不同培养基对耶氏解脂酵母合成共轭亚油酸的影响 被引量：1

1

作者 张白曦 李敏 +3 位作者 陈海琴 宋元达 陈卫 张灏 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期66-69,共4页

为了提高共轭亚油酸(CLA)在耶氏解脂酵母重组菌株中的产量,选择YEA、YPD、YP2D4、YNBDO2和YNBDL25种培养基,对其进行摇瓶发酵,分析其生长状态,并利用气相色谱法测定菌体中的总脂含量及脂肪酸组成。结果表明:培养基中充足的碳源和氮源是... 为了提高共轭亚油酸(CLA)在耶氏解脂酵母重组菌株中的产量,选择YEA、YPD、YP2D4、YNBDO2和YNBDL25种培养基,对其进行摇瓶发酵,分析其生长状态,并利用气相色谱法测定菌体中的总脂含量及脂肪酸组成。结果表明:培养基中充足的碳源和氮源是提高菌体生物量及重组蛋白表达量的前提;在培养基中添加脂肪酸显著提高了菌体中的总脂含量和t10,c12-CLA产量;在5种培养基中,YNBDL2是最适合t10,c12-CLA合成的培养基,其培养基中t10,c12-CLA产量为185.8 mg/L,是YPD培养基中t10,c12-CLA产量的13倍。 展开更多

关键词 耶氏解脂酵母 T10 c12-CLA 产量 培养基 发酵

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共轭亚油酸合成相关基因在耶氏解脂酵母中异源表达及活性研究 被引量：1

2

作者 刘云云 杨波 +3 位作者 张灏 陈永泉 陈卫 陈海琴 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期82-87,共6页

为了探究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中与共轭亚油酸(CLA)生物合成相关的3个基因:(亚)油酸水合酶基因(mcra)、短链脱氢酶/氧化还原酶基因(dh)、乙酰乙酸脱羧酶基因(dc)在耶氏解脂酵母(Yarrowia lipolytica,Y.lipolytica)中异... 为了探究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中与共轭亚油酸(CLA)生物合成相关的3个基因:(亚)油酸水合酶基因(mcra)、短链脱氢酶/氧化还原酶基因(dh)、乙酰乙酸脱羧酶基因(dc)在耶氏解脂酵母(Yarrowia lipolytica,Y.lipolytica)中异源表达后能否具有活性,利用两个耶氏解脂酵母整合表达质粒(p INA 1269和p INA 1312),将3个基因分别导入耶氏解脂酵母营养缺陷型宿主菌Polf(Ura^-,Leu^-)中,构建了重组菌株。在不同重组菌中添加相应的底物:亚油酸(LA)和10-羟基-顺12-十八碳烯酸(10-HOE),然后对反应体系进行脂肪酸检测,得到基因对应的不同产物:10-HOE和10-氧代-反11-十八碳烯酸(10-oxo-trans 11-octadecenoic acid),证明mcra、dh、dc在耶氏解脂酵母中进行了异源表达并且具有活性。 展开更多

关键词 亚油酸 共轭亚油酸 耶氏解脂酵母 异源表达

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溶氧对耶氏解脂酵母油脂积累和柠檬酸分泌的影响 被引量：2

3

作者 亢新鑫 杨俊换 +1 位作者 张怀渊 宋元达 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期121-125,共5页

产油耶氏解脂酵母能将培养基中过量的碳源转化为油脂储存于细胞内并分泌大量的柠檬酸。在耶氏解脂酵母发酵过程中通过关联搅拌转速和通气量调控培养基中的溶氧含量处于5%、10%、20%、30%和不控制5种水平,来研究溶氧对其油脂积累和柠檬... 产油耶氏解脂酵母能将培养基中过量的碳源转化为油脂储存于细胞内并分泌大量的柠檬酸。在耶氏解脂酵母发酵过程中通过关联搅拌转速和通气量调控培养基中的溶氧含量处于5%、10%、20%、30%和不控制5种水平,来研究溶氧对其油脂积累和柠檬酸分泌的影响。结果表明,随着发酵培养基中溶氧的增加,耶氏解脂酵母细胞内油脂含量和柠檬酸分泌量均有所增加,且不控制培养基中溶氧时,细胞内油脂含量和柠檬酸产量均最高,油脂含量达到细胞干重的11.62%(w/w),柠檬酸产量达到21.0 g/L。培养基中不同的溶氧含量还会影响油脂的脂肪酸组成,高溶氧能够促进油酸含量的增加,溶氧不控制时油酸的含量最高,达到48.62%。本研究为耶氏解脂酵母产脂发酵培养过程中溶氧的控制提供了重要的实验依据。 展开更多

