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携带耶尔森强毒力岛的大肠埃希菌耐药性及其对雏鸭的致病性试验 被引量:6
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作者 吕殿红 周秀蓉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期50-54,共5页
为了解105株动物源携带耶尔森强毒力岛的大肠埃希菌耐药状况和致病性,分别对各分离菌进行28种抗菌药物的敏感性测定,并选择不同毒力基因型的10株大肠埃希菌进行雏鸭的致病性试验。结果表明,分离菌对四环素、多西环素、氨苄西林、阿莫西... 为了解105株动物源携带耶尔森强毒力岛的大肠埃希菌耐药状况和致病性,分别对各分离菌进行28种抗菌药物的敏感性测定,并选择不同毒力基因型的10株大肠埃希菌进行雏鸭的致病性试验。结果表明,分离菌对四环素、多西环素、氨苄西林、阿莫西林、复方磺胺甲口恶唑、链霉素耐药性较高,耐药率均在80%以上;敏感率在80%以上的药物有头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、头孢西丁、氨曲南、头孢曲松、奈替米星;其他药物均显示较高的耐药率;105株大肠埃希菌中有87种耐药谱。10株大肠埃希菌对雏鸭的致病性均很强,且同样的基因型表现出的致病特性不一致。结果说明大肠埃希菌分离菌株耐药性严重和致病性强,提示防治大肠埃希菌病的重要性。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耶尔森强毒力岛 耐药性 致病性
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树鼩源大肠杆菌分离鉴定及耶尔森强毒力岛相关基因的检测及序列分析 被引量:2
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作者 陈柄汛 韩冬梅 +7 位作者 赵维薇 张博 邓静 万全 王喜 肖鹏 吕龙宝 高洪 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期4466-4475,共10页
【目的】研究树鼩源大肠杆菌耶尔森强毒力岛(HPI)相关基因的携带情况及其耐药性,为树鼩的饲养管理及大肠杆菌病的防治提供一定思路。【方法】无菌采集树鼩肛拭子样品129份,采用麦康凯培养基、LB琼脂培养基、革兰氏染色和生化试验进行细... 【目的】研究树鼩源大肠杆菌耶尔森强毒力岛(HPI)相关基因的携带情况及其耐药性,为树鼩的饲养管理及大肠杆菌病的防治提供一定思路。【方法】无菌采集树鼩肛拭子样品129份,采用麦康凯培养基、LB琼脂培养基、革兰氏染色和生化试验进行细菌分离鉴定,用PCR法对分离菌株进行HPI相关基因检测,经PCR鉴定后筛选HPI阳性菌株并对该菌株的主要结构基因irp2和fyuA进行相似性分析和系统发育树构建,采用纸片扩散法对分离菌株进行药敏试验。【结果】129份树鼩肛拭子样品共分离得到123株大肠杆菌,分离率为95.35%(123/129);革兰氏染色结果显示,分离菌株镜检为红色粗短杆菌;生化鉴定结果显示,分离菌株对乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蛋白胨和甘露醇生化反应呈阳性,硫化氢和尿素酶生化反应呈阴性,均符合大肠杆菌特性;PCR产物电泳结果显示,HPI相关基因检出率为88.62%(109/123),irp2基因携带率为34.15%(42/123),fyuA基因携带率为47.97%(59/123);主要结构基因序列分析结果显示,irp2和fyuA基因与GenBank中公开发表的irp2和fyuA基因序列相似性分别达到98.6%和98.9%以上;系统发育树结果显示,分离菌株与耶尔森菌属亲缘关系较近;耐药性分析结果显示,分离菌株对阿米卡星和氟苯尼考敏感,对阿莫西林和苯唑西林耐药,耐药率分别为87.80%和81.30%。【结论】HPI相关基因在树鼩大肠杆菌中广泛分布,进一步证实HPI可发生水平转移,且主要结构基因irp2和fyuA的遗传具有较高保守性。 展开更多
关键词 树鼩 大肠杆菌 耶尔森强毒力岛
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中国肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的检测 被引量:8
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作者 张冬梅 俞守义 唐根富 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期78-81,共4页
目的 了解耶尔森菌强毒力岛在中国肠产毒性大肠杆菌中的分布及插入位点。方法 使用PCR扩增、DNA打点杂交和DNA测序及分析方法。结果 在 94株分离自中国的肠产毒性大肠杆菌中 ,14株耶尔森菌强毒力岛核心区的 8个基因PCR扩增阳性 ,除 ... 目的 了解耶尔森菌强毒力岛在中国肠产毒性大肠杆菌中的分布及插入位点。方法 使用PCR扩增、DNA打点杂交和DNA测序及分析方法。结果 在 94株分离自中国的肠产毒性大肠杆菌中 ,14株耶尔森菌强毒力岛核心区的 8个基因PCR扩增阳性 ,除 3株菌的整合酶基因外 ,PCR扩增产物长度均与预期一致 ,但天冬酰胺转运RNA(asnTtRNA)位点扩增阴性 ;上述 14株菌进行全菌DNA打点杂交试验 ,均与irp2和 fyuA探针杂交 ;选择上述 3株菌中的 1株 ,对其整合酶基因的PCR产物测序 ,并与鼠疫耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因序列比较 ,发现该整合酶基因于 5’端缺失了 347bp的片段。 结论  14 %肠产毒性大肠杆菌携带的耶尔森菌强毒力岛 ,且均插入在天冬酰胺转运RNA位点处 ;部分菌株所携带的耶尔森菌强毒力岛的整合酶基因发生了缺失。 展开更多
关键词 耶尔森 肠产性大肠杆菌 asnT TRNA基因 int/intB基因
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鸡源大肠杆菌中HPI和LEE毒力岛相关基因的检测 被引量:12
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作者 蒋月 盛鹏飞 《中国家禽》 北大核心 2014年第21期54-56,共3页
采用PCR方法检测辽宁锦州地区分离的150株鸡源大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛基因(HPI)和肠细胞脱落位点毒力岛(LEE),利用多重PCR方法检测HPI irp2和fyu A基因,以及LEE ler和eae A基因。在分离的鸡源大肠杆菌中,HPI毒力岛基因检测结果为:18... 采用PCR方法检测辽宁锦州地区分离的150株鸡源大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛基因(HPI)和肠细胞脱落位点毒力岛(LEE),利用多重PCR方法检测HPI irp2和fyu A基因,以及LEE ler和eae A基因。在分离的鸡源大肠杆菌中,HPI毒力岛基因检测结果为:18.7%的菌株irp2和fyu A基因扩增阳性,6.7%的菌株irp2基因阳性;LEE毒力岛基因检测结果为:15.3%的菌株ler和eae A基因扩增阳性。结果表明,25.3%的鸡源大肠杆菌携带HPI,15.3%的鸡源大肠杆菌携带LEE。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耶尔森强毒力岛 肠细胞脱落位点
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沙门菌HPI基因缺失株构建及其对鸡巨噬细胞吞噬能力的影响
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作者 齐伟 周首龙 +3 位作者 高雪丽 刘超男 吕晓萍 郑世民 《中国家禽》 北大核心 2016年第16期22-27,共6页
为进一步探讨沙门菌的致病机制,研究构建了耶尔森强毒力岛(HPI)基因缺失沙门菌,并检测了HPI基因缺失沙门菌对鸡巨噬细胞吞噬能力的影响。应用PCR扩增沙门菌脚V同源的cat基因片段,借助pKD46质粒在HPI阳性沙门菌中表达Exo、Beta和Gam... 为进一步探讨沙门菌的致病机制,研究构建了耶尔森强毒力岛(HPI)基因缺失沙门菌,并检测了HPI基因缺失沙门菌对鸡巨噬细胞吞噬能力的影响。应用PCR扩增沙门菌脚V同源的cat基因片段,借助pKD46质粒在HPI阳性沙门菌中表达Exo、Beta和Gam3种蛋白质,实现HPI全岛敲除。利用HW基因敲除体系建立沙门菌感染巨噬细胞模型,并检测其对巨噬细胞吞噬能力的影响。结果显示,同源重组测序为阳性;irp2、irp9及irp5PCR鉴定为阴性;HPI阳性沙门菌感染鸡巨噬细胞(M—HPI)后0~2h,其对刚果红染色酵母的吞噬能力显著低于HPI缺失沙门菌(M—AHPI)(P〈0.05),而2h以后尽管仍然保持以上变化,但未见统计学意义(P〉0.05)。研究成功建立了沙门菌月Ⅳ全基因敲除方法和沙门菌删基因缺失株,HPI基因缺失株沙门菌感染可损伤鸡巨噬细胞的吞噬能力。 展开更多
关键词 耶尔森强毒力岛 沙门菌 巨噬细胞吞噬能
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撒坝猪源大肠埃希氏菌HPI对泛素蛋白酶体介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子表达的影响 被引量:1
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作者 邓静 王喜 +7 位作者 卫朝辉 赵维薇 单春兰 张博 万全 赵汝 高利波 高洪 《动物医学进展》 北大核心 2021年第4期1-5,共5页
为探讨撒坝猪源大肠埃希氏菌(E.coli)的耶尔森强毒力岛(HPI)对泛素蛋白酶体(UPS)介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子的影响,将猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为5组,空白对照组、HPI阳性株感染组、HPI阴性株感染组、HPI阳性株+MG-132组、HPI... 为探讨撒坝猪源大肠埃希氏菌(E.coli)的耶尔森强毒力岛(HPI)对泛素蛋白酶体(UPS)介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子的影响,将猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为5组,空白对照组、HPI阳性株感染组、HPI阴性株感染组、HPI阳性株+MG-132组、HPI阴性株+MG-132组。于试验后的第4、6、12、24 h收集各组细胞,用试剂盒检测泛素蛋白酶体活性,荧光定量PCR法检测TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平,ELISA法检测NF-κB、IκB-α及炎性因子IL-1和TNF-α含量。结果显示,IPEC-J2细胞感染E.coli后,与空白对照组相比,感染组中泛素蛋白酶体活性水平、TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平及细胞炎性因子IL-1和TNF-α的蛋白含量总体上调,且HPI阳性株感染组均高于HPI阴性株感染组;用E.coli HPI感染经MG-132处理后的IPEC-J2细胞,泛素蛋白酶体活性下降,TLR4/NF-κB信号通路中关键因子的转录水平及炎性因子的蛋白含量下降,且低于空白对照组。试验结果表明撒坝猪源E.coli HPI能激活泛素蛋白酶体介导的TLR4/NF-κB信号通路,可通过上调TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平,促进炎性因子IL-1和TNF-α的释放,诱发炎症反应。 展开更多
关键词 撒坝猪 大肠埃希氏菌 耶尔森强毒力岛 泛素蛋白酶体 TLR4/NF-κB信号通路
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