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SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色新方法的研究 被引量:12
1
作者 程冬梅 邓志勇 郭霭光 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第6期1214-1217,共4页
通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成... 通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成之后也十分稳定。 展开更多
关键词 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色 氯化钙 制备 电泳纯化蛋白
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两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响 被引量:2
2
作者 周艳芬 赵晓瑜 +1 位作者 李亚东 乔环宇 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期59-61,共3页
以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收。它们的灵敏度分别为500ng和5ng;蛋白质回收率分别为37.9%和74.4%。
关键词 牛血清白蛋白 十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳 染色方法 蛋白质回收 马斯亮蓝 咪唑—Zn
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聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质快速染色 被引量:2
3
作者 陆珊华 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期480-480,共1页
关键词 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 快速染色 血清蛋白质
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染脱色方法的比较研究 被引量:7
4
作者 许文涛 黄昆仑 +1 位作者 常世敏 罗云波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期148-151,共4页
本文对几种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)快速染脱色方法进行了比较研究,从蛋白质回收,染色时间及其灵敏度的角度对它们的优缺点进行了比较,并且阐述了它们各自的染色机理。与常规考马斯亮蓝染色法相比,这几种方法染脱色的清晰度稍... 本文对几种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)快速染脱色方法进行了比较研究,从蛋白质回收,染色时间及其灵敏度的角度对它们的优缺点进行了比较,并且阐述了它们各自的染色机理。与常规考马斯亮蓝染色法相比,这几种方法染脱色的清晰度稍差,但是灵敏度相当,在实践上均是可行的。尤其是CaCl2、KCl法的灵敏度更高,染色时间短, 展开更多
关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质 快速染色 KCL
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检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇蛋白的新方法——海波银染法 被引量:6
5
作者 安春菊 耿华 +1 位作者 李德森 杜荣骞 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期273-276,共4页
介绍一种检测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法———海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进 ,省略了乙醇固定与洗涤步骤 ,只需 2 0min即可完成全部染色过程 ,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下 。
关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 考马斯亮蓝染色 蛋白质银染
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双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究进展 被引量:1
6
作者 郭慧 邓文星 张映 《生物学教学》 北大核心 2009年第6期9-11,共3页
双向聚丙烯酰胺凝胶电泳按等电点和分子量对蛋白质进行分离,具有很高的分辨率,已经成为蛋白质组研究中的核心技术之一。本文对双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的原理、检测步骤进行介绍,并对其存在问题与发展进行简要介绍。
关键词 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D—PAGE) 染色 生物学教学 蛋白质
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季铵型阳离子聚丙烯酰胺的无盐染色行为 被引量:7
7
作者 腾晓旭 马威 张淑芬 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期563-568,共6页
以季铵型阳离子聚丙烯酰胺作为一种新的阳离子助剂对棉纤维进行处理,应用于活性染料无盐染色,对染色过程中染料与处理后棉纤维之间的吸附类型、吸附热力学及吸附动力学进行了研究。结果表明,无盐染色过程符合Langmuir吸附模型;吸附过程... 以季铵型阳离子聚丙烯酰胺作为一种新的阳离子助剂对棉纤维进行处理,应用于活性染料无盐染色,对染色过程中染料与处理后棉纤维之间的吸附类型、吸附热力学及吸附动力学进行了研究。结果表明,无盐染色过程符合Langmuir吸附模型;吸附过程是放热自发进行的,低温有利于染料的吸附;吸附动力学符合二级动力学模型,属于化学吸附过程。与传统有盐染色结果相比,染色后的阳离子化棉纤维色深增加,染料利用率提高。 展开更多