关键词 溶氧 耶氏解脂酵母 微生物油脂 柠檬酸

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重金属离子对耶氏解脂酵母油脂积累量及柠檬酸分泌量的影响

4

作者 张鲁宁 宋元达 张怀渊 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第10期89-94,100,共7页

通过研究不同种重金属离子对生物量、细胞外柠檬酸含量、油脂含量及脂肪酸组成的影响,进一步探究不同浓度梯度下的金属离子对耶氏解脂酵母油脂积累量和柠檬酸分泌量的影响。结果表明,4种金属离子(Co^2+、Cu^2+、Mn^2+、Ni^2+)均能抑制... 通过研究不同种重金属离子对生物量、细胞外柠檬酸含量、油脂含量及脂肪酸组成的影响,进一步探究不同浓度梯度下的金属离子对耶氏解脂酵母油脂积累量和柠檬酸分泌量的影响。结果表明,4种金属离子(Co^2+、Cu^2+、Mn^2+、Ni^2+)均能抑制耶氏解脂酵母细胞的生长,且随着浓度的增加抑制作用更加明显;其中Mn^2+能够促进细胞柠檬酸分泌和油脂积累,油脂积累量和柠檬酸分泌量分别在1.0和2.0 mmol/L Mn^2+时达到最大值,分别为17.6%(w/w)和6.9 g/L;其他3种金属离子则抑制柠檬酸分泌和油脂合成;Co^2+、Ni^2+、Cu^2+影响脂肪酸组成,Co^2+和Ni^2+促进了饱和脂肪酸含量增加,单不饱和脂肪酸的含量急剧下降,而Cu^2+则促进脂肪酸不饱和度的增加,亚油酸的含量从7%提高到40%以上。本研究首次探究了金属离子对耶氏解脂酵母微生物油脂积累和柠檬酸分泌的影响,为产油微生物油脂发酵生产提供有力的依据。 展开更多

关键词 耶氏解脂酵母 重金属离子 油脂含量 柠檬酸分泌

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分离纯化重组解脂耶氏酵母发酵液中虫草素的研究

5

作者 宋丽萍 段希宇 +2 位作者 王翀 卢向阳 田云 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期26-31,共6页

多项研究证明以解脂耶氏酵母作为虫草素生物合成的细胞工厂,是获得虫草素的有效途径。为获得下游虫草素分离纯化工艺,该研究采用不同规格的大孔吸附树脂对重组解脂耶氏酵母发酵液中的虫草素进行静态、动态纯化。结果显示,以NKA-Ⅱ大孔... 多项研究证明以解脂耶氏酵母作为虫草素生物合成的细胞工厂,是获得虫草素的有效途径。为获得下游虫草素分离纯化工艺,该研究采用不同规格的大孔吸附树脂对重组解脂耶氏酵母发酵液中的虫草素进行静态、动态纯化。结果显示,以NKA-Ⅱ大孔吸附树脂作为吸附材料,在虫草素质量浓度为3 mg/mL、pH值为9的上样液以上样流速为3 BV/h、上样体积为10 BV、洗杂流速为2 BV/h、洗杂体积为3 BV、洗脱剂为体积分数为30%乙醇、洗脱流速为3 BV/h、洗脱体积为15 BV时,发酵液中虫草素回收率可达到87.67%,纯度达65.82%。该研究为今后利用重组解脂耶氏酵母大规模生产制备虫草素提供数据参考。 展开更多

关键词 虫草素 解脂耶氏酵母 分离纯化 大孔吸附树脂 甘蔗糖蜜

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解脂耶氏酵母细胞工厂生产多不饱和脂肪酸的研究进展

6

作者 何思成 张紫瑗 +3 位作者 韩雨晴 苗琳 张翠英 于爱群 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期72-85,共14页

