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水牛RNA聚合酶III启动子的克隆与鉴定 被引量:1
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作者 张晓溪 刘庆友 +3 位作者 邓彦飞 罗婵 崔奎青 石德顺 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期858-863,共6页
【目的】获得有效的水牛RNA聚合酶III启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础。【方法】通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段(shEGFP)... 【目的】获得有效的水牛RNA聚合酶III启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础。【方法】通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段(shEGFP)对水牛7SK、U6启动子进行功能性分析,然后分别在水牛源及鼠源细胞中与pEGFP-N1共转染,转染48h后用荧光显微镜检测EGFP的表达情况,并用流式细胞仪和荧光实时定量PCR检测EGFP沉默表达情况。【结果】克隆获得水牛7SK、U6启动子序列分别为430和357bp,其OCT-1(或CACCC盒)及TATA盒高度保守。连接shEGFP后与pEGFP-N1共转染细胞,通过荧光显微镜可观察到细胞发生了明显的荧光表达沉默现象;通过流式细胞分析,发现水牛7SK和U6启动子引导的shEGFP在水牛源细胞中沉默效率高达93.82%和87.45%;荧光实时定量PCR检测结果显示,在转染bu7SK-shEGFP和buU6-shEGFP的水牛源BFF细胞中,EGFP表达水平均显著低于其他物种启动子的细胞转染组(P<0.05),而在鼠源PT67细胞中,水牛启动子的启动效率与其他物种启动子差异不显著(P>0.05)。【结论】水牛7SK和U6启动子可高效启动shRNA表达,且具有一定的物种特异性。 展开更多
关键词 水牛 RNA聚合酶ⅲ启动子 7SK U6 克隆 鉴定 基因沉默
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真核生物RNA聚合酶的结构和功能概述
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作者 严意华 林颖韬 胡雪峰 《生物学教学》 北大核心 2018年第11期2-4,共3页
真核生物中存在三种RNA聚合酶,它们对基因的表达起着十分重要的作用。本文概述三种RNA聚合酶的结构和功能。
关键词 RNA聚合 RNA聚合 RNA聚合酶ⅲ 转录
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Increased level of polymerase Ⅲ transcribed Alu RNA in hepatocellular carcinoma tissue
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作者 Tang RB Wang HY +4 位作者 Lu HY Xiong J Li HH Qiu XH Liu HQ 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期880-880,共1页
关键词 聚合酶ⅲ 基因转录 RNA 肝细胞癌 肿瘤组织
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DNA识别受体的研究进展
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作者 徐丽(综述) 曹雪涛(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期99-103,共5页
作为生命物质基础的DNA主要通过内体TLR9和胞质识别受体来启动免疫应答。近年来TLR9受体研究的新进展主要体现在以下四个方面:(1)TLR9与其配体相互作用的决定因素;(2)TLR9由内质网到内体的转位机制及其重要性;(3)内体的酸化成熟和TLR9... 作为生命物质基础的DNA主要通过内体TLR9和胞质识别受体来启动免疫应答。近年来TLR9受体研究的新进展主要体现在以下四个方面:(1)TLR9与其配体相互作用的决定因素;(2)TLR9由内质网到内体的转位机制及其重要性;(3)内体的酸化成熟和TLR9的剪切在信号转导中的作用;(4)TLR9区分自体与外源DNA的可能机制。同时,有关TLR9拮抗剂和TLR9缺陷小鼠的一系列实验有力地证实了TLR9非依赖性胞质DNA受体的存在,到目前为止共发现了3个分子:DAI、AIM2、RNA聚合酶Ⅲ。 展开更多
关键词 DNA 识别受体 TLR9 DAI AIM2 RNA聚合酶ⅲ
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增加tRNA_i^(Met)合成促进细胞增殖与癌性转化
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作者 贺惠娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1204-1204,共1页
关键词 蛋白质合成 细胞增殖 细胞转化 RNA聚合酶ⅲ 癌性 产物表达 TRNA 细胞生长
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