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产耶尔森杆菌素大肠杆菌诱导小鼠十二指肠炎症的研究
1
作者
王浩
景麟稀
+7 位作者
肖金龙
沈珏
赵金刚
王帅
刘根
赵汝
肖鹏
高洪
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期4693-4702,共10页
【目的】探究耶尔森杆菌素(yersiniabactin,Ybt)在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)致小鼠十二指肠炎症中的作用,为猪源大肠杆菌诱导肠道炎症的机制提供新的理论依据。【方法】使用R语言功能包挖掘大肠杆菌感染细胞的基因表达综合(gen...
【目的】探究耶尔森杆菌素(yersiniabactin,Ybt)在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)致小鼠十二指肠炎症中的作用,为猪源大肠杆菌诱导肠道炎症的机制提供新的理论依据。【方法】使用R语言功能包挖掘大肠杆菌感染细胞的基因表达综合(gene expression omnibus,GEO)数据库,进行差异表达基因火山图、热图富集和KEGG通路分析;使用分子对接软件预测Ybt与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的结合;以注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的小鼠为阳性对照,用大肠杆菌ZB-1及前期构建的产Ybt缺陷菌株ZB-1ΔHPI感染小鼠,HE染色观察感染后十二指肠损伤,实时荧光定量PCR检测TLR4、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)和IL-1β的mRNA水平;ELISA检测pro-IL-18、pro-IL-1β、IL-18和IL-1β在十二指肠中的分泌水平;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色观察炎性因子IL-18和IL-1β在十二指肠中的表达定位。【结果】GEO数据库火山图及热图分析显示,大肠杆菌感染显著上调了TLR4、NF-κB、IL-1β和趋化因子(CXCL1、CXCL3、CXCL5等)的表达(P<0.05),KEGG富集发现TLR4/NF-κB通路参与了大肠杆菌感染;此外,分子对接显示,Ybt能与TLR4结合;小鼠十二指肠组织HE染色显示,产Ybt大肠杆菌感染诱导了小鼠严重的十二指肠炎症及损伤;实时荧光定量PCR结果显示,ZB-1组的TLR4、NF-κB、IL-18和IL-1βmRNA水平显著高于ZB-1ΔHPI组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与ZB-1ΔHPI组相比,ZB-1组显著促进了pro-IL-Iβ、IL-Iβ、pro-IL-18和IL-18的释放(P<0.05)。同时,IHC结果显示,大量IL-18和IL-1β表达于肠绒毛上皮细胞,产Ybt大肠杆菌感染显著促进了这一结果(P<0.05)。【结论】Ybt具有较强的促炎作用,结合TLR4通过TLR4/NF-κB通路促进大肠杆菌诱导的小鼠十二指肠炎症。
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关键词
大肠
杆菌
耶尔森杆菌素
TLR4/NF-κB通路
十二指肠炎症
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职称材料
猪源大肠杆菌高致病性毒力岛结构基因进化分析及其对TNF/NF-κB通路的影响
2
作者
王浩
王世玉
+5 位作者
肖金龙
沈珏
潘天灵
张靖松
肖鹏
高洪
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期392-403,共12页
旨在研究猪源大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)高致病性毒力岛(high pathogenicity island, HPI)结构基因的进化趋势及其对TNF/NF-κB通路的影响。本研究运用MEGA等软件分析HPI结构基因的遗传进化,使用R语言功能包挖掘E.coli感染细胞...
旨在研究猪源大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)高致病性毒力岛(high pathogenicity island, HPI)结构基因的进化趋势及其对TNF/NF-κB通路的影响。本研究运用MEGA等软件分析HPI结构基因的遗传进化,使用R语言功能包挖掘E.coli感染细胞的基因表达综合数据库(gene expression omnibus, GEO),并进行差异基因富集分析;使用分子对接预测HPI-Ybt与TNF/NF-κB通路相关蛋白的结合;将E.coli及前期构建的HPI缺陷株E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,运用qPCR、ELISA和Western blot对TNF/NF-κB通路中的关键调控点进行检测。系统进化树分析显示,分离株YUNNAN001的intb基因与GQ891729.1亲缘关系最近,而与CQ903045.1亲缘关系较远。KEGG富集发现TNF和NF-κB通路均参与了E.coli感染,且共同基因有10个;火山图及热图富集显示,E.coli感染显著促进了TNF/NF-κB通路中PTGS2、NF-κB、TRAF6等的表达(P<0.05),分子对接显示,HPI-Ybt能与同属于TNF/NF-κB通路的10个蛋白相结合,其中与MAP3K14、TNFAIP3的结合最强;感染E.coli组的NF-κB、PTGS2、TNF-α、TRAF6、TRIF、ATF4、cxcl2和IL-6 mRNA水平显著高于E.coliΔHPI组(P<0.01),且相对于E.coliΔHPI组,E.coli组显著激活了TNF/NF-κB通路蛋白的表达;此外,与E.coliΔHPI组相比,E.coli感染显著升高了NF-κB和IL-6的水平(P<0.01)。结果提示,E.coli-HPI通过合成Ybt结合TNF/NF-κB通路中的关键蛋白,进而激活TNF/NF-κB通路。
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关键词
大肠
杆菌
高致病性毒力岛
耶尔森杆菌素
进化分析
TNF/NF-κB信号通路
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职称材料
题名
产耶尔森杆菌素大肠杆菌诱导小鼠十二指肠炎症的研究
1
作者
王浩
景麟稀
肖金龙
沈珏
赵金刚
王帅
刘根
赵汝
肖鹏
高洪
机构
云南农业大学食品科学技术学院
云南农业大学动物医学院
云南农业大学动物科学技术学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期4693-4702,共10页
基金
国家自然科学基金项目(31960692、31660704)
