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耐辐射异常球菌磷酸戊糖途径对DNA损伤修复的影响 被引量:3
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作者 郭翠 唐然 +3 位作者 江世杰 张维 王劲 陈明 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期252-258,共7页
耐辐射异常球菌(D.radiodurans)超强的辐照抗性归因于其高效的DNA损伤修复系统,磷酸戊糖途径(PPP)作为细胞各种糖类代谢枢纽,是合成核苷酸和核酸所需的核糖以及生成细胞还原力(NADPH)的重要途径。为探究D.radiodurans R1中PPP对DNA损伤... 耐辐射异常球菌(D.radiodurans)超强的辐照抗性归因于其高效的DNA损伤修复系统,磷酸戊糖途径(PPP)作为细胞各种糖类代谢枢纽,是合成核苷酸和核酸所需的核糖以及生成细胞还原力(NADPH)的重要途径。为探究D.radiodurans R1中PPP对DNA损伤修复的影响,本研究敲除PPP中编码限速酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的基因zwf,比较UV辐照后突变株Δzwf与野生型D.radiodurans的生理生化差异。结果表明,zwf突变导致菌株对UV辐照敏感;UV辐照后Δzwf胞内NADPH、D-核糖、核苷酸合成前体IMP、UMP含量明显降低;葡萄糖酸-δ-内酯及D-核糖能完全和部分恢复Δzwf的UV辐射抗性。综上可知PPP通过提供DNA损伤修复原料及还原力,在DNA损伤修复过程中起着重要作用。本研究结果为DNA损伤修复机理提供参考。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌R1 UV辐照 PPP zwf DNA损伤修复
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耐辐射异常球菌dlp基因缺失突变株构建及其生物学功能研究 被引量:1
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作者 刘小利 江世杰 +7 位作者 薛冬 刘盈盈 吴小丽 冯帅 韩佳慧 汪雨舟 平淑珍 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期155-163,共9页
耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有对非生物胁迫超强的抵抗能力而备受关注。旨在了解该菌亲水蛋白Dlp在细胞耐受非生物胁迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重组技术,获得了dlp基因缺失突变株Δdlp,对野生型DR及突变株... 耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有对非生物胁迫超强的抵抗能力而备受关注。旨在了解该菌亲水蛋白Dlp在细胞耐受非生物胁迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重组技术,获得了dlp基因缺失突变株Δdlp,对野生型DR及突变株Δdlp进行非生物胁迫。结果表明,dlp的缺失导致DR细胞对高盐和氧化胁迫敏感。体外检测氧化胁迫条件下Dlp蛋白对苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的保护,结果显示,Dlp蛋白的加入能缓解氧化胁迫条件下MDH、LDH酶活性的损失。由此表明,亲水蛋白Dlp增强了耐辐射异常球菌对非生物胁迫的抗性,并能以类似分子伴侣的形式保护胁迫条件下酶的活性。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 基因突变 亲水蛋白Dlp 非生物胁迫 酶活性
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铁蛋白DrfE对耐辐射异常球菌抗氧化酶活性的影响
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作者 吴小丽 刘盈盈 +5 位作者 江世杰 陈云 刘小利 汪雨舟 平淑珍 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期164-171,共8页
为研究耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)中drf E编码的铁蛋白Drf E的功能,通过基因回补试验构建drf E基因的回补菌株(pdrf E∷Δ),对野生型WT、突变株Δdrf E及回补菌株pdrf E∷Δ进行不同浓度H_2O_2和Na Cl胁迫,分别测定野生... 为研究耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)中drf E编码的铁蛋白Drf E的功能,通过基因回补试验构建drf E基因的回补菌株(pdrf E∷Δ),对野生型WT、突变株Δdrf E及回补菌株pdrf E∷Δ进行不同浓度H_2O_2和Na Cl胁迫,分别测定野生型WT、突变株Δdrf E和回补菌株pdrf E∷Δ体内Fe2+含量及抗氧化酶类活性。结果显示,drf E基因缺失导致菌株对氧化和盐胁迫敏感,该基因的回补能够恢复菌株对氧化和盐胁迫的抗性。drf E基因缺失导致耐辐射异常球菌体内Fe2+浓度由232μmol/L增加至293μmol/L;80 mmol/L H_2O_2处理30 min后,突变株Δdrf E的CAT活性下降32.74%,SOD下降41.3%。以上结果表明Drf E蛋白可能参与耐辐射异常球菌铁代谢途径,并且在细胞抗氧化体系中发挥重要作用。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 铁蛋白DrfE 非生物胁迫 抗氧化酶 铁离子
