、退火温度和循环次数进行优化。结果表明,试剂盒法和改良CTAB法均可获得较高浓度和质量的DNA,都是提取山乌桕叶片DNA的良好方法;山乌桕叶片ISSR-PCR反应体系中,DNA模板用量对扩增效果影响最大,2×Taq Master Mix添加量的影响最小;山乌桕叶片ISSR-PCR的最优反应体系为:总体积20μL,其中含20 ng DNA模板1.5μL、2×Taq Master Mix 8.0μL、引物浓度0.8μmol·L^(-1)。山乌桕叶片ISSR-PCR的反应程序为:94℃预变性5 min、94℃变性30 s、51.9℃退火45 s、72℃延伸90 s、40个循环,72℃延伸10 min、4℃保存。 展开更多

关键词 山乌桕 DNA提取 简单重复序列区间-聚合酶链式扩增反应 体系优化

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基因扩增技术

4

作者 武建国 《医学研究生学报》 CAS 1991年第3期274-274,共1页

用 DNA 探针技术分析特异的核苷酸序列来诊断传染病和遗传病,使诊断的灵敏度有了很大的提高,但由于特异的靶序列含量极微,一般情况下即使用 DNA 杂交技术也难以测出,常需将嵌有靶基因的载体导入细菌细胞中,细菌快速繁殖,靶基因得到扩增... 用 DNA 探针技术分析特异的核苷酸序列来诊断传染病和遗传病,使诊断的灵敏度有了很大的提高,但由于特异的靶序列含量极微,一般情况下即使用 DNA 杂交技术也难以测出,常需将嵌有靶基因的载体导入细菌细胞中,细菌快速繁殖,靶基因得到扩增后再进行检测。此法费时、费事,难于实际应用。1985年 Saiki 和1987年 Mullis 分别建立了多聚酶链反应(polymerase chaim reaction,PCR),又称特异性 DNA 序列引物定向酶促扩增技术,能选择性扩增、浓集一个特异性 DNA 展开更多

关键词 基因扩增技术 DNA 探针技术 多聚酶链反应 核苷酸序列 靶序列 选择性扩增 杂交技术 特异性 多瘤病毒

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HLA-DRB1、DQB1基因多态性与流行性出血热的相关性 被引量：7

5

作者 冯继红 孙万邦 +3 位作者 罗军敏 李维宏 黄学贵 张忆雄 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第48期23-25,共3页

目的从基因水平探讨HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性与流行性出血热的相关性,以阐述其免疫遗传学特征。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测流行性出血热患者和正常对照组各50例的HLA-DRB1、DQB1等位基因。结果流行性出血热患者... 目的从基因水平探讨HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性与流行性出血热的相关性,以阐述其免疫遗传学特征。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应技术检测流行性出血热患者和正常对照组各50例的HLA-DRB1、DQB1等位基因。结果流行性出血热患者与正常对照组比较,HLA-DRB1*16等位基因分布频率明显增高(Pc=0.010 6),两组间其余HLA-DRB1-、DQB1等位基因分布频率差异无统计学意义(Pc>0.05)。结论HLA-DRB1*16等位基因与流行性出血热呈正相关,可能为流行性出血热易感基因之一。 展开更多

关键词 流行性出血热 序列特异性引物聚合酶链反应 人类白细胞抗原 相关性

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三种方法检测强直性脊柱炎患者HLA-B27的效果比较 被引量：11

6

作者 赵晓君 薛鸾 +3 位作者 陈云飞 黄岚 王靖 蒋文燕 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第43期48-49,共2页

目的评价序列特异性引物—聚合酶链式反应(PCR-SSP)法、流式细胞术及微量淋巴细胞毒(MLCT)法三种方法检测血清人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)对强直性脊柱炎(AS)的诊断价值。方法选择80例经临床确诊的AS患者(AS组)和85例健康体检者(对照... 目的评价序列特异性引物—聚合酶链式反应(PCR-SSP)法、流式细胞术及微量淋巴细胞毒(MLCT)法三种方法检测血清人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)对强直性脊柱炎(AS)的诊断价值。方法选择80例经临床确诊的AS患者(AS组)和85例健康体检者(对照组),分别采用PCR-SSP法、流式细胞术及MLCT法检测血清HLA-B27,计算三种方法诊断AS的敏感度、特异度。结果 PCR-SSP法、流式细胞术、MLCT检测血清HLA-B27诊断AS的敏感度分别96.25%9、3.75%、83.75%,特异度分别为94.12%9、5.29%9、5.29%,前两种方法的敏感度显著高于第三种(P均<0.05)。结论 PCR-SSP法检测血清HLA-B27快速、简单,且对诊断AS具有较高敏感度和特异度。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 序列特异性引物-聚合酶链式反应 流式细胞术 人类白细胞抗原-B27