关键词 季铵型阳离子聚丙烯酰胺 棉纤维 活性染料 无盐染色
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胆红素氧化酶凝胶电泳活性染色法
8
作者 曾伟 赵晓瑜 倪志华 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第2期198-201,共4页
胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也... 胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也可以在电泳后置于胆红素溶液中染色(PACE-胆红素).其中PAGE-胆红素方法在20 min后即在凝胶上出现深绿色的胆红素氧化酶条带,随着时间延长,凝胶上的绿色酶条带逐渐扩散,最终形成透明条带;而运用胆红素-PAGE的方法则在12 h后才能在凝胶上看见透明的胆红素氧化酶所在的条带.相比之下,前者更为简便、快速、灵敏. 展开更多
关键词 活性染色 胆红素氧化酶 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
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蛋白质凝胶电泳的高灵敏度染色法——复合银染 被引量:5
9
作者 柳荣 黄建英 刘田生 《天津农学院学报》 CAS 1999年第2期5-10,共6页
本实验以牛血清白蛋白为样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后用考马斯亮兰R-250和银染法分步染色。这种复合银染法的灵敏度比单独使用银染法提高约1000倍,比单独使用考马斯亮兰R-250染色法提高约106倍。它在1mm厚的... 本实验以牛血清白蛋白为样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后用考马斯亮兰R-250和银染法分步染色。这种复合银染法的灵敏度比单独使用银染法提高约1000倍,比单独使用考马斯亮兰R-250染色法提高约106倍。它在1mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上至少可检测出5pg/mm2的蛋白质。在没有放射性防护设施的任何一个生物实验室中,采用复合银染法基本上能够达到或接近放射性标记检测的灵敏度。相比之下,它不仅省去了繁琐的各式各样的标记过程及其放射性污染,同时还具有很高的灵敏度,因此复合银染具有广泛的应用性。 展开更多
关键词 蛋白质 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染 复合银染 染色 灵敏度
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小麦籽粒淀粉分支酶活性电泳染色方法的比较验证
10
作者 赵法茂 齐霞 肖军 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第3期352-355,共4页
以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同... 以发育中的小麦籽粒为材料,对两种淀粉分支酶凝胶电泳活性染色方法的缓冲体系、染色过程、染色时间,试剂浓度等进行了比较验证。结果表明,Nagamine等文献中的酶活性染色方法能很好的区分淀粉分支酶的同种型类型和基因位点分布,显示不同基因位点的遗传多态性特点,与Yamanouchi等文献中的染色方法相比,酶带分辨率高,电泳图谱清晰,实验成本降低,可为淀粉分支酶的分子生物学及遗传特性研究提供一种经济、可靠的方法。 展开更多
关键词 小麦 淀粉分支酶 活性染色 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 比较
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银屑病患者指甲和鳞屑的蛋白质SDS-电泳图谱和转谷氨酰胺酶活性探讨
11
作者 张玉红 李红文 吴景兰 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期700-702,共3页
目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PA... 目的:探讨银屑病患者指甲和鳞屑蛋白质十二烷基硫酸钠(SDS)-电泳图谱和转谷氨酰胺(transglutaminase1,TGase1)酶的活性。方法:各取5例银屑病患者的指甲和鳞屑与5例健康人的指甲和鳞屑,分别提取蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。应用辣根过氧化物酶(HRP)-单丹酰尸胺结合物对鳞屑铺片标本检测TGase 1酶活性。结果:健康人指甲和鳞屑的SDS-PAGE图谱皆呈现4条主带:63 ku、54 ku、48 ku及38 ku,银屑病患者指甲及鳞屑的SDS-PAGE图谱也呈现此4条主带,但多数主带扫描数值的水平较高,P<0.01。健康人的鳞屑铺片标本TGase 1酶活性呈现为棕黄色细颗粒定位于角质深层角质形成细胞(KC)的周缘;相比之下银屑病患者的TGase 1酶活性缺乏。结论:指甲及鳞屑的SDS-PAGE主带相似,前者图谱更清晰可能与其蛋白较稳定有关。银屑病患者比健康人的SDS-PAGE图谱主带表达水平升高,提示其KC可能呈增生状态,表达产物较多;患者TGase 1酶活性的缺如提示其表皮屏障功能有缺陷,可能与其参与代偿性增生有关。 展开更多
关键词 银屑病 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性 转谷氨酰胺 指甲 鳞屑
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小麦蛋白酶解制备活性多肽的研究 被引量:11
12
作者 王岁楼 祝红蕾 张栋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期388-392,共5页
分别采用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解小麦蛋白,实验结果表明,胃蛋白酶作用效果最好。以水解度(DH)和得率为指标,对底物浓度、胃蛋白酶浓度、反应温度、反应时间和反应体系pH值等影响因素进行了单因素试验,在此基础... 分别采用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解小麦蛋白,实验结果表明,胃蛋白酶作用效果最好。以水解度(DH)和得率为指标,对底物浓度、胃蛋白酶浓度、反应温度、反应时间和反应体系pH值等影响因素进行了单因素试验,在此基础上通过正交试验最终确定了酶解小麦蛋白的最佳条件为:底物浓度10%、E/S7%、温度35℃、时间3h、pH2.0,在此条件下蛋白质水解度为4.62%、产物得率为50.64%。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小麦蛋白的水解产物,实验结果表明,所有水解产物的分子量均小于7.0kD,其中大多数处于4.1~1.4kD,说明小麦蛋白已被水解成多肽。 展开更多