2021年度云南省研究生优质课程建设项目(云学位[2021]16号、2021YJSYZKC05)。
文摘
【目的】探究耶尔森杆菌素(yersiniabactin,Ybt)在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)致小鼠十二指肠炎症中的作用,为猪源大肠杆菌诱导肠道炎症的机制提供新的理论依据。【方法】使用R语言功能包挖掘大肠杆菌感染细胞的基因表达综合(gene expression omnibus,GEO)数据库,进行差异表达基因火山图、热图富集和KEGG通路分析;使用分子对接软件预测Ybt与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的结合;以注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的小鼠为阳性对照,用大肠杆菌ZB-1及前期构建的产Ybt缺陷菌株ZB-1ΔHPI感染小鼠,HE染色观察感染后十二指肠损伤,实时荧光定量PCR检测TLR4、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)和IL-1β的mRNA水平;ELISA检测pro-IL-18、pro-IL-1β、IL-18和IL-1β在十二指肠中的分泌水平;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色观察炎性因子IL-18和IL-1β在十二指肠中的表达定位。【结果】GEO数据库火山图及热图分析显示,大肠杆菌感染显著上调了TLR4、NF-κB、IL-1β和趋化因子(CXCL1、CXCL3、CXCL5等)的表达(P<0.05),KEGG富集发现TLR4/NF-κB通路参与了大肠杆菌感染;此外,分子对接显示,Ybt能与TLR4结合;小鼠十二指肠组织HE染色显示,产Ybt大肠杆菌感染诱导了小鼠严重的十二指肠炎症及损伤;实时荧光定量PCR结果显示,ZB-1组的TLR4、NF-κB、IL-18和IL-1βmRNA水平显著高于ZB-1ΔHPI组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与ZB-1ΔHPI组相比,ZB-1组显著促进了pro-IL-Iβ、IL-Iβ、pro-IL-18和IL-18的释放(P<0.05)。同时,IHC结果显示,大量IL-18和IL-1β表达于肠绒毛上皮细胞,产Ybt大肠杆菌感染显著促进了这一结果(P<0.05)。【结论】Ybt具有较强的促炎作用,结合TLR4通过TLR4/NF-κB通路促进大肠杆菌诱导的小鼠十二指肠炎症。
关键词
大肠
杆菌
耶尔森杆菌素
TLR4/NF-κB通路
十二指肠炎症
Keywords
Escherichia coli
yersiniabactin
TLR4/NF-κB pathway
duodenum inflammation
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪源大肠杆菌高致病性毒力岛结构基因进化分析及其对TNF/NF-κB通路的影响
2
作者
王浩
王世玉
肖金龙
沈珏
潘天灵
张靖松
肖鹏
高洪
机构
云南农业大学食品科学技术学院
云南农业大学动物医学院
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期392-403,共12页
基金
国家自然科学基金资助项目(31960692,31660704)
2021年度云南省研究生优质课程建设项目(2021YJSYZKC05)。
文摘
旨在研究猪源大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)高致病性毒力岛(high pathogenicity island, HPI)结构基因的进化趋势及其对TNF/NF-κB通路的影响。本研究运用MEGA等软件分析HPI结构基因的遗传进化,使用R语言功能包挖掘E.coli感染细胞的基因表达综合数据库(gene expression omnibus, GEO),并进行差异基因富集分析;使用分子对接预测HPI-Ybt与TNF/NF-κB通路相关蛋白的结合;将E.coli及前期构建的HPI缺陷株E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,运用qPCR、ELISA和Western blot对TNF/NF-κB通路中的关键调控点进行检测。系统进化树分析显示,分离株YUNNAN001的intb基因与GQ891729.1亲缘关系最近,而与CQ903045.1亲缘关系较远。KEGG富集发现TNF和NF-κB通路均参与了E.coli感染,且共同基因有10个;火山图及热图富集显示,E.coli感染显著促进了TNF/NF-κB通路中PTGS2、NF-κB、TRAF6等的表达(P<0.05),分子对接显示,HPI-Ybt能与同属于TNF/NF-κB通路的10个蛋白相结合,其中与MAP3K14、TNFAIP3的结合最强;感染E.coli组的NF-κB、PTGS2、TNF-α、TRAF6、TRIF、ATF4、cxcl2和IL-6 mRNA水平显著高于E.coliΔHPI组(P<0.01),且相对于E.coliΔHPI组,E.coli组显著激活了TNF/NF-κB通路蛋白的表达;此外,与E.coliΔHPI组相比,E.coli感染显著升高了NF-κB和IL-6的水平(P<0.01)。结果提示,E.coli-HPI通过合成Ybt结合TNF/NF-κB通路中的关键蛋白,进而激活TNF/NF-κB通路。
关键词
大肠
杆菌
高致病性毒力岛
耶尔森杆菌素
进化分析
TNF/NF-κB信号通路
Keywords
Escherichia coli
high pathogenicity island
Yersiniobactin
analysis of evolution
TNF/NF-κB pathway
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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题名
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被引量
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1
产耶尔森杆菌素大肠杆菌诱导小鼠十二指肠炎症的研究
王浩
景麟稀
肖金龙
沈珏
赵金刚
王帅
刘根
赵汝
肖鹏
高洪
《中国畜牧兽医》
CAS
CSCD
北大核心
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猪源大肠杆菌高致病性毒力岛结构基因进化分析及其对TNF/NF-κB通路的影响
王浩
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沈珏
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张靖松
肖鹏
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