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药物代谢酶CYP3A在中国肾移植人群的遗传多态性 被引量：8

7

作者 储小曼 闵佩清 +2 位作者 张静 孔诚 蔡卫民 《医学研究生学报》 CAS 2005年第2期107-111,共5页

目的:建立药物代谢酶CYP3A4、CYP3A5的多个等位基因分型方法,为进一步从基因水平研究CYP3A与机 体对药物反应的个体差异本质及其与药物代谢的相关性提供分子生物学实验方法;探讨药物代谢酶CYP3A在中 国肾移植人群的遗传多态性。　方... 目的:建立药物代谢酶CYP3A4、CYP3A5的多个等位基因分型方法,为进一步从基因水平研究CYP3A与机 体对药物反应的个体差异本质及其与药物代谢的相关性提供分子生物学实验方法;探讨药物代谢酶CYP3A在中 国肾移植人群的遗传多态性。　方法:用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性(PCR RFLP)法及特异性等位基因 扩增(PCR ASA)法分别建立了CYP3A的CYP3A4亚型三个新突变点(CYP3A4 4、 5、 6)及CYP3A5亚型的 CYP3A5 3基因分型方法,并对中国肾移植人群进行基因分型。　结果:CYP3A4 4、 5、 6、CYP3A5 3在中 国肾移植人群的基因频率分别为0.75%、0.76%、0.75%和27.83%;个体突变率分别为2/133、3/197、3/200和 55/115。　结论:研究结果提示,中国肾移植人群中CYP3A4 4、 5、 6、CYP3A5 3的存在可能使其表达的药 物代谢酶活性改变,从而影响药物在体内的代谢过程。 展开更多

关键词 CYP3A 基因多态性 药物代谢 特异性等位基因扩增法 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性

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河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究 被引量：7

8

作者 滑世轩 王书勤 +1 位作者 岑东 燕备战 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期545-547,共3页

目的研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。结果 HPA... 目的研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4;4a 0.996 9,4b 0.003 1;5a 0.990 6,5b 0.009 4;6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。结论河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。 展开更多

关键词 人类血小板抗原 序列特异性引物聚合酶链反应 基因分型 基因频率

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PCR-SSP检测HLA-B_(27)基因分型诊断强直性脊柱炎 被引量：1

9

作者 董魁 吴俊柱 沈云青 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第25期61-61,共1页

关键词 HLA-B27 基因分型 诊断 PCR-SSP技术 强直性脊柱炎 序列特异性引物 患者 寡核苷酸探针 聚合酶链反应

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广东汉族SLE患者HLA-DR、DQ、DP基因多态性研究 被引量：2

