目的观察不同浓度白藜芦醇对人前列腺癌细胞株PC-3增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法培养PC-3细胞并分为实验1、2、3、4组和对照组,实验1、2、3、4组分别加入10、50、100、150μmol/L的白藜芦醇,对照组不加药物。各组给药24 h后,采用...目的观察不同浓度白藜芦醇对人前列腺癌细胞株PC-3增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法培养PC-3细胞并分为实验1、2、3、4组和对照组,实验1、2、3、4组分别加入10、50、100、150μmol/L的白藜芦醇,对照组不加药物。各组给药24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪测算细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中的凋亡相关蛋白P53、Cleave-Caspase-3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)。结果对照组及实验1、2、3、4组OD值依次递减,实验1、2、3、4组细胞增殖抑制率依次递增(P均<0.05)。白藜芦醇在处理24h后对PC-3细胞具有显著的细胞毒作用,呈剂量依赖性,IC50值为23.25μmol/L。对照组及实验1、2、3、4组细胞凋亡率依次递增(P均<0.05)。实验1、2、3、4组细胞中P53、PARP(89 k D)相对表达量高于对照组,实验2、3、4组细胞中Cleave-Caspase-3相对表达量高于对照组,实验1、2、3、4组细胞中P53、PARP(89 k D)、Cleave-Caspase-3相对表达量依次增高(P均<0.05)。结论白藜芦醇可抑制PC-3细胞增殖并诱导细胞凋亡,作用呈剂量依赖性,其机制可能与P53表达上调、Caspase-3被激活、增加PARP的剪切有关。展开更多
探讨PARP抑制剂(PARPi)对XRCC1的表达以及对食管鳞癌(ESCC)放射治疗敏感性的影响。收集接受直线加速器辐照治疗的ESCC患者组织标本,免疫组化法检测其中XRCC1、PARP-1表达,观察其表达对ESCC患者放疗近期疗效的影响。ECA109细胞经AZD2281(...探讨PARP抑制剂(PARPi)对XRCC1的表达以及对食管鳞癌(ESCC)放射治疗敏感性的影响。收集接受直线加速器辐照治疗的ESCC患者组织标本,免疫组化法检测其中XRCC1、PARP-1表达,观察其表达对ESCC患者放疗近期疗效的影响。ECA109细胞经AZD2281(PARP抑制剂)处理后接受加速器辐照,检测PARPi的放疗增敏比(SER)。利用RT-PCR实验检测AZD2281联合辐照后XRCC1mRNA转录情况,探讨PARPi对辐照后ECA109细胞XRCC1mRNA转录的影响。结果发现,XRCC1阳性者放疗的客观有效率(ORR)低于阴性者(38.1%vs.88.9%,p=0.017);PARP-1阳性者放疗的ORR低于阴性者(36.8%vs.81.8%,p=0.026)。AZD2281的浓度为3μmol/L时,联合组的SER=1.744。AZD2281可增强ECA109细胞的辐射损伤作用。辐射后48 h XRCC1mRNA相对表达量明显上升;联合PARPi可抑制辐射诱导的XRCC1mRNA表达上调。本组结果显示,XRCC1、PARP-1高表达者放疗近期疗效较差,放疗可诱导XRCC1基因转录,AZD2281能有效抑制辐射诱导的XRCC1 mRNA表达上调,其可能的机制是PARPi抑制DNA-PKcs进而下调XRCC1表达。该结果提示PARPi可能通过抑制XRCC1表达、减少DNA损伤修复,从而增加ESCC放疗敏感性。展开更多
文摘目的观察不同浓度白藜芦醇对人前列腺癌细胞株PC-3增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法培养PC-3细胞并分为实验1、2、3、4组和对照组,实验1、2、3、4组分别加入10、50、100、150μmol/L的白藜芦醇,对照组不加药物。各组给药24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪测算细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中的凋亡相关蛋白P53、Cleave-Caspase-3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)。结果对照组及实验1、2、3、4组OD值依次递减,实验1、2、3、4组细胞增殖抑制率依次递增(P均<0.05)。白藜芦醇在处理24h后对PC-3细胞具有显著的细胞毒作用,呈剂量依赖性,IC50值为23.25μmol/L。对照组及实验1、2、3、4组细胞凋亡率依次递增(P均<0.05)。实验1、2、3、4组细胞中P53、PARP(89 k D)相对表达量高于对照组,实验2、3、4组细胞中Cleave-Caspase-3相对表达量高于对照组,实验1、2、3、4组细胞中P53、PARP(89 k D)、Cleave-Caspase-3相对表达量依次增高(P均<0.05)。结论白藜芦醇可抑制PC-3细胞增殖并诱导细胞凋亡,作用呈剂量依赖性,其机制可能与P53表达上调、Caspase-3被激活、增加PARP的剪切有关。
文摘探讨PARP抑制剂(PARPi)对XRCC1的表达以及对食管鳞癌(ESCC)放射治疗敏感性的影响。收集接受直线加速器辐照治疗的ESCC患者组织标本,免疫组化法检测其中XRCC1、PARP-1表达,观察其表达对ESCC患者放疗近期疗效的影响。ECA109细胞经AZD2281(PARP抑制剂)处理后接受加速器辐照,检测PARPi的放疗增敏比(SER)。利用RT-PCR实验检测AZD2281联合辐照后XRCC1mRNA转录情况,探讨PARPi对辐照后ECA109细胞XRCC1mRNA转录的影响。结果发现,XRCC1阳性者放疗的客观有效率(ORR)低于阴性者(38.1%vs.88.9%,p=0.017);PARP-1阳性者放疗的ORR低于阴性者(36.8%vs.81.8%,p=0.026)。AZD2281的浓度为3μmol/L时,联合组的SER=1.744。AZD2281可增强ECA109细胞的辐射损伤作用。辐射后48 h XRCC1mRNA相对表达量明显上升;联合PARPi可抑制辐射诱导的XRCC1mRNA表达上调。本组结果显示,XRCC1、PARP-1高表达者放疗近期疗效较差,放疗可诱导XRCC1基因转录,AZD2281能有效抑制辐射诱导的XRCC1 mRNA表达上调,其可能的机制是PARPi抑制DNA-PKcs进而下调XRCC1表达。该结果提示PARPi可能通过抑制XRCC1表达、减少DNA损伤修复,从而增加ESCC放疗敏感性。