多不饱和脂肪酸属直链脂肪酸,是机体生物膜的关键结构组分,它可以调控糖脂代谢及激素代谢,具有促进发育、提高免疫力和预防疾病等多种益生功能,对机体健康具有十分重要的作用。因此,多不饱和脂肪酸在食品、医药和饲料等多个领域均表现... 多不饱和脂肪酸属直链脂肪酸,是机体生物膜的关键结构组分,它可以调控糖脂代谢及激素代谢,具有促进发育、提高免疫力和预防疾病等多种益生功能,对机体健康具有十分重要的作用。因此,多不饱和脂肪酸在食品、医药和饲料等多个领域均表现出重要的应用价值和广阔的开发前景,市场需求持续上升。与传统的海洋生物提取法相比,微生物合成法具有生产周期短、工艺简单、对环境友好等优势,近年来利用微生物细胞工厂生产多不饱和脂肪酸等微生物油脂逐渐成为科学界和工业界的研究热点和发展趋势。解脂耶氏酵母作为一种非常规产油酵母,因其具备高产油脂和脂肪酸的天然能力,因此成为了代谢工程改造微生物生产多不饱和脂肪酸的首选底盘细胞之一。本文首先介绍了多不饱和脂肪酸的来源及其天然合成途径;然后总结归纳了当前利用代谢工程策略改造解脂耶氏酵母生产多不饱和脂肪酸的研究现状;最后对利用解脂耶氏酵母细胞工厂生产多不饱和脂肪酸存在的主要瓶颈问题和未来发展趋势进行了探讨,期望为未来高效合成多不饱和脂肪酸微生物细胞工厂的构建提供理论支持与思路。 展开更多

关键词 多不饱和脂肪酸 微生物细胞工厂 解脂耶氏酵母 产油酵母 代谢工程

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解脂耶氏酵母菌处理含油废水的研究 被引量：17

7

作者 吴兰 罗玉萍 +1 位作者 万金保 李思光 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期122-125,共4页

利用解脂耶氏酵母菌在最佳降解条件下分别处理色拉油、餐饮油等油脂类废水和柴油、机油等石油类废水50h．结果表明：该菌株能快速降解油脂，在油质量浓度≤2000mg／L时生化反应属于一级反应，对色拉油、餐饮油中油脂的降解率分别为93．3... 利用解脂耶氏酵母菌在最佳降解条件下分别处理色拉油、餐饮油等油脂类废水和柴油、机油等石油类废水50h．结果表明：该菌株能快速降解油脂，在油质量浓度≤2000mg／L时生化反应属于一级反应，对色拉油、餐饮油中油脂的降解率分别为93．30％和85．08％，同时菌体细胞大量生长，其生物量分别为1652．7和1940．0mg／L，废水处理过程中pH稳定在3—4之间；但该菌对石油的降解率低，生成的生物量少，处理后废水pH维持在6～7之间．解脂耶氏酵母菌对油的降解与自身生物量的生成有关，该菌株降解油脂类和石油类物质的途径不同，产生的脂酶系统不同，使得废水的pH变化规律不相同． 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母菌 含油废水 菌体生物量 脂酶

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不同碳源培养下解脂耶氏酵母的转录组差异分析 被引量：5

8

作者 常晨 刘伟丰 +1 位作者 郭阳 包怡红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第20期200-207,共8页

以葡萄糖为碳源生长的解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)为对照组,以油酸为碳源生长的Y.lipolytica为实验组,利用Illumina高通量测序平台对两者进行转录组测序,通过多种生物信息学方法对数据进行分析处理.对照组的测序结果共得到179239... 以葡萄糖为碳源生长的解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)为对照组,以油酸为碳源生长的Y.lipolytica为实验组,利用Illumina高通量测序平台对两者进行转录组测序,通过多种生物信息学方法对数据进行分析处理.对照组的测序结果共得到17923921 clean reads;实验组的测序结果共得到22656852 clean reads.两个样品差异表达基因的分析显示共有536个显著性差异表达基因,376个基因表达上调,160个基因表达下调.通过GO和KEGG富集分析可以了解这些差异基因参与的生物学调控.本研究为解脂酵母分子生物学的进一步研究提供了参考. 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 转录组 差异基因

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壳聚糖酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及重组酶性质研究 被引量：2

9

作者 刘万顺 王娇 +4 位作者 杨艳 韩宝芹 董文 刘光磊 池振明 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期58-62,共5页