10

作者 禤国维 范瑞强 +2 位作者 吴元胜 陈红 查旭山 《岭南皮肤性病科杂志》 2003年第4期225-228,共4页

目的 :研究广东汉族SLE患者与HLA -DQ、DR、DP的相关性。方法 :采用聚合酶链反应一序列特异性引物 (PCR -SSP)技术 ,对 48例广东籍汉族SLE患者和 1 0 2例健康对照者静脉血样本HLA -DQ、DR、DP等位基因多态性进行研究。结果 :SLE患者DQA1... 目的 :研究广东汉族SLE患者与HLA -DQ、DR、DP的相关性。方法 :采用聚合酶链反应一序列特异性引物 (PCR -SSP)技术 ,对 48例广东籍汉族SLE患者和 1 0 2例健康对照者静脉血样本HLA -DQ、DR、DP等位基因多态性进行研究。结果 :SLE患者DQA1 0 1 0 1等位基因频率显著升高 (RR =8 1 2 ,P =0 0 0 4) ,DQA1 0 3 0 2的明显低于正常组 (RR =0 0 9,P =0 0 0 5 )。DQB1 0 3 0 1基因频率明显低于正常组 ,两者比较有显著性差异 (P <0 0 1 )。SLE患者DR3 (DRB1 0 3 0 1 -DRB1 0 3 0 2 )基因频率显著高于正常组 ( χ2 =1 4 2 4,P <0 0 1 ,RR =2 0 2 0 ) ;DRw5 2 (DRB3 0 1 0 1 -DRB3 0 3 0 1 )基因频率显著高于正常组 ( χ2 =2 0 3 46,P <0 0 1 ) ;DRW1 4:DRB1 1 40 2 ,DRB1 1 40 3基因频率也显著高于正常组 (P <0 0 5 ) ;DR4(DRB1 0 40 1 -DRB1 0 41 1 )基因频率明显低于正常组 (P <0 0 1 ) ,DR9(DRB1 0 90 1 ) ,DRw1 1(DRB1 1 1 0 1 -DRB1 1 1 0 4)基因频率也显著低于正常组 (P <0 0 1 ) ,DPA1 0 2 0 2等位基因频率显著高于正常组 ( χ2 =4 1 2 4,P <0 0 5 ,RR =3 5 4) ,SLE患者DPA1 0 2 0 1等位基因频率显著低于正常组 ( χ2 =4 5 95 ,P <0 0 5 ,RR =0 3 7)。结论 :提示HLA -DQA1 展开更多

关键词 广东汉族 SLE HLA-DR基因 DQ基因 DP基因 系统性红斑狼疮 聚合酶链反应-序列特异性引物技术

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对HLA-B座位中低分辨中模棱两可基因分型的调查分析

11

作者 鞠瑞青 《中国实用医药》 2014年第4期255-255,共1页

人类白细胞抗原（HLA）是目前所知的最具有多态性的遗传系统之一,它位于人类第6号染色体短臂上,总长度3600 kb,约占人类基因组总长度的1/3000。整个HLA复合体共有数十个基因座,可分为HLA-Ⅰ类、HLA-Ⅱ类、HLA-Ⅲ类基因。HLA-B基因座属于... 人类白细胞抗原（HLA）是目前所知的最具有多态性的遗传系统之一,它位于人类第6号染色体短臂上,总长度3600 kb,约占人类基因组总长度的1/3000。整个HLA复合体共有数十个基因座,可分为HLA-Ⅰ类、HLA-Ⅱ类、HLA-Ⅲ类基因。HLA-B基因座属于HLA-Ⅰ类基因,它是HLA编码系统中最复杂,多态性最多的区域,由于其高变区各个等位基因差异仅在几个碱基,且只有极少等位基因某个高变区具有独立的碱基序列,因而交叉反应众多,故B位点往往出现定型困难［1］。尽管现有特异性寡核苷酸探针技术已经达到了中等分辨水平,但对于HLA-B座位上有些模棱两可的基因型尚不能分辨识别。作者所在实验室采用特异性寡核苷酸探针（PCR-SSO）技术对13485例HLA-B座位进行中低分辨调查分析,并对筛选出的模棱两可等位基因通过采用聚合酶链反应-序列特异性引物扩增（PCR-SSP）技术进行进一步确认。 展开更多

关键词 HLA-B 聚合酶链反应-序列特异性引物扩增 特异性寡核苷酸探针 基因分型 调查 人类白细胞抗原 HLA-Ⅰ类 人类基因组

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新疆地区维吾尔族寻常型银屑病与HLA-DRB1~＊ 07等位基因的关联研究 被引量：6

12

作者 蒋建华 多兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第1期54-57,共4页

目的银屑病是慢性炎症性、增生性皮肤病,可分为Ⅰ型和Ⅱ型2种亚型,发病机制尚不清楚,与遗传、免疫、感染等因素有关。近年来,国内外对银屑病发病与人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)相关性的研究积累了一些资料。目前认为HLA... 目的银屑病是慢性炎症性、增生性皮肤病,可分为Ⅰ型和Ⅱ型2种亚型,发病机制尚不清楚,与遗传、免疫、感染等因素有关。近年来,国内外对银屑病发病与人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)相关性的研究积累了一些资料。目前认为HLA-DRB1*07是与寻常型银屑病最为密切相关的基因位点。尚未见有维吾尔族银屑病患者HLA-DRB1*07频率的研究报道。文中探讨新疆地区维吾尔族寻常型银屑病与HLA-DRB1*07等位基因的相关性。方法用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP)对200例维吾尔族寻常型银屑病患者HLA-DRB1*07等位基因进行检测,并与200例健康人群进行对照,分析了携带该基因的银屑病患者与其家族史的相关性。结果寻常型银屑病患者组HLA-DRB1*07等位基因频率显著高于对照组。Ⅰ型寻常型银屑病HLA-DRB1*07等位基因频率显著高于对照组。有银屑病家族史患者与无银屑病家族史的患者HLA-DRB1*07等位基因频率无显著性差异。结论 HLA-DRB1*07等位基因可能是新疆维吾尔族寻常型银屑病患者的易感基因。 展开更多