关键词 小麦蛋白 酶解 活性多肽 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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山溪鲵皮肤分泌物抗菌活性的初步研究 被引量:12
13
作者 刘炯宇 江建平 +4 位作者 何开泽 谢锋 张逊 郑中华 周洲 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第5期415-419,共5页
山溪鲵皮肤分泌物和经两次SephadexG 2 5层析分离得到的初步提纯样品经抗菌实验 ,发现具有抗菌活性。其中的抗菌活性成分为蛋白质性质 ,分子量约为 2 0kD ,具有在高温下短时间、常温下长时间保持稳定的特性。初步提纯样品经尿素SDS聚丙... 山溪鲵皮肤分泌物和经两次SephadexG 2 5层析分离得到的初步提纯样品经抗菌实验 ,发现具有抗菌活性。其中的抗菌活性成分为蛋白质性质 ,分子量约为 2 0kD ,具有在高温下短时间、常温下长时间保持稳定的特性。初步提纯样品经尿素SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为两条带 ;经反相高效液相层析 (RP HPLC)检测为 13个峰。此提纯方法的活性回收率为 4 6 .7%。这为进一步的纯化和性质鉴定工作奠定了基础。 展开更多
关键词 皮肤 分泌物 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 反相高效液相 经尿 抗菌活性 RP-HPLC 层析分离 鉴定工作 蛋白质
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试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNA A1555G突变的比较研究 被引量:3
14
作者 李琦 戴朴 +3 位作者 黄德亮 金政策 康东洋 张昕 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2008年第1期49-52,共4页
目的通过比较试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNAA1555G突变的不同特点,探索应用标准试剂盒和PAGE银染方法检测线粒体DNAA1555G突变的快速筛查和诊断方法。方法采用线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法... 目的通过比较试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNAA1555G突变的不同特点,探索应用标准试剂盒和PAGE银染方法检测线粒体DNAA1555G突变的快速筛查和诊断方法。方法采用线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测线粒体DNA1555位点正常者229例,A>G突变阳性者17例,验证此试剂盒配合PAGE银染法检测的有效性和准确性。结果线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测结果与酶切EB染色和测序结果完全吻合。结论线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法和试剂盒配合EB检测法较前者更为灵敏和清晰,在分析线粒体DNAA1555G突变方面具有简单、价廉、结果直观的特点,适合在中国用于进行此突变的大规模筛查或预防性检查。 展开更多
关键词 耳聋 线粒体DNA 突变 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染 溴化乙锭染色
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SDS-PAGE凝胶原位检测抗菌蛋白的活性——生物自显影技术 被引量:4
15
作者 邓小娟 曹阳 +1 位作者 钟仰进 黄自然 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期136-137,共2页
以大肠杆菌诱导的柞蚕蛹免疫血淋巴为例,介绍一种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后的凝胶原位检测抗菌活性组 分的生物自显影技术,该技术适用于鉴定各种不同生物体来源的样品中起活性作用的抗菌蛋白或抗菌肽。
关键词 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 原位检测 抗菌活性 生物自显影
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鳞翅目昆虫细胞抗菌肽的诱导、筛选及抗菌活性的研究 被引量:3
16
作者 彭蓉 杨忠 +4 位作者 刘凯于 姚汉超 杨红 崔艳芳 洪华珠 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2006年第2期240-243,共4页
选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系,采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法,诱导其产生抗菌肽,并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析.结果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系———粉纹夜蛾BTI-T... 选取3种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系,采用热灭活的大肠杆菌诱导的方法,诱导其产生抗菌肽,并进行抗菌活性检测、诱导动力学研究及Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析.结果筛选到1株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系———粉纹夜蛾BTI-Tn-5B1细胞系,并发现该粉纹夜蛾5B1细胞在诱导后16 h产生了1个分子量大约为8 000的抗菌肽,抗菌活性检测表明其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coliK12D31)、德氏卑沙门氏菌(Salmonella derby)均有不同程度的抑制作用,其中特别是对革兰氏阴性菌———大肠杆菌K12D31和德氏卑沙门氏菌有较强的抑菌活性. 展开更多