为构建高效表达壳聚糖酶工程菌株,以Microbacteriumsp.基因组为模板扩增壳聚糖酶基因,目的基因与表达载体pINA1317连接构建重组质粒,重组质粒NotⅠ酶切线性化后转化解脂耶氏酵母Y.liPolytica Po1h。所得结果为PCR扩增得到约1000bp的特... 为构建高效表达壳聚糖酶工程菌株,以Microbacteriumsp.基因组为模板扩增壳聚糖酶基因,目的基因与表达载体pINA1317连接构建重组质粒,重组质粒NotⅠ酶切线性化后转化解脂耶氏酵母Y.liPolytica Po1h。所得结果为PCR扩增得到约1000bp的特异性片段,序列分析表明含有壳聚糖酶全长基因,开放阅读框801bp,编码266个氨基酸残基。转化子酶活力为10.4U/mL,是原菌株酶活力的3.15倍。重组蛋白经DEAE-Sepharose FF分离纯化,达到电泳纯,SDS-PAGE显示单一条带,分子量约41kDa。重组酶反应最适温度为45℃,最适pH为5.6,Km和Vmax分别是0.926mg/mL和6.15U/mL。质谱分析酶解产物主要为三糖和五糖。实现了壳聚糖酶在解脂耶氏酵母中的分泌表达,为壳聚糖酶的工业化生产奠定了理论基础。 展开更多

关键词 壳聚糖酶 解脂耶氏酵母 表达 酶学性质

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解脂耶氏酵母中光控表达系统的构建及其应用研究 被引量：4

10

作者 张萍 魏文平 +1 位作者 周英 叶邦策 《合成生物学》 CSCD 2021年第5期778-791,共14页

光作为诱导因子具有响应速度快、无损、可逆和独特的时空特异性等优势,已广泛应用于生物底盘细胞的工程化改造中。本研究构建重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的光控表达系统,成功实现了对香豆酸和柚皮素合成。该光控系统基于绿... 光作为诱导因子具有响应速度快、无损、可逆和独特的时空特异性等优势,已广泛应用于生物底盘细胞的工程化改造中。本研究构建重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的光控表达系统,成功实现了对香豆酸和柚皮素合成。该光控系统基于绿光响应调控因子CarH以及转录激活因子VPR-HSF1,构建了光响应复合体CarHVPRH,而该复合体在绿光照射条件下无法聚合,从而不能调控目标基因的转录与表达。结果表明,基于光控因子CarH-VPRH、诱导型启动子2CarOTEF以及报告基因mCherry构建的光诱导传感器能够显著响应光照,并在黑暗条件下激活mCherry转录,72 h和120 h时产生的荧光信号分别是光照下的43倍和143倍。在此基础上,将该元件应用于对香豆酸及柚皮素的生物合成及合成途径的动态调控中,实现黑暗条件下的对香豆酸产量是绿光诱导下的2.0倍,达到99.1 mg/L;柚皮素产量是绿光诱导下的2.6倍达到117.1 mg/L;在细胞生长方面,绿光照射组的生长量高于黑暗组,特别是在绿光照射24 h,然后切换成黑暗条件,细胞的生长量有较为明显的优势,显示了绿光诱导系统在调控Y.lipolytica中产物合成与细胞生长平衡的潜力。因此该绿光响应基因调控系统可有效应用于Y.lipolytica细胞中目标基因的转录调控,具有廉价易得、无毒害、灵活添加及易去除等优势,因此具有大规模合成和生产目的产物的潜力。 展开更多

关键词 CarH 绿光诱导 解脂耶氏酵母 生物传感器 柚皮素

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氮源对解脂耶氏酵母合成共轭亚油酸的影响 被引量：1

11

作者 张白曦 李敏 +2 位作者 陈海琴 陈卫 张灏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期8-11,共4页

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株合成反-10,顺-12-共轭亚油酸的产量,以YNBDSa为发酵培养基进行摇瓶发酵,研究氮限制策略及氮源种类对菌株合成脂肪酶Lip2、亚油酸异构酶PAI及反-10,顺-12-共轭亚油酸产量的影响。结果表明:高氮培养基更利于... 为了提高解脂耶氏酵母重组菌株合成反-10,顺-12-共轭亚油酸的产量,以YNBDSa为发酵培养基进行摇瓶发酵,研究氮限制策略及氮源种类对菌株合成脂肪酶Lip2、亚油酸异构酶PAI及反-10,顺-12-共轭亚油酸产量的影响。结果表明:高氮培养基更利于菌体生长以及产物的合成,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量达到4.3 g/L,是低氮培养基对应结果的8.6倍;采用有机氮为氮源时,Lip2酶活及PAI表达量显著高于无机氮的结果,反-10,顺-12-共轭亚油酸产量最高达到4.6 g/L,是无机氮结果的46倍。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 氮源 反-10 顺-12-共轭亚油酸 产量