关键词 寻常型银屑病 HLA-DRB1 等位基因 聚合酶链反应-序列特异性引物

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HLA-DQB1基因分型技术

13

作者 黄兵 张祖文 +3 位作者 兰炯采 张玉明 武大林 黄志光 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期29-31,共3页

报告了简便、快速的ＨＬＡ－ＤＱＢ１聚合酶链反应一序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）基因分型技术。比较了基因分型与血清学分型技术的结果，其中３３份标本中６份血清型结果（１８．２％）与基因型不吻合。

关键词 人类白细胞抗原 聚合酶链反应 序列特异性引物

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PCR-SSP/PCR-SSO两种KIR基因分型方法的比较 被引量：2

14

作者 李娟 慕力 +6 位作者 韩兴乔 张华 孙乐静 暨波 魏博 杨俊晔 韩俊领 《生物医学工程与临床》 CAS 2021年第2期225-231,共7页

目的杀伤细胞免疫蛋白样受体(KIR)基因在自然杀伤细胞活性调节、机体抗感染、移植免疫过程中发挥重要作用。在脐带血移植中,KIR基因分型的效率和准确关系到移植的成败。为了满足临床上对KIR基因分型的要求,对比分析聚合酶链反应-序列特... 目的杀伤细胞免疫蛋白样受体(KIR)基因在自然杀伤细胞活性调节、机体抗感染、移植免疫过程中发挥重要作用。在脐带血移植中,KIR基因分型的效率和准确关系到移植的成败。为了满足临床上对KIR基因分型的要求,对比分析聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)和聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSO)两种方法,试图建立一个高效便捷检测KIR基因分型的方法学体系。方法从2018年到2019年已外送到第三方检测实验室(北京博富瑞医学检验实验室有限公司)做过KIR基因分型检测的脐带血样本中随机取出12份,分别用PCR-SSP及PCR-SSO商品化试剂盒进行KIR基因分型检测,并通过凝胶电泳分析或MATCH IT!DNA软件分析,获取KIR基因分型结果。结果12例脐带血样本中,PCR-SSO方法学检测的结果与原PCR-SSO方法检测结果完全一致,PCR-SSP方法学检测的结果与原PCR-SSO方法检测结果9例相同,有2例因出现漏孔而无法判读,有1例出现了假阳性带。结论PCR-SSO方法学检测KIR基因效果优于PCR-SSP,但是PCR-SSO方法学也存在当微珠的荧光校准值接近于临界值时,结果出现错判的现象;为保证KIR基因分型的准确度,建议PCR-SSP方法出现漏孔或者PCR-SSO方法荧光校准值接近于临界值时两种方法相互验证。 展开更多

关键词 KIR基因 基因分型 聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP) 聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSO) 荧光校准值 相互验证

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中国汉族人Rh血型系统D阴性表型的分子机理研究 被引量：4

15

作者 徐群 乔文本 +4 位作者 李京 吕红娟 孙波 刘德春 张建业 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第10期68-69,共2页

金鸡辞旧,瑞犬迎新,值此佳年盛世,山东省血液中心与《山东医药》携手合作,共同推出“输血研究“栏目。本栏目旨在贯彻党和国家的卫生工作方针政策,坚持临床与基础结合,理论与实践结合,普及与提高结合,充分展示血液领域取得的新成果、新... 金鸡辞旧,瑞犬迎新,值此佳年盛世,山东省血液中心与《山东医药》携手合作,共同推出“输血研究“栏目。本栏目旨在贯彻党和国家的卫生工作方针政策,坚持临床与基础结合,理论与实践结合,普及与提高结合,充分展示血液领域取得的新成果、新技术、新理论、新经验,反映国内外最新的输血研究动态,为各级各类医疗卫生机构和输血工作者,提供一个促进学术交流和信息传播的平台。我们热切希望和广大作者、读者一道精诚合作、并肩耕耘,为全面提高我省输血医学科研水平,促进输血事业发展做出贡献。 展开更多

