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肉用杂交犊牛小肠上皮细胞的分离培养和鉴定
被引量：
5
1
作者
刘倚帆
谭秀文
+4 位作者
游伟
张相伦
姜富贵
宋恩亮
万发春
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期2278-2286,共9页
本试验旨在建立肉用杂交犊牛小肠上皮细胞分离培养和鉴定的方法,为研究犊牛小肠上皮细胞营养吸收、免疫调控及肠道屏障功能提供原代细胞培养模型。选用新生未吮乳的肉用杂交犊牛的空肠组织,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法对小肠上皮细...
本试验旨在建立肉用杂交犊牛小肠上皮细胞分离培养和鉴定的方法,为研究犊牛小肠上皮细胞营养吸收、免疫调控及肠道屏障功能提供原代细胞培养模型。选用新生未吮乳的肉用杂交犊牛的空肠组织,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法对小肠上皮细胞进行分离,应用相差消化法和相差贴壁法对犊牛小肠上皮细胞进行纯化。通过细胞形态学观察、生长曲线、免疫荧光及染色体核型分析等方法来鉴定细胞。结果表明:1)应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法得到的犊牛小肠上皮细胞生长状况良好,经纯化后得到90%以上纯度的犊牛小肠上皮细胞,并稳定传代至10代以上; 2)犊牛小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律; 3)免疫荧光鉴定犊牛小肠上皮细胞特异性表达角蛋白13和绒毛蛋白; 4)透射电镜观察发现犊牛小肠上皮细胞边缘有微绒毛结构,细胞与细胞之间的紧密连接结构清晰可见; 5)染色体核型分析显示细胞内含有60条染色体,形态正常,呈二倍体核型。综上所述,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化及相差贴壁纯化成功得到犊牛小肠上皮细胞,为研究犊牛小肠上皮细胞营养物质吸收、免疫调控和肠道屏障功能提供了细胞素材。
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关键词
犊牛
小肠上皮细胞
联合消化法
细胞鉴定
核型分析
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职称材料
视网膜血管铺片技术的改进
被引量：
3
2
作者
徐玉环
徐艳峰
+7 位作者
刘颖
黄澜
李彦红
韩云林
邓巍
许庆刚
秦川
朱华
《中国比较医学杂志》
北大核心
2015年第5期51-53,50,I0012,共5页
目的探讨视网膜血管铺片技术的改进及在实验动物小鼠,大鼠,狗和猴中的应用。方法应用蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片,行HE及PAS染色观察血管形态,免疫组化方法观察CD31及VEGF的表达。结果用改进方法制备的视网膜血管铺片...
目的探讨视网膜血管铺片技术的改进及在实验动物小鼠,大鼠,狗和猴中的应用。方法应用蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片,行HE及PAS染色观察血管形态,免疫组化方法观察CD31及VEGF的表达。结果用改进方法制备的视网膜血管铺片,血管网完整,无神经组织残留,可清晰显示血管走向。各级血管形态清晰,血管分支清楚完整,无断裂现象。血管内皮细胞形态清晰。CD31在血管周细胞及内皮细胞均有表达;VEGF主要在内皮细胞表达。结论改进的视网膜血管铺片技术可成功应用于不同实验动物,为视网膜血管性疾病的研究提供了重要途径。
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关键词
视网膜血管铺片
联合消化法
抗原修复
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职称材料
题名
肉用杂交犊牛小肠上皮细胞的分离培养和鉴定
被引量：
5
1
作者
刘倚帆
谭秀文
游伟
张相伦
姜富贵
宋恩亮
万发春
机构
山东省农业科学院畜牧兽医研究所
山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室
山东省肉牛生产性能测定中心
山东省畜禽健康养殖工程技术中心
出处
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期2278-2286,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31501979
31672450)
现代农业(肉牛牦牛)产业技术体系建设专项(CARS-37)
文摘
本试验旨在建立肉用杂交犊牛小肠上皮细胞分离培养和鉴定的方法,为研究犊牛小肠上皮细胞营养吸收、免疫调控及肠道屏障功能提供原代细胞培养模型。选用新生未吮乳的肉用杂交犊牛的空肠组织,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法对小肠上皮细胞进行分离,应用相差消化法和相差贴壁法对犊牛小肠上皮细胞进行纯化。通过细胞形态学观察、生长曲线、免疫荧光及染色体核型分析等方法来鉴定细胞。结果表明:1)应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化法得到的犊牛小肠上皮细胞生长状况良好,经纯化后得到90%以上纯度的犊牛小肠上皮细胞,并稳定传代至10代以上; 2)犊牛小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律; 3)免疫荧光鉴定犊牛小肠上皮细胞特异性表达角蛋白13和绒毛蛋白; 4)透射电镜观察发现犊牛小肠上皮细胞边缘有微绒毛结构,细胞与细胞之间的紧密连接结构清晰可见; 5)染色体核型分析显示细胞内含有60条染色体,形态正常,呈二倍体核型。综上所述,应用胶原酶Ⅰ和中性酶联合消化及相差贴壁纯化成功得到犊牛小肠上皮细胞,为研究犊牛小肠上皮细胞营养物质吸收、免疫调控和肠道屏障功能提供了细胞素材。
关键词
犊牛
小肠上皮细胞
联合消化法
细胞鉴定
核型分析
Keywords
calf
intestinal epithelial cell
combined digestion method
cell identification
karyotype analysis
分类号
S823 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
视网膜血管铺片技术的改进
被引量：
3
2
作者
徐玉环
徐艳峰
刘颖
黄澜
李彦红
韩云林
邓巍
许庆刚
秦川
朱华
机构
中国医学科学院医学实验动物研究所
首都医科大学附属北京同仁医院
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2015年第5期51-53,50,I0012,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973项目)(2011CB504903)
文摘
目的探讨视网膜血管铺片技术的改进及在实验动物小鼠,大鼠,狗和猴中的应用。方法应用蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片,行HE及PAS染色观察血管形态,免疫组化方法观察CD31及VEGF的表达。结果用改进方法制备的视网膜血管铺片,血管网完整,无神经组织残留,可清晰显示血管走向。各级血管形态清晰,血管分支清楚完整,无断裂现象。血管内皮细胞形态清晰。CD31在血管周细胞及内皮细胞均有表达;VEGF主要在内皮细胞表达。结论改进的视网膜血管铺片技术可成功应用于不同实验动物,为视网膜血管性疾病的研究提供了重要途径。
关键词
视网膜血管铺片
联合消化法
抗原修复
Keywords
Retinal vascular preparation
Combined digestion
Antigen retrieval
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肉用杂交犊牛小肠上皮细胞的分离培养和鉴定
刘倚帆
谭秀文
游伟
张相伦
姜富贵
宋恩亮
万发春
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
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职称材料
2
视网膜血管铺片技术的改进
徐玉环
徐艳峰
刘颖
黄澜
李彦红
韩云林
邓巍
许庆刚
秦川
朱华
《中国比较医学杂志》
北大核心
2015
3
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