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重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反10,顺12-共轭亚油酸的条件优化

12

作者 张白曦 宋宇航 +2 位作者 倪丽娟 张灏 陈卫 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期70-73,共4页

采用重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反10,顺12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)单体,为了提高t10,c12-CLA的产量,对全细胞催化条件进行优化。通过含有油酸的培养基摇瓶培养36 h获得菌体细胞,经反复冻融处理制备全细胞催化剂。优化后的催化体... 采用重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反10,顺12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)单体,为了提高t10,c12-CLA的产量,对全细胞催化条件进行优化。通过含有油酸的培养基摇瓶培养36 h获得菌体细胞,经反复冻融处理制备全细胞催化剂。优化后的催化体系条件为:温度28℃,磷酸盐缓冲液(p H 7)浓度0.1 mol/L,转速200 r/min,无需限制氧气。在优化后的反应条件下催化反应40 h,t10,c12-CLA产量达到15.6 g/L,转化率为62.2%。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 亚油酸异构酶 全细胞催化 反10 顺12-共轭亚油酸

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外源底物亚油酸对解脂耶氏酵母重组菌株合成共轭亚油酸的影响

13

作者 张白曦 李敏 +2 位作者 倪丽娟 陈卫 张灏 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期87-90,共4页

为了提高解脂耶氏酵母重组菌株的反-10,顺-12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)产量,采用YNBDL培养基进行摇瓶发酵,考察了在培养基中添加不同纯度的亚油酸对解脂耶氏酵母合成t10,c12-CLA的影响。结果表明:亚油酸纯度的提高对菌株的生长和产脂未... 为了提高解脂耶氏酵母重组菌株的反-10,顺-12-共轭亚油酸(t10,c12-CLA)产量,采用YNBDL培养基进行摇瓶发酵,考察了在培养基中添加不同纯度的亚油酸对解脂耶氏酵母合成t10,c12-CLA的影响。结果表明:亚油酸纯度的提高对菌株的生长和产脂未产生影响,且t10,c12-CLA的产量随亚油酸纯度的增加而提高,最高产量可达3.7 g/L;用大豆油替代培养基中的亚油酸,t10,c12-CLA的转化率从20%提高至25%,菌株生长、产脂及t10,c12-CLA产量与添加纯度为65%亚油酸的结果相近。实验证明解脂耶氏酵母重组菌株能够高效转化富含亚油酸的植物油合成t10,c12-CLA。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母重组菌株 亚油酸 大豆油 反-10 顺-12-共轭亚油酸 产量

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解脂耶氏酵母诱变育种及发酵产α-酮戊二酸条件优化

14

作者 巩健 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期190-195,共6页

对具有发酵产α-酮戊二酸能力的解脂耶氏酵母(Yarrowia Lipolytica)ZY-4进行了紫外诱变和NTG诱变育种,筛选得到产量提高的突变株,并对突变株的发酵培养基进行了优化,结果表明,紫外诱变和NTG诱变后筛选到的突变株分别比原始出发菌株产量... 对具有发酵产α-酮戊二酸能力的解脂耶氏酵母(Yarrowia Lipolytica)ZY-4进行了紫外诱变和NTG诱变育种,筛选得到产量提高的突变株,并对突变株的发酵培养基进行了优化,结果表明,紫外诱变和NTG诱变后筛选到的突变株分别比原始出发菌株产量提高了67.8%和110%。优化后发酵培养基成分为甘油8%,氯化铵5.0 g/L,硫胺素1.0μg/L,磷酸二氢钾1.0 g/L,七水硫酸镁0.5 g/L,培养基优化后α-酮戊二酸产量比原始出发菌株提高了232.4%。 展开更多

关键词 Α-酮戊二酸 解脂耶氏酵母 诱变育种

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葡萄糖氧化酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及发酵优化 被引量：2

15

作者 刘晓筱 张娟 +1 位作者 陈坚 堵国成 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1233-1241,共9页