关键词 RH血型系统 中国汉族人 机理研究 表型 阴性 人RhD基因 序列特异性引物 分子 聚合酶链反应 基因内含子4

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RhD血型基因定型在新生儿溶血病产前诊断的应用 被引量：4

16

作者 田爱民 孙启俊 +1 位作者 Helen Davies YW Liew 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期194-195,209,共3页

目的检测血液RhD血型基因型并应用于新生儿溶血病(HDN)的产前诊断。方法采用聚合酶链反应序列特异性引物(PCR SSP)方法,根据PCR产物的强弱判定RhD基因型。结果36名个体血液样本中,10名为RhD-/RhD-纯合子,3名为RhD+/RhD-杂合子,23名为RhD... 目的检测血液RhD血型基因型并应用于新生儿溶血病(HDN)的产前诊断。方法采用聚合酶链反应序列特异性引物(PCR SSP)方法,根据PCR产物的强弱判定RhD基因型。结果36名个体血液样本中,10名为RhD-/RhD-纯合子,3名为RhD+/RhD-杂合子,23名为RhD+/RhD+纯合子。结论该方法可以准确检测出RhD血型基因型,并可用于RhD血型不合引起HDN的产前诊断。 展开更多

关键词 RHD血型 RhD基因型 聚合酶链反应-序列特异性引物 新生儿溶血病 产前诊断

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115例献血者ABH分泌型与非分泌型分布及基因多态性分析 被引量：1

17

作者 朱岷 马洪亮 +1 位作者 赵蒲宇 兰炯采 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期550-552,共3页

目的探讨115例汉族献血者ABH分泌型与非分泌型血清学分布及基因多态性。方法用凝集抑制试验检测115例标本ABH血型物质,聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)对选取标本作ABH基因定型,直接测序技术对46例血清学检测为分泌型标本进行分... 目的探讨115例汉族献血者ABH分泌型与非分泌型血清学分布及基因多态性。方法用凝集抑制试验检测115例标本ABH血型物质,聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)对选取标本作ABH基因定型,直接测序技术对46例血清学检测为分泌型标本进行分析。结果 115例献血者中分泌型95例,非分泌型20例;分泌型献血者A物质效价均高于B物质效价和H物质效价(P<0.05);115例献血者中,无A385T基因突变的48例均为分泌型;A385T基因突变者中,杂合子基因385A/385T 39例,为分泌型,纯合子385T/385T基因28例,8例为分泌型,20例为非分泌型;1例分泌型标本出现178C/T新的突变位点。结论 ABH血型A物质效价高于B、H物质,115例汉族人群中存在不同于高加索人群及非洲人群的A385T基因突变。 展开更多

关键词 ABH分泌型 聚合酶链反应-序列特异性引物 基因多态性 (DNA)序列测定

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一种副干酪乳杆菌快速鉴定方法的建立及应用

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作者 孙林慧 禚惠荣 +3 位作者 师文君 王康琪 张东立 侯少阳 《食品安全导刊》 2023年第15期100-104,共5页

目的:基于肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应技术(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus-Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR),寻找并制备一对引物探针,灵敏、准确地从复杂生境中鉴定副干酪乳杆菌。方法:寻找副干酪乳... 目的:基于肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应技术(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus-Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR),寻找并制备一对引物探针,灵敏、准确地从复杂生境中鉴定副干酪乳杆菌。方法:寻找副干酪乳杆菌HP-B1145的肠杆菌基因间重复一致序列(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus,ERIC)最佳反应体系,对ERIC片段回收纯化得到特定条带及序列结果,据此设计引物,快速鉴定副干酪乳杆菌。结果:根据回收得到的副干酪乳杆菌HP-B1145 ERIC片段,设计出了一对引物探针(1145-S-F:5’-GCAGGATGCTGATTGTTAGCAG-3’;1145-S-R:5’-CTCCGACCAAAGCGACTATGAC-3’)。结论:根据引物特异性、准确性、普适性、含量限度实验得出,设计的引物能准确灵敏地从复杂生境中鉴定副干酪乳杆菌。 展开更多

关键词 副干酪乳杆菌 肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应技术(ERIC-PCR) 引物探针 特异性 鉴别

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