关键词 抗菌肽 BTI-Tn-5B1细胞系 Tricine SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 抗菌活性
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高碘酸-硝酸银染色法鉴定糖蛋白 被引量:12
17
作者 刘翠芳 蒋继志 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期534-535,共2页
对传统的糖蛋白染色方法(高碘酸-Sehiff法)进行了改进。蛋白质的氧化采用高碘酸法,染色时采用硝酸银染色法。此方法灵敏度是高碘酸-Sehiff法的100倍,而且比高碘酸-Sehiff法节省16~18h。
关键词 糖蛋白 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染 染色方法
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本地黎、杞黎和侾黎人群中Y染色体DYS287和DYS19的多态分布 被引量:1
18
作者 李冬娜 应大君 +1 位作者 符生苗 谢协驹 《海南医学院学报》 CAS 2004年第1期9-12,共4页
目的:对中国海南岛本地黎、杞黎和侾黎人群中Y染色体Alu序列和DYS19的多态分布进行调查。方法:采用PCR法对Y染色体特异性微卫星DYS19和Y染色体DYS287位点进行扩增,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果:在DYS19位点... 目的:对中国海南岛本地黎、杞黎和侾黎人群中Y染色体Alu序列和DYS19的多态分布进行调查。方法:采用PCR法对Y染色体特异性微卫星DYS19和Y染色体DYS287位点进行扩增,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果:在DYS19位点,本地黎群体发现4种等位基因,杞黎和侾黎群体均为3种。等位基因频率分布在3个支系中均以194bp的频率为最高,分别是0.711、0.855和0.667。统计分析显示:杞黎与侾黎人群在DYS19位点的等位基因频率有极显著性差异(P﹤0.01)。在DYS287位点,3个人群均未发生Alu序列插入。结论:DYS19和DYS287位点可以作为重要、稳定的遗传标记对遗传多样性研究提供可靠的证据。 展开更多
关键词 黎族 Y染色 遗传多态性 微卫星 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳 等位基因
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牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性测定方法的比较 被引量:9
19
作者 张爱霞 张佳程 生庆海 《中国乳业》 2003年第2期39-40,共2页
牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性的测定,以合成色谱底物(V7127)进行的分光光度比色法为最佳方案,因此利用该方法进行研究的也较多。SDS-PAGE、ELISA技术、TCA可溶性氮等各方法,虽然具有一定的局限性,但可作为分光光度法的辅助手段,以更好... 牛乳中纤维蛋白酶及其酶原活性的测定,以合成色谱底物(V7127)进行的分光光度比色法为最佳方案,因此利用该方法进行研究的也较多。SDS-PAGE、ELISA技术、TCA可溶性氮等各方法,虽然具有一定的局限性,但可作为分光光度法的辅助手段,以更好的对纤维蛋白酶进行研究。 展开更多
关键词 纤维蛋白酶 牛乳 酶原活性 测定方法 分光光度法 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 酶联免疫吸附技术 三氯乙酸-可溶性氮法
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不同家蚕品系的胰蛋白酶抑制剂种类与活性的多态性分析
20
作者 王凌燕 钟晓武 +4 位作者 张艳 董照明 王娟 夏庆友 赵萍 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期613-618,共6页
胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)广泛存在于昆虫体内,可抑制胰蛋白酶的水解活性。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白酶活性染色的方法,研究不同家蚕品系的丝腺、同一品系家蚕的不同组织器官及不同发育时期丝腺中胰蛋白酶抑制... 胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)广泛存在于昆虫体内,可抑制胰蛋白酶的水解活性。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白酶活性染色的方法,研究不同家蚕品系的丝腺、同一品系家蚕的不同组织器官及不同发育时期丝腺中胰蛋白酶抑制剂种类和活性的多态性,以丰富家蚕丝蛋白的合成、分泌及保护机制研究的基础信息。在22个家蚕品系上蔟第2天的蚕体丝腺中,共检测到6种胰蛋白酶抑制剂,分别命名为TI-Ⅰ~TI-Ⅵ,其中大部分家蚕品系都有TI-Ⅵ,有TI-Ⅳ的品系也较多,而有TI-Ⅱ的品系最少,家蚕不同品系间TI的种类分布不一致;在幼虫5龄期,TI活性随着丝腺的发育逐渐增强;在家蚕品系大造上蔟第1天蚕体的7个组织器官中,只在血液、精巢和丝腺中检测到TI,其中血液和丝腺中各检测到2种TI,精巢中检测到1种TI,而且同一家蚕品系含有TI的组织器官中的TI种类也不一致。对茧丝中3种TI(TI-Ⅲ、TI-Ⅳ和TI-Ⅵ)的理化性质进行检测,发现不同种类TI对温度及p H的适应范围不同,其中TI-Ⅵ的适应范围较广。研究结果显示:不同家蚕品系丝腺中含有的TI种类以及6种TI活性的强弱表现出多态性;同一家蚕品系不同组织器官中的TI种类也具有多态性;温度和p H对不同TI的活性影响程度不同。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 种类 活性 家蚕品系 丝腺 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性染色
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