葡萄糖氧化酶(β-D-glucose:oxygen 1-oxidoreductase;EC 1.1.3.4,简称GOD)是生物领域中至关重要的工具酶之一,被广泛应用于食品工业、饲料工业、纺织、医药等行业中。作者构建了一株重组解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica 1-28,分泌GOD... 葡萄糖氧化酶(β-D-glucose:oxygen 1-oxidoreductase;EC 1.1.3.4,简称GOD)是生物领域中至关重要的工具酶之一,被广泛应用于食品工业、饲料工业、纺织、医药等行业中。作者构建了一株重组解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica 1-28,分泌GOD,并进一步运用单因素实验与正交实验在摇瓶水平对其发酵培养基进行了优化。实验结果显示,最佳发酵培养基配方为:甘油20 g/L,酵母膏2.64 g/L,氯化铵2.64 g/L,无水硫酸镁0.13 g/L,磷酸二氢钾0.32 g/L,维生素B13.34×10-4g/L,初始pH值6.0。优化后GOD发酵产量达到11.0 U/mL,较初始发酵培养基GOD产量提高了72%。在此基础上进行3 L罐发酵,重组菌在甘油补料30 g/L,pH为5.0时,28℃发酵190h,发酵液酶活达到81.6 U/mL。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 葡萄糖氧化酶 发酵优化

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解脂耶氏酵母不对称还原苯乙酮合成(R)-苯乙醇 被引量：2

16

作者 许芹 王丹 +1 位作者 徐晴 李霜 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期528-533,共6页

为了提高解脂耶氏酵母对苯乙酮的催化效率,以20mmol/L的苯乙酮和苯乙醇为筛选压力,采用紫外诱变获得突变株,优化了反应体系参数,如温度、p H值、辅助底物、有机溶剂(如甲苯、己烷、辛烷、DMF、DMSO等)以及离子液体(1-丁基-3-甲基咪唑六... 为了提高解脂耶氏酵母对苯乙酮的催化效率,以20mmol/L的苯乙酮和苯乙醇为筛选压力,采用紫外诱变获得突变株,优化了反应体系参数,如温度、p H值、辅助底物、有机溶剂(如甲苯、己烷、辛烷、DMF、DMSO等)以及离子液体(1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐,BMIM·PF6)等对催化体系的影响。结果表明,利用解脂耶氏酵母突变株全细胞催化苯乙酮(20mmol/L)合成(R)-苯乙醇,转化率76%,e.e.达99.2%。优化后的反应体系如下:最适辅助底物为葡萄糖,反应温度30℃,p H=7.0,30%(体积分数)疏水性离子液体BMIM·PF6。当利用解脂耶氏酵母突变株的发酵液为催化体系,向反应体系中添加30%(体积分数)BMIM·PF6,以60mmol/L苯乙酮为底物,反应36h,(R)-苯乙醇的转化率达95%,e.e.值达97%。解脂耶氏酵母突变株全细胞催化苯乙酮不对称还原反应,在高底物浓度、高转化率以及高光学纯度等方面具有突出表现。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 苯乙酮 (R)-苯乙醇 生物催化 酶 优化

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脱脂蚕蛹水解液中Fe^(3+)和Zn^(2+)对解脂耶氏酵母油脂合成的调控作用 被引量：2

17

作者 史馨怡 徐晓慧 +5 位作者 金传琪 刘曦 盛晟 武国华 吴福安 王俊 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期901-909,共9页

将脱脂蚕蛹水解后用作产油微生物发酵培养基的氮源,生产营养价值高的可食用油脂,探究蚕蛹水解液中Fe^(3+)和Zn^(2+)对产油微生物解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的生长及油脂累积的影响。首先于酵母对数生长期,在氮限制培养基中分别... 将脱脂蚕蛹水解后用作产油微生物发酵培养基的氮源,生产营养价值高的可食用油脂,探究蚕蛹水解液中Fe^(3+)和Zn^(2+)对产油微生物解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的生长及油脂累积的影响。首先于酵母对数生长期,在氮限制培养基中分别添加10-3mol/L Fe^(3+)和10-3mol/L Zn^(2+)溶液,使油脂合成量分别比对照提高了43.59%和38.70%,且同时添加Fe^(3+)和Zn^(2+)比单独添加Fe^(3+)和Zn^(2+)使油脂含量分别提高了27.88%、5.75%。然后于酵母对数生长期以脱脂蚕蛹水解液作为补料加入培养基,不仅使油脂的产量较酵母粉补料培养基提高了40.67%,而且使酵母合成油脂中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸(UFAs/SFAs)含量的比值从3.78提高到8.25,合成三酰甘油的sn-2和sn-1,3位脂肪酸的UFAs/SFAs值分别提高17.9%、179.8%。试验结果表明:以来源丰富的蚕蛹水解液作为解脂耶氏酵母发酵培养生产油脂过程中的补料,其浓度适中的Fe^(3+)、Zn^(2+)与其他有益组分对酵母生长和油脂合成及积累具有促进作用,并且使脂肪酸组成及分布改善。 展开更多