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Lon1蛋白酶参与耐辐射异常球菌高温胁迫及细胞分裂的功能研究 被引量:2
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作者 赵明明 唐殷 +6 位作者 郭磊周 韩佳慧 葛佳茗 孟勇 平淑珍 周正富 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期149-158,共10页
Lon是一类广泛存在于生物体内的蛋白水解酶,其通过水解受损及无用蛋白,防止蛋白聚集造成的细胞伤害,在胞内氨基酸周转再利用中发挥重要作用。极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans R1)的超强非生物胁迫耐受性与其拥有功能... Lon是一类广泛存在于生物体内的蛋白水解酶,其通过水解受损及无用蛋白,防止蛋白聚集造成的细胞伤害,在胞内氨基酸周转再利用中发挥重要作用。极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans R1)的超强非生物胁迫耐受性与其拥有功能强大的胞内蛋白质稳态系统密切相关。而Lon作为蛋白水解系统的重要组成部分,在耐辐射异常球菌中的功能分析还未见具体报导。因此本研究以耐辐射异常球菌Lon1蛋白酶为研究对象,分析其逆境胁迫下的功能。结果显示lon1基因的转录受高温诱导,48℃高温胁迫蛋白组学分析显示,lon1的缺失使多个分子伴侣蛋白、参与膜功能和转运蛋白以及与DNA修复、转录调控、能量代谢等相关的蛋白表达量发生显著上调;lon1的缺失使5个参与细胞形态建成的蛋白表达量显著下调,电镜结果证实lon1缺失使细菌分裂异常,形成巨型细胞,细胞膜发生严重的损伤;非生物胁迫冲击实验发现,lon1的缺失使耐辐射异常球菌对0.2 mol/L NaCl以及48℃高温敏感。研究表明Lon1蛋白酶主要参与耐辐射异常球菌的细胞形态建成,并在适应高温等胁迫中发挥功能。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 LON 非生物胁迫 蛋白质组
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离子注入对微生物细胞的刻蚀与对DNA的损伤及修复 被引量:23
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作者 宋道军 姚建铭 +3 位作者 吴丽芳 王纪 涂友斌 余增亮 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期37-40,共4页
以耐辐射异常球菌为试材, 以 Ecoli 为对照, 用显微扫描电镜和3 H- Td R 标记, 研究了离子注入对微生物细胞的刻蚀与对 D N A 的损伤及其修复。结果表明, 注入离子对细胞存在着刻蚀损伤;中性蔗糖梯度密度离心... 以耐辐射异常球菌为试材, 以 Ecoli 为对照, 用显微扫描电镜和3 H- Td R 标记, 研究了离子注入对微生物细胞的刻蚀与对 D N A 的损伤及其修复。结果表明, 注入离子对细胞存在着刻蚀损伤;中性蔗糖梯度密度离心沉降分析证明, 大剂量下离子注入可直接导致 D N A 损伤, 并观察到在对应的存活率峰值注入剂量下, Dradiodurans 修复损伤 D N A 的能力比 Ecoli 强, 还证明了细胞经不同时间温育后, 损伤的 D N A 分子得到了部分修复。 展开更多
关键词 离子注入 耐辐射异常球菌 DNA损伤 修复
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DrwH类信号肽序列对其抗氧化功能的影响 被引量:2
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作者 郭磊周 韩佳慧 +6 位作者 唐殷 李江 黄程 代其林 王劲 平淑珍 江世杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期125-132,共8页
耐辐射异常球菌疏水性LEA5C家族蛋白DrwH参与细胞耐受氧化和盐胁迫过程。前期研究发现,DrwH蛋白N端存在19个氨基酸组成的类信号肽序列,为探索该序列对DrwH发挥抗氧化功能的影响,本研究通过对DrwH蛋白进行分段截短,构建含有不同区段的重... 耐辐射异常球菌疏水性LEA5C家族蛋白DrwH参与细胞耐受氧化和盐胁迫过程。前期研究发现,DrwH蛋白N端存在19个氨基酸组成的类信号肽序列,为探索该序列对DrwH发挥抗氧化功能的影响,本研究通过对DrwH蛋白进行分段截短,构建含有不同区段的重组大肠杆菌菌株,比较分析重组菌株在正常培养和氧化胁迫下的生长能力。结果表明,含有类信号肽序列的融合蛋白过量表达不仅抑制了大肠杆菌的生长,而且使DrwH蛋白失去抗氧化能力。荧光定量PCR显示经IPTG诱导后,含类信号肽全长蛋白DrwH和结构域蛋白WHy在转录水平大量累积,蛋白在过量积累条件下发挥其生物学功能。由此表明,类信号肽对全长蛋白DrwH表达及其发挥抗氧化功能具有重要影响。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 DrwH蛋白 WHy结构域 类信号肽 抗氧化
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