关键词 脱脂蚕蛹 蛋白质水解液 氮源 FE3+ Zn2+ 解脂耶氏酵母 微生物油脂

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常压室温等离子体诱变选育高产脂肪酶解脂耶氏酵母 被引量：4

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作者 季亚美 王立梅 齐斌 《食品与机械》 北大核心 2020年第11期10-15,共6页

采用常压室温等离子体(Atmospheric room temperature plasma,ARTP)对产脂肪酶的解脂耶氏酵母菌株YL1进行诱变;通过三丁酸甘油酯平板法、p-NPP法以及酸碱滴定法等筛选得到高产脂肪酶的目标菌株C4,并研究其遗传稳定性。结果表明,解脂耶... 采用常压室温等离子体(Atmospheric room temperature plasma,ARTP)对产脂肪酶的解脂耶氏酵母菌株YL1进行诱变;通过三丁酸甘油酯平板法、p-NPP法以及酸碱滴定法等筛选得到高产脂肪酶的目标菌株C4,并研究其遗传稳定性。结果表明,解脂耶氏酵母菌株YL1的最佳诱变时间为60s,菌株致死率达97.45%;突变株C4的脂肪酶酶活为13.4 U/mL,较出发菌株提高了82.6%,多代培养后遗传稳定;与出发菌株相比,突变株脂肪酶可使维生素A棕榈酸酯的合成转化率提高36.9%。 展开更多

关键词 常压室温等离子体 解脂耶氏酵母 脂肪酶

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解脂耶氏酵母URA3基因的敲除 被引量：1

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作者 冯春利 任清 +2 位作者 张蕾蕾 李秀婷 宋焕禄 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期624-628,共5页

构建了营养缺陷型解脂耶氏酵母菌株,使之用于遗传标记和高产香味物质γ-癸内酯。作者利用基因同源重组的方法敲除掉尿嘧啶合成酶关键基因URA3基因,用尿嘧啶营养缺陷型培养基(SD-URA)添加一定浓度的5-氟乳清酸(5-FOA)和尿嘧啶筛选获得转... 构建了营养缺陷型解脂耶氏酵母菌株,使之用于遗传标记和高产香味物质γ-癸内酯。作者利用基因同源重组的方法敲除掉尿嘧啶合成酶关键基因URA3基因,用尿嘧啶营养缺陷型培养基(SD-URA)添加一定浓度的5-氟乳清酸(5-FOA)和尿嘧啶筛选获得转化子。实验表明:尿嘧啶营养缺陷型菌株在含有5-FOA和尿嘧啶的培养基上生长而野生型菌株不生长,从而建立了一种快速获得营养缺陷型解脂耶氏菌株的方法。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母菌 URA3 基因敲除

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代谢工程改造解脂耶氏酵母生产脂肪酸及其衍生物 被引量：4

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作者 王凯峰 王金鹏 +1 位作者 韦萍 纪晓俊 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第1期351-365,共15页

微生物来源的脂肪酸及其衍生物广泛应用于能源、材料和营养化学品等领域,可用于生产航空燃油、聚合物、增塑剂、润滑剂和食品添加剂等。解脂耶氏酵母是一种研究最为透彻的产油脂酵母,具有高产各种脂肪酸及其衍生物的潜力。本文综述了近... 微生物来源的脂肪酸及其衍生物广泛应用于能源、材料和营养化学品等领域,可用于生产航空燃油、聚合物、增塑剂、润滑剂和食品添加剂等。解脂耶氏酵母是一种研究最为透彻的产油脂酵母,具有高产各种脂肪酸及其衍生物的潜力。本文综述了近年来解脂耶氏酵母遗传操作工具的发展,并介绍了通过代谢工程技术改造解脂耶氏酵母生产脂肪酸及其衍生物的进展,在此基础上,展望了通过构建解脂耶氏酵母细胞工厂合成特定脂肪酸及其衍生物的未来发展方向。 展开更多

关键词 解脂耶氏酵母 脂肪酸 细胞工厂 代谢工程 合成生物学 生